以杆状病毒为载体在昆虫细胞中表达致弱Ⅰ型马立克氏病病毒pp38基因同源物

用限制性内切酶Eco RI将不含起始密码子的pp38 基因从重组转移载体质粒pVLpp38 Ⅰ中切出,将致弱Ⅰ型MDV pp38 基因同源物克隆进该转移载体的相同位点。用所得的含pp38 基因同源物的重组转移载体质粒pVL pp38′与野生型杆状病毒(AcMNPV)以脂质体介导法共转染昆虫细胞系Sf9 后,用单克隆抗体H19 介导的间接荧光抗体法筛选到能表达MDV pp38 基因同源物的重组杆状病毒克隆。经SDS-PAGE和Western blot试验,证实pp38 基因同源物在Sf9 细胞中得到表达,抗重组杆状病毒血清能像抗MDV 血清那样,与MDV Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒感染的鸡胚成纤维细胞在荧光抗体试验中呈阳性反应。     

应用杆状病毒载体在昆虫细胞表达马立克氏病病毒Meq基因

将源于马立克氏病病毒 ( MDV) GA株的 Meq基因克隆到杆状病毒转移载体质粒 p Blu Bac4中强有力的多角化蛋白启动子 ( PPH)之后 ,经与线性化的 Bac-N-Blue TMDNA共转染于昆虫细胞系 SF9,获得了重组杆状病毒。使用重组痘病毒表达的 Meq制备的单抗 ,对重组杆状病毒感染的 SF9细胞及其裂解物分别进行间接免疫荧光试验、Western blotting和免疫沉淀试验 ,结果发现 :( 1 )本表达系统产生的 Meq可被原制备的单抗所识别 ;( 2 )在感染细胞中 ,Meq蛋白仅局限于细胞核内 ,而且随着感染后时间的增加 ,具有从核质向核仁和核膜转移的趋向 ;( 3 ) Western blotting和免疫沉淀试验均证实重组杆状病毒感染细胞裂解物中出现有 2条特异带 ( 60 0 0 0处 )。结果表明 ,杆状病毒 /昆虫细胞系统用于表达外源蛋白是可行有效的     

鸡马立克氏病病毒的分离与初步鉴定

从鸡马立克氏病病鸡拔取羽毛根 ,经处理后接种于 4日龄鸡胚绒毛尿囊膜。盲传到第六代出现典型的马立克氏痘斑。用第7代鸡胚绒毛尿囊膜研磨液与MD阳性血清进行琼脂扩散试验 ,结果出现了明显的白色沉淀线。此结果表明已分离到马立克氏病毒。     

细胞浓度对鸡马立克氏病病毒蚀斑的影响

火鸡疱疹病毒与马立克氏病病毒都能在鸡胚成纤维细胞(CEF)上形成蚀班(PFU),而PFU的数量又与疫苗的效价有直接关系,在长期的马立克氏病活疫苗效力检验过程中,我们发现制备单层细胞时,细胞浓度对病毒蚀斑单位的形成影响较大,尽管有些生产厂也注意到这点,但没有作系统比较,只...     

马立克氏病毒及其载体的研究进展

1 分子生物学特性 马立克氏病病毒(MDV)基因组为双股线性DNA,长度约为175 kb.MDV的DNA浮力密度为1.706 g/mL,碱基组成的G+C含量为46%.火鸡疱疹病毒(HVT)DNA浮力密度和G+C含量与MDV相似.裸露的病毒DNA对单层细胞和易感鸡都具有感染性.     

新病理型马立克氏病病毒的特性

马立克氏病病毒（Marek'sdiseasevirus,MDV）是一种细胞结合性疟疾病毒,有三种血清型即1型为强毒致病性MDV,I型为非致病性MDV,N型为火鸡疮疹病毒（HVT）,其中1型MDV的毒力由经典的温和型不断向更强的毒力进化。在美国召开的第十三届国际马立克氏病会议上,来自美国、英国、德国、意大利等许多学者都报道了近年MDV毒力增强问题,本文仅就此作一介绍。IMDV的霉力进化从1907年JoszefMarek博士在匈牙利首次描述马立克氏病,到五十年代．一种温和型马立克氏病毒株（mMDV）CU。一直引起典型的疾病。五十年代后期Benton（195年…     

马立克氏病病毒的分离与鉴定

从广西不同地区患马立克氏病的鸡群分离出１０株马立克氏病毒，命名为ＭＺ１、Ｅ１、Ｅ２、Ｅ３、Ｅ４、Ｇ２、Ｌ１、Ｇ５、Ａｎ７、Ｎ。用ＭＤＶ分型单克隆抗体对Ｅ４、Ｌ１、Ｇ２、Ａｎ７、Ｎ毒进行血清型鉴定，结果除Ｅ４疑有血清Ⅱ型与血清Ⅰ型ＭＤＶ同时存在外，其余均为血清Ⅰ型ＭＤＶ。     

马立克氏病病毒囊膜糖蛋白B抗原I型特异性和群共同性决定簇的…

用能表达马立克氏病病毒（ＭＤＶ）糖蛋白Ｂ（ｇＢ）的重组杆状病毒感染的Ｓｆ９细胞免疫小鼠，制备针对ＭＤＶｇＢ的单克隆抗体，以Ｉ型马立克氏病病毒ＧＡ株感染的鸡胚成纤维细胞作为检测抗原，同时以免疫荧光试验（ＩＦＡ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）来筛选杂交瘤细胞，结果获得了ＩＦＡ和ＥＬＩＳＡ均为阳性的１株单克隆抗体细胞株，定义名ＢＡ４和ＢＤ８。在ＩＦＡ和免疫沉淀试验中，单抗ＢＤ８与Ｉ，ⅡⅢ型ＭＤＶ均呈阳     

马立克氏病病毒的蛋白和疫苗研究进展

马立克氏病是严重危害养鸡业的重要传染病之一,对该病的研究可为肿瘤病的研究提供理想模型,本文从病毒编码的蛋白出发,重点介绍了病毒的酶类、抗原的研究进行及其在预防马立克氏病上的应用,提出利用载体构建重组疫苗对今后防制马立克氏病具有广阔的应用前景。     

致病性马立克氏病病毒的污染与监测

马立克氏病（ Ｍａｒｅｋ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ，ＭＤ）是危害世界养禽业最严重的病毒性肿瘤性传染病。ＭＤ经羽毛囊排毒，空气传播，传染力极强，是鸡的三大主要疫病之一，可造成重大的经济损失。该病的致病因子为马立克氏病病毒（Ｍａｒｅｋ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ，ＭＤＶ），属疱疹病毒科成员，根据其嗜淋巴细胞性相似于γ－疱疹病毒，而其基因组结构却相似于α－疱疹病毒［１］。 ＭＤＶ按其致病性和血清学反应不同分为三个血清型：血清Ｉ型（ＭＤＶＩ）包括致瘤致病性的强毒株（如 ＨＰＲＳ－ １７、ＧＡ、Ｍｄ／５、ＢＪ－１）…     

姜黄素抑制马立克氏病病毒在CEF细胞中的复制

为探究姜黄素对马立克氏病病毒(MDV)在CEF细胞中复制的影响,在病毒感染的不同时间点加入姜黄素,通过real-time PCR、蛋白免疫印迹和病毒噬斑计数实验来检测姜黄素对病毒复制的影响。结果显示:姜黄素能够抑制MDV基因表达、蛋白合成以及病毒的增殖,且抑制作用具有剂量和时间依赖性;姜黄素还能直接影响MDV的感染性;姜黄素明显影响MDV感染细胞中IL-1β、IL-6等细胞因子的表达。该研究结果表明,姜黄素能体外抑制MDV的复制和增殖,具有开发为抗MDV临床药物的潜力。     

马立克氏病病毒的分子生物学研究进展

马立克氏病病毒（MarekDiseaseVirus，MDV）主要侵害鸡性腺、神经、肌肉、虹膜及各内脏器官，引起单个或多个组织器官的淋巴细胞增生和单核细胞浸润。MDV所引起的疾病──马立克氏病是危害世界养禽业最严重的传染病之一，也是世界上第一个用疫苗预防的病毒性肿瘤获得成功的范例。MDV属于疮疹病毒科（Herpesviridae），又称鸡疮疹病毒2型（AvianherPesvirus2）、神经淋巴瘤病毒（Neurolymphomatosisvirus）、鸡麻痹病毒（Fowlparal－ysisvirus）。根据血清学反应不同，可将MDV相关的疤疹病毒划分为3个不同的血清型：血清1型包括引起…     

马立克氏病病毒体内复制动力学研究进展

马立克氏病病毒(MDV)在体内的复制情况与其毒力有密切关系.一般情况下,MDV毒株的毒力越强,其在宿主体内的病毒载量就越高.MDV在宿主体内的复制动力学涉及多方面的因素,其中主要包括有:MDV的组织嗜性及毒力、宿主的免疫情况及马立克氏病(MD)遗传抗性、MDV的基因组特点等多方面因素,这些因素都会影响到MDV在宿主体内的复制情况.本文就MDV在鸡体内各个组织器官复制动力学及其相关影响因素的最新研究进展进行综述.     

鸡肾细胞培养分离鸡马立克氏病病毒

鸡肾细胞培养分离鸡马立克氏病病毒吕昌琳高登慧（贵州农学院，贵阳５５００２５）马立克氏病（ＭＤ）是由疱疹病毒引起的一种具有高度传染性的肿瘤性疾病，作者用琼脂扩散进行流行病学调查，用鸡胚、雏鸡接种进行人工感染试验及病理组织学检查、荧光抗体试验，反向间接血...