碱茅幼穗的组织培养初报

碱茅幼穗在附加有２４－Ｄ１５ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基中,暗培养条件下两周时形成０５ｃｍ２大小的愈伤组织块,其发生率为４３％。培养３周后形成旺盛生长的肉黄色愈伤组织。愈伤组织的分化是在含ＫＴ１０ｍｇ／Ｌ、ＮＡＡ０５ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上２～４周时出现绿色芽点,继续培养１～２周即可得到分化植株,将该植株移至不含激素的ＭＳ或Ｎ６培养基上时,光照条件下形成绿色分化植株。     

红三叶组织培养及再生植株

本文采用ＭＳ，Ｂ５和ＰＣ一Ｌ２作为基本培养基，在不同激素组合条件下对红三叶（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍｐｒａｔｅｎｓｅ）子叶及下胚轴进行组织培养。在ＭＳ，Ｂ５和ＰＣ一Ｌ２附加２ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ和０．５ｍｇ／ＬＢＡ的培养基上，子叶及下胚轴愈伤组织诱导率均在８９％以上。愈伤组织继代在Ｂ５无机盐十三倍ＭＳ有机成分＋３％蔗糖＋０．５ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ＋０．５ｍｇ／Ｌ６ＢＡ０．２ｍｇ／ＬＮＡＡ，＋１０ｍｇ／ＬＶｃ的培养基上生长良好。愈伤组织在Ｂ５附加０．１ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋０．２ｍｇ／ＬＩＢＡ的培养基上再生植株。下胚轴在ＭＳ附加２ｍｇ／Ｌ６ＢＡ＋１ｍｇ／ＬＮＡＡ的培养基上直接分化形成丛生苗，转入无激素ＮＳ培养基上再生根。实验表明ＶＥ，Ｖｃ，ＰＶＰ和活性碳对愈伤组织褐化有抑制作用，１０ｍｇ／ＬＶｃ抗褐化作用最好。     

白羊草幼穗的组织培养

白羊草幼穗在附加在２,４－Ｄ １．０ｍｇ／Ｌ,水解酪蛋白５００或１０００ｍｇ／Ｌ的Ｎ６或ＭＳ培养基中,在２５±１℃,暗光培养条件下,两周时形成０．５ｃｍ＾２大小的愈伤组织块。愈伤组织的发生率为８４％,培养３周后形成旺盛生长的的愈伤组织。其分化是在含有ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ,ＫＴ１．０ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上或在附加有ＫＴ１．０ｍｇ／Ｌ、ＩＡＡ０．４ｍｇ／Ｌ、ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ的Ｎ６培养基上２￣４周后     

草麻黄的组织培养及植株再生

将草麻黄幼草节间幼茎部分作外植体,培养在附加ＫＴ０．０５４ｍｇ／ｌ＋２,４－Ｄ１．１１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基中,可成功诱导出愈伤组织,愈伤组织分化出芽;同样的外本培养在附加ＢＡ３ｍｇ／ｌ＋ＩＡＡ０．２ｍｇ／ｌ的ＭＳ培养基中,诱导出大量不定芽;不同途径得到的芽转移到ＭＳ附加６－ＢＡ０．０５６ｍｇ／ｌ＋１．１１ｍｇ／ｌ２,４＋１１．１１ｍｇ／ｌ２,４－Ｄ的培养基后,可分化出不定根,从而形成完整植株。     

百脉根的组织培养与植株再生

百脉根下胚轴在附加有２，４－Ｄ ０．６￣２．０ｍｇ／Ｌ、ＫＴ ０．３ｍｇ／Ｌ的ＭＳ的培养基上，３￣４周时形成愈伤组织，继代２￣４次后，在附加有ＢＡ ０．５￣２．０ｍｇ／Ｌ，ＮＡＡ０．１￣２．０ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上２￣３周有白色根形成。     

假俭草侧芽愈伤诱导和植株再生

以中国优良品系Ｅ １２６假俭草的侧芽为外植体建立高效的再生体系。试验结果显示,１）适宜于侧芽生长的培养基为ＭＳ＋ＢＡＰ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．８ ｍｇ／Ｌ;２）在最佳诱导培养基ＭＳ＋２,４ Ｄ１．０ ｍｇ／Ｌ＋ＢＡＰ０．１ ｍｇ／Ｌ上,侧芽愈伤诱导率达９３％。较强的光照能提高愈伤组织的诱导率;３）在最佳分化培养基ＭＳ＋ＫＴ２．０ｍｇ／Ｌ 上,绿苗分化率为１２．６％;４）试管苗最佳生长培养基为ＭＳ＋ＢＡＰ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．８ ｍｇ／Ｌ;５）在最佳生根培养基ＭＳ＋ＮＡＡ０．６ｍｇ／Ｌ 上,试管苗的生根率达９８％,植株移栽成活率为９４％。本试验为假俭草体细胞筛选和遗传转化提供依据。     

顿河红豆草下胚轴培养及其植株再生

对顿河豆草５ｄ龄无菌苗下胚轴愈伤组织诱导及其植株再生条件的研究结果表明,愈伤组织培养基为ＭＳ基础培养基,附加０．２ｍｇ／ｌ２,４－Ｄ、１ｍｇ／ｌＢＡＰ和２ｍｇ／ｌＮＡＡ,ｐＨ５．８;分化培养我激素ＭＳ培养基;生根培养基为１／２ＭＳ或１／２ＬＳ＋０．０５ｍｇ／ｌＮＡＡ＋０．８％琼脂培养基。其愈伤组织绝大多数生长良好,出愈率达９６．８％。体细胞胚化率为２５．３％,具有体细胞胚分化力的基因型占３５％,生     

黑麦草幼穗培养直接成苗和微繁殖

本文研究了多花黑麦草幼穗离体培养直接成苗和微繁殖。结果表明，在ＭＳ培养基中附加０．５－１．０ｍｇ．Ｌ＾－１或０．５ｍｇ．Ｌ＾－１２，４－Ｄ时幼穗成苗率较高，分别达４８％和７５％；幼穗可不切段直接培养；在ＭＳ培养基中附加２ｍｇ．Ｌ＾－１ＢＡＰ时微繁殖的效果最好。     

大赖草的组织培养及植株再生的研究

大刺草在成熟胚在含有２ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ的ＭＳ培养上形成颗粒状愈伤组织，减少培养基中的２，４－Ｄ浓度，愈伤组织分化出绿色的芽点。生根培养基为不含任何激素的ＭＳ培养基，有分化能力的愈伤组织可以在保持培养基（ＭＳ＋２ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ＋０．５ｍｇ／ＬＢＡＰ）上长期保存，利用这一培养程序可以快速，大量地繁殖大赖草，文章还对外源激素在植物组织培养中的作用进行了讨论。     

激素对兰引Ⅰ号草坪型狗牙根愈伤组织及器官形成的影响

对兰引Ⅰ号草坪型狗牙根茎段外植体进行了愈伤组织和器官形成的诱导，结果表明ＭＳ＋２，４－Ｄｍｇ／Ｌ可诱导其产生愈伤组织，诱导率达７３％，ＭＳ＋ＮＡＡ ２ｍｇ／Ｌ仅能诱导生根，这２种生长素与细胞分裂素６－ＢＡ（浓度０．５ｍｇ／Ｌ）的组合可诱导出大量的分蘖芽。     

紫花苜蓿离体培养植株再生及其RAPD分析

对苜蓿(品种农宝)的下胚轴外植体进行离体培养建立了再生体系。结果表明,子叶和下胚轴切段在附加0.2~1.0 mg/L IAA和2.0 mg/L 6-BA或2.0 mg/L KT的MS培养基上培养,均能诱导出愈伤组织,但子叶所诱导的愈伤组织不具有分化能力。下胚轴切段培养5~7 d即可诱导出愈伤组织,并分化出绿色芽点,在原培养基上进而可分化出大量的丛生芽。在含0.2 mg/L IAA和2.0 mg/L 6-BA的MS培养基上,其分化率最高可达到42.6%。这些芽在含0.2 mg/L IAA和0.5 mg/L KT的MS培养基上长成2 cm左右的幼苗时,将其切下转至1/2 MS0培养基上,培养10 d即可诱导生根,得到再生植株。随机选取实生苗和下胚轴愈伤组织再生苗进行RAPD分析,结果表明,所用的50个随机引物中有5个扩增出差异性条带,甚至再生植株之间也有1条引物扩增的条带有差异,这说明经组织培养所得到的再生植株与实生苗相比,在DNA水平上发生了一定程度变异,并且这种变异也存在于再生植株之间。     

唐古特白刺组织培养及其培养基筛选研究

本试验选用唐古特白刺幼嫩茎段和叶片作为材料,研究白刺不同外植体的离体培养技术及其适宜的培养基。结果表明,白刺带芽嫩茎是诱导丛生芽的良好外植体,恒温20℃以下,可有效降低白刺丛生芽初代培养污染严重的程度;叶片是诱导愈伤组织的良好外植体,且低浓度生长素2,4-D培养基较高浓度培养基形成的白刺愈伤组织致密,也不易褐化。白刺的最适增殖、壮芽培养基为MS+6-BA 2 mg/L+NAA 1.00 mg/L,而且是以腋芽形成丛生芽的方式进行增殖的;最适生根培养基是1/2 MS+KT 1 mg/L+IBA 0.5 mg/L;形成愈伤组织较好的培养基是MS+2,4-D 0.5～1.0 mg/L。     

甜叶菊种子丛生芽诱导和植株再生

以甜叶菊种子为外植体,成功建立了快繁再生体系。基本培养基为MS,在添加了6-BA1.0mg/L和NAA0.5 mg/L的培养基上最适于丛生芽诱导,诱导率为98.6%;最佳壮苗培养基为MS+6-BA0.5 mg/L+KT0.5 mg/L+GA0.2 mg/L+NAA0.1 mg/L;试管苗最佳生根培养基为MS+NAA0.2 mg/L,生根率达到99.5%;生根的试管苗移栽到装有田园土的土盆中,其存活率达到82.4%。本试验为甜叶菊快速繁殖工作奠定了良好的实验基础。     

野生黄花苜蓿组织培养及再生体系研究

以呼伦贝尔草原野生黄花苜蓿(Medicago falcata L.)无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,对其组织培养及再生体系进行系统的研究,以期为其下一步转基因试验提供良好的受体。结果表明:最佳愈伤诱导培养基为MS+1.5 mg·L^-1 2,4-D+0.4 mg·L^-1 6-BA+3%蔗糖+0.7%琼脂,下胚轴和子叶的最佳愈伤诱导率均可达到100%。最佳胚性愈伤形成培养基为MS+0.5 mg·L^-1 KT+0.1 mg·L^-1 NAA+2%蔗糖+0.7%琼脂,胚性愈伤形成率为81.5%;最佳分化芽形成培养基为MS+0.25 mg·L^-1 KT+0.05 mg·L^-1 NAA+2%蔗糖+0.7%琼脂,分化芽形成率为36.5%。最佳生根培养基为1/2MS+0.5 mg·L^-1 NAA+1.5%蔗糖+0.7%琼脂,生根率为93.3%。愈伤诱导结果显示,供试黄花苜蓿材料个体间组织培养再生性存在较大差异,在同一激素水平上有大约1/3植株的愈伤状态优于其他植株。     

青蒿花序轴离体培养的初步研究

以不同基因型(青蒿素含量1.3％以上)的花序轴为外植体进行离体培养,初步建立了不同基因型的再生体系。结果表明,以MS基本培养基进行诱导培养时,附加6-BA 1.0～3.0 mg/L+NAA 0.1-0.5 mg/L能直接从愈伤组织块诱导出不定芽,且不同基因型诱导的激素浓度不同。再生植株的株系培养,附加低浓度的6-BA 0.1~0-3 mg/L+NAA 0.05-0.1 mg/L则有利于快速生长成苗,同时附加IAA或GA3对其生长也有一定好处,但主要与基因型相关。     

柠条锦鸡儿的组织培养

以柠条锦鸡儿(Caragana korshinskii Kom.)无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,研究其愈伤组织诱导及植株再生。结果表明:柠条锦鸡儿子叶和下胚轴均能诱导出愈伤组织,其适宜诱导培养基分别为M S+2,4-D2.0(mg/L)+KT0.1(mg/L)和M S+2,4-D2.0(mg/L)+BA0.5(mg/L);子叶诱导不定芽的适宜培养基为M S+6-BA0.2(mg/L)+NAA0.05(mg/L),下胚轴诱导不定芽的适宜培养基为MS+6-BA0.5(mg/L)+NAA0.05(mg/L);适宜生根培养基为1/2M S+IBA0.5(mg/L)+NAA0.5(mg/L)。本试验结果可为柠条锦鸡儿的快速繁殖利用及品种改良提供依据。     

野生黄花苜蓿叶肉原生质体培养和植株再生

取野生黄花苜蓿15～20天叶龄的叶片，去掉下表皮，用1％纤维素酶、1％半纤维素酶和0．5％果胶酶的混合液游离原生质体。用改良的MS培养基附加2，4－D、BA和NAA等，在黑暗条件下浅层悬浮培养。培养第4天、第7天和第10天，原生质体分别出现第一次、第二次和多次分裂，在此期间数次加液或换液调节渗透压，直至形成1mm左右的大细胞团，然后转移到附加2，4-D和KT等的MS固体培养基，诱导形成愈伤组织，再经4～5次继代培养，分化成为完整的再生植株。     

苜蓿组织培养体细胞胚发生体系的建立

采用17个农艺性状优良的苜蓿Medicago sativa丰产品种,诱导体细胞胚发生,结果表明:苜蓿无菌苗子叶在含有2.0 mg/L 2,4-D和0.25 mg/L KT的MS培养基(有机物质有改变)上诱导出愈伤组织;愈伤组织在含有0.05 mg/L NAA和0.5 mg/L 6-BA的MS培养基上形成胚性愈伤组织,并伴随着体细胞胚的发生;发育到子叶期的体细胞胚在不加任何激素的MS培养基上就可以萌发,再生成完整植株。     

Establishing regeneration systems of Gannong No.4 alfalfa

为实现对甘农4号紫花苜蓿Medicago sativa cv.Gannong No.4的遗传改良,研究拟建立一个操作简便、可重复性强、遗传性稳定、培养周期短和再生率高的转基因受体系统,为其遗传改良奠定基础。研究以MS为基本培养基,在不同浓度的2,4 D与6 BA的诱导培养基上,以甘农4号紫花苜蓿下胚轴为外植体,诱导愈伤组织,诱导率为86.85%～99.56%,其中MS+2 mg/L 2,4 D+1 mg/L 6 BA诱导率最高;浅黄色至淡绿色的愈伤组织在MS+0.5 mg/L KT+0.1 mg/L NAA培养基上的分化最好且植株颜色嫩绿。丛生芽在1/2MS+0.5 mg/L NAA的生根培养基上可再生成完整的苜蓿植株。     

兰州百合鳞片组织培养研究

以兰州百合的内层鳞片为外殖体,以MS为基本培养基并添加不同配比生长调节剂,进行组织培养研究。结果表明,以MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA培养基对初代培养形成不定芽最佳,低温有助于外殖体分化;不定芽增殖最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA;1/2 MS+0.2 mg/L NAA+蔗糖60 g/L适宜苗的生根培养,生根率达100%,且结鳞茎率达73.4%。