防治茉莉白绢病的药剂筛选研究

[目的]筛选防治茉莉白绢病菌的化学药剂和生防菌。[方法]采用生长速率法和抑菌圈法测定化学药剂和生防菌对茉莉白绢病菌的抑制作用,采用盆栽试验测试化学药剂和生防菌以及化学药剂和生防菌复配对茉莉白绢病的防治作用。[结果]测试的9种化学农药和6种生防菌中,25%戊唑醇可湿性粉剂和芽孢杆菌Bv22菌株对茉莉白绢病菌生长的抑制作用最强,其LC50分别为2690.96cfu/ml和200.05μg/L,且25%戊唑醇可湿性粉剂对芽孢杆菌Bv22菌株的生长无抑制作用。室内防治试验结果表明,25%戊唑醇可湿性粉剂100mg/L和芽孢杆菌Bv22菌株108cfu/ml以及25%戊唑醇可湿性粉剂200mg/L＋芽孢杆菌Bv22菌株107cfu/ml和25%戊唑醇可湿性粉剂400mg/L＋芽孢杆菌Bv22菌株106cfu/ml对茉莉白绢病的防治效果分别为84.44%、60.00%、96.67%和96.67%。[结论]化学药剂和生防菌复配对茉莉白绢病的有较好的防治作用。     

甘薯黑痣病防治药剂的筛选

为了筛选对甘薯黑痣病防效良好的药剂,首先采用滤纸片法在室内测定了1种生防菌剂和21种化学杀菌剂对甘薯黑痣病菌的抑菌作用,结果表明,咯菌腈、咪鲜胺、多菌灵和枯草芽孢杆菌表现出较好的抑菌效果,在50 mg／L质量浓度下抑菌圈直径分别为4.75 cm、1.55 cm、1.20 cm和3.60 cm。用以上4种杀菌剂分别处理带病种薯、秧苗、土壤,进行甘薯黑痣病的田间防治试验,结果显示,枯草芽孢杆菌的效果不及3种化学药剂,咪鲜胺的效果最佳,其处理带病种薯的病苗防效为88.1％,处理秧苗、土壤的病指防效达到83.8％和97.4％。     

荷花腐败病生防菌的筛选及鉴定

[目的]筛选对荷花腐败病菌有较强拮抗作用的生防菌,为荷花的健康生产及荷花腐败病的有效控制提供参考.[方法]采用抑菌圈法和对峙培养法从106株供试拮抗细菌中筛选对荷花腐败病菌有较强拮抗作用的生防菌,经形态学、生理生化和分子鉴定确定生防菌分类地位,通过与其他6种作物病原真菌的对峙培养了解生防菌的抑菌谱,并通过田间小区试验明确生防菌的田间防治效果.[结果]从供试的106株测试菌株中筛选获得4株对荷花腐败病菌具有拮抗效果的生防菌,其中以DR1菌株的拮抗效果最佳,抑菌带宽为9.8 mm.DR1菌株的拮抗谱较宽,对供试6种植物病原真菌均具有良好的抑制活性.田间防效试验结果表明,DR1菌株对荷花腐败病的平均防效为41.83%.根据16SrDNA和gyrB基因序列分析结果并其结合生理生化特征,将DR1菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens).[结论]解淀粉芽孢杆菌的拮抗活性、耐热性和抗逆性强,且有较宽的抗菌谱,在荷花病害防治中具有较好的开发应用前景.     

5种杀菌剂对短短小芽孢杆菌TW-2菌体及芽孢的影响

采用平皿计数法和抑菌圈法研究了5种化学杀菌剂(春雷霉素、三环唑、戊唑醇、稻瘟酰胺和咪鲜胺)对稻瘟病生防菌短短小芽孢杆菌TW-2菌株(Bacillus pumilus)菌体和芽孢存活的影响。结果表明:供试的5种化学杀菌剂在高浓度下(2 000 mg/L)可以完全抑制短短小芽孢杆菌TW-2菌株菌体和芽孢的存活,而低浓度下(0.32~8.00mg/L)对菌体和芽孢的存活影响较小;在5种化学杀菌剂中春雷霉素对短短小芽孢杆菌TW-2菌株菌体和芽孢存活影响最大,其次依次是咪鲜胺、三环唑、戊唑醇、稻瘟酰胺。研究结果显示:稻瘟病生防菌短短小芽孢杆菌TW-2菌与供试的5种化学杀菌剂分别混用防治稻瘟病,这5种杀菌剂的浓度应在0.32 mg/L以下,否则会影响生防菌的效果。     

几种生防药剂对草莓白粉病的田间防效

[目的]测定并评价5种生防药剂对草莓白粉病的防治效果,优选草莓白粉病生防药剂。[方法]以百菌清为对照药剂,于2014年在安徽省长丰县草莓种植基地研究5种生防药剂(枯草芽孢杆菌、蜡质芽孢杆菌和井冈·枯芽菌)对草莓白粉病的防治效果。[结果]供试的5种生防药剂对草莓白粉病均有较好的防治效果,持效性好。[结论]供试的5种生防药剂在草莓生产中可替代化学药剂防治草莓白粉病,降低化学农药使用量和草莓产品农药残留风险。     

人参土传病害生防菌株的筛选及抑菌活性研究

[目的]筛选获得对人参土传病害具较好防治作用的生防菌株。[方法]采用稀释平板法和平板对峙培养法从患病人参根际土中分离筛选生防菌,并对菌株进行形态学、生理生化特征和16S rDNA鉴定。[结果]以立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）、尖镰孢菌（Fusari-um oxysporum）和腐皮镰孢菌（Fusarium solani）为指示菌株,从黑龙江铁力农场患病人参根际土中筛选获得2株具较强拮抗作用的生防菌株B59和X1,鉴定为枯草芽孢杆菌。2株生防菌对8种不同真菌的抑菌率平均达90%以上,初步研究表明B59和X1菌株可分泌抗菌活性物质。[结论]2株生防枯草芽孢杆菌B59和X1菌株对人参土传病原菌具较强的拮抗作用,具有一定的开发应用潜力。     

枯草芽孢杆菌KXZ-33与化学药剂协同防控棉花枯萎病的效果评价

【目的】分析生防细菌与化学杀菌剂复配效果,筛选出有效防治棉花枯萎病的配方组合处理种子,为棉花病害绿色防控提供技术支撑。【方法】以棉花枯萎病主要致病菌尖孢镰刀菌为研究对象,采用室内平板对峙试验筛选拮抗细菌,含毒介质法对化学杀菌剂进行毒力测定,相容性测定筛选出与生防细菌协同使用的化学杀菌剂;评价盆栽试验防病效果。【结果】6种生防细菌对尖孢镰刀菌均有抑制作用,抑制率在56.69%~79.53%,其中枯草芽孢杆菌KXZ-33对其抑制率最好,为79.53%。化学药剂甲基硫菌灵、多菌灵、福美双抑菌效果较好,EC₅₀分别为15.840 1、18.018 0、12.794 0 mg/L。KXZ-33与20 mg/L的甲基硫菌灵的相容性最高为90.46%,活菌数为2.18×10⁷ cfu/mL。KXZ-33与10 mg/L多菌灵在7 d防治效果最高为90.5%,28 d下降为27.0%;KXZ-33与10 mg/L甲基硫菌灵协同防治棉花枯萎病7 d防效为87.7%,28 d防病效果为43.7%。【结论】枯草芽孢杆菌KXZ-33种子处理与喷施50%甲基硫菌灵10 mg/L防治棉花枯萎病可以起到提高防效,弥补生防细菌在农业生产中的防效不稳定的同时可以减少化学农药的使用量。     

辣椒枯萎病主要致病菌的分离鉴定及农用拮抗菌筛选

[目的]分离鉴定辣椒枯萎病主要致病菌,探寻能够有效抑制该致病菌的生防菌株.[方法]采用植物病害组织致病菌划线分离方法分离致病菌,经形态学以及ITS区域PCR检测,确定菌株属性,通过平板拮抗筛选,确定对该致病菌具有拮抗作用的农用生防菌株.[结果]初步鉴定该致病菌为尖孢镰刀(Fusarium oxysporum),将该致病菌与11株农用微生物芽孢杆菌和3株农用微生物木霉菌进行拮抗试验,发现枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、海洋芽孢杆菌(Bacillus marinus)、坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus)、甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)6株芽孢杆菌对该致病菌拮抗效果明显,长枝木霉(Trichoderma longibrachiatum)与哈茨木霉(Trichoderma harzianum)2株木霉菌对该致病菌具有明显的拮抗效果.[结论]筛选到了8株能够有效抑制该病原菌的生防菌株,为以后研究生防肥料奠定了基础.     

一株香菇病原真菌的分离、鉴定与室内防治药剂筛选

【目的】鉴定严重影响香菇生产的一株病原真菌,筛选有效的防治药剂。【方法】采用组织分离的方法分离病原真菌,遵循柯赫氏法则对病原菌验证;利用传统形态学鉴定和分子生物学(ITS、rpb2、ef-1条码)鉴定方法鉴定病原真菌;以含药培养基和三点接种法从常用杀菌剂及生防制剂中筛选药剂。【结果】确定该病原菌为哈茨木霉(Tichoderma harzianum Rifai);杀菌剂中代森联和高效绿霉净对病原菌有明显的抑制效果,生防制剂中多抗霉素和多粘类芽孢杆菌对病原菌效果尤为显著。【结论】与毒性强、高残留的化学杀菌剂相比,绿色环保、低毒、低公害的生防制剂具有非常好的研究价值与发展前景,可以进一步开发作为化学杀菌剂的替代品。     

防治甜瓜灰霉病药剂筛选试验

本试验选用3种生防菌剂即枯草芽孢杆菌300倍液、哈兹木霉菌300倍液、生物代谢制剂1 000倍液与当地常用化学药剂多菌灵1 000倍液对比,从中筛选出适宜的防治甜瓜灰霉病的生防菌剂。结果表明,枯草芽孢杆菌300倍液对灰霉病的预防效果优于多菌灵,在4种药剂处理中表现最好;其次为哈兹木霉菌300倍液与生物代谢制剂1 000倍液,防治效果与空白对照有显著差异。     

云南番茄细菌性疮痂病病原菌鉴定及其生防研究

从番茄病叶上分离到7株病原细菌菌株,采用柯赫氏法则确定为该病的病原。经培养性状观察、生理生化特性分析(Biolog系统)和16S r DNA序列分析,以及病原菌的寄主范围测定,确定该病原菌为疱斑黄单胞菌Xanthomonas campestris pv.vesicatoria(Dye)。依据室内平板抑菌试验初筛选结果,选取7株生防细菌进行温室复筛试验。温室试验中病原菌采用喷雾法接种,生防菌采用喷雾法和浸种法接种。研究测定7株生防细菌对番茄疮痂病的防治效果,同时比较两种接种方式对生防菌防治病害效果的影响。结果显示:生防菌菌株C3(解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens)、R~2-2(甲基营养型芽孢杆菌Bacillus methylotrophicus)、HY(抗生素溶杆菌Lysobacter antibioticus)对番茄疮痂病的防效较高,两种接种方法处理下对该病的防效始终高于65%;生防菌采用浸种法处理时,生防菌C3对番茄苍痂病的防效最好,为83.36%;生防菌采用喷雾法处理时,生防菌HY对番茄苍痂病的防效最好,为76.18%;两种不同的接种方法对菌株1-7影响最大,对M3的影响最小。     

解淀粉芽孢杆菌在山茶叶中的定殖及对山茶灰斑病的防效

【目的】解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)是从山茶叶片内部分离得到的1株内生拮抗菌株,通过研究该菌株在山茶叶片表面和内部的定殖规律及其对山茶灰斑病的田间防治效果,为新型生防制剂的开发及山茶灰斑病的生物防治提供理论依据。【方法】采用抗生素标记法,结合比较标记菌株和非标记菌株的形态特征、拮抗能力、防病效果,筛选出最佳标记菌株;分别采用喷施和针刺法研究接种浓度、病原菌对生防菌在山茶叶表面及内部定殖动态的影响,并测定生防菌对山茶灰斑病的田间防治效果。【结果】从含500μg/mL链霉素抗性平板上得到最佳标记菌株,标记菌株与未标记菌株在形态特征、拮抗能力、防病效果方面均无明显差异。定殖试验表明,解淀粉芽孢杆菌能够高效定殖于山茶叶表面及内部,且叶表面的定殖较叶片内部更为高效、持久,其定殖量与接种浓度呈正相关,并在一定时间内维持相当数量,病原菌仅与叶表面定殖密切相关,与生防菌的叶内定殖无关。田间防治试验表明,生防菌解淀粉芽孢杆菌菌悬液对山茶灰斑病有显著生防效果,预先接种生防菌菌悬液后再接种病原菌的生防效果最好,防效为75.35%,先接种病原菌后喷施解淀粉芽孢杆菌菌悬液处理的防效为73.89%,同时接种生防菌菌悬液和病原菌时的防效最低,为72.95%。【结论】生防菌株B.amyloliquefaciens能够有效定殖于山茶叶片表面及内部,且对山茶灰斑病具有显著的生物防治效果。     

枯草芽孢杆菌Czk1与化学杀菌剂复配对橡胶树炭疽病菌的抑菌活性

[目的]探究枯草芽孢杆菌与化学杀菌剂协同防治橡胶炭疽病的可行性,构建由生防菌与化学杀菌剂组成的菌药复配剂,为橡胶炭疽病的可持续防治提供科学依据.[方法]以6种化学杀菌剂(咪鲜胺、百菌清、根康、嘧霉胺、丙环唑和嘧菌酯)及2株菌株(枯草芽孢杆菌Czk1和橡胶胶孢炭疽菌RC178)为试验材料,采用菌丝生长速率法测定6种化学杀菌剂对RC178的室内毒力,稀释平板涂布法测定6种杀菌剂与Czk1的相容性,抑菌圈法测定Czk1对RC178的室内毒力,Horsfall法明确菌药的复配方案.[结果]室内毒力测定研究结果显示,6种杀菌剂中咪鲜胺对RC178的抑菌效果最好,其有效抑制中浓度(EC50)仅为0.0778μg/mL,其次为百菌清和根康,EC50分别为0.4694和0.4733μg/mL.化学杀菌剂与Czk1的相容性测定结果表明,嘧霉胺、嘧菌酯、丙环唑、根康和咪鲜胺与Czk1的相容性均较好,其中根康在中高浓度下还能促进Czk1菌落数量的增长.将浓度为4.75×107 CFU/mL的Czk1分别与浓度为10.4733μg/mL的根康和浓度为0.0778μg/mL的咪鲜胺混配,Czk1:根康=7:3(v/v)时对RC178抑制的增效作用最强,增效比率(IR)为1.36;Czk1:咪鲜胺=8:2(v/v)时对RC178抑制的增效作用最强,IR为1.65.[结论]枯草芽孢杆菌Czk1与咪鲜胺和根康具有较好的相容性,Czk1发酵液分别与咪鲜胺和根康复配对橡胶炭疽病菌RC178的抑菌活性具有明显增效作用,具有开发成菌药制剂的潜力.     

枯草芽孢杆菌Yz菌株发酵原粉丸化种衣剂与化学药剂复配剂的研制

[目的]筛选可与枯草芽孢杆菌Yz菌株联用的化学药剂及复配比例,以提高枯草芽孢杆菌Yz菌株对棉花立枯病的防治效果。[方法]采用稀释平板计数法,测定Yz菌株发酵原粉中活菌数,比较不同化学药剂与Yz菌的生物相容性;采用盆栽试验,测定复配种衣剂对棉花立枯病的防效以及对棉花种子发芽率的影响。[结果]甲基托布津、扑海因、百菌清、多菌灵对Yz菌芽孢活性具有保护作用,活芽孢下降率分别为39.70%、39.99%、46.33%、50.42%,显著低于对照;多抗霉素和代森锰锌对Yz菌芽孢活性无影响,活芽孢下降率与对照无显著差异;可用来与Yz丸化种衣剂进行复配。盆栽试验表明,Yz丸化种衣剂与代森锰锌、多菌灵、甲基托布津复配后,棉花种子发芽率较高,为85.00%～94.98%,对棉花立枯病的防效也提高,为63.99%～71.37%。其中,甲基托布津以0.3%和0.5%的比例与Yz丸化种衣剂混配效果最好,防效分别为74.42%、76.58%。[结论]甲基托布津与Yz丸化种衣剂复配效果较好,以0.3%比例复配最佳。     

三种生防细菌对新疆灰霉病菌(Botrytis cinerea)的拮抗作用

[目的]明确生防芽孢杆菌A57、A178、N1729在植物病害生物防治中的实用价值,并为后续的生防制剂的研发提供科学依据,对其在新疆各地蔬菜灰霉病菌的抑菌活性进行了研究.[方法]采用平板对峙法检测三种生防细菌抑菌活性,并检测其无细胞滤液的抑菌效果,无细胞滤液利用摇瓶发酵后经微孔滤膜过滤制备,用滤纸片法测定抑菌圈,确定抑菌效果.[结果]A178的活菌体拮抗效果最强,平均抑菌率达45.67;, N1729菌株分泌物的拮抗效果最强,平均抑菌率为44.61;,可作为灰霉病的有效生防菌;而A57的抑菌效果最差,不能作为后灰霉病菌有效的生防菌使用.[结论]A178、N1729这两个菌株具有很好的开发应用前景.     

加工辣椒立枯病的药剂室内筛选研究

[目的]立枯病是新疆加工辣椒苗期主要病害之一,杀菌剂的应用是控制该病的重要手段.室内筛选抑菌效果好的农药,为大田辣椒立枯病药剂防治提供参考.[方法]采用组织分离法分离病原生物,形态观察法鉴定病原,室内盆栽法测定致病性,菌落生长速率法和盆栽法筛选药剂.[结果](1)不同立枯丝核菌菌株间致病力差异显著.(2)对强致病立枯病菌抑制效果最好的是夫农和银典,其次陶氏益农信生、菌思奇亦有较好的效果.[结论]在辣椒立枯病发病前或发病初期可优先选用上述抑菌效果好的夫农,银典药剂进行防治.     

防治人参菌核病新型高效低毒农药室内筛选

选用不同化学杀菌剂原药和生防菌剂(株)，采用生长速率法对人参菌核病原菌进行室内毒力测定，并比较不同药剂在不同浓度下对菌核形成数量的影响，以期筛选出高效防治人参菌核病药剂。结果表明：化学药剂中氟环唑和咯菌腈的抑菌效果最好，其EC₅₀和EC₉₀值均<0.010 0 mg/L，其次为戊唑醇和氟啶胺，其EC₅₀和EC₉₀值均<0.100 0 mg/L。首次采用原药对16种药剂进行了抑菌效果和菌核形成抑制效果评价，能够真实地反映出药剂的实际水平，其中氟环唑和氟啶胺首次用于人参菌核病的防治研究。生防菌剂(株)中枯草芽孢杆菌(科诺)、复合内生芽孢杆菌(京青)抑菌效果最好，EC₅₀较小，EC₉₀分别为4.22×10⁵,2.45×10⁶ CFU/mL；其次为枯草芽孢杆菌(德强)、解淀粉芽孢杆菌FS6,EC₅₀均<2.0×10⁵ CFU/mL,EC₉₀     

具有拮抗作用的石榴内生菌的分离与鉴定

[目的]筛选对石榴枯萎病菌具有拮抗作用的内生生防菌.[方法]从采自云南蒙自的石榴叶片中分离并获得5株内生拮抗菌,通过测定其对甘薯长喙壳(Ceratocystis fimbriata)的抑菌能力筛选出1株具有高效拮抗作用的生防菌株Y2,对其进行抑菌谱测定及鉴定.[结果]经生理生化和16S rDNA序列测定表明Y2为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).[结论]试验结果为石榴枯萎病的防治提供了理论依据.     

生防菌剂浸种对豌豆苗期茎基腐病的田间防效

利用4种生防菌剂枯草芽孢杆菌B1、 B2、 X4、 Z10播前浸种,观察其对豌豆苗期茎基腐病的预防效果,结果表明,四种生防菌剂浸种对豌豆苗期茎基腐病均有一定的防效,以B2生防菌剂的防效最理想,稀释30倍时防效最好.     

生防菌剂对葡萄霜霉病菌抑菌活性及其田间防效评价

[目的]探明黄麻链霉菌NF0919菌株和枯草芽孢杆菌DJ-6对葡萄霜霉病的生防活性.[方法]采用叶盘法分别测定了黄麻链霉菌NF0919发酵上清液、1.0×1011 cfu/g枯草芽孢杆菌DJ-6 WP、代森锰锌和烯酰吗啉对葡萄霜霉病菌的室内毒力,并进行了防治葡萄霜霉病的田间试验.[结果]NF0919菌株发酵上清液、1.0×1011 cfu/g枯草芽孢杆菌DJ-6 WP、代森锰锌和烯酰吗啉对葡萄霜霉病菌孢子萌发抑制的EC50值分别为96.285 9、86.603 8、69.947 2和7.263 6μg/ml.NF0919菌株发酵20倍液和1.0x1011 cfu/g枯草芽孢杆菌DJ-6 WP 1 000倍液对葡萄霜霉病做预防性施药时,2次药后7d的防效分别为71.55％和70.71％,2次药后14 d的防效分别为67.54％和68.19％;当做治疗性施药时,2次药后7 d的防效分别为59.72％和56.07％,2次药后14 d的防效分别为56.88％和57.46％.两种供试生防菌剂的防效相当,且保护效果与50％代森锰锌WP 300倍液均差异不显著,而治疗效果与40％烯酰吗啉SC 200倍液均差异显著.[结论]黄麻链霉菌NF0919菌株和枯草芽孢杆菌DJ-6 WP对葡萄霜霉病具有一定的生防潜力与开发的价值.