胚盘下腔注射法将外源质粒pEGFP-N1导入鸡胚的研究

研究运用胚盘下腔注射法将外源质粒pEGFP-N1导入鸡胚,通过检测外源基因表达载体在鸡胚发育过程中的动态代谢、与宿主基因组整合情况,进而对该模式在制备转基因鸡和基因功能研究中的可能性进行探讨。取新鲜鸡胚为实验材料,胚盘下腔注射pEGFP-N1,石蜡膜封口后孵化,于不同时间段采集鸡胚及出雏鸡组织样,PCR方法检测pEGFP-N1的分布及其降解情况。同时,对酶切、回收后的阳性样本基因组用PCR检测了外源质粒与基因组DNA的整合情况。研究结果表明：实验组0.5、1、3、4、5和6日龄鸡胚以及初生雏鸡中均可检测到外源质粒pEGFP-N1上的EGFP基因,阳性率分别为100%、80.00%、66.57%、75.00%、64.29%和84.21%。随着鸡胚的发育,外源质粒会被逐渐代谢掉,出雏时实验组雏鸡的阳性率为75%。但是,阳性样本基因组经HindⅢ酶切后PCR检测结果表明,pEGFP-N1未与宿主染色体产生整合,而是以游离或者多聚状态存在于鸡胚组织中。     

孵化前期二氧化碳调控对蛋鸡种蛋孵化胚胎的影响

为探究孵化前期高浓度CO2调控对蛋鸡种蛋孵化的影响机制,该研究以京红1号蛋鸡种蛋为试验对象,在孵化前期（0～10 d）处理组通过补充CO2的方式保持CO2浓度1%,对照组CO2浓度小于0.25%,对比研究了1% CO2浓度处理对种蛋孵化的影响。结果表明,CO2处理组与对照组的受精蛋孵化率无显著性差异（P>0.05）;第9天和第12天CO2处理组的胚胎质量和相对胚胎质量显著高于对照组（P<0.05）;第3天、第6天和第9天CO2处理组的蛋白pH值显著低于对照组（P<0.05）;第11天,CO2处理组和对照组尿囊绒毛膜（CAM,Chorioallantoic Membrane）血管发育密度无显著性差异（P>0.05）;第0天、第6天、第12天两组的蛋壳和胚胎钙含量不存在显著差异。在蛋鸡种蛋孵化前期（0～10 d）保持1%浓度的CO2,降低了蛋白pH值,加速了胚胎发育,但未影响孵化率。     

AA肉种鸡胚胎性疾病的病原学研究及主要病原的PCR 检测

2004年6月份以来，山东某一大型AA父母代肉种鸡场孵化场出现胚胎死亡、弱雏增多、孵出的雏鸡30日龄左右免疫应答不良、生长缓慢等症状。为了探明其病因，作者通过流行病学调查和病原学检查，结果表明造成该病的主要原因是由禽波氏杆菌(Bordetella avium)、沙门氏菌(Salmonella)、大肠杆菌(Escherichia coli)、支原体(滑液囊和鸡败血支原体)及鸡传染性贫血病病毒（CIAV）和病毒性关节炎病毒（VAV）共感染种鸡后，由种蛋垂直传播到鸡胚、雏鸡造成的。同时对其主要病原禽波氏杆菌进行了16S rRNA基因的扩增，结果扩增出783 bp的目的条带; 通过PCR对CIAV VP3基因及VAV S1基因进行扩增，结果分别扩增出582和532 bp的目的条带，其PCR产物均分别能与相应的探针杂交，呈现阳性反应。     

低剂量γ射线辐照对鸡胚胎发育的刺激效应

用０．５，１．０，Ｇｙ＾６０Ｃｏγ射线孵前辐照滨白蛋鸡和ＡＡ肉鸡商品代种蛋，孵化试验表明，低剂量γ射线照射对鸡胚胎发育有明显的刺激效应，使一些在孵化中不能发育的受精卵得到正常发育，滨白蛋鸡辐照组种蛋胚胎发育的卵数比对照组高５．４６％～６．７２％（Ｐ〈０．０１），孵化率比对照组高４．４％（Ｐ〈０．０１）。ＡＡ肉鸡种蛋辐射组胚胎发育的卵数比对照高５．４６％～５．５４％（Ｐ〈０．０１），孵化率０．５Ｇｙ     

外源基因导入鸡胚的两种显微注射方法的比较

胚盘下腔显微注射和卵黄囊血管显微注射是向鸡胚中导入基因等外源物质的常用方法.本研究从实验操作难度、外源基因导入效果、对鸡胚存活率的影响等方面比较了这两种方法的优缺点.实验结果表明,胚盘下腔显微注射操作较简单,在鸡胚发育的不同日龄直至出雏后都可以检测到非整合的外源基因的存在,经胚盘下腔显微注射的鸡胚的存活率为9.5%;卵黄囊血管显微注射操作难度大,在不同日龄及出雏鸡只中也可以检测到外源基因的存在,外源质粒仍以游离状态存在,并未与宿主基因组发生整合,经卵黄囊血管注射的鸡胚的存活率为35.7%.两者各有利弊,研究中应根据实验目的、导入外源物质的作用时间、样本量的多少选择适当的注射方法.     

鸡胚疫苗注射时蛋壳力学模型分析及参数优化

针对鸡胚疫苗注射时由针头冲击产生裂纹导致接种失败的问题,建立了蛋壳注射时冲击固体力学分析模型。首先,由冲量定理和动量守恒定律推导出注射孔单位长度所受合力与注射初速度、注射体系质量及针头锥形角之间的关系。由ANSYS19.2有限元分析软件初步确定注射初速度的范围为0.5～0.8 m/s,注射体系质量0.5～1.2 kg,针头锥形角为10°和15°。其次,通过图像处理技术实现对注射孔裂纹特征的提取,计算注射孔裂纹有效面积指数和裂纹有效轮廓指数,实现对注射裂纹蛋胚和完好蛋胚的判别。最后采用三因素二水平有交互作用的方差分析法,确定最优注射参数组合：注射初速度为0.6 m/s、针头锥形角为10°、注射体系质量为1.0 kg。采用7～14日龄乌鸡孵化种蛋80枚,根据优化后的参数组合,进行鸡胚注射试验,注射成功率为98.75%。     

蛋壳作为吸附材料的研究进展

中国是禽蛋生产和消费大国,每年会产生大量废弃蛋壳。蛋壳往往被当作废弃物处理,不能得到及时回收和处理,浪费资源的同时污染环境。因蛋壳作为廉价易得的吸附材料在修复环境污染方面具有潜在的利用价值,国内外学者对其吸附特性进行了广泛的研究。该文对已有研究进行了归纳,从蛋壳结构与吸附性的关系,处理工艺,吸附的应用及效果、影响因素等方面进行了分析,以便读者了解蛋壳的吸附特性。同时,选取典型研究实例,介绍蛋壳的吸附特性以及加工工艺,从而引起人们对蛋壳潜在价值的重视,以促进蛋壳资源的再利用。     

蛋壳品质的近红外光谱检测分析

蛋壳品质对蛋品孵化、贮存和运输均有重要影响。为了探索近红外光谱技术快速检测蛋壳品质的方法,该文在鸡蛋蛋壳品质指标相关性分析的基础上进行了蛋壳品质的近红外光谱检测分析,研究比较了不同建模方法、不同光谱预处理方法和不同波段范围对预测结果的影响。结果表明：在5段特征波长范围内建立的经过多元散射校正的偏最小二乘回归（PLSR,partial least squares regression）模型对蛋壳强度的预测结果最好,相关系数r为0.86,校正、预测均方根误差分别为4.42、7.53 N;同时蛋壳百分比（蛋壳质量/蛋质量）的PLSR模型的相关系数r为0.92,校正、预测误差分别为0.313%、0.529%;蛋壳厚度的PLSR模型的相关系数r为0.81,校正、预测误差分别为0.0176、0.0234 mm。研究结果表明应用近红外光谱技术预测蛋壳品质是可行的,为蛋壳品质的快速无损检测提供了一种新的方法。     

雏禽也需要人工助产

在母畜（牛、马、驴、猪、羊等）分娩发生难产时，往往要进行人工助产，这样做是对的。但在家禽（鸡、鸭、鹅、火鸡等）的孵化过程中，往往就忽略了给出壳困难的雏禽进行人工助产，致使难产的胚胎发生死亡，带来经济损失。现将给雏禽进行人工助产的方法及应注意的问题介绍如下。     

鸡胚性分化早期性别差异表达miRNAs的表达谱分析

为研究microRNA(miRNA)在鸡胚早期性分化过程中的表达,探讨miRNA在性腺早期发育中的作用,本研究从前期以3.5～6.5 d的雌、雄鸡(Gallus gallus)胚胎性腺为材料的miRNA芯片表达谱中筛选出6个性别差异表达的miRNAs(其中miR-551b和miR-612为鸡新miRNAs),采用RNA加尾以及引物延伸的半定量RT-PCR方法研究这些差异表达miRNAs在3.5～6.5 d雌、雄鸡胚性腺中的表达,并验证其中新miRNAs的茎环前体结构.RNA folding软件折叠结果表明,预测的鸡miR-612和miR-551b均具有茎环状的前体结构.半定量结果表明,这6个miRNAs均存在不同程度的性别差异表达.除4.5 d外,gga-miR-612和gga-miR-1456在其它检测时期的表达为雌性高于雄性;在4.5～6.5 d鸡胚性腺中,gga-miR-551b在雄性中表达显著高于雌性(P<0.05);gga-miR-126在3.5和6.5 d雌性性腺中的表达低于雄性,而4.5和5.5 d则相反;gga-miR-1599在所检测时期中均为雄性中高表达且在4.5 d达极显著水平(P<0.01),gga-miR-10b的表达与之相反.根据表达谱结果推测gga-miR-551b以及gga-miR-1599可能涉及早期鸡胚性腺发育过程.     

LED光质和日累积光照量对番茄种苗生长及能量利用效率的影响

为了提高育苗质量,降低冬春季低温弱光环境对设施种苗优质生产的制约,该研究利用人工光型植物工厂的LED光照与环控技术研究光质和日累积光照量（Daily Light Integral,DLI）对番茄种苗形态建成和生物量累积的影响,通过对光能利用效率（Light Energy Use Efficiency,LUE）和电能利用效率（Electric Energy Use Efficiency,EUE）的实际测试,分析人工光育苗的能耗水平。光质环境以白色荧光灯为对照,选用红蓝比（R∶B）为0.9的白色LED和R∶B为1.2（L1.2）和2.2（L2.2）的白红LED灯具,在DLI为10.1、12.6和15.1 mol/(m2·d)下培育\     

LED光源改善鸡舍环境及肉鸡生产性能

探讨全封闭饲养条件下,LED光源对肉鸡生产性能,养分表观消化率和鸡舍空气中NH3、CO2、粉尘浓度,以及空气微生物含量的影响。试验于2017年3月2日至3月30日在河南省某农业集团一大型肉鸡场进行。选用健康状况良好、体况一致的1日龄白羽肉鸡240只,采用单因子完全随机试验设计,分为2个处理组,一组采用暖白色光LED灯光源照明为试验组,另一组采用普通暖白色荧光灯光源照明为对照组。试验期间详细观察肉鸡生产情况,分别计算平均日采食量、平均日增质量、料质量比、发病率以及死淘率。于肉鸡8、15、22和28日龄当日全收粪法测定粗蛋白、粗脂肪、钙和磷的表观消化率。试验期间每天08:00,14:00和20:00,采用光化学方法分别在两栋鸡舍内测量NH3和CO2浓度,测量点分布依据五点法,测量高度为0.5 m。分别对8、15、22和28日龄的鸡舍,采用质量法测定粉尘含量,平板沉降法测定空气微生物含量。结果表明,与荧光灯相比,LED光源对8~22日龄肉鸡的生产性能、养分代谢及其生存环境质量没有不利影响。LED光源有利于提高22~28日龄肉鸡的平均日采食量和平均日增质量,分别比荧光灯光源下的肉鸡显著增加了13.13%和13.23%(P0.05)。LED光源有利于提高22~28日龄肉鸡对饲料中粗蛋白,钙和磷的表观消化率,22日龄时,分别比荧光灯鸡舍的肉鸡显著提高了9.45%,14.90%和7.48%(P0.05),28日龄时分别提高了7.30%,6.78%和8.29%(P0.05)。试验期间LED光源鸡舍内肉鸡发病率为2.45%,显著低于荧光灯鸡舍3.57%的发病率(P0.05)。LED光源鸡舍内肉鸡死淘率为1.18%,显著低于荧光灯鸡舍2.36%的死淘率(P0.05)。同时,LED光源鸡舍的25日龄以后的NH3浓度、22日龄以后的粉尘和微生物浓度均显著低于荧光灯光源鸡舍(P0.05)。因此,LED光源有利提高肉鸡的生产性能和改善肉鸡生活空间的空气环境质量,加之LED光源在养殖生产上的应用具有安全、经济、环保的特点,值得进一步推广和应用。     

敲击振动检测鸡蛋裂纹的初步研究

现代化的蛋品加工业中,传统的照蛋检测鸡蛋裂纹技术远不能满足生产的自动化要求,为了实现快速在线无损检测鸡蛋裂纹,试验通过在鸡蛋不同部位施加机械冲击,利用计算机处理产生的声音信号,分析壳裂鸡蛋和完好鸡蛋的响应频率差异。结果表明：敲击赤道不同的部位,完好鸡蛋各点的特征响应频率十分接近,而壳裂鸡蛋差别较大。根据赤道四点特征响应频率变异系数(CV),建立了初步分级算法,使得裂纹鸡蛋检出水平达到91%,对整批鸡蛋的分级准确率达到87%。     

REDUCING NITRATE CONTENT IN LETTUCE BY PRE-HARVEST CONTINUOUS LIGHT DELIVERED BY RED AND BLUE LIGHT-EMITTING DIODES

Effect of pre-harvest continuous light with different red/blue ratio on photon flux density (R/B ratio) on reducing nitrate accumulation was studied by growing lettuce (Lactuca sativa L.) under continuous illumination delivered by light-emitting diodes (LEDs). Results show that nitrate concentration decreased by 1648.0–2061.1 mg kg^?1 in leaf blade and 962.9–2090.3 mg kg^?1 in petiole, accompanied by a dramatic increase in soluble sugar content. Compared with monochromatic red light treatment, the decrease in nitrate concentration and increase in soluble sugar content in lettuce under mixed red and blue light were more pronounced. The lowest nitrate concentration was observed in the treatment with R/B ratio of 4. It's concluded that pre-harvest exposure to 48?h continuous LED light could effectively reduce nitrate accumulation in lettuce and this process is strongly affected by R/B ratio of light. This study may provide new perspective for pre-harvest quality management of vegetable, especially in commercial leaf vegetable production under artificial lighting.     

White-light emitting diodes’ spectrum effect on photosynthesis and nutrient use efficiency in Podocarpus macrophyllus seedlings

Abstract

Fast urbanization and population increase resulted in the demand for ornamental seedling supply in a high efficiency under the culture of continuous artificial lighting. Light emitting diode (LED) can be considered as the replacement of high-pressure sodium (HPS) lamps by providing lights with specific wavelengths for plant growth at low energy cost. In this study, nutrient use efficiency was detected in Podocarpus macrophyllus seedlings under lighting spectra generated by white light-emitting diodes (LEDs) (red (R)/green (G)/blue (B)=8.4:75:16.6) and high-pressure sodium (HPS) lamps (R/G/B/=4.3:69.3:26.5). Compared to seedlings under the HPS spectrum, those under white LED spectrum had better growth, greater biomass accumulation, higher photosynthesis and gas exchange. In contrast, LED-spectrum treated seedlings had greater nitrogen (N) and phosphorus (P) contents than HPS-spectrum treated ones. The LED spectrum promoted nutrient use index for both N and P in seedlings compared to the HPS spectrum. The LED spectrum induced steady-state uptake of P but resulted in the dilution of N. In conclusion, white LED can be considered to replace the usage of HPS lamps for the culture of tree seedlings due to the spectrum effect on N utilization, P uptake and the use efficiencies of N and P.     

Managing predation on ground-nesting birds: The effectiveness of nest exclosures

Ground-nesting birds have declined world-wide, probably partly due to high nest predation. A non-lethal method for decreasing predation uses protective cages at nests. Tests have mainly looked at the effect of such nest exclosures on hatching success and adult predation, but several additional aspects need to be explored for a comprehensive evaluation of this conservation technique. Here, we test the effect of nest exclosures in two common European shorebirds: northern lapwing (Vanellus vanellus) and redshank (Tringa totanus), measuring hatching success, incubation length, hatching synchrony, hatchability, partial clutch loss, chick condition, and adult predation. In both species, protected nests had higher hatching success than unprotected nests. Taking into account incubation time, nest abandonment, hatchability and partial clutch loss, protected nests still hatched more young than unprotected controls. In lapwings, but not in redshanks, protected nests were incubated longer, but this did not impair the condition of lapwing chicks. Protected redshanks suffered increased predation on incubating adults, which often sit on the nest until a predator is close by. Our results emphasize the need for caution in the use of nest exclosures, particularly in redshanks and other species with similar incubation behaviour. Exclosures can, however, be a useful management tool in shorebirds that leave their nest early, when an approaching predator is still far away.     

基于图像处理-深度学习的孵前种鸭蛋外部品质在线无损检测

种鸭蛋的品质影响着孵化率和健雏率,挑选优质种鸭蛋孵化不仅可以减少孵化占用的资源,还可以及时将不适宜孵化的种鸭蛋筛选出另做它用,避免其孵化失败造成浪费。为了对不同外部品质的孵前种鸭蛋进行检测分级,该研究设计了一种基于图像处理和深度学习的种鸭蛋外部品质检测系统。在传送轨道上获取种鸭蛋的透射图像后,选取多张鸭蛋图像中的最大长轴计算形状特征,通过交错值衡量大小头相似度;在伽马变换平衡图像颜色后,使用HSV分割提取脏污特征图来计算脏污面积;采用自适应阈值分割和脏污特征图掩膜对图像样本数据进行预处理,搭建裂纹识别网络CrackNet来识别脏污鸭蛋的裂纹。结果表明,该检测系统可计算种鸭蛋的大小、蛋形指数、脏污面积和大小头相似度,检测表面裂纹,计算所得长轴和蛋形指数的均方误差仅0.220 2 mm²和0.000 058,CrackNet的裂纹识别准确率为98.03%,研究结果可为入孵前种鸭蛋的筛选工作提供技术支持。     

养殖皱纹盘鲍人工育苗LED光质及光照时期优选

光照是影响水生生物生长发育和存活的重要环境因子之一。该文研究了不同光质(红光、橙光、白光、蓝光、绿光和黑暗环境)和光照起始阶段(分别从受精卵,担轮幼虫,眼点幼虫)对皱纹盘鲍幼虫生长发育和存活的影响。试验结果表明:在蓝、绿光以及黑暗环境下,幼虫的孵化率都超过80%,与红、橙、白光组相比差异显著(P0.05)。红、橙、白光下,幼虫的畸形率则均较高,且与其他光质组相比差异显著(P0.05)。而在红光下,幼虫的畸形率显著高于其他处理组(P0.05),超过10%。蓝光下,从担轮幼虫阶段起始光照,幼虫的变态率显著高于其他光质组。红、橙光和黑暗环境下,不同光照起始阶段幼虫的变态率均较低且没有显著性差异(P0.05)。从受精卵阶段起始光照,蓝光下幼虫的变态率显著高于其他光质组(P0.05),绿光和白光下幼虫的变态率也较高且二者间并没有显著性的差异(P0.05)。从受精卵阶段起始光照,蓝、绿光和黑暗环境下担轮幼虫的规格显著大于白、红光组(P0.05),且3种光质间并没有显著性的差异(P0.05)。蓝、绿光下,从担轮幼虫和面盘幼虫阶段起始光照,幼虫形成次生壳和变态时的规格显著大于从受精卵阶段起始光照组(P0.05),但从眼点幼虫阶段起始光照组,幼虫所需的变态时间显著长于从受精卵和担轮幼虫阶段起始光照组(P0.05)。因此,在皱纹盘鲍的幼虫培育过程中,选择蓝、绿光并且从担轮幼虫期起始光照对提高苗种孵化效率、增加单位水体产量和促进鲍育苗技术发展具有重要意义。