黄精水煎剂对β-淀粉样蛋白诱导的大鼠 学习记忆能力下降的保护作用研究

本研究旨在探讨黄精水煎剂(PCD)对β-淀粉样蛋白(Aβ)致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠的保护作用及可能机制。通过Aβ25-35微量注射至大鼠双侧海马CA1区建立AD模型,同时用PCD干预,研究PCD对AD模型大鼠学习记忆能力、海马组织损伤和CA1区神经元中过度磷酸化tau蛋白(p-tau)表达的影响。结果表明,PCD可明显缩短模型大鼠逃避潜伏期,对模型大鼠学习记忆能力损伤有保护作用;能改善大鼠海马神经元损伤,减少CA1区在thr231位点tau蛋白的过度磷酸化。这些结果提示,PCD对学习记忆能力有显著的保护作用,这可能与其减少海马内p-tau-thr231水平和消除组织氧化逆境有关。     

脑尔康对AD模型大鼠海马内低密度脂蛋白受体相关蛋白表达的影响

目的观察复方中药脑尔康对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马低密度脂蛋白受体相关蛋白(LDL receptor-related protein,LRP)表达的影响,探讨其抗痴呆的作用机制。方法 48只健康雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、吡拉西坦组和脑尔康大、中、小剂量组,每组8只。除空白组外,其余各组大鼠双侧海马CA1区各一次性注射10μg凝聚态Aβ1-42制备AD模型,空白组注射等体积生理盐水。3个脑尔康剂量组大鼠给予脑尔康(60、30、15g.kg-1.d-1)连续灌胃28d,吡拉西坦组给予吡拉西坦(0.375g.kg-1.d-1)灌胃,空白组和模型组给予等量生理盐水灌胃。采用Y型电迷宫检测大鼠学习记忆能力,采用免疫组化染色法检测海马内LRP表达。结果大鼠海马注射Aβ1-42后,与空白组比较,模型组大鼠学习记忆能力下降,海马内Aβ1-42表达明显增多,而LRP的表达减少;经脑尔康干预后,与模型组比较,吡拉西坦组和脑尔康组大鼠学习记忆能力改善(P<0.05或P<0.01),海马内Aβ1-42表达下降(P<0.05或P<0.01),而LRP的表达上调(P<0.05或P<0.01)。结论复方中药脑尔康可能通过上调AD模型大鼠海马LRP的表达从而降低Aβ1-42的含量,并改善其学习记忆能力,从而发挥抗痴呆作用。     

回神颗粒对双转基因阿尔茨海默病小鼠海马区Aβ1-42表达的影响

目的 探讨在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)病理早期采用回神颗粒对转基因AD小鼠的治疗作用。方法 采用聚合酶链式反应（PCR）法鉴定淀粉样前体蛋白/早老素1(APP/PS1)双转基因AD小鼠的基因表型后,选取3月龄雄性转基因阳性PAD小鼠和同龄、同背景的C57BL/6J野生型雌性小鼠作为实验对象。应用Morris水迷宫中逃避潜伏期、穿越平台的次数来评价小鼠的学习记忆能力,苏木精-伊红(HE)染色法观察小鼠脑组织形态学的改变,免疫组化法检测小鼠海马区β淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)1-42的表达水平。结果 回神颗粒治疗组小鼠学习记忆能力提高,与模型组比较,小鼠逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增多(P＜0.05);穿越平台次数与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗组大脑海马区Aβ1-42表达阳性面积明显减少(P＜0.05)。与正常组相比,模型组AD小鼠大脑海马区Aβ1-42表达阳性面积明显增高(P<0.05)。结论 回神颗粒可显著改善APP/PS1转基因AD小鼠的学习记忆能力,抑制Aβ1-42的过度表达、聚集。     

运动疲劳大鼠可能通过海马LTP抑制及CaN蛋白表达增多降低学习记忆功能

目的:通过观察运动疲劳对大鼠学习记忆、海马CA1区长时程增强(LTP)效应和钙神经素(CaN)蛋白表达的影响,探讨运动疲劳影响学习记忆功能的生理机制.方法:32只健康雄性8周鼠龄SD大鼠,随机分为安静对照组(CG)和运动疲劳组(FG),每组16只.运动疲劳组做连续7天递增负荷跑台运动,每天运动至力竭,对照组不加干预.7天建模结束后,运用避暗穿梭实验检测2组大鼠学习记忆能力,并分别采用在体脑立体定位—神经电生理方法观察海马CA1区LTP效应和免疫组织化学方法观察大鼠海马CA1区CaN蛋白表达水平.结果:与CG大鼠相比,FG大鼠避暗潜伏期缩短,错误次数增加,日差异显著(P＜0.01);最大场兴奋性突出后电位(fEPSP)的平均幅值FG大鼠(113.81％±2.36％)较CG大鼠(129.31％±2.38％)显著降低(P＜0.01);FG大鼠CaN蛋白表达也较对照组显著上调(P＜0.01).结论:运动疲劳可降低大鼠学习记忆能力,抑制海马CA1区LTP效应,上调CaN蛋白表达.提示:运动疲劳降低大鼠学习记忆功能的生理机制可能与海马CA1区LTP抑制及CaN蛋白表达增多有关.     

辛伐他丁对糖尿病大鼠认知下降的影响

目的:辛伐他丁对糖尿病大鼠学习记忆障碍的改善。方法:用辛伐他丁对糖尿病大鼠予以干预。然后对糖尿病大鼠进行水迷宫实验来研究其行为学改变情况。并用免疫组化法检测海马CA1区凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的变化。结果 :辛伐他丁能明显缩短大鼠Morris水迷宫到逃避潜伏期和错误反映次数,通过上调海马CA1区Bcl-2表达,减少bax表达,减少大鼠海马神经细胞凋亡率。结论:辛伐他丁在机体内能够增加Bcl-2蛋白含量,并抑制bax蛋白的表达,进而降低机体海马神经细胞出现凋亡的情况,改善糖尿病大鼠学习记忆能力的下降。     

玫瑰花对β-淀粉样蛋白诱导PC12神经细胞毒性的抑制作用

[目的]研究玫瑰花提取物对β-淀粉样蛋白（Aβ25-35）诱导的损伤PC12细胞的保护作用。[方法]PC12细胞加入Aβ25-35共同孵育后,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测PC12细胞活力,比色法检测细胞内丙二醛（MDA）含量,酶联免疫法检测细胞内Nf-κb水平。[结果]玫瑰花提取物对PC12无显著细胞毒性,可以显著抑制Aβ25-35诱导的PC12细胞毒性。与模型组相比,添加玫瑰花乙酸乙酯萃取物的样品组能降低PC12细胞内MDA浓度和Nf-κb表达。[结论]玫瑰花提取物对β-淀粉样蛋白致PC12细胞损伤具有一定的抑制作用,其作用机理可能与降低Aβ25-35所致的PC12细胞内的氧化应激有关。     

银杏叶提取物对去卵巢大鼠学习记忆功能的影响

利用水迷宫法研究了银杏叶提取物(EG b)对去卵巢大鼠学习记忆功能的影响,同时利用免疫组织化学SP法检测了大鼠海马中乙酰胆碱转移酶(ChAT)和神经元型一氧化氮合酶(NO S1)的表达情况。结果表明,去卵巢后大鼠学习记忆功能明显下降,海马中ChAT阳性神经元的表达明显减弱(P<0.05),NO S1阳性神经元(除CA 2区)的表达明显增强(P<0.01);EG b对雌激素缺乏所致的学习记忆功能下降具有明显的改善作用,其作用是通过增强海马中ChAT阳性神经元的表达和抑制NO S1阳性神经元的表达而实现的。     

骨髓基质细胞诱导的神经干细胞移植对颞叶癫痫大鼠学习记忆障碍的改善作用

   探讨骨髓基质细胞诱导的神经干细胞移植至海人酸(kanic acid,KA)致痫大鼠海马后对学习记忆障碍的改善作用,从而为干细胞移植治疗癫痫提供理论依据.体外分离大鼠骨髓基质细胞,并在特定条件下培养、诱导分化为神经干细胞.在海马内注射KA建立大鼠癫痫模型,之后把诱导的神经干细胞移植至KA致痫鼠的海马内,用Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力,用PCR方法检测海马内NSE、c-fos和SEZ-6基因表达,采用Western blot技术检测海马内NSE、C-FOS和SEZ-6蛋白表达.结果显示:骨髓基质细胞成功诱导分化为神经干细胞,诱导分化的神经干细胞移植到脑内可明显改善大鼠的学习记忆障碍;移植组大鼠海马内NSE、c-fos和SEZ-6基因表达下调,NSE、C-FOS和SEZ-6蛋白表达亦下调,与阳性对照组及假移植组比较,差异显著(P<0 05).说明骨髓基质细胞诱导的神经干细胞移植至KA致痫大鼠海马后对学习记忆障碍有明显的改善作用,其机制可能与NSE、c-fos、SEZ-6基因和蛋白的表达下调相关.     

有氧运动通过上调IGF1改善抑郁症大鼠的学习记忆能力

目的：分析4周有氧运动对抑郁症大鼠海马组织胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1, IGF1) 信号通路的影响,探究长期有氧运动缓解抑郁症及改善机体记忆学习能力的分子生物学机制。方法：30只成年雄性清洁级SD大鼠（250g～300g）诱导慢性不可预见性应激模型。建模成功的SD大鼠随机分为抑郁安静组 (Con) 和抑郁有氧运动组 (ET) 各10只。ET 组小鼠进行为期4周的有氧跑台训练,抑郁安静组的大鼠笼内自由活动作为对照。4周后取两组大鼠海马组织,进行基因芯片分析;随机选取6个差异表达基因进行Real-time qPCR实验以验证基因芯片结果; Western Blot实验检测IGF1及其信号通路相关分子和细胞外信号调节激 酶 (extracellular signal-regulated kinase, ERK)、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein, CREB)的表达。结果：对比 Con 和 ET 组SD大鼠海马组织基因表达谱,筛选发现共有366个差异表达基因,其中表达上调的基因有 332 个,表达下调的基因有 34 个。 Real-time qPCR实验结果与基因芯片一致。通路 (Pathway) 分析结果显示,差异表达基因编码的蛋白共富集 61 条细胞信号通路,其中包括IGF1信号通路。采用Western Blot检测IGF1信号通路相关分子,发现ET 组IGF1,ERK及CREB表达上调。结论：4周有氧跑台训练引起抑郁症SD大鼠海马组织全基因表达谱发生变化,可能通过调控IGF1信号通路相关分子促进机体记忆学习能力的提高。     

甲状腺素联合多奈哌齐对成年期甲减 大鼠海马SNAP-25的影响

阐明甲状腺素联合多奈哌齐对成年期甲状腺功能减退症(简称甲减)大鼠海马突触小体相关蛋白25(SNAP-25)表达的影响,探讨成年甲减脑功能损伤及恢复机制。结果显示甲减大鼠血清T3、T4及海马CA1、CA3区和齿状回(DG)SNAP-25蛋白水平显著升高。单独甲状腺素或联合治疗后血清T3、T4水平恢复正常,但单独甲状腺素治疗后,海马SNAP-25水平仍显著高于对照组大鼠,联合治疗后海马各层SNAP-25蛋白水平与对照组无显著差异。这些结果提示,成年期甲减可致海马内SNAP-25蛋白表达增加,单独甲状腺素治疗后SNAP-25蛋白表达恢复不理想,与多奈哌齐联合治疗使甲减大鼠海马内SNAP-25蛋白恢复到正常水平。     

甲状腺素联合多奈哌齐对成年期甲减大鼠海马SNAP-25的影响

阐明甲状腺素联合多奈哌齐对成年期甲状腺功能减退症(简称甲减)大鼠海马突触小体相关蛋白25(SNAP-25)表达的影响,探讨成年甲减脑功能损伤及恢复机制。结果显示甲减大鼠血清T3、T4及海马CA1、CA3区和齿状回(DG)SNAP-25蛋白水平显著升高。单独甲状腺素或联合治疗后血清T3、T4水平恢复正常,但单独甲状腺素治疗后,海马SNAP-25水平仍显著高于对照组大鼠,联合治疗后海马各层SNAP-25蛋白水平与对照组无显著差异。这些结果提示,成年期甲减可致海马内SNAP-25蛋白表达增加,单独甲状腺素治疗后SNAP-25蛋白表达恢复不理想,与多奈哌齐联合治疗使甲减大鼠海马内SNAP-25蛋白恢复到正常水平。     

基于SIRT1/NF-κB炎性通路探讨加味脑泰方对血管性痴呆大鼠学习记忆及海马组织病理形态的影响

目的 探讨加味脑泰方（以下简称JWF）对血管性痴呆（vascular dementia,VD）大鼠SIRT1/NF-κB p56炎性通路的调控作用。方法 采用双侧颈总动脉结扎法（two-vessel occlusion,2-VO）复制VD大鼠模型。实验设正常组,假手术组,模型组,JWF高、中、低剂量组和奥拉西坦组,其中JWF高、中、低剂量组和奥拉西坦组分别灌胃给予JWF17.0、34.0、51.0 g/kg和奥拉西坦0.216 g/kg,其余3组灌服等容量蒸馏水,连续干预30 d。采用Morris水迷宫、HE染色分别检测大鼠学习记忆能力和海马组织病理形态变化;采用免疫组化检测沉默信息调节因子-1（silent informatio regulator-1,SIRT1）、核因子κB抑制蛋白d亚基（The nuclear factorκB inhibits theprotein subunit,IκBα）、核因子-κB（nuclear factor-kappa B,NF-κB）蛋白表达情况。结果 与正常组比较,模型组大鼠学习记忆能力显著降低（P<0.05）,海马神经元变性、坏死,炎性细胞浸润增加,且SIRT1、IκBα表达下调,NF-κB p56表达上调（P<0.05）;与模型组比较,奥拉西坦组和JWF高、中剂量组大鼠学习记忆能力显著增强（P<0.05）,海马组织中神经元锥体细胞排列较整齐,轮廓清晰,炎性细胞浸润显著减少,且海马组织内SIRT1、IκBα表达上调,NF-κB p56表达下调（P<0.05）。结论 JWF对血管性痴呆大鼠炎性相关信号通路SIRT1/NF-κB p56具有明显的调控作用,这可能是其保护VD大鼠海马神经元继而改善学习记忆能力的重要机制之一。     

卷烟烟气暴露对大鼠学习记忆功能及海马组织病理和BDNF表达的影响

设对照组(未染毒)、低剂量组(约2.5支烟,每天染毒10 min)、中剂量组(约5支烟,每天染毒20 min)及高剂量组(约10支烟,每天染毒40 min)4个处理,将雄性SD大鼠置于气体染毒箱内行被动吸烟,研究卷烟烟气暴露对大鼠学习记忆功能及海马病理和脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophicfactor,BDNF)的影响。结果表明:染毒30 d,染毒组大鼠潜伏时间均显著短于对照组,BDNF表达显著高于对照组;染毒60 d,中剂量组大鼠潜伏时间显著短于对照组,BDNF表达显著高于对照组;染毒180 d,染毒组大鼠潜伏时间显著长于对照组,BDNF表达显著高于对照组;不同剂量处理大鼠的海马HE染色均无明显变化,大鼠的海马组织均无器质性损伤;短期烟气暴露可提高大鼠学习记忆功能,随染毒时间的延长,大鼠学习记忆功能下降,该作用与海马BDNF的表达密切相关。     

原花青素影响Aβ25-35诱导PC12细胞周期变化与细胞凋亡的可能机制

目的探讨原花青素（Proanthocyanidins,PAC）对β-淀粉样肽（25—35）[β amyloid peptide-（25—35）,Aβ25-35]诱导体外血清饥饿培养的PCI2细胞周期异常与凋亡保护作用的可能机制。方法种人培养瓶或板的PC12细胞贴壁后用常用血清饥饿培养使细胞同步于岛期,30mg／L的PAC预处理血清饥饿培养的PC12细胞,加入终浓度为25μmol／L Aβ25-35处理0～20h,通过RT-PCR和Western blot从mRNA及蛋白水平检测细胞周期蛋白依赖性激酶4（Cyclin—dependent kinase-4,CDK4）、磷酸化的视网膜纤维母细胞瘤蛋白（phosphorylated Retinoblastoma protein,pRb）、腺病毒E2启动子结合因子1（Adenovirus E2 factor-1,E2 F1）、B细胞淋巴瘤／白血病关联X蛋白（B-cell lymphoma／leukemia-2 Associated X protein,bax）基因表达的变化。结果与Aβ25—35诱导组比较,CDK4、E2F1、bax mRNA表达和CDK4、pR6、Bax蛋白表达降低。结论PAC可能通过下调CDK4、pRb、E2F1的表达,从而降低bax的活化,对Aβ25-35诱导的PC12细胞周期异常与凋亡起保护作用的。     

补肾填髓方对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力及线粒体氧化应激的影响

目的 观察补肾填髓方对阿尔茨海默病（Alzheimer''s disease,AD）模型大鼠学习记忆能力及线粒体氧化应激的影响。方法 50只大鼠先用Y迷宫初筛,再按旷场实验得分随机分成正常组、模型组、假手术组、中药组、西药组。假手术组两侧侧脑室注射β淀粉样蛋白（Aβ）_42~1,余下除正常组外均以双侧侧脑室注射（Aβ）_1-42复制AD模型。造模后中药组灌服补肾填髓方,西药组灌服多奈哌齐,其他组灌服等容量生理盐水,连续干预28 d。Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,酶联免疫吸附方法（ELISA）检测大鼠脑皮质及血清超氧化物歧化酶（superoxide dismufase,SOD）活性,硫代巴比妥酸法（TBA）检测大鼠脑皮质及血清丙二醛（malondialdehyde,MDA）活性,透射电镜观测海马线粒体超微结构。结果 与模型组比较,中药组和西药组大鼠水迷宫逃避潜伏期缩短,在原平台象限游泳时间及距离的百分比增加,差异均有显著统计学意义（P<0.05或P<0.01）。与模型组比较,中药组SOD活性升高,MAD活性减低（P<0.05,P<0.01）;西药组的SOD活性升高,MDA活性降低（P<0.01）;中药组及西药组的海马线粒体超微结构病理损害改善。结论 补肾填髓方可以改善AD大鼠的学习记忆能力,其机制可能与改善线粒体氧化应激有关。     

愈痫灵方对PTZ致痫鼠认知功能障碍与海马p-CREB、CaMK IV表达的影响

目的 分析愈痫灵方对海马磷酸化环磷腺苷应答元件结合蛋白（CREB）、钙调蛋白依赖性蛋白激酶IV（CaMK IV）的关系和表达变化,探讨愈痫灵方改善戊四氮（PTZ）致痫鼠认知功能障碍的影响。方法 取健康雄性SD大鼠120只,从中随机选取10只作为正常对照组,其余大鼠用戊四氮造模,将符合模型标准的大鼠随机抽取60只分为愈痫灵组、拉莫三嗪组、丙戊酸钠组和模型组,每组15只。灌胃后用水迷宫实验测试大鼠的学习记忆能力,采用免疫组织化学方法检测p-CREB、CaMK IV在海马体CA1区的表达变化。结果 各组大鼠水迷宫实验潜伏期和总路程的学习记忆成绩比较有显著统计学意义（P<0.001）：模型组与正常组比较,差异有显著统计学意义（P<0.001）;拉莫三嗪组、愈痫灵组与模型组比较,差异有显著统计学意义(P<0.001)。愈痫灵方对致痫鼠海马CA1区P-CREB、CaMK IV表达的影响：各组之间表达的比较,差异有显著统计学意义（P<0.01）;模型组与正常组比较,差异有显著统计学意义（P<0.01）;愈痫灵组、拉莫三嗪组与模型组比较,差异有显著统计学意义（P<0.01）。结论 愈痫灵方可以通过增强海马区p-CREB的水平,提高P-CREB的上游通路CaMK IV,改善致痫大鼠的学习记忆能力。     

氟对大鼠海马中SNAP-25基因表达的影响

通过建立氟中毒大鼠模型,研究一定剂量氟化钠下大鼠海马中氟突触体相关蛋白-25(SNAP-25)基因表达量,为探讨氟对神经系统造成的影响提供动物性试验依据。结果表明,与饮用去离子水组相比,染氟突触体相关蛋白-25基因mRNA的表达明显下调。     

柴胡疏肝散对抑郁症大鼠海马5-HT及5-HT1A表达的影响

目的研究柴胡疏肝散对抑郁大鼠海马5-HT及5-HT1A的作用,探讨柴胡疏肝散抗抑郁作用机制。方法选用成年Wistar大鼠45只,分为对照组、模型组和治疗组。给予慢性不可预性温和应激(CUMS)建立抑郁模型,治疗组给予柴胡疏肝散饮片灌胃。采用糖水偏好实验和悬尾实验进行行为学检测,采用高效液相色谱法测定海马5-HT浓度,Western blot检测5-HT1A表达。结果模型组大鼠糖水偏好百分比明显降低(P<0.05),悬尾不动时间明显延长(P<0.05);治疗组能逆转此改变;模型组大鼠海马5-HT含量和5-HT1A受体表达水平明显低于对照组(P<0.05),治疗组5-HT含量和5-HT1A受体表达水平明显升高,但仍低于对照组(P<0.05)。结论柴胡疏肝散抗抑郁作用可能与影响海马5-HT水平及5-HT1A受体表达有关。     

Aβ1-10特异性结合肽对老年性痴呆大鼠空间学习记忆的影响

利用Morris水迷宫探讨Aβ1-10特异性结合肽对Aβ1-42诱导的老年性痴呆大鼠模型空间学习记忆的影响。结果显示,在定位航行试验中,中剂量治疗组的潜伏期和游泳路程较模型组显著缩短(P<0.05);在空间探索任务中,中剂量治疗组在目标象限内游泳路程的百分比显著高于模型组(P<0.05)。表明合适剂量的Aβ1-10特异性结合肽可显著改善老年性痴呆大鼠的空间学习记忆能力。