规模化猪场猪源沙门氏菌的耐药性及相关耐药基因检测

为了解贵州省某规模化猪场猪源沙门氏菌分离株的药物敏感性和耐药基因的存在情况,也为进一步研究细菌耐药的分子机制和临床用药提供资料,利用K-B法检测了6株猪源沙门氏菌对15种药物的敏感性,采用PCR方法检测了9种常见耐药基因在分离株中的分布情况。结果显示,所有菌株对青霉素、氨苄西林和吡哌酸的耐药率最高均为100%,对头孢克洛、链霉素和庆大霉素的耐药率最低。从9种常见耐药基因中扩增到3种β-内酰胺类耐药、3种氨基糖苷类、2种氟喹诺酮耐药基因。研究表明,沙门氏菌极易产生耐药性,耐药基因广泛存在于耐药菌株中,但耐药表型与耐药基因之间无绝对相关性。     

灵长类动物肠道沙门氏菌的分离鉴定与药敏试验

从13个动物园的非人灵长类动物中采集了384份粪便样品,经过细菌分离培养后,并经染色镜检和生化试验等分离鉴定出153株沙门氏菌,分离率为39.84%。按照美国临床实验室标准化委员会(CLSI)的判定标准,对分离得到的153株沙门氏菌进行了22种抗生素药物的药敏试验,结果表明,153株均表现出不同的程度的耐药性,其中,羧苄西林的耐药率最高,为95.42%,而亚胺硫霉素最敏感,敏感率为90.20%;且153株沙门氏菌分离株均为多重耐药菌株(n≥2),其中1株的耐药数可达18种之多,耐2~12种抗菌药物的菌株多达123株,占分离菌株的80.39%。从不同动物园分离的沙门氏菌对22种抗生素耐药情况的方差分析来看,在所调查的13个动物园中,不同动物园沙门氏菌分离株的耐药情况也不同。     

饲料及其原料中沙门氏菌的分离鉴定和耐药分析

为了解饲料及其原料中沙门氏菌污染情况及耐药情况,为沙门氏菌病的防控工作提供理论依据,特针对饲料及其原料开展沙门氏菌污染情况及耐药情况筛查。试验共收集饲料及原料样品707份,参照GB/T 13091－2002饲料中沙门氏菌检测方法进行沙门氏菌的分离和鉴定;分离株以API 2.0E鉴定试剂盒确认;后参照GB 4789.4－2010进行血清分型,并采用K-B纸片琼脂扩散法测定分离株耐药情况。结果表明,共检出阳性样品56份,阳性率为7.9%,其中52份为动物性原料;经血清分型得到阿贡纳沙门氏菌（Agona）5株,阿贡纳沙门氏菌Ⅱ（AgonaⅡ）1株,博内茅斯（Bournemouth）1株和摩科拉（Mokola）1株,其余菌株因血清种类有限,仅分型至群,未能进一步分型;药敏试验结果显示,饲料中沙门氏菌耐药率比人源和动物源性沙门氏菌低,但仍分离到13重耐药株1株,4重耐药株2株,3重耐药株9株,2重耐药株12株,且各菌株耐药谱不同。饲料及其原料中沙门氏菌检出率和耐药性相对较低,但仍存在个别菌株耐药情况严重的现象,有必要继续加大、加强针对抗生素使用的监管力度。     

北美水貂源沙门氏菌的分离鉴定及耐药性检测

为调查秦皇岛地区北美水貂沙门氏菌的检出率及耐药情况,对65份水貂样品中的细菌进行分离纯化,采用细菌的鉴定培养、革兰氏染色、生化鉴定和16S rDNA鉴定分离菌,采用小鼠致病性试验研究分离菌株的致病性,采用KB纸片法检测分离菌的耐药性。结果显示,经鉴定共计分离出9株沙门氏菌,分离率13.85%(9/65);9株沙门氏菌均可致小鼠发病死亡,死亡率20%—100%;9株沙门氏菌分别对5—11种抗生素药物耐药,氟苯尼考、替米考星、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶和复方新诺明的耐药率高达100%,土霉素敏感率最高,为88.89%(8/9)。上述研究结果表明,秦皇岛地区从水貂分离到的沙门氏菌均具有一定的致病力和多重耐药性,为该地区水貂沙门氏菌病的防治提供参考。     

广西地区鸡源沙门氏菌的分离鉴定及耐药状况研究

为了解广西地区临床病鸡中沙门氏菌的流行情况以及沙门氏菌对常用抗菌药物的耐药状况,本研究对2014年—2015年送检的121只疑似沙门氏菌感染病鸡进行细菌的分离鉴定以及耐药性研究。结果共分离到49株沙门氏菌,包括4种血清型,其中鸡白痢沙门氏菌(S.pullorum)41株、鸡伤寒沙门氏菌(S.gallinarum)4株、鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)3株和肯塔基沙门氏菌(S.kentucky)1株。分离株对磺胺异恶唑耐药率最高,达93.9%,其次为复方新诺明、萘啶酸、阿莫西林和氨苄西林,多重耐药菌株占93.7%,分离株最多可耐10种抗生素。结果表明,自广西地区送检的病鸡中分离到的沙门氏菌以鸡白痢沙门氏菌为优势血清型,鸡源沙门氏菌的多重耐药问题比较严重。     

动物源性沙门氏菌的耐药性分析及氟苯尼考类耐药基因的鉴定

为了解动物沙门氏菌的流行情况和药物敏感性及氟苯尼考耐药株的耐药基因分布,本试验对临床上疑似患沙门氏菌病的病料进行病原分离和细菌的多重PCR鉴定;采用K-B法测定分离株对23种抗菌药物的敏感性;选择氟苯尼考耐药菌株扩增floR、fexA、fexB、cfr和pexA基因。结果显示,共鉴定出61株沙门氏菌,其中肠炎沙门氏菌10株,鸡白痢沙门氏菌12株,鼠伤寒沙门氏菌39株。所有菌株对青霉素、红霉素、万古霉素耐药,90.16%对6种及6种以上抗菌药耐药。floR基因广泛存在于鼠伤寒沙门氏菌氟苯尼考耐药菌株中(8/12,66.67%),未发现其他耐药基因。研究结果表明鼠伤寒沙门氏菌是鹅源分离株中的优势血清型;floR基因主要介导沙门氏菌对氟苯尼考耐药性,但可能还存在其他机制。     

甘孜州牦牛沙门氏菌的分离和鉴定

2010年6月,四川省甘孜州炉霍县某乡12户牧民的100多头成年牦牛发生了以呼吸困难和腹泻为主要特征的疾病,根据流行病学情况、临床症状、病理解剖学变化、实验室分离鉴定,结合16SrRNA基因测序和同源性比对分析等情况,将该病诊断为肠道亚种沙门氏菌引起的牦牛沙门氏菌病。     

进口饲料中沙门氏菌的分离鉴定及其药敏分析

为了解进口饲料中沙门氏菌的耐药情况,分离、鉴定进口饲料中的沙门氏菌,采用药敏试剂盒对分离的沙门氏菌菌株进行了14种抗菌药物的敏感性试验。结果显示,从进口饲料中分离鉴定出的148株沙门氏菌对14种抗菌药物的敏感率均在93%（138/148）以上,对阿奇霉素完全敏感;148株沙门氏菌中有8株具有耐药性,以多重耐药为主,分离自7个国家和地区的样品。结果说明,进口饲料中沙门氏菌耐药率相对较低,但部分国家样品中的沙门氏菌存在耐药,而且多为多重耐药。建议加强进口饲料中的沙门氏菌及其耐药性监测,防止国外沙门氏菌,特别是耐药沙门氏菌的传入。     

四川省部分地区山羊沙门氏菌健康带菌率及耐药性调查

为了解四川省山羊沙门氏菌带菌情况,本试验采集了四川省部分地区5个规模化山羊养殖场表观健康山羊粪便196份,经BPW预增菌、TTB选择性增菌后,采用靶向invA基因的PCR方法检测沙门氏菌的带菌率;对阳性样本进行细菌分离鉴定,随机选择25株沙门氏菌分离株测定其对15种抗菌药物的敏感性。结果显示,山羊沙门氏菌的平均带菌率为54.59%。药敏试验结果显示,分离株均对丁胺卡那敏感,而对其余14种抗菌药物呈不同程度的耐药,多重耐药菌株占88%,其中耐2~7种药物的占52%,耐9~13种药物的占36%。结果表明,四川省部分地区山羊的沙门氏菌健康带菌率较高,且多重耐药性普遍,其公共卫生意义值得进一步研究。     

重庆部分羊场沙门氏菌的分离鉴定、耐药表型分析及耐药基因检测

本研究旨在初步了解重庆市羊源沙门氏菌的耐药性及耐药基因流行情况。在5个山羊养殖场采集185份山羊粪便样品,经选择性增菌和PCR鉴定分离沙门氏菌,确定了其血清型,测定了分离菌对28种抗菌药物的敏感性,并检测了喹诺酮耐药决定区(QRDR)的耐药突变位点和质粒介导的喹诺酮耐药(PMQR)、超广谱β-内酰胺酶(ESBL)基因。共分离到羊源沙门氏菌11株,其中10株为德尔卑沙门氏菌。分离的菌株对氨苄西林、头孢唑啉、头孢氨苄、头孢噻肟、四环素和培氟沙星耐药严重;9株菌表现为多重耐药,对3～7类药物耐药。所有菌株均存在QRDR耐药突变且携带bla_(TEM)基因;7株菌携带1～5种PMQR基因。本研究分离的羊源沙门氏菌对常用抗菌药物整体耐药较为严重,且广泛存在耐药突变和携带耐药基因。     

青海省藏羊感染皮蝇蛆调查及其虫种鉴定

为了解青海省藏羊感染皮蝇蛆状况及感染种类,本研究在3个地区调查了476只藏羊,对2株感染藏羊皮蝇蛆和4株感染牦牛皮蝇蛆的线粒体CO1基因种属特异性序列进行比较研究。结果表明:14只羊感染了皮蝇蛆,感染率为2.9%,总瘤胞数为27个,平均感染强度为1.9个;并扩增其长度为688 bp的序列,克隆后测序,将其序列与GenBank中的牛皮蝇、纹皮蝇蛆和中华皮蝇蛆序列进行聚类分析,结果显示青海省感染藏羊的皮蝇蛆与感染牦牛的果洛株、民和和黄南株在线粒体CO1基因片段聚类分析进化树和同源性比较中,与牛皮蝇位于同一个进化树分支上,基因片段同源性大于99%,为牛皮蝇;感染牦牛的海晏株和贵南株在线粒体CO1基因片段聚类分析进化树和同源性比较中,与中华皮蝇位于同一个进化分支上,基因片段同源性大于99%,为中华皮蝇。几个皮蝇蛆分离株种内变异率小于1%,种间变异率大于8%。     

牦牛大肠杆菌的分离鉴定及系统发育分析

本试验旨在研究牦牛源大肠杆菌的遗传进化关系,明确其与人和其他动物大肠杆菌的亲缘关系。采集来源于四川省甘孜州、阿坝州的60份临床健康成年牦牛肛门棉拭子样本,接种于麦康凯琼脂培养基上进行细菌的分离培养,通过常规形态学、培养特性、生化特征和16S rRNA PCR检测的研究,确定49株为大肠杆菌。对其中9株牦牛源大肠杆菌进行16S rRNA克隆、测序,经系统发育分析发现牦牛菌株组内同源性为98.8%~99.9%,与GenBank中其他菌株的同源性为94.0%~100%。结果表明,牦牛源大肠杆菌与牛源菌株的遗传距离最近,与羊源菌株的遗传距离最远,与人、猪、鸭、鸡源菌株的遗传距离较近,其中有2株菌与人肠出血性大肠杆菌(EHEC)O₁₅₇∶H₇和志贺氏菌聚为一支,从遗传进化的关系看其有可能成为人类的潜在病原菌。     

谈海北州藏系绵羊本品种选育提高和开发利用

文章阐述了青海省藏系绵羊的生态类型、地理分布以及生产、饲养现状，分析了近年来海北州在藏系绵羊本品种提纯复壮方面取得的科技成果、经济效益和存在的问题，在此基础上提出了提高藏系绵羊生产性能的途径和具体实施的对策和建议，为各级政府和广大的农牧民群众决策和实现调整结构、提高总增、增加商品的优质高效畜牧业目标提供参考。     

西藏那曲牦牛源产气荚膜梭菌的分离鉴定及生物学特性

利用细菌培养、生化鉴定、小鼠致病性试验、PCR技术等方法对西藏那曲市多起牦牛猝死病例进行诊断和分析.结果表明,从病死牦牛脏器中分离得到3株产气荚膜梭菌,命名为AD-01、AD-02和BG-01.其中AD-01和AD-02分离株属于A型,BG-01分离株属于C型.通过对分离株16S rRNA进行序列比对并制作进化树分析发...     

Study on Infection of 4 Kinds of Internal Parasites in Yaks in Hongyuan and Litang County of Northwest Sichuan Province

To understand the infection of main internal parasites in yaks, total of 402 fecal samples of yaks were collected from Hongyuan county in Aba prefecture and Litang county in Ganzi prefecture, the morphological characteristics of 4 kinds of internal parasitic eggs or oocysts were observed and the numbers of them were counted using the modified Liao's counting method. The results showed that in yaks of Hongyuan county, the average infection intensities of EPG or OPG of nematodes, cestodes, trematodes and coccidian were 11.59, 23.77, 42.45 and 14.72, respectively, and the total number of infections was 92.53 (48.91 to 154.90); The average infection rates of eggs or oocysts of these 4 kinds of parasites were 18.01%, 36.62%, 44.68% and 17.37%, respectively, and the total infection rate was 76.39%, which proved that trematodes was the dominant parasitic species and cestodes was also an important one in this area. In yaks of Litang county, the average infection intensities of EPG or OPG of nematodes, cestodes, trematodes and coccidian were 52.38, 13.10, 20.24 and 1.19, respectively, and the total number of infections was 86.90, the average infection rates of eggs or oocysts of these 4 kinds of parasites were 52.38%,19.05%,23.81% and 2.38%, respectively, the total infection rate was 78.57%, which proved that nematodes was the dominant parasitic species in this area. The infection patterns of internal parasitic eggs or oocysts in yaks in Hongyuan and Litang county were all mainly the single and double infection, the sums of these two patterns were 69.31% and 78.57%, respectively, which accounted for 90.73% and 100% of the total infection rate, respectively. The results in this paper showed that the parasitic disease in yaks was still an important disease harmful to yak production and herdsman health, meanwhile these results enriched the epidemiological data of the internal parasitic disease of yaks in Northwest plateau of Sichuan province and provided a theory basis for prevention and control of parasitic diseases in yaks in this area.     

川西北红原县和理塘县牦牛4类体内寄生虫感染的研究

采集川西北阿坝州红原县和甘孜州理塘县总计402份牦牛粪便样本,采用廖氏计数法（改良）对4类常见体内寄生虫虫卵进行形态学观察并计数,以了解该地区牦牛体内寄生虫感染情况。结果表明,红原县牦牛体内线虫、绦虫、吸虫、球虫虫卵或卵囊（EPG或OPG）的平均感染量分别为11.59、23.77、42.45和14.72,总感染量为92.53（48.91~154.90）;平均感染率分别为18.01%、36.62%、44.68%、17.37%,总感染率为76.39%,表明吸虫是红原的优势寄生虫虫种,绦虫也是重要虫种。理塘县牦牛线虫、绦虫、吸虫、球虫的虫卵或卵囊（EPG或OPG）的感染量分别为52.38、13.10、20.24和1.19,总感染量为86.90;感染率分别为52.38%、19.05%、23.81%和2.38%,总感染率为78.57%,表明线虫为该地区的优势虫种。红原县和理塘县两地牦牛体内寄生虫虫卵感染主要以单一感染和二重感染为主,二者的总和分别为69.31%和78.57%,分别占总感染率的90.73%和100%。本研究结果证实牦牛寄生虫病目前仍是危害牦牛生产和当地牧民健康的一类重要疫病。该研究丰富了川西北高原地区牦牛体内寄生虫病的流行病学资料,为该地区牦牛寄生虫病的防控提供了理论依据。     

阴山扁蓿豆光合特性对模拟牦牛、藏羊践踏和降水的短期响应

为明晰牦牛和藏羊践踏对阴山扁蓿豆光合特性的分异影响,在天祝高寒草地采用模拟降水和践踏双因子控制试验,研究了阴山扁蓿豆单叶面积、叶绿素含量、叶片气体交换参数变化对短期模拟牦牛、藏羊践踏和降水的响应。结果表明,随着模拟牦牛和藏羊践踏强度的增加、模拟降水量的降低,阴山扁蓿豆单叶面积、叶绿素含量、蒸腾速率(T_r)、叶片气孔导度(G_s)和净光合速率(P_n)均呈下降趋势,胞间CO₂浓度(C_i)呈上升趋势。相同降水量下,藏羊和牦牛轻度践踏强度下阴山扁蓿豆蒸腾速率、叶片气孔导度和净光合速率均高于对照,胞间CO₂浓度低于对照。与对照相比,牦牛重度践踏处理下阴山扁蓿豆单叶面积、叶绿素含量、蒸腾速率、叶片气孔导度和净光合速率的降幅和胞间CO₂浓度的升幅均大于藏羊重度践踏处理。单一的模拟降水或模拟践踏极显著地影响了各测定指标,且两者共同作用对阴山扁蓿豆单叶面积、蒸腾速率、叶片气孔导度、净光合速率和践踏末期叶绿素含量的影响达极显著水平。综合可得,牦牛和藏羊轻度践踏可促进阴山扁蓿豆光合作用,重度践踏严重抑制了阴山扁蓿豆光合作用,且牦牛践踏对阴山扁蓿豆光合能力的抑制作用大于藏羊践踏。     

牦牛源正呼肠孤病毒2型的检测和分离鉴定

旨在调查川西北牦牛哺乳动物正呼肠孤病毒（MRV）的感染情况并分离病毒。采用RT-PCR方法，对采自川西北15个牧场的72份牦牛腹泻粪便样本和其中5个牧场的15份腹泻牦牛血清样本进行MRV检测，阳性样本进一步用分型PCR确定其血清型。结果显示，粪便样本中MRV检出率为20.83%（15/72），血清2型的比例为60%（9/15）；血清样本中MRV检出率为40%（6/15），血清2型的比例为83.33%（5/6）；未检测到其他血清型。成功地从腹泻粪便中分离到1株MRV血清2型毒株（TCID₅₀为4×10^-8.56·mL^-1），并获得长度为23 587 bp的分离株全基因组，该分离株与中国猪源毒株的遗传关系最近；与GenBank中所有的MRV S1基因相比，该分离株有4个独特的氨基酸突变。本研究从牦牛中检测到MRV，并分离到1株牛源MRV血清2型毒株，为进一步研究MRV血清2型生物学特性奠定了基础。     

Seroprevalence investigation of bovine ephemeral fever in yaks in Tibetan Plateau of China from 2012 to 2015

Bovine ephemeral fever (BEF) is caused by the arthropod-borne bovine ephemeral fever virus (BEFV), which is classified in family Rhabdoviridae and genus Ephemerovirus. However, it is still unclear whether yaks from the Tibetan plateau of China are exposed to BEFV. It is the first time that a survey was conducted to investigate the seroprevalence of BEFV infection in yaks (Bos grunniens) on the Tibetan Plateau of China. A total of 1123 serum samples were collected randomly from yaks from 2012 to 2015 and were assayed for BEFV antibodies by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The proportions of positive serum samples were assessed among the 1123 samples, as well as factors of geographical origin and years. The results showed that there were 454 serum samples that tested positive for BEFV, and the total positive rate is 40.4 %. The prevalence in 2012, 2013, 2014, and 2015 was 49.3, 36, 44.1, and 34.0 %, respectively, and the difference is statistically significant (P<?0.01). In different regions, the prevalence was ranged from 34.7 to 45.7 % with a significant difference among the different regions of (P?<?0.05). Logistic regression analysis showed that yaks in Tibet (Xizang autonomous region) (45.7 %) had 1.6 times (OR = 1.589, 95 % CI = 1.141–2.215, P?<?0.01) higher risk of being seropositive compared to yaks in Qinghai province, while no regional difference was found of Sichuan province compared to Qinghai (P?>?0.05). The prevalence in 2012 (49.3 %) was more than 1.8 time (OR = 1.880, 95 % CI = 1.350–2.619, P?<?0.001) at risk of acquiring the infection compared to the year of 2015. The prevalence of yaks in 2014 (44.1 %) had a 1.5 times (OR = 1.528, 95 % CI = 1.350–2.619, p?<?0.001) at risk of being seropositive compared to yaks in 2015, while no year difference was found of 2013 compared to 2015 (P?>?0.05). Our study suggests that the yaks from the high plateau are highly infected by BEFV, and geographical origin and years are main risk factors for BEF seroprevalence.

     

藏兽药健胃消痞散对牦牛的增重效果

2005年在夏河县选取成年牦牛和牦犊牛80头,随机分为试验组、对照组各两组,每组为20头,在自然放牧的条件下对试验组牦牛灌服藏兽药健胃消痞散,对照组不用药。试验结果表明,试验组成年牦牛比对照组平均多增重5.14kg,试验组牦犊牛比对照组平均多增重7.35kg,经济效益显著。