桃实蝇的DNA条形码鉴定

桃实蝇(Bactrocera zonata)严重危害桃、番石榴、番荔枝等经济作物,被我国列为进境植物检疫性有害生物。为明确桃实蝇各虫态的重要形态鉴定特征,并将DNA条形码技术应用于桃实蝇的鉴定,本研究针对采自于印度旁遮普邦的桃实蝇卵、幼虫、蛹和成虫样品进行了形态观察和分子鉴定。结果表明:桃实蝇成虫整体呈红褐色,头部具一对卵圆形黑色颜面斑。翅除前缘带和臀条外几乎透明,r_(2+3)室端部具"痣状"小褐斑,延伸至r_(4+5)室端部。实蝇成虫及蛹样品的COI条形码序列与GenBank中收录的桃实蝇序列相似度在99.24%～100%之间;基于COI条形码构建的系统发育树显示本研究所有样品和桃实蝇聚在一个分支上。本研究表明DNA条形码技术可有效应用于桃实蝇的准确鉴定。     

基于DNA条形码技术的河南省夏季重要实蝇害虫分子鉴定

以夏季采自河南省洛阳市、郑州市的实蝇幼虫、成虫为研究材料,采用DNA条形码技术,通过测定、比对线粒体DNA细胞色素氧化酶I(COI)基因片段序列,对其进行种类鉴定。结果表明,检测的实蝇样品种类为橘小实蝇(Bactrocera dorsalis)、具条实蝇(Zeugodacus scutellatus)和三点棍腹实蝇(Dacus trimacula),与相关种已知序列的相似度均在99.39%以上,其系统发育树明显与我国其他常见实蝇近缘种区分开。     

基于DNA条形码的广西苦瓜中实蝇幼虫分子鉴定研究*

实蝇是多种热带、亚热带水果和蔬菜的重要害虫,其卵、幼虫、蛹难以通过形态特征进行种类鉴定。DNA条形码是近年来出现的物种分子鉴定技术,能够实现对昆虫非成熟虫态的快速鉴定。本研究利用DNA条形码技术和BOLD系统,选取线粒体DNA细胞色素氧化酶I（COI）基因片段,针对采自于广西南宁地区苦瓜中的实蝇幼虫样品进行了序列测定、比对和分析。结果显示,在所检测的10头实蝇幼虫样品中,有4头为瓜实蝇［Bactrocera cucurbitae (Coquillett)］、6头为南亚果实蝇［Bactrocera tau (Walker)］。     

基于DNA条形码技术的湖南省柑橘主产区实蝇幼虫分子鉴定

为明确湖南省柑橘主产区的实蝇入侵为害现状,从该省7个市(自治州)22个地点收集柑橘蛆果中的幼虫,利用DNA条形码技术对其进行分子鉴定,并以DNA条形码序列作为分子标记探究橘大实蝇Bactrocera minax的20个中国地理种群(湖南省6个组群共16个种群、其它3省市4个种群)以及1个印度地理种群间的亲缘地理关系,分析橘大实蝇在我国的遗传进化关系。结果表明,仅采集自邵阳市城步苗族自治县柑橘蛆果中的5头幼虫被鉴定为蜜柑大实蝇B. tsuneonis,其余21个地点采集的595头幼虫均被鉴定为橘大实蝇。21个橘大实蝇地理种群的平均单倍型多样性为0.75,核苷酸多样性为0.0032,核苷酸差异数为2.13,中国所有地理种群均具有较高的遗传多样性;单倍型网络进化图显示湖南、重庆、贵州种群共享的单倍型H3为原始单倍型,表明其为比较原始的种群;AMOVA分析结果显示种群内个体间遗传变异占总体变异的59.04%,是遗传变异的主要来源;遗传分化结果表明湖南省6个组群间均出现了中度至高度的遗传分化,FST在0.0521～0.7795之间。表明DNA条形码技术可用于蜜柑大实蝇和橘大实蝇幼虫的分子鉴定及其种群遗传进化分析。     

基于DNA条形码技术的泰国番石榴中实蝇幼虫分子鉴定研究

实蝇是世界重要的检疫性害虫之一,对果蔬生产及其国际贸易具有很大的影响。而以线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚单位I(mtDNACOI)基因的部分序列作为实蝇的DNA条形码能减少对实蝇成虫形态特征的依赖,可检测其任何虫态的样品,有助于实蝇样品的快速鉴定。本研究采用DNA条形码技术,针对采自泰国四色菊市番石榴烂果中的5头实蝇幼虫进行COI扩增测序,与生命条形码数据库(BOLD)中的序列进行比对并利用PAUP4.0软件构建了其系统进化树。根据序列分析和系统进化关系分析的结果,将5头实蝇幼虫样品鉴定为番石榴实蝇(Bactrocera correctaBezzi),并将本研究获得的2条COI序列在GenBank中注册,GenBank的登录号为HM590450和HM590451。     

4种实蝇线粒体DNA全序列测定

橘小实蝇(Bactrocera dorsalis)、木瓜实蝇(Bactrocera papayae)、杨桃实蝇(Bactrocera carambolae)和菲律宾实蝇(Bactrocera philippinensis)的成虫和幼虫的形态特征十分相近,难以区分.本文对4种实蝇的线粒体DNA全序列进行测定,序列在GenBank上登录(登录号分别为:DQ917577,DQ917578,EF014414,DQ995281),并对4个种的线粒体DNA全序列进行序列分析,为建立基于线粒体DNA序列分析的快速鉴定方法提供基础.     

海南三亚崖州湾科技城发现番石榴果实蝇

番石榴果实蝇Bactrocera correcta(Bezzi)严重为害番石榴、莲雾、芒果等果蔬植物,我国将果实蝇属Bactrocera (非中国种)列为进境植物检疫性有害生物。2021年10月至2022年6月,在海南省三亚市崖州湾科技城内连续9个月诱捕到疑似番石榴果实蝇成虫。本研究通过形态特征、DNA条形码和常规PCR等方法,对诱捕到的疑似样品进行了鉴定。鉴定结果表明,诱捕到的实蝇样品为番石榴果实蝇,相关植物检疫机构需进一步加强海南地区番石榴果实蝇的检疫、监测及防控。     

球孢白僵菌对橘小实蝇实验种群的影响

研究了球孢白僵菌(Beauveria bassiana)B6菌株对橘小实蝇成虫(Bactrocera dorsalis Hendel)的影响。结果表明,在杨桃、番石榴与香蕉3种水果上喷施球孢白僵菌孢子悬浮液,橘小实蝇雌成虫平均产卵量分别为(188.3±11.4)粒、(156.7±13.1)粒、(165.3±9.1)粒,与对照差异不显著;孵化的老熟幼虫数量分别(156.3±11.5)头、(130.3±8.3)头、(147.7±10.6)头,与对照差异也不显著;成虫存活率分别为51.1%、52.2%、62.3%,与对照差异极显著。干扰作用控制指数IIPC为0.554 2、0.573 0、0.667 7,对橘小实蝇成虫控制效果明显。     

引诱剂对蜜柑大实蝇的诱捕效果

本文报道了采用国际通用的监测技术,利用橘小实蝇、瓜实蝇、地中海实蝇引诱剂和水解蛋白诱饵,在广西凭祥市确定存在蜜柑大实蝇的果园开展了针对性的诱捕;诱捕结果表明,瓜实蝇引诱剂和水解蛋白诱饵能够诱捕到蜜柑大实蝇成虫,且水解蛋白诱饵比瓜实蝇引诱剂诱捕效果好.     

湖北口岸截获辣椒实蝇

2008年6月10日,武汉天河机场检疫人员从进境泰国旅客携带的行李中,发现泰国红辣椒近500g.样品送湖北检验检疫局技术中心检测,植检人员解剖发现有4只实蝇幼虫,经饲养羽化成虫后,复核鉴定为辣椒实蝇(Bactrocera latifrons).     

印江县柑橘大实蝇发生特点与防控策略

<正>柑橘大实蝇Bactrocera(Tetradacus)minax(Enderlein)属双翅目Diptera实蝇科Tephritidae,俗称"柑蛆",又名橘大实蝇,柑橘大果蝇。多年来,由于果农没有掌握柑橘大实蝇的防控技术,为害区域和为害程度逐年加大,严重威胁着印江县柑     

橘小实蝇对沙田柚果实危害的测定

橘小实蝇[Bactrocera（Bactrocera）dorsalis（Hendel）]对沙田柚的为害,主要表现在成虫产卵造成果皮的损伤,幼虫在产卵腔取食和在果皮海绵组织中扩散污染.试验观察发现幼虫全部在卵腔和海绵组织中死亡,未发现有幼虫为害果肉.     

湖南辣椒上首次发现辣椒实蝇

为掌握湖南省为害辣椒的实蝇种类,我们对辣椒的虫果进行了调查。2021年9月,我们在湖南省长沙市采到虫害辣椒,待幼虫化蛹并羽化出成虫后,对其进行形态学及分子鉴定,确定本次采到的5头幼虫均为辣椒实蝇[Bactrocera latifrons (Hendel)]。这是辣椒实蝇在湖南省的首次记录。     

蜜柑大实蝇在中国的适生性研究

蜜柑大实蝇Bactrocera(Tetradacus)tsuneonis(Miyake)是重要的检疫性有害生物,危害柑橘类作物.本研究在中国748气象站点的气象数据和蜜柑大实蝇生物学数据的基础上综合运用CLIMEX软件与ArcGIS软件对蜜柑大实蝇在我国的适生性进行研究.结果显示:蜜柑大实蝇在我国具有较高的适生性,适生范围涉及33个省、市(区),其中广西、广东、贵州、重庆、湖北、江苏的广大地区,四川、云南的东南部,陕西、河南的南部,安徽、台湾的北部和海南的中部地区等为高度适生区.本研究明确了蜜柑大实蝇在我国的适生性,提出了针对不同适生程度区域内的防控措施建议,对科学制定我国蜜柑大实蝇检疫政策和措施、防止该实蝇入侵和进一步扩散等具有重要的意义.     

Carpomya属检疫性实蝇

本文介绍Carpomya属中的欧非枣实蝇(Carpomya incompleta)、甜瓜迷实蝇(C.pardalina)、枣实蝇C.vesuviana、和C.schineri的成虫形态鉴定特征,并提供了该属中6种主要实蝇的形态鉴定特征检索表以及分布和寄主种类等相关信息。     

从榴莲蜜上截获三带实蝇

凭祥海关从越南进境旅客携带的榴莲蜜上截获1种实蝇幼虫,利用成虫形态特征和分子特征进行鉴定。结果表明:该虫成虫中胸侧板条伸达肩胛;翅上具有沿bm-cu脉、r-m脉与dm-cu脉以及穿过M脉端部的3条横向条纹;bc室深色;COI基因序列分析表明该实蝇幼虫的序列与GenBank和BOLD Systems中的B. umbrosa序列相似性达99%～100%;基于COI序列的系统发育树分析表明与B. umbrosa聚在同一个分枝上。结合形态和分子鉴定结果,将其鉴定为三带实蝇(Bactrocera umbrosa Fabricius)。这是我国口岸首次从榴莲蜜上截获该虫。     

实蝇高引诱性酵母菌的分离和筛选

实蝇是一类重要的检疫性园艺害虫,易造成果实未熟先黄、脱落和腐烂。利用饵剂进行成虫诱杀是防治实蝇最有效的手段之一,而国内目前普遍缺乏绿色高效的实蝇饵剂。多种微生物被报道对实蝇具有引诱能力,配合诱捕器使用,可以成为一种高效绿色的成虫防治技术。本研究从海南、广东、广西、江西、浙江、湖北等地的柑橘、番石榴、杨桃等虫果及寄主叶片上分离获得了357株酵母菌菌株,通过26S rDNA测序,鉴定出这些菌株分属于8个属、25个种,包含假丝酵母属Candida(6种)、有孢汉逊酵母属Hanseniaspora(5种)、毕赤酵母属Pichia(9种)、酿酒酵母属Saccharomyces(1种)、有孢圆酵母属Torulaspora(1种)、子囊酵母属Galactomyces (1种)、Starmerella属(1种)和威克汉姆酵母属Wickerhamomyces属(1种)。在所有分离培养的酵母菌中,优势种是仙人掌有孢汉逊酵母Hanseniaspora opuntiae,优势度指数为0.22。在模拟田间环境的半封闭网室中测定357株酵母菌株发酵液对南亚果实蝇Zeugodacus tau和橘小实蝇Bactrocera dorsalis雌雄成虫的引诱活性,初步筛选获得发酵液引诱活性较好的菌株12株,其引诱南亚果实蝇和橘小实蝇的数量分别是阳性对照的1.0~3.7倍和3.2~7.8倍。进一步筛选发现克鲁维毕赤酵母Pichia kluyveri ZJGJA31和球形环孢菌Torulaspora globosa HBMTA13发酵液对南亚果实蝇田间引诱能力分别为(10.6±1.7)头/诱捕器和(6.8±1.1)头/诱捕器;对橘小实蝇田间引诱能力分别为(9.1±1.1)头/诱捕器和(23.0±2.9)/诱捕器。结果表明,P.kluyveri ZJGJA31和T.globosa HBMTA13发酵液具有被开发成实蝇引诱剂的潜在价值。     

缅甸第四特区实蝇类害虫调查

2001～2003年连续3年5～10月对缅甸第四特区检疫性实蝇类害虫进行疫情监测.在第四特区3年共设置了60个监测点,应用性引诱剂和诱饵诱集实蝇成虫,结合田间观察和室内饲养,初步查明检疫性实蝇害虫种类有12种,其中优势种为橘小实蝇(Bactrocera dorsalis),其次为瓜实蝇(Bactrocera cucurbitae)和南瓜实蝇.5～7月为实蝇类害虫发生的高峰期,种群数量以6月份最多.     

两种大实蝇的鉴别

Tetradacus 亚属在我国有两个种:蜜柑大实蝇 Dacus(Tetradacus)tsuneonisMiyake 和柑桔大实蝇 Dacus(Tetradacus)cirri(Chen)。这两个种外部形态极其相似。D.Elmo Hardy(1955)和欧洲地中海植物保护组织(1981)一直将这两个种视为同种异名。而在我国,学者们则认为是两个种,关于这两个种的分类地位问题,本文不拟涉及。笔者仅就这两种实蝇的鉴别方     

SYBR Green实时荧光PCR快速鉴定辣椒实蝇

本文应用SYBRGreen实时荧光PCR技术,建立了SYBRGreen实时荧光PCR快速鉴定辣椒实蝇的方法。利用辣椒实蝇mtDNACOI基因序列,筛选出种特异引物lati1/lati2。引物的特异性分别用辣椒实蝇、橘小实蝇、木瓜实蝇、杨桃实蝇、菲律宾实蝇、芒果实蝇、番石榴实蝇、瓜实蝇和南瓜实蝇等9种果实蝇来验证。0.01ng,0.1ng,1ng,10ng,20ng,40ng和100ng等7个不同浓度系列的辣椒实蝇DNA模板用来检测SYBRGreenPCR实时荧光反应的灵敏度,结果表明,SYBRGreenPCR的检测限度达1pg以下,最适模板DNA浓度为1～20ng。成虫、幼虫和蛹等3种不同虫态的辣椒实蝇有一致的扩增曲线,熔解曲线分析和琼脂糖凝胶电泳分别用来确认实时荧光PCR产物的特异性。其平均熔解温度为77.5℃±0.1℃。获得1段长为366bp的特异性目标片段,说明在辣椒实蝇成虫为模板基础上建立的SYBRGreen实时荧光PCR方法适于幼虫、蛹的快速鉴定。