柑橘衰退病毒检测试剂研制及其分子特性研究

柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)广泛分布于世界各柑橘产区,其引起的衰退病是最具危害性的柑橘病害之一,该病毒主要通过蚜虫和带毒接穗传播.CTV存在明显的株系分化现象,除少数株系在许多柑橘品种上不产生可见症状外,大部分株系能在柑橘上产生明显症状,常见症状可分为三大类型,即速衰型、茎陷点型和苗黄型.速衰型症状主要表现在以酸橙作砧木的甜橙等感病柑橘上;茎陷点症状的发生与砧木种类无关,常导致葡萄柚或甜橙产量降低、品质下降、植株矮化;苗黄症状在田间很少发生,主要是在酸橙、来檬或葡萄柚的苗期引起严重褪绿和矮化.     

几种重要花生病毒研究新进展

 花生病毒病是影响花生生产的重要病害。近10年来,花生矮化病毒(PSV)、花生条纹病毒(PStV)和番茄斑萎病毒属(Tospovirus)病毒分子生物学研究进展,极大地丰富了对上述病毒基因组结构、遗传变异、进化的认识,以及病毒种、亚组和株系的科学划分。对PSV来说,提出了2个亚组的划分,而我国PSV株系血清学和RNA3全序列的分析,明确它们独自构成第3个新的亚组。对我国和东南亚国家PStV株系CP基因序列同源性的分析,说明在这些国家和地区PStV是单独进化的,形成不同症状类型的株系。Tospovirus属病毒分子生物学研究的深入使得该属病毒从番茄斑萎病毒(TSWV)1种增加到13种,其中侵染花生的病毒达5种,分布于不同的国家和地区。     

油菜花叶病毒Wh株系的鉴定

依据病毒的寄主植物反应、血清学性质和RNA 3'末端含cp和mp基因1554 bp cDNA片段序列分析,明确一个侵染油菜的烟草花叶病毒属Tobamovirus病毒分离物是油菜花叶病毒(Oileed rape mosaic virus,ORMV)的一个株系,定名为Wh株系.ORMV-Wh侵染油菜、白菜和大白菜等十字花科的作物,初期产生典型明脉症状,对辣椒、番茄和烟草等茄科植物致病性弱;血清学与烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)有明显差异.ORMV-Wh mp、cp基因和3'UTR区段大小分别为798、474和235个核苷酸,mp和cp基因有77个核苷酸重叠;与TMV序列同源性在60%以下,与侵染十字花科Tobamovirus属病毒株系序列同源性在80%以上;其中与ORMV的不同株系RMV-CAB、RMV-Sh、YoMV、YoMV-Cg和CTMV-W的同源性在90%以上.     

植物病毒抗血清的制备和应用

血清学方法,在植物病毒研究方面有很大的应用价值。由于植物病毒抗血清具有高度的专化性,并且容易控制,所以,可用来研究病毒的株系亲缘关系、病毒在植物体内转移及带毒量的分析等方面。在生产上,对无性繁殖的材料,可用血清反应法淘汰带病毒的植株,亦可诊断没有症状的带病毒植株。     

有关烟草坏死病毒鉴定的几个问题

烟草坏死病毒(TNV)首次为 Simith 和Bold 于1935年发现并命名。此病毒广泛分布于全世界。英格兰,美国和新西兰的植物病毒学家都曾单独分离出 TNV,并进行了大量的研究工作。近年来,我国也有关于此病的报道。现已发现 TNV 包含许多株系,并且某些株系带有卫星病毒(SV)。TNV 各株系之间及带有 SV 的 TNV 与 SV 之间的关系甚为     

酵母pac1基因介导对葡萄B病毒的抗性

为明确广谱性抗病毒基因—酵母pac1基因对葡萄B病毒(Grapevine virus B,GVB)的抗性效果,通过农杆菌介导的遗传转化,将pac1基因导入西方烟37B,对转基因植株进行PCR鉴定及Southern blot分析,通过病毒摩擦接种观察症状以及实时荧光定量RT-PCR检测植株体内病毒含量,并对转基因植株抗病性进行初步鉴定。结果表明,目的基因pac1成功导入并整合至西方烟37B基因组,共获得10个转基因株系。不同株系的T1代烟草中阳性植株比例为16.7%~72.7%,表明目的基因可成功遗传到子代。接种病毒后转基因植株普遍延迟发病,但后期症状与非转基因对照相似,其中仅1个转基因株系B6具有不表现典型症状等抗性反应。接种植株病毒含量检测中,所有转基因植株均检测到病毒存在,但表现为抗病的B6株系中病毒含量显著低于非转基因对照,表明该转基因植株虽不能完全抵抗GVB侵染,但对GVB具有耐病性。     

黄瓜花叶病毒RNA1侵染性cDNA克隆构建及病毒致病因子的分析

侵染性克隆是研究植物病毒的基础。黄瓜花叶病毒是目前最重要的植物病毒之一。本文以黄瓜花叶病毒M株系为材料来构建病毒的侵染性克隆。由于RNA1的c DNA对多数克隆菌株有毒性,因而采取了分段克隆的方法来构建RNA1的侵染性c DNA克隆,并进一步通过假重组技术来研究病毒的致病因子。结果表明,采用分段克隆的方法成功获得了CMV-M RNA1的侵染性克隆;M株系侵染烟草引起的黄白化症状与病毒的RNA3有直接相关性。     

文旦柚矮化病的初步鉴定

苏鸿基(1979、1981)报道了台湾葡萄柚和柚的矮化病,接种墨西哥莱檬引起轻脉明和轻茎陷点,尤力克柠檬无黄化症状,葡萄柚叶片显著黄化和皱缩,ELISA等试验证实为衰退病毒(CTV)的一个株系。Tsai等(1992)进一步指出,柚茎陷株系引起柚严重茎陷点,称为衰退病毒矮化株系(CTV—D),并指出文旦柚矮化病在国内华南发生。作者1990年注意到浙江省玉环县文旦柚发生矮化症状树,对此病进行了调查和鉴定,初步结果报道如下。 1 发生和症状特点     

马铃薯Y病毒HC-Pro第182位赖氨酸残基参与引起烟草叶脉坏死

马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)是侵染烟草的最重要病毒之一.不同PVY株系侵染烟草可引起不同症状,有些PVY株系可引起烟草叶脉坏死,严重影响烟草的产量和品质.PVY A12分离物属于NTN-NW株系,但侵染珊西烟(Nicoti-ana tabacum cv.Xanthi)不能引起叶脉坏死.分析发现,...     

毒株、苗龄及温度对烟草苗期接种TMV试验的影响

病毒株系、苗龄、接种后培养条件是影响烟草病毒病发生发展的关键因素,为确保烟草接种TMV抗性鉴定和药效生测试验的准确性,在NV基因烟草和普通烟草上接种TMV,采用病毒生物学、qRT-PCR和Western blot技术,研究病毒的分离纯化、株系、稀释限点、传导路径、病害症状,以及N基因抗TMV的温敏性.结果显示,TMV为...     

应用间接酶联免疫吸附技术对芜菁花叶病毒血清学关系的研究

 本试验收集了来自不同国家和地区的10个芜菁花叶病毒株系或分离物(TuMV)。应用直接ELISA和间接ELISA对其各株系间血清学关系进行了比较试验。直接ELISA双抗体夹心法专化性较强。由病毒抗血清所制备的结合体只与同宗抗原起反应,不与TuMV其它株系异宗抗原起反应。应用病毒抗血清所制备的F (ab')₂包被处理的间接ELISA技术,鉴定病毒不同株系血清学亲缘关系时,只要用1个病毒株系抗血清即可对不同株系进行鉴定。由6个TuMV株系分别制备的抗血清对10个毒株进行鉴定表明,各株系均能交互反应,说明株系间具有共同的抗原性,仅OM株系与其它株系较少一致性,表明血清学关系较疏远。因此认为,间接ELISA适用于广泛的病毒诊断及株系鉴定之用,比直接ELISA优越。     

巴西中部大豆上发生的一种菜豆皱缩花叶病毒株系

1989年,在巴西中部EMBRAPA和CPAC地区的田中从表现斑驳的大豆上分离到一种病毒,根据寄主范围、症状、传播方式、病毒粒子形态和血清学研究判断,该种病毒鉴定为菜豆皴缩花叶病毒的一个株系,属于豌豆花叶病毒组。     

李痘病毒及其2个主要流行株系的分子鉴定

通过分析李痘病毒及其2个不同株系核酸的保守序列,设计出3对引物,即1对通用引物和2对株系特异性引物对李痘病毒进行RT-PCR检测,结果显示通用引物可以同时检测该病毒的2个最主要的流行株系,即D株系和M株系,而D株系引物只能检测出D株系病毒,M株系只能检测出M株系病毒,为口岸对进境种子、苗木及果实等中的李痘病毒准确快速的检测提供了一个有效的方法。     

一种由麦二叉蚜和麦长管蚜传播的小麦黄矮病毒株系的鉴定

 通过对采自我国内蒙古丰镇县13个春小麦病株标样进行4种蚜虫连续传毒比较,不同温度饲毒和接种试验,薄膜饲毒,2种蚜虫成若蚜传毒比较和血清学酶标试验等,明确我国内蒙古丰镇县小麦黄矮病毒株系为由麦二叉蚜和麦长管蚜有效传播的麦二叉蚜麦长管蚜株系(GAV)。对于这个株系,禾缢管蚜与玉米蚜是不能传播的。这种株系在我国冬麦区春麦区都有分布。     

东北三省大豆花叶病毒(SMV)株系的种类与分布

 本文报道了大豆花叶病毒株系鉴定和划分的方法以及东北3省各株系的分布比例,为大豆抗花叶病毒育种工作提供了基础。采用当前生产上有相当面积的栽培品种作为株系鉴别品种,将毒株分为3个株系群。1号株系群能使感病品种合丰23、九农9和吉林18发病产生系统症状;2号株系群除对上述品种外,还能使中抗品种齐黄1号和铁丰18也发病;3号株系群则对7个鉴别品种包括高抗品种诱变30及科系8号均能发病。     

马铃薯Y病毒云南昭通烟草分离物的检测及年度间差异比较

利用DAS-ELISA检测试剂盒检测昭通烟草脉斑病样品,结果表明存在马铃薯Y病毒O株系和马铃薯Y病毒N株系两个不同株系病毒。利用Sprimer和M4引物扩增、克隆、测序,得到长度为1 771 bp目的片段,该片段包含病毒的外壳蛋白基因序列、3′ UTR序列以及部分Nib基因序列;序列分析表明与湖南HN 2分离物（GenBank No. GQ200836）和美国NE 11分离物（GenBank No. DQ157180）核苷酸序列相似性均为98%,系统进化分析表明其具有较近的亲缘关系。     

黄瓜花叶病毒随体RNA的分子生物学

利用随体RNA对病毒的修饰作用。这种修饰作用随RNA的株系不同或改善症状或诱导症状,了解随体RNA的分子生物学,可以研究随体RNA在作物保护上的应用。     

北京地区辣椒病毒病毒原种类及黄瓜花叶病毒株系鉴定

近十年来,经鉴定,明确了北京地区辣椒病毒病毒原有7种,即黄瓜花叶病毒(CMV)占病株样品的55％,烟草花叶病毒(TMV)占26％,马铃薯Y病毒(PXY)占13.2％,烟草蚀纹病毒(TEV)占11.8％,马铃薯X病毒(PVX)占10.4％,苜蓿花叶病毒(AMV)占2％,及蚕豆萎蔫病毒(BBWV)占1.4％。其中CMV可划分为4个株系,即重花叶株系,坏死株系,轻花叶株系和带状株系。     

北京地区辣椒病毒病毒原种类及黄瓜花叶病毒株系鉴定

近十年来,经鉴定,明确了北京地区辣椒病毒病毒原有7种,即黄瓜花叶病毒(CMV)占病株样品的55％,烟草花叶病毒(TMV)占26％,马铃薯Y病毒(PXY)占13.2％,烟草蚀纹病毒(TEV)占11.8％,马铃薯X病毒(PVX)占10.4％,苜蓿花叶病毒(AMV)占2％,及蚕豆萎蔫病毒(BBWV)占1.4％。其中CMV可划分为4个株系,即重花叶株系,坏死株系,轻花叶株系和带状株系。     

甘薯病毒病的研究Ⅰ甘薯羽状斑驳病毒的分离、鉴定

 本文从寄主范旧,蚜传特性、病毒颗粒形态、免疫电镜等方面对嫁接获得的甘薯羽状斑驳病毒廊坊分离物(SPFMV-LF)进行了鉴定,并和SPFMV-RC(美国株)进行了实验比较。SPFMV-LF易汁液摩擦传播和嫁接传播,并以蚜虫非持久性传播,SPFMV-LF系统侵染巴西牵牛(Ipomoea setosa)、牵牛(I.nil);不侵染Chenopodium quinoa、C.ama-ranticolor、Nicotiana benthamiana及其它烟草。尚未发现其局部斑寄主。SPFMV-LF及SPFMV-RC感染I.setosa后引起相似的症状,但感染I.nil后症状差别较大。病毒颗粒长860-830nm,经两次蔗糖垫超速离心从SPFMV-LF感染的I.setosa叶片提取病毒并在BALB/C小鼠中制备抗SPFMV-LF的腹水多克隆抗体,免疫电镜表明,SPFMV-LF的抗体和SPFMV-RC株系有反应。上述实验结果表明SPFMV-LE是SPFMV的一个株系,但不同于SPFMV-RC。