钙元素对冬季迟缓期的艾纳香生物量和有效成分含量的影响

以一年生艾纳香种子苗为实验材料,用一水合氯化钙提供钙元素,在冬季艾纳香生长迟缓期进行3次施肥,测定艾纳香的株高、地径、叶长和叶宽等生长指标以及生物量.采用紫外可见分光光度法测定艾纳香不同部位中总黄酮的相对含量,并计算总黄酮的绝对含量;采用GC测定艾纳香叶片中1-龙脑的相对含量,并计算1-龙脑的绝对含量.结果表明:钙元素极显著增加了冬季生长迟缓期的艾纳香叶、茎和根生物量,其中5g/L钙处理组的艾纳香叶生物量极显著高于其他3个处理组,10、15 g/L钙处理下的叶生物量极显著高于空白对照组(CK),分别是对照的3.03倍和2.65倍.钙元素的施加抑制了艾纳香不同部位总黄酮相对含量的积累,然而显著增加了总黄酮绝对含量.5 g/L钙处理组的1-龙脑相对含量和绝对含量最高,分别为0.22％和0.22 g,与10、15g/L钙和CK组相比,分别增加了37.50％、22.22％、37.50％和100％、100％、450％.在冬季艾纳香生长迟缓期施加钙元素可以显著促进艾纳香叶、茎和根生物量的积累,提高总黄酮和1-龙脑的绝对含量.     

锰元素对冬季迟缓期的艾纳香幼苗生物量和有效成分含量的影响

以一年生艾纳香种子苗为试验材料,在冬季艾纳香生长迟缓期3次施用锰元素,研究锰元素对冬季生长迟缓期的艾纳香生物量和有效成分含量的影响.结果表明:在冬季艾纳香生长迟缓期,施用锰元素可以显著促进艾纳香的生长和生物量的积累,显著提高总黄酮和l-龙脑的绝对含量.锰元素极显著提高了冬季生长迟缓期艾纳香的株高、地径、叶长和叶宽等生长指标,进而导致艾纳香叶、茎和根生物量的增加,其中以4 g/L Mn处理的艾纳香叶生物量最高,极显著高于其他3个处理;锰元素对艾纳香不同部位中总黄酮相对含量和叶片l-龙脑相对含量提高无促进作用或影响不显著,但是极显著增加了其绝对含量的积累,其中4 g/L Mn处理下叶总黄酮绝对含量最高,其次是1、10 g/L Mn处理,分别是对照的7.62、5.5、4.08倍;4g/L Mn处理下叶片l-龙脑绝对含量显著高于其他处理.     

镁对两年生艾纳香生物量、抗氧化酶活性及有效成分积累的影响

以两年生艾纳香苗为实验材料,用七水合硫酸镁提供镁素,研究镁对艾纳香药材生物量、3种抗氧化酶活性、总黄酮和l-龙脑百分含量和单株产量。结果表明,镁显著增加了艾纳香生物量。与其他处理组相比,5、10和80 mg/m L镁处理的SOD和CAT活性较高,而POD活性较低。不同浓度的镁处理显著提高了艾纳香中总黄酮百分含量、总黄酮单株产量以及l-龙脑单株产量,其中5、10和80 mg/m L镁处理组最显著。而10 mg/m L镁处理下的l-龙脑百分含量最高。因此,综合以上结果,10 mg/m L镁处理为两年生艾纳香施用的最佳浓度,能显著提高药材生物量和药材质量。     

水杨酸和茉莉酸甲酯对艾纳香叶片左旋龙脑与总黄酮含量的影响

以艾纳香为试材,用水杨酸(SA)和茉莉酸甲酯(各设浓度10、1、0.1、0.01 mmol/L)分别喷施艾纳香叶片(嫩叶、成熟叶、老叶),以喷施去离子水为对照,探索不同浓度SA、茉莉酸甲酯(MeJA)对艾纳香叶片中左旋龙脑(L–龙脑)和总黄酮含量的影响效果。结果表明:除10 mmol/L MeJA处理外,其他浓度的MeJA处理艾纳香嫩叶后,L–龙脑含量均在72 h达到最大值;用1.0 mmol/L MeJA处理成熟叶,L–龙脑在72 h达到最大值(3.043 mg/g),显著高于对照;除0.01 mmol/L MeJA处理外,用其他浓度的MeJA处理嫩叶,总黄酮的含量均在48 h达到最大值;用1.0 mmol/L MeJA处理老叶,总黄酮含量在72 h达19.246 mg/g;用0.01 mmol/L SA处理成熟叶、老叶,L–龙脑的含量在72 h时分别为2.418、2.034 mg/g,与对照差异达显著水平;用0.1 mmol/L SA处理嫩叶、成熟叶、老叶,总黄酮含量在24 h较高,分别为6.287,8.172、11.827 mg/g。综合本研究结果,1 mmol/L的MeJA对艾纳香叶片中L–龙脑和总黄酮的合成均具有较好的促进作用,且在处理后72 h艾纳香叶片中L–龙脑和总黄酮含量相对较高;0.01 mmol/L SA对艾纳香叶片中L–龙脑和总黄酮含量的积累具有较好的效果,处理后,艾纳香叶片中L–龙脑含量在72 h较高,总黄酮含量在24 h较高。     

不同生长期艾纳香l-龙脑和总黄酮含量变化

为了艾纳香适宜采收期的确定提供理论依据,对不同月份和不同株龄的艾纳香,采用GC法测定l-龙脑含量,紫外可见分光光度计法测定总黄酮含量。结果表明:艾纳香l-龙脑含量以10月的最高,8-12月份的无显著性差异(P0.05),3年生艾纳香中的l-龙脑含量最高,与1年生及更小株龄的艾纳香存在显著差异(P0.05);总黄酮含量以6月、8月与11月的较高,2年生艾纳香中总黄酮含量最高,且与其他株龄的艾纳香存在显著差异(P0.05)。以l-龙脑为指标提取艾片时,9-12月中旬都可采收,以10月最佳;以总黄酮为指标在11月份采收较好。     

艾纳香化学成分在不同组织中的分布

为探明营养生长期与生殖生长期艾纳香主要化学成分在不同组织中的分布规律,为艾纳香适宜采收部位的确定提供理论依据,采用GC法测定l-龙脑含量,紫外可见分光光度法测定总黄酮含量,并分析不同组织部位化学成分含量的变化差异。结果表明:1)l-龙脑含量,在营养生长期,嫩叶中的含量最高,为6.25mg/g,与其他组织部位呈显著性差异(P0.05),但功能叶、老叶和枯叶中的含量也较高,分别为5.11mg/g、4.80mg/g和4.33mg/g;生殖生长期,嫩叶中l-龙脑含量最高,为2.30mg/g,与其他6个组织部位呈显著性差异(P0.05),其中侧枝、花枝、花蕾和花朵中未检测到l-龙脑。2)总黄酮含量,营养生长期,功能叶的含量最高,为97.56mg/g,与嫩叶、老叶无显著性差异,但与嫩梢、嫩茎、枯叶则呈显著性差异(P0.05)。生殖生长期,功能叶中总黄酮含量最高,为111.39mg/g,与花蕾、嫩叶无显著性差异,但三者与枯叶、侧枝、花枝都呈显著性差异(P0.05)。因此,以l-龙脑为指标,用于提取艾片时,宜选择营养生长期采收,并采收全部叶片(包含枯叶、老叶、功能叶和嫩叶)及嫩梢;以总黄酮为指标,营养生长期与生殖生长期都较为合适,应采集老叶、功能叶和嫩叶。     

氮磷钾配施对艾纳香产量及品质的影响

为给艾纳香大规模栽培合理施肥提供技术支撑和理论依据,采用"3414"试验设计和GC色谱法研究不同氮磷钾配施对艾纳香产量和品质的影响。结果表明:氮磷钾配施可以显著提高艾纳香的产量,并有利于l-龙脑相对含量的积累。其中,以N_2P_2K_2(N 16.71kg/667m~2,P_2O_5 24.91kg/667m~2及K_2O12.40kg/667m~2)的产量最高,其生物产量和经济产量分别为1 325.66kg/667m~2和133.35kg/667m~2,有效化学成分l-龙脑相对含量为3.84mg/g,仅次于N_2P_2K_1(N 16.71kg/667m~2,P_2O_524.91kg/667m~2及K_2O6.20kg/667m~2)的4.38mg/g。氮磷钾3种肥料配施其互作效应依次为NPKNKNPPK,氮素对产量影响最大,其次是钾素和磷素。综合考虑艾纳香产量和l-龙脑的相对含量以及氮磷钾配施的肥料利用率,推荐施肥水平为N_2P_2K_2(N∶P∶K=1∶1.49∶0.74)。     

气质联用法对艾纳香中龙脑含量的测定

以艾纳香(Blumea balsamifera L.)组织培养过程中的愈伤组织、组培苗以及罗甸野生苗为研究对象,以乙醇为溶剂提取艾纳香中的龙脑,运用气质联用法分别测定艾纳香组培愈伤组织、组培苗、罗甸野生苗中龙脑的相对百分含量.结果表明,艾纳香组培愈伤组织中不含龙脑,组培苗、罗甸野生苗中龙脑的含量分别为3.216 7和3.6200 mg/g.该方法简便、精密度和重复性良好,龙脑在0.020 0～0.060 0 mg/mL内线性关系良好.组培苗和罗甸野生苗的添加回收率分别为97.11％和97.78％.     

正交实验法优化艾纳香提取废渣中 总黄酮提取工艺

采用三氯化铝显色,芦丁作对照品,紫外分光光度法测定总黄酮含量,对艾纳香叶中总黄酮提取因素进行研究,采用单因素筛选结合L9(34)正交试验法优选艾纳香总黄酮提取参数。结果表明,提取艾纳香黄酮因素影响大小为:料液比(C)提取温度(B)提取时间(D)提取溶剂乙醇体积分数(A)提取次数,最佳提取工艺参数为:60%乙醇、温度90℃、料液比1∶20、提取3 h,总黄酮百分含量为2.29%。经提取验证,该提取工艺对艾纳香总黄酮资源化开发与利用有一定的技术参考价值。     

超声辅助双水相提取艾纳香总黄酮的工艺优化及抗氧化活性的研究

以艾纳香为原料、艾纳香总黄酮得率为指标,采用超声辅助乙醇-硫酸铵双水相体系对艾纳香总黄酮提取工艺进行单因素及Box-Behnken响应曲面试验优化,并用羟自由基清除力、DPPH自由基清除力以及还原力与一般回流提取所得的总黄酮的抗氧化能力进行比较研究。结果表明,艾纳香总黄酮超声辅助双水相提取的最佳工艺条件为超声时间31 min、(NH_4)_2SO_4用量0.4 g/m L、液料比为32 m L∶1 g,此条件下提取的艾纳香总黄酮得率为(13.31±0.21)%。对DPPH自由基、羟自由基有较强的清除能力以及较高的还原力,且超声辅助双水相提取的艾纳香总黄酮抗氧化能力显著高于一般回流提取。     

艾纳香分株苗左旋龙脑稳定性及其优良单株筛选

为探明艾纳香母株与分株苗间左旋龙脑含量的稳定性,同时筛选优良单株,选择10个分株苗无性系分别在3个不同地的土壤(澄迈、儋州和临高)进行盆栽试验,采用GC法测定左旋龙脑含量,应用相关分析和方差分析等对母株和分株苗间差异进行统计。结果表明:艾纳香母株和分株苗间左旋龙脑含量呈极显著相关(P0.01);分株苗左旋龙脑含量受种质影响显著,其方差贡献率达69.65%,且在3种土壤下的广义遗传力(重复力)均达0.8以上;分株苗C33-3、C5-1和C5-4的左旋龙脑含量较高,均大于14mg/g,可作为较优材料进行生产扩繁。     

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为探明艾纳香母株与分株苗间左旋龙脑含量的稳定性,同时筛选优良单株,选择10个分株苗无性系分别在3个不同地的土壤(澄迈、儋州和临高)进行盆栽试验,采用GC法测定左旋龙脑含量,应用相关分析和方差分析等对母株和分株苗间差异进行统计.结果表明:艾纳香母株和分株苗间左旋龙脑含量呈极显著相关(P＜0.01);分株苗左旋龙脑含量受种质影响显著,其方差贡献率达69.65％,且在3种土壤下的广义遗传力(重复力)均达0.8以上;分株苗C33-3、C5-1和C5-4的左旋龙脑含量较高,均大于14 mg/g,可作为较优材料进行生产扩繁.     

氮磷钾配施对艾纳香生长及产量、品质的影响

在大田条件下,采用L_9(3~3)正交试验设计,研究氮、磷、钾配施对艾纳香生长、产量和主要有效成分的影响。结果表明,不同施肥水平对生长期间艾纳香茎粗、叶片数的影响不明显,对株高、分枝数、分生苗数的促进作用较为明显;N、P_2O_5、K_2O施用量分别为0、400、200 kg/hm~2和100、200、200 kg/hm~2时,艾纳香单株鲜质量、单位面积产量相对较大,挥发油、左旋龙脑含量相对较高,总黄酮含量也较高。结合产量与氮磷钾肥料效应模拟方程得出,N、P_2O_5效应的最大值分别为氮肥施用量为161.32 kg/hm~2,磷肥施用量为184.72 kg/hm~2,与N∶P_2O_5∶K_2O使用量分别为100、200、200 kg/hm~2接近,可实现艾纳香的优质高产。     

艾纳香幼苗对夏季干旱胁迫生理响应

以有性繁殖1年龄艾纳香幼苗为研究对象,研究其水分胁迫响应机理,寻求艾纳香生长最佳栽培条件。于2014年5月开始为期4个月四梯度干旱处理试验,对不同水分胁迫下艾纳香生理指标分析。结果表明,对照组艾纳香长势最好;轻度干旱胁迫下,缺水对艾纳香影响不显著,丙二醛含量虽少量增加,但植株最大程度利用有限水分,通过降低叶绿素、可溶性淀粉含量,增加可溶性糖和游离脯氨酸含量,适当增加抗氧化酶活性,增强根系活力等方式对抗轻度缺水。中度和重度胁迫下,植物细胞受损,丙二醛含量增加,根系活力减弱,植株生长缓慢,艾纳香通过可溶性糖、可溶性淀粉等渗透物质增加维持细胞渗透势平衡,降低水分胁迫造成的细胞受损,通过抗氧化酶清除过氧化氢等有害物质保持细胞活性。中度干旱胁迫下,植株虽可生长,但长势不良;重度胁迫下,艾纳香叶片掉落甚至植株死亡。夏季艾纳香幼苗管理应保证水分供应充足。     

艾纳香残渣总黄酮提取工艺的优化

为艾纳香残渣资源的回收及进一步开发利用提供技术依据,采用单因素试验结合Box-Behnken响应面法对艾纳香残渣总黄酮最佳提取工艺进行筛选。结果表明:总黄酮最佳提取工艺为料液比1∶62(g∶mL),乙醇体积分数75%,提取时间31min,超声功率400 W。在此条件下艾纳香残渣总黄酮提取率为4.62%,预测值和测定值平均偏差率为1.43%(5%),采用响应面法优化艾纳香残渣总黄酮提取工艺稳定可行。     

大果木姜子浸提液对艾纳香幼苗的化感作用研究

为了在贵州大面积推广种植艾纳香与大果木姜子,通过盆栽方式,研究大果木姜子浸提液对艾纳香化感作用,测定艾纳香的叶片相对含水量、生物量尧游离脯氨酸含量、可溶性蛋白质含量、可溶性糖含量、可溶性淀粉含量、根系活力、MDA、POD、SOD、CAT 等活性变化,得出敏感指数与综合效应等指标。结果表明：随着大果木姜子浸提液浓度的增加,艾纳香抗氧化系统的3种酶活、丙二醛含量、渗透调节、有机物质和根系活力都有一定程度改变,对植物的相对含水量和生物量造成影响,各物质在处理的过程中表现出的化感作用为抑制,且随浓度增大抑制作用增强。因此在对艾纳香和大果木姜子的间作过程中要及时清理大果木姜子的凋落物以减弱抑制作用。     

干旱胁迫对艾纳香盆栽幼苗生长及叶片结构的影响

【目的】了解特色药用植物艾纳香(Blumea balsamifera L. DC.)幼苗期在不同水分胁迫下不同取样时期的苗高、地径、生物量及叶结构变化,寻找最佳栽培条件。【方法】2014年5—9月,以一年生艾纳香幼苗为试验材料,进行不同程度(土壤田间持水量:CK为80%,轻度胁迫LD为60%,中度胁迫MD为40%,重度胁迫SD为30%)的干旱胁迫盆栽试验,测定艾纳香生物量和显微镜下的叶结构指标,分析不同程度干旱对艾纳香生物量和叶片结构的影响。【结果】不同干旱程度下,艾纳香的生物量、叶片厚度、栅栏组织与细胞结构紧密度(CTR)均随土壤水分的减少而减少,而根冠比、细胞结构疏松度(SR)与海绵组织随水分的减少而增大。【结论】中度胁迫是艾纳香生长可承受的最大范围,人工种植在土壤含水量40%下能维持叶片与地径的生长,从而获得药用材料。     

大果木姜子浸提液对艾纳香幼苗的化感作用研究

为了在贵州大面积推广种植艾纳香与大果木姜子,通过盆栽方式,研究大果木姜子浸提液对艾纳香化感作用,测定艾纳香的叶片相对含水量、生物量、游离脯氨酸含量、可溶性蛋白质含量、可溶性糖含量、可溶性淀粉含量、根系活力、MDA、POD、SOD、CAT等活性变化,得出敏感指数与综合效应等指标.结果表明:随着大果木姜子浸提液浓度的增加,艾纳香抗氧化系统的3种酶活、丙二醛含量、渗透调节、有机物质和根系活力都有一定程度改变,对植物的相对含水量和生物量造成影响,各物质在处理的过程中表现出的化感作用为抑制,且随浓度增大抑制作用增强.因此在对艾纳香和大果木姜子的间作过程中要及时清理大果木姜子的凋落物以减弱抑制作用.     

根外施用钙肥对苹果树生育期及产量的影响

作物产品中的钙含量是人类钙营养元素的重要来源,施钙能够提高植物性食品中的含钙量,从而有利于人类健康。若植物新根生长受阻或蒸腾作用减小,作物中钙的含量急剧降低,这样将影响作物的正常生长发育。通过对作物进行根外喷施钙肥,能够快速有效的补充植物对钙元素的需要。本试验通过在苹果的开花期、结果期以及膨大期连续三次叶面喷施不同含量的钙肥,测出喷施含钙量为160g/L钙肥的苹果树的每公顷产量较对照清水的增产5666.6kg,增产率达14.4%,并且方差分析达极显著水平;在喷施含钙量为120g/L的钙肥的苹果树的每公顷产量较对照清水的增产4888.8kg,增产率达12.4%,并且方差分析达显著水平。     

不同基质配比对艾纳香幼苗生长的影响

为筛选适宜艾纳香幼苗生长的基质及组成,以黄土、泥炭土、珍珠岩和椰糠为原料,研究不同基质配比对艾纳香幼苗成活率、地上部生长、根生长和叶绿素含量的影响,并进行综合评价。结果表明,不同基质配比对艾纳香幼苗生长的影响差异显著,以黄土、珍珠岩、椰糠为基质的T10处理幼苗存活率、株高、茎粗、植株干重、壮苗指数、主根长和平均根长等指标显著高于其他处理;较适宜的基质组成为T3（黄土、泥炭土、珍珠岩）和T4（黄土、泥炭土、椰糠）处理,基质为黄土的处理艾纳香幼苗生长最差。营养钵种植条件下,最适宜艾纳香幼苗生长的基质配比为黄土∶珍珠岩∶椰糠=46∶27∶27。