细粒棘球蚴细胞系(13G-5)细胞代谢抗原的免疫原性和反应原性

应用培育成功的人源细粒棘球蚴细胞系(13G-5)细胞的天然代谢抗原,接种昆明小鼠,于接种后第14天给免疫小鼠接种人源细粒棘球蚴原头节约1 000 个,于200 d 剖检观察有无包囊形成,病理切片鉴定;并用该抗原作为诊断抗原,使用间接血凝(IHA)、琼脂扩散(AGD)试验,检测临床确诊的细粒棘球蚴病人血清。以多房棘球蚴病人血清、细颈囊尾蚴羊血清及正常人血清作为对照。结果表明,该抗原能使60% 的小鼠获得完全抵抗细粒棘球蚴原头节攻击的能力,未完全获得保护的小鼠形成包囊的数量、大小较对照组明显减少,且为不育囊;使用该抗原IHA 检测31 份血清,阳性24 份,阳性率77.42% ,AGD检测30 份血清,阳性13 份,阳性率43.33% ,2 种方法对多房棘球蚴病人血清和细颈囊尾蚴羊血清及正常人血清不起反应。     

绵羊细粒棘球蚴全血金标渗滤检测方法的建立

为建立一种快速、高效的诊断家畜细粒棘球蚴病方法,提取绵羊细粒棘球蚴包囊新鲜囊液,盐析囊液抗原,点样于硝酸纤维膜,以胶体金-驴抗羊IgG和胶体金-兔抗鼠IgG为检测标记物,采用垂直流渗滤装置检测绵羊与人工感染细粒棘球蚴小鼠血清和全血特异性抗体。患病绵羊阳性血清及全血检出率在90.91%~94.4%,细粒棘球蚴感染小鼠血清及全血检出率均为100%;细粒棘球蚴阴性羊血清和全血假阳性率为4.00%~4.59%;与脑多头蚴病血清交叉反应率为28.57%(2/7)。研究结果表明细粒棘球蚴全血金标渗滤法(DIGFA)可应用于绵羊棘球蚴病的诊断与检疫。     

用ELISA法观察模型小鼠原发性感染细粒棘球绦虫后特异性抗体的变化规律

分别用较高纯度的细粒棘球绦虫六钩蚴抗原和传统使用的囊液抗原对一次感染和二次感染细粒棘球绦虫六钩蚴的小鼠血清进行ELISA测定，认为寄生于不同部位的包囊刺激机体产生的抗体水平不同．同时检测早期抗体时，六钩蚴抗原比囊液抗原更具有阶段性优越性。小鼠二次感染六钩蚴后六钩蚴抗体水平得到明显加强，并推测认为一次感染产生的六钩蚴抗体可能是具有保护性的抗体。     

细粒棘球绦虫排泄分泌抗原的研究：六钩蚴排泄分泌抗原的反应原性

本实验应用体外培养方法制备细粒棘球绦虫六钩蚴排泄分泌（ＥＳ）抗原，应用酶联兔疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）首次对六钩蚴ＥＳ抗原的反庆原性进行了初步分析。以５μｇ／ｍｌ包被反应板分别与已知阳性，阴性血清；人工感染血清；免疫血清；疫区屠宰绵羊血清；肝片吸虫，细颈囊尾蚴以及边虫感染的绵羊添反应，结果表明六钩蚴ＥＳ抗原具有较好的反庆原性。ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００层析以抗原有一定的纯化作用。纯化六钩蚴ＥＳ抗原可     

细粒棘球蚴细胞系13G—5培育

从１８例棘球蚴病人的包囊分离棘球蚴细胞,经３６批次体外培养获得１株细粒棘球蚴细胞系（１３Ｇ－５细胞系）,已培养１４０ｄ,传２１代,并继续扩大增殖培养。测定了该细胞系第１３代细胞生长曲线和集落形成率（４％）。１３Ｇ－５细胞系５代以前为多形性细胞,后逐渐以成纤维型细胞占优势。探讨了棘球蚴细胞培养的制约因素。     

细粒棘球绦虫六钩蚴静脉感染小鼠模型动物的建立

利用绵羊－犬源细粒棘球绦虫的六钩蚴尾静脉注射感染昆明小鼠10只，每只接种六钩蚴600枚。结果，在接种后62－83d内小鼠全部死亡，剖检死亡小鼠其荷囊量为2－40个。     

细粒棘球绦虫三磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆、表达及其分子特征的生物信息学分析

三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是糖酵解途径中的关键酶,现已发现该酶可作为一些寄生虫的疫苗候选分子和药物靶标。然而,有关绦虫三磷酸甘油醛脱氢酶的研究报道较少。为探究细粒棘球绦虫GAPDH(EgGAPDH)的分子特征与应用价值,克隆细粒棘球绦虫的GAPDH基因,并以生物信息学方法对其进行系统的分析。结果显示:EgGAPDH基因全长1 011bp,编码336个氨基酸。EgGAPDH是由4个结构相同的单体蛋白(O、P、Q、R)组成的一个同源四聚体,每个单体蛋白质含有3个活性中心,即NAD+绑定区域(aa 4-151和aa 315-336)、催化结合区域(aa 156-314)和一个酶活性位点(aa 149-156)。通过对EgGAPDH的氨基酸序列的抗原表位预测得到了16个B细胞抗原表位和9个T细胞结合位点;Western blot显示原核表达的重组EgGAPDH能与感染细粒棘球蚴的小鼠血清发生特异性结合;以纯化的重组EgGAPDH蛋白为抗原通过ELISA法检测17份细粒棘球蚴小鼠阳性血清,阳性检出率为100%。试验结果表明:成功克隆并表达细粒棘球绦虫的EgGAPDH基因,EgGAPDH蛋白具有3个酶功能区域和多个免疫结合位点,Western blot和ELISA结果显示,该蛋白质可能具有作为抗细粒棘球蚴的药物靶标和疫苗候选分子的潜力。     

棘球蚴的SDS－PAGE银染分析

棘球蚴的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ银染分析徐雪平，李兴江，薄新文陈志蓉，郑经鸿（新疆农垦科学院）棘球蚴病是一危害严重的人兽共患寄生虫病，在该病的免疫诊断中绵羊棘球蚴囊液是最常用的诊断抗原。但棘球蚴囊液成分复杂，在免疫诊断中有时与其它绦虫蚴发生免疫交叉反应。为此...     

棘球蚴病免疫诊断的新进展

一、囊状棘球蚴病(CHD,细粒棘球绦虫) 20年前,当Capron及其同事(1967)用免疫电泳从免疫了细粒棘球蚴囊液的动物血清及感染棘球蚴的病人血清中描述了一条主要沟沉淀带时,他们为囊状棘球蚴病血清学诊断的特异性的“金标准”(Gold Standard)奠定了基础。这条沉淀带,作者们把它称为“弧5”,是生发层及原头节所分泌的一种热稳定脂蛋白抗原抗体应答的结果。这一抗原是迄今为止已鉴定的细粒棘球绦虫中绦期物质中最具免疫原性、最特异的组分(Schantz等,1986;Richard等,1986)。在许多不同地区对数千病例的检测表明,在滴人血清中证实“弧5”是感染细粒棘球绦虫、多房棘球绦虫或伏氏棘球绦虫任一种的直接阳性证据。在Varela—Diaz等(1978)报道感染猪囊尾蚴的病人血清中亦发生“弧5”反应之前,还没有在未     

绵羊细粒棘球蚴病病例的病理学观察

细粒棘球蚴是细粒棘球绦虫的幼虫，寄生于人和多种食草动物（牛、绵羊等）的内脏组织，引起棘球蚴病或称包虫病。该病是一种危害严重的人兽共患病，徐之杰等于2003年6月收集黑龙江省病例78例，2004年11月10日，我们在大庆地区发现绵羊细粒棘球蚴病病例。     

不同宿主源棘球蚴包囊液抗原的SDS—PAGE分析

本文利用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ对不同宿主源棘球蚴囊液抗原的多肽组成进行了分析和比较,旨在为免疫诊断抗原的分离、鉴定和纯化奠定基础,为细粒棘球绦虫种内变异和株的鉴定提供参考指标。结果表明,在还原条件下,绵羊棘球蚴囊液抗原共有多肽带１９条,其中６６和５９ＫＤ多肽带为主带,４０、３４．５、３３、２４．５和１４ＫＤ多肽带次之。牛源囊液抗原共有多肽带１２条,６６和５９ＫＤ多肽带也为主带,２４．５ＫＤ多肽带次之。人源囊液抗原共有多肽带１３条,６６、４０、２０．５和１４ＫＤ多肽带为主带,５９ＫＤ多肽带近于缺乏,分子量在５９和２４ＫＤ之间的带明显偏少,而７１、６９、６８和２０．５ＫＤ多肽带为自身特有。３种不同宿主源棘球蚴囊液抗原其多肽组成均很复杂,羊、牛源囊液抗原的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ图谱较相似,而人源与此差异明显。初步认为绵羊和牛源囊液抗原在免疫诊断中具有可替代性。     

细粒棘球绦虫铜锌超氧化物歧化酶基因的表达与特征分析

旨在探讨Eg-SOD基因的特征及其在细粒棘球绦虫上的抗氧化作用。通过原核表达得到重组Eg-SOD,对其进行酶活性测定、免疫印迹、ELISA以及免疫荧光定位分析。经原核表达出的重组Eg-SOD蛋白为可溶性蛋白,以羟胺法测定其酶学活性,可达(464.55±19.99)U·mg-1。免疫印迹结果显示,该蛋白质能够被实验室人工感染细粒棘球蚴的小鼠阳性血清所识别,具有较强的反应原性;ELISA分析显示,重组Eg-SOD对人工感染细粒棘球蚴的小鼠血清和自然感染包虫病的绵羊血清检出率均为100%,而对细颈囊尾蚴的交叉反应为37.5%,提示该蛋白质可以作为潜在的诊断候选分子。免疫荧光定位显示该蛋白质广泛分布于成虫和原头蚴的组织间隙,以及少量分布于表皮。本研究对Eg-SOD的特点进行了初步的探讨,并揭示该蛋白质与虫体的抗氧化损伤有着密切的联系。     

同心县羊包虫病发病情况调查及其防治

羊包虫病包括多头蚴和棘球蚴。多头蚴俗称脑包虫，是多头绦虫的幼虫，寄生于羊脑内；棘球蚴是细粒棘球绦虫的幼虫，包括无头棘球蚴、人型棘球蚴及多房棘球蚴，主要寄生于羊的肝脏、肺脏，人亦可感染。多头蚴与棘球蚴的成虫寄生于犬、狼、狐狸等终未宿主的小肠内，其孕卵体节脱落后，随粪便到体外。     

泽库地区包虫(棘球蚴)病基线调查

2000年5月，10月，分别对泽库地区人，犬，牛和羊进行了刺球蚴（包虫）病调查。结果：人包虫病患者患病率为0.43‰（其中农牧民患者占78.26%)，犬细粒棘球绦虫平均感染率为65%，牛棘球蚴平均感染率65.42%。羊棘球蚴平均感染率为42.79%。结果表明，泽库地区属棘球蚴病高发区。     

吡喹酮防治犬细粒棘球绦虫效果观察

吡喹酮防治犬细粒棘球绦虫效果观察胡义，保广祺，郭红伟，周翰信（青海省海北州牧科所）为检验、考核对犬细粒棘球绦虫（Ｅ．ｇｒｏ－ｎｕｌｏｓｕｓ）综合防治效果，于１９９１年１１月至１９９４年１１月在海晏县全境内进行了细粒棘球线虫和棘球蚴病综合防治效果观察。...     

久治县牛羊棘球蚴病调查

棘球蚴病是由细粒棘球绦虫（Echinoeoceus granulosus）的幼虫棘球蚴（echinocoocus）寄生于哺乳动物脏器所引起的疾病。家畜被棘球蚴侵袭后,幼畜发育迟缓,成畜生产效能急剧减低,严重时可以引起死亡。此病为人畜共患病,严重危害人的身心健康。近年来,久治地区牛、羊棘球蚴的感染情况有上升的趋势。为了摸清目前家畜棘球蚴的感染情况和危害程度,我们于2005年9—11月利用县肉联厂和畜产品交易市场收购屠宰牛、羊的便利条件,进行了普查。     

细粒棘球绦虫排泄分泌抗原研究：原头节排泄分泌抗原的反应原性

细粒棘球绦虫排泄分泌抗原研究──原头节排泄分泌抗原的反应原性朱兴全，窦兰清，史晓红，孙学勤，王晓华，牛炳亨（中国农业科学院兰州兽医研究所，甘肃７３００４６）笔者的初步研究已阐明，六钩蚴排泄分泌（ＥＳ）抗原具有较好的反应原性，纯化六钩蚴ＥＳ抗原可望能用...     

海西州都兰县棘球蚴病流行情况调查

<正>棘球蚴是由细粒棘球绦虫的幼虫棘球蚴寄生于哺乳动物脏器所引起的疾病。家畜被棘球蚴侵袭后,幼畜发育迟缓,成畜生产性能急剧降低,严重时可引起死亡,此病又为人畜共患病,严重危害人的身心健康。为了掌握青海省海西州都兰地区棘球蚴病的流行情况,2011年4—11月份笔者对该地区牛羊棘球蚴和犬细粒棘球蚴虫感染及人患棘球蚴病(包虫病)的危害程度和流行情况进行了调查,为今后开展棘球蚴病的综合防控提供参考数据,现将调查情况报道     

玛沁县牛、羊棘球蚴病的调查

棘球蚴病是由细粒棘球绦虫的蚴虫所引起的,主要寄生在牛、羊的肝脏中,所有的哺乳动物均可感染。它的成虫——细粒棘球绦虫,寄生于肉食动物（犬、狼、狐狸）的小肠里。为了掌握玛沁县棘球蚴病的感染情况,为畜防提供科学依据,我们于2005年7～11月在玛沁县屠宰场进行了调查。     

TGF-β1和Collagen-Ⅲ在牦牛感染细粒棘球蚴肝纤维化中的表达

研究转化生长因子β1(TGF-β1)、Ⅲ型胶原(Collagen-Ⅲ)在牦牛感染细粒棘球蚴导致肝纤维化中的表达及其意义。收集西藏地区40例细粒棘球蚴感染的牦牛肝组织和血清样本,同时收集未感染的肝组织和血清进行对照。采用苏木素-伊红(HE)染色法和天狼猩红染色法观察牦牛肝脏病理变化和肝纤维化程度;酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫组化法(IHA)分别检测肝组织和血清中TGF-β1、Collagen-Ⅲ的表达水平及分布;RT-PCR检测肝细胞内TGF-β1和Collagen-Ⅲ基因mRNA的相对表达水平。HE染色和天狼猩红染色结果显示,与未感染细粒棘球蚴病牦牛肝组织相比,感染棘球蚴周围的肝组织肝界板细胞破坏,呈虫蚀状,感染肝组织外围纤维化,细粒棘球蚴寄生的牦牛肝脏组织引起组织增生,纤维化;ELISA结果显示感染细粒棘球蚴牦牛血清样中细胞因子TGF-β1、Collagen-Ⅲ的含量明显超过未感染组(P<0.05),且免疫组化的结果显示它们的表达主要存在于细胞基质中;RT-PCR显示细粒棘球蚴感染肝组织中TGF-β1、Collagen-Ⅲ的mRNA相对表达量超出未感染组(P<0....