Functional Oligosaccharides Affect Rumen Fermentation and Microbial Growth Efficiency of Jingjiang Cattle

本试验旨在研究不同水平的功能性寡糖对锦江黄牛瘤胃发酵及微生物生长效率的影响.采用体外批次培养法,在精粗比为20∶80的基础饲粮中添加甘露寡糖、果寡糖和大豆寡糖,各组功能性寡糖的添加水平分别为0(对照组)、0.80％、1.00％和1.20％.结果表明,饲粮添加功能性寡糖对锦江黄牛瘤胃pH无显著影响(P＞0.05),但显著增加培养液挥发性脂肪酸和菌体蛋白浓度(P＜0.05);每日微生物氮产量也有提高的趋势,但差异不显著(P＞0.05).建立微生物生长效率与功能性寡糖添加水平之间的二次曲线模型,当甘露寡糖添加水平为1.17％时,微生物生长效率最大,为59.72 g/kg;当大豆寡糖添加水平为1.03％时,微生物生长效率最大,为59.50 g/kg.综合本试验结果,功能性寡糖的添加水平在1.00％～1.20％之间更有利于锦江黄牛瘤胃微生物的生长.     

Q-Exactive高分辨质谱同时测定生乳中5类32种兽药残留

本文应用QuEChERS前处理技术,结合高效液相色谱-高分辨质谱技术,对残留在生乳中磺胺类、大环内酯、林可酰胺、酰胺醇、青霉素5类32种兽药的同时测定进行了研究.本方法以1％氨水乙腈和1％乙酸乙腈为萃取溶剂,无水硫酸钠为脱水剂,C18和PSA为吸附剂,甲醇-0.1％甲酸水(1:9,V/V)为再溶解溶液.用Hypersi...     

超高效液相色谱-串联质谱测定畜禽肉中硝基呋喃代谢物方法关于pH值的优化探讨

本试验的目的是优化畜禽肉中硝基呋喃代谢物超高效液相色谱-串联质谱测定方法。样品经洗涤后去除杂质,在酸性条件下水解,与加入的2-硝基苯甲醛溶液进行衍生化反应,反应产物调pH7.6后经乙酸乙酯提取,氮气吹干,5%乙腈含0.1%甲酸水溶液溶解残余物,用超高效液相色谱-串联质谱仪测定。四种硝基呋喃代谢物内标的使用补偿了前处理过程对最后定量结果的影响,结果准确可靠。     

超高效液相色谱-质谱法测定猪尿中15种β-受体阻断剂残留

为建立一种快速测定猪尿中15种β-受体阻断剂残留的超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS/MS)确证方法,本试验优化了分子印迹固相萃取(MISPE)净化条件及色谱、质谱条件.猪尿样品经离心后加入MISPE柱上样,依次经水、乙腈淋洗,10％乙酸甲醇洗脱,N2吹干,0.1％甲酸水-乙腈(V:V=9:1)复溶;采用ESI正离子...     

高效液相色谱同步检测饲料中黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮及呕吐毒素的方法

本研究旨在建立同步检测饲料中黄曲霉毒素B_1、玉米赤霉烯酮及呕吐毒素的高效液相色谱(HPLC)法。样品用乙腈-水提取,经涡旋、高速离心,移取2 mL上清液加入28 mL含1%吐温-20的磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.0),过三合一免疫亲和柱净化,用2 mL甲醇洗脱;洗脱液经50℃浓缩氮气吹干后用50%甲醇-水复溶,采用高效液相色谱仪串联光化学衍生器、荧光检测器和紫外检测器进行检测。结果表明:黄曲霉毒素B_1标准品溶液浓度在2.5～50.0 ng/mL、玉米赤霉烯酮标准品溶液浓度在50～2 500 ng/mL、呕吐毒素标准品溶液浓度在250～5 000 ng/mL时线性关系良好,平均加标回收率为81.2%～92.3%,相对标准偏差(RSD)为4.3%～9.5%。采用该方法检测了4种不同饲料样品中的黄曲霉毒素B_1、玉米赤霉烯酮及呕吐毒素含量,所有样品均检测出1种以上霉菌毒素,说明饲料中霉菌毒素混合污染较为普遍。由此可见,本试验所建立的方法准确度和精密度高,稳定性好,可作为饲料中黄曲霉毒素B_1、玉米赤霉烯酮及呕吐毒素的同步检测方法。     

两种微生物添加剂对玉米青贮发酵品质及微生物数量的影响

目的:本试验旨在探讨两种微生物添加剂对玉米青贮发酵品质的影响。方法:以玉米秸秆为原料,两种微生物混合菌作为添加剂,分别设置对照组、试验1组、试验2组,采用塑料罐装青贮方式,每个青贮重复3次,密封青贮60 d后,开罐检测,实验室分析发酵品质和化学成分。结果:试验1组和2组均能增加玉米青贮中乳酸菌数量,试验2组pH值显著低于对照组,乳酸含量显著高于对照组,试验1组和2组玉米青贮中粗蛋白含量显著高于对照组,与青贮前相比,二种微生物添加剂处理组干物质(DM)含量下降,中酸性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)的含量增加。结论:试验2组所添加的微生物添加剂更能适应本地区青贮发酵过程。     

优化高效液相色谱法测定棉籽粕中游离棉酚的含量

本试验旨在建立一种测定棉籽粕中游离棉酚含量的高效液相色谱(hPLC)法的优化方法.试验采用丙酮提取棉籽粕样品,经超声、离心、抽滤、旋转蒸发处理,用乙腈-0.2％磷酸(体积比为85∶15)溶液溶解;色谱条件为:色谱柱Agilent TC-C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.2％磷酸(体积比为85∶15)溶液,流速1.0mL/min,紫外检测波长235nm,进样量20μL,柱温25℃.结果得出,游离棉酚的回归标准曲线为y=189347x+24969(r=0.99999),在游离棉酚含量为0.1224～78.336 μg/mL范围内线性良好,最低定量限为0.52mg/kg;棉籽粕样品36h内4℃稳定性的相对标准偏差在1.51％～3.43％;平均回收率在94.72％～99.49％,相对标准偏差在1.72％～3.13％.可知,本方法稳定性好,准确度、灵敏度和回收率高.     

动物肝组织中西维因残留的检测--HPLC法研究

以高效液相色谱(HPLC)法建立了猪、羊、鸡肝组织中西维因残留量的检测方法。采用ODS色谱柱，二极管阵列检测器，甲醇／水(65／35)为流动相，222nm检测波长下进行检测。西维因对照品溶液的最低检测限为0．1mg／L，线性范围为0．1～20mg／L，标准曲线回归方程为：y=-22459．83 454684．31x，线性关系良好(r=0．9999)。样品以乙腈提取，并加入无水硫酸钠和正已烷，过滤后去除杂质，乙腈层在45～50℃下水浴氮气吹干，残渣用甲醇溶解后，进样分析。平均回收率均大于80％，日间和日内变异系数均小于10％。符合药物残留痕量分析要求。本方法简便，并有很好的选择性、重现性和灵敏度。     

不同提取液对牛至粉中香芹酚和麝香草酚提取效果分析

本试验使用1%β-环糊精溶液、1%羟丙基-β-环糊精溶液、10%丙二醇溶液,在40℃对牛至粉进行超声提取40 min,同时用纯化水提取作为阴性对照,乙腈提取作为阳性对照,获得牛至提取液,用高效液相色谱法测定不同提取液中牛至精油成分香芹酚和麝香草酚含量,以期了解环糊精和丙二醇对纯化水提取牛至中挥发油成分香芹酚和麝香草酚辅助提取作用。试验结果显示:5种提取液中香芹酚和麝香草酚的浓度差异极显著,由高到低依次为乙腈、1%β-环糊精溶液、1%羟丙基-β-溶液、10%丙二醇溶液、纯化水,其中1%β-环糊精提取液对香芹酚和麝香草酚提取效率达到乙腈的87.64%和69.45%。环糊精或丙二醇均可提高纯化水对牛至中香芹酚和麝香草酚的提取量,其中1%β-环糊精溶液最优,为牛至产品开发提供了新的思路。     

应用高效液相色谱法测定鸡肝中土霉素残留量

本试验采用高效液相色谱法,建立了以偏磷酸甲醇溶液为溶剂,甲醇-乙腈-0.01摩尔/升草酸(15:15:25)混合溶液为流动相,spherisorb-c18为固定相,紫外检测波长为360纳米的液相色谱的基本条件.     

顶空固相微萃取—气相色谱法测定木糖发酵液中乙醇

建立了顶空固相微萃取(HS-SPME)和气相色谱(GC)联用测定木糖发酵液中乙醇的方法。针对目标组分详细研究了萃取头的种类、萃取时间、萃取温度、pH值、离子强度及解吸条件对HS-SPME的影响。GC载气(高纯氮气)流速为4.0mL/min,色谱柱为DB-ALC2毛细管柱(30m×0.53mm,2μm),柱温:40℃;在优化的条件下,以叔丁醇为内标物,内标法-校准曲线法定量,测定乙醇的线性范围为50～300μg/L;检出限(3倍噪声)为4.19μg/L,相对标准偏差小于6%;回收率为91.01%～97.90%。该方法用于木糖发酵液中乙醇的测定,结果令人满意。     

LC-MS/MS法分析生猪异位发酵床垫料中5大类兽用抗菌药物残留及蓄积趋势

建立了生猪异位发酵床垫料中四环素类、喹诺酮类、磺胺类、酰胺醇类和大环内酯类共54种抗菌药物残留量的LC-MS/MS检测方法.经超低温冷冻粉碎后的垫料样本,费休氏-库仑滴定法测定水分,Mcllvaine-Na2 EDTA缓冲液和乙腈提取,亲水亲脂平衡固相萃取小柱净化,LC-MS/MS法测定抗菌药物残留量,最终结果以折水后...     

菲和芘胁迫下AMF和PGPR对高羊茅生理生态的响应

旨在探究菲和芘胁迫下丛枝菌根真菌(AMF)与根围促生细菌(PGPR)对高羊茅生理生态的响应。以菲和芘1∶1混合处理浓度各0、50、100和150mg·kg^-1下对高羊茅接种AMF变形球囊霉(Gv)、PGPR荧光假单胞菌(Ps2-6)、Gv+Ps2-6和不接种对照共16个处理。结果表明,AMF、PGPR或AMF+PGPR处理均显著增加高羊茅生物量和菌根侵染率,增强植物光合作用,提高叶绿素含量,显著提高植物体内生理活性。在土壤中菲和芘100mg·kg^-1水平下,与对照相比,双接种Gv+Ps2-6处理的高羊茅叶片叶绿素a、b和总叶绿素含量分别提高57.7%、41.7%和51.8%;净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、胞间CO2浓度(Ci)和气孔导度(Gs)分别增加70.6%、100.0%、4.5%和78.6%;最大光化学效率(Fv/Fm)和PSⅡ潜在活性(Fv/Fo)分别提高2.2%和8.8%;超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性、可溶性糖和脯氨酸含量分别是对照的1.6、1.5、2.3和2.7倍,丙二醛含量比对照下降46.0%;高羊茅株高和地上鲜重分别比对照增加63.0%和69.6%;接种PGPR处理能够增加AMF侵染率以及菌根依赖性。供试条件下,双接种Gv+Ps2-6处理增加高羊茅叶绿素含量和抗氧化能力,增强光合作用能力,降低膜脂过氧化水平,促进植物生长的作用最为显著。     

酿酒酵母固态发酵白酒糟生产蛋白饲料的研究

以廉价的白酒糟为主要基质,接种酿酒酵母,开展酵母高密度固体发酵的研究。最终确定了在实验室条件下以白酒糟为基质进行酵母高密度固体发酵的工艺流程为:250 ml三角瓶装入干白酒糟10 g,并补加混合营养液2 ml(以干糟质量的8%添加糖蜜,以0.5 gN/kg干糟的量添加尿素),摇匀分散,加入干糟质量4%的复合酶制剂,调整酒糟的含水量为45%~50%,按0.7亿/g干糟接种后于30℃恒温箱中发酵培养72 h,酵母总数约30亿/g干糟,烘干粉碎即可制得酵母蛋白饲料。     

国家标准方法测定水产品中硝基呋喃类代谢物残留量检测方法的改进

针对水产品硝基呋喃类药物代谢物我国农业农村部制定了783-1-2006号公告,使用液相色谱串联质谱法检测水产品中硝基呋喃类代谢物。该方法是将样品肌肉组织残留的硝基呋喃类代谢物在酸性条件下水解衍生化,经液液萃取后,内标法定量。本方法前处理简单,液液萃取避免了固相萃取的繁琐,减少了目标化合物的损失,内标法校正使得结果较为准确。但是,仍存在衍生化过程酸度不够导致衍生化不够彻底,提取过程磷酸氢二钾浓度不够导致提取不彻底,甲醇溶液定容后,涡旋振荡溶解出现乳化现象等问题。结合实际情况对国家标准方法进行改进和优化,进一步提升方法的准确度、精密度、灵敏度。     

药用真菌发酵及其产物对AA肉鸡免疫功能及生长的影响

以一药用真菌进行固体发酵,比较不同培养基质、起始含水量、起始pH值对其生长的影响;再以该真菌发酵物(菌质)作为饲料添加剂试验,研究其对AA肉鸡生长性能和免疫功能的影响。结果显示:以大米、小米和复合基质进行固体发酵,该真菌生长较好(生物量为35.8%),且添加一定量的中药不影响真菌的生长,起始含水量为50%,起始pH值为4.5;动物试验表明,含中药的发酵产物能明显增强AA肉鸡对新城疫,禽流感H9、H5的免疫力(P<0.05,P<0.01),体增重显著高于对照组(P<0.05,P<0.01)。     

产大豆肽蛋白饲料的研制及其固态发酵工艺参数的优化研究

就2种菌组合协同固态发酵生产功能大豆寡肽蛋白饲料工艺参数优化的工业化研究结果进行了总结。其模式为:2种菌组合→液态接种→发酵池封闭式发酵。筛选菌种:枯草芽胞杆菌和乳酸杆菌。经优化后发酵工艺参数:时间38h;pH值为7～8;初始培养温度(37±1)℃;芽胞杆菌菌液接种量2%,乳酸菌接种量为3%;料水比为2∶1;底物组成:豆粕90%、麸皮7%、玉米粉3%。     

三嗪类除草剂及其代谢产物的检测方法研究进展

三嗪类除草剂会通过干扰内分泌系统的正常功能影响人类健康,很多国家已将部分此类化合物列入内分泌干扰剂化合物名单。作者从样品提取和仪器检测技术的发展趋势方面综述了环境和食品样品中三嗪类除草剂及其代谢产物的检测方法。在样品提取方面,液液萃取、固相萃取和固相微萃取技术简便且具有较高回收率,广泛应用于三嗪类除草剂的提取。另外,由于分子印迹、凝胶渗透色谱和加速溶剂萃取技术可以提高方法选择性和降低样品基质干扰,因而也越来越多地应用于三嗪类除草剂的提取工作;在检测技术方面,气相色谱和液相色谱法应用最为广泛。此外,由于色谱质谱联用技术可以大大降低方法检测限并能提高阳性样品的定性准确度,符合高通量和痕量检测的发展趋势,因此气相色谱/液相色谱串联质谱技术也广泛应用于三嗪类除草剂残留的定量和定性检测。     

库拉索芦荟提取物对维氏气单胞菌抑菌作用的研究

采用榨汁法、水煮法和醇提法制备库拉索芦荟提取物,通过K-B法和二倍稀释法测定3种方法芦荟提取物对维氏气单胞菌的抑菌作用。结果显示,用3种方法制备的库拉索芦荟提取物对维氏气单胞菌均有不同程度的抑制作用,榨汁法、水煮法和醇提法得到的库拉索芦荟提取物对3株维氏气单胞菌的平均最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)分别为1、0.5和0.125 g/mL,最小杀菌浓度(minimal bactericidal concentration,MBC)分别为1、1和0.25 g/mL。库拉索芦荟提取物对3株维氏气单胞菌均有抑制作用,芦荟提取物浓度越高抑菌效果越明显,其中醇提法的抑菌效率高,水煮法的抑菌作用其次,榨汁法的抑菌效果较弱。     

Determination of an efficient and reliable method for DNA extraction from ticks

Molecular detection of pathogenic microorganisms in ticks is based on DNA amplification of the target pathogen; therefore, extraction of DNA from the tick is a major step. In this study, we compared three different tick DNA extraction protocols based on an enzymatic digestion by proteinase K followed by DNA extraction by a commercial kit (method 1), or on mortar crushing, proteinase K digestion and phenol/chloroform DNA extraction (method 2) and fine crushing with a beads beater, proteinase K digestion and DNA extraction using a commercial kit (method 3). The absence of PCR inhibitors and the DNA quality were evaluated by PCR amplification of the tick mitochondrial 16S rRNA gene using tick-specific primers. With method 1, 23/30 (77%) of the samples were extracted; with method 2, 30/31 (97%) of the samples were extracted and with method 3, 30/30 (100%) of the samples were extracted. DNA extraction efficiency using method 3 is significantly higher than DNA extraction efficiency using method 1 (100% versus 77%, P < 0.05). There was no significant difference between methods 2 and 3. Method 3 was however more adapted to cohort studies than method 2. This technique was validated for cohort tick DNA extraction and applicable to the treatment of small samples such as nymphs and soft ticks with 100% efficiency.