鸡源棒状杆菌的分离鉴定及同源性分析

笔者对发生传染性眼炎的病鸡送检病料进行了病原分离鉴定,为该病的实验室诊断提供参考资料。用接种环蘸取病鸡的眼结膜,在兔血琼脂平板和含5%小牛血清TSA琼脂平板上进行病原的分离培养、形态观察、生化试验、16Sr RNA PCR扩增、序列测定、同源性分析。结果从病鸡的眼结膜上分离到一株革兰氏阳性杆菌。该菌对营养要求高,在营养琼脂平板和LB琼脂平板上呈贫瘠的露滴状菌落,在兔血琼脂平板和含5%小牛血清的TSA琼脂平板上生长良好,呈不溶血圆形隆起、白色半透明、光滑湿润的露滴状菌落。该菌与棒状杆菌HM215052.1同源性达99.3%。说明该群鸡是由棒状杆菌所引起的传染性眼炎。     

雏鸡白痢沙门氏菌的分离和自动编码鉴定

采集临床疑似患鸡白痢雏鸡的肝、脾、肺等组织病料进行细菌分离培养,在营养琼脂平板、麦康凯琼脂平板和S.S琼脂平板上生长出均一、无色、半透明、表面光滑、闪亮、隆起、边缘整齐的针尖大小菌落。细菌为革兰氏阴性、两端稍圆、中等大小的细长杆菌,单在,不能运动。应用微生物自动分析系统编码鉴定该病原为鸡白痢沙门氏菌。     

一株鸡多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及药敏实验

为确诊贵州省安顺市某土鸡养殖场暴发的疫病,无菌挑取病鸡的心、肝、脾和全血分别接种至血琼脂平板、TSA平板和麦康凯琼脂平板进行细菌培养,分离菌经革兰氏染色、生化实验,PCR鉴定、药敏实验和动物致病性实验。结果:分离菌为多杀性巴氏杆菌,该菌对庆大霉素、米诺环素中度敏感,对环丙沙星、诺氟沙星等其他药物不敏感。结论:实验成功分离鉴定了一株鸡多杀性巴氏杆菌。根据药敏实验指导该场用药后,疫情得到控制。     

一例鸡源金黄色葡萄球菌的分离鉴定与耐药性分析

采集关节肿胀、关节囊内有浆液性渗出物患病鸡肝脏及骨髓进行细菌分离,对分离菌进行形态学观察、革兰氏染色、生理生化试验、PCR鉴定、16S rDNA序列测定和药敏试验。结果从病鸡样品中分离出一株在普通琼脂平板上形成湿润、表面光滑、隆起的圆形菌落,菌落在血琼脂平板上能产生β溶血;分离菌为革兰氏阳性,符合金黄色葡萄球菌生化培养特性;PCR检测结果显示金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶基因呈阳性,细菌16S rDNA核酸序列Blast比对结果显示为金黄色葡萄球菌;分离菌对阿莫西林、四环素、青霉素G、氯霉素、复方新诺明和氨苄西林具有耐药性。结果为云南鸡源金黄色葡萄球菌病的临床诊断和防治提供了依据。     

1例鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定与耐药性分析

为查明河南省新乡市某规模化蛋鸡场疑似沙门氏菌感染病例的病原,进而制定合理的治疗方案,本研究无菌采集疑似病雏鸡肠管样品,用革兰氏染色、培养特性观察、生化试验、PCR方法对其进行确诊,并进行病原回归试验,采用药敏纸片琼脂扩散法(K-B法)分析分离菌对19种常见抗生素的耐药性。结果显示,本试验成功分离了一株革兰氏阴性短杆菌,该分离菌符合鸡白痢沙门氏菌的培养特性和生化特性;PCR成功扩出invA基因,通过与GenBank数据库比对分析确定该细菌为鸡白痢沙门氏菌;用分离细菌株感染SPF鸡能复制出与自然感染一致的病例,说明鸡白痢沙门氏菌是造成本养鸡场雏鸡发病的主要病原;分离株具有较强的致病性和多重耐药性,对阿米卡星、苯唑青霉素、青霉素耐药,对复达欣、氨苄青霉素、头孢曲松等药物敏感,将敏感抗生素用于临床治疗效果明显。结合以上结果,本研究提出该病的具体防治措施,并取得了较好的效果,为鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定及防治提供了参考,对鸡白痢沙门氏菌病病原的早期诊断和治疗具有重要临床意义。     

一株多杀性巴氏杆菌的分离鉴定与耐药性研究

从扬州大学动物医院收集送检病鸡的病料,无菌采集病死鸡的肝脏、肺脏等组织接种于麦康凯平板和血琼脂平板上进行细菌分离与培养,并对分离菌进行生化试验、16 S r RNA基因序列分析和荚膜分型PCR鉴定,同时用12种抗菌药物对分离菌株进行药敏试验。细菌分离结果显示,分离菌在麦康凯平板上未见菌落生长,在血琼脂平板上呈光滑、湿润的露滴样小菌落;革兰氏染色镜检结果为革兰氏阴性小杆菌,瑞氏染色镜检可见大量两极浓染的短杆菌;生化试验结果表明分离菌株能够发酵葡萄糖、果糖、蔗糖等糖类,不能发酵乳糖和麦芽糖;同时,16 S r RNA基因序列和荚膜分型PCR测定结果显示分离菌为荚膜A型多杀性巴氏杆菌。药敏试验结果表明,分离菌株对痢特灵、左氟沙星、强力霉素的敏感性较高,而对氯霉素、美洛西林、卡那霉素等高度耐药。     

1株宽噬菌谱鸡白痢沙门氏菌噬菌体的分离及生物学特性分析

本研究采用双层琼脂平板法从现代化肉鸡养殖场采集的粪便、污水和垫料样品中分离宽噬菌谱鸡白痢沙门氏菌烈性噬菌体,并通过透射电子显微镜观察、噬菌谱分析、热稳定性、pH稳定性、最佳感染复数及一步生长曲线等对分离纯化的噬菌体进行生物学特性分析。结果显示,试验成功分离纯化出一株鸡白痢沙门氏菌噬菌体,命名STP98-a。该噬菌体噬菌斑直径4~5 mm,圆形透明,无晕圈,其头部偏椭圆形,长径约61 nm,横径约67 nm,尾长约112 nm,直径约10 nm,属于长尾噬菌体科;能裂解不同血清型鸡白痢沙门氏菌和肠炎沙门氏菌肠亚种,噬菌谱宽;在30~60℃保持高活性;在pH 3.0~12.0稳定;最佳感染复数为0.001;一步生长曲线结果显示,其感染宿主菌潜伏期为5 min,裂解期为135 min,裂解量为93。综上所述,STP98-a为一株宽噬菌谱鸡白痢沙门氏菌烈性噬菌体,可用于鸡白痢沙门氏菌噬菌体制剂的研发。     

1例鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定与耐药性分析

为查明河南省新乡市某规模化蛋鸡场疑似沙门氏菌感染病例的病原，进而制定合理的治疗方案，本研究无菌采集疑似病雏鸡肠管样品，用革兰氏染色、培养特性观察、生化试验、PCR方法对其进行确诊，并进行病原回归试验，采用药敏纸片琼脂扩散法（K-B法）分析分离菌对19种常见抗生素的耐药性。结果显示，本试验成功分离了一株革兰氏阴性短杆菌，该分离菌符合鸡白痢沙门氏菌的培养特性和生化特性；PCR成功扩出invA基因，通过与GenBank数据库比对分析确定该细菌为鸡白痢沙门氏菌；用分离细菌株感染SPF鸡能复制出与自然感染一致的病例，说明鸡白痢沙门氏菌是造成本养鸡场雏鸡发病的主要病原；分离株具有较强的致病性和多重耐药性，对阿米卡星、苯唑青霉素、青霉素耐药，对复达欣、氨苄青霉素、头孢曲松等药物敏感，将敏感抗生素用于临床治疗效果明显。结合以上结果，本研究提出该病的具体防治措施，并取得了较好的效果，为鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定及防治提供了参考，对鸡白痢沙门氏菌病病原的早期诊断和治疗具有重要临床意义。     

1株宽噬菌谱鸡白痢沙门氏菌噬菌体的分离及生物学特性分析

本研究采用双层琼脂平板法从现代化肉鸡养殖场采集的粪便、污水和垫料样品中分离宽噬菌谱鸡白痢沙门氏菌烈性噬菌体,并通过透射电子显微镜观察、噬菌谱分析、热稳定性、pH稳定性、最佳感染复数及一步生长曲线等对分离纯化的噬菌体进行生物学特性分析。结果显示,试验成功分离纯化出一株鸡白痢沙门氏菌噬菌体,命名STP98-a。该噬菌体噬菌斑直径4~5mm,圆形透明,无晕圈,其头部偏椭圆形,长径约61nm,横径约67nm,尾长约112nm,直径约10nm,属于长尾噬菌体科;能裂解不同血清型鸡白痢沙门氏菌和肠炎沙门氏菌肠亚种,噬菌谱宽;在30~60℃保持高活性;在pH 3.0~12.0稳定;最佳感染复数为0.001;一步生长曲线结果显示,其感染宿主菌潜伏期为5min,裂解期为135min,裂解量为93。综上所述,STP98-a为一株宽噬菌谱鸡白痢沙门氏菌烈性噬菌体,可用于鸡白痢沙门氏菌噬菌体制剂的研发。     

禽源沙门氏菌的分离与鉴定

为调查乌鲁木齐市及周边地区临床上病死鸡以及市场上出售健康鸡的沙门氏菌的感染情况,在兴农动物医院门诊、北园春活禽交易市场等地无菌采集病料或肛拭子共178份,接种到蛋白胨缓冲液培养管中增菌24h后,通过SS琼脂培养、三塘铁斜面、尿素管初步鉴定,共分离到待检菌株18株,经PCR检测最终确定18株全为沙门氏菌。18株沙门氏菌有17株来源于10日龄内雏鸡,1株来源于蛋鸡。说明沙门氏菌病雏鸡发病率高,成年鸡发病率低。     

雏鸡鼠伤寒沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌 混合感染的诊断

为对发病雏鸡群进行确诊,通过流行病学调查、病雏剖检观察及细菌分离鉴定,并对分离菌进行小白鼠接种观察,证实鸡群发生了由鼠伤寒沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌混合感染引起的禽副伤寒和禽伤寒,其中鼠伤寒沙门氏菌是主要病原,感染率高于鸡伤寒沙门氏菌。药物敏感试验结果表明,分离菌对多种常见抗生素表现敏感。     

鸡白痢沙门氏菌的分离与鉴定

在禽类 ,沙门氏菌可引起鸡白痢、鸡伤寒和副伤寒。其中鸡白痢沙门氏菌感染往往是终生带菌的 ,感染母鸡所产的蛋 ,高达 1/ 3带菌。带菌蛋的孵化率低 ,孵出的雏鸡的成活率也低[1,2 ] 。所以 ,鸡白痢所造成的经济损失是巨大的。2 0 0 2年 8月南宁市某养鸡场有一群 8- 11日龄的雏鸡发病 ,发病率为 10 % ,死亡率为1%。经实验室的细菌分离和一系列的生化试验 ,确诊该群雏鸡感染了鸡白痢沙门氏菌。1　材料与方法1.1　材料1.1.1　培养基血液琼脂平板、麦康凯琼脂平板、伊红美兰平板、半固体培养基等常用培养基 ,由本室制备和保存。1.1.2　生化反应管…     

沙门氏菌对六种氟喹诺酮类药物的敏感性试验

对鸡源、猪源、人源、食品源的沙门氏菌进行了鉴定,对敏感菌株进行了耐药性诱导;并用琼脂平板二倍稀释法,测定了6种氟喹诺酮类药物对临床分离和体外诱导的68株沙门氏菌的MIC,结果表明临床沙门氏菌对环丙沙星的耐药率达61.8%(37/60),而且6种氟喹诺酮类药物之间的交叉耐药现象非常严重.     

仔猪黄痢的病原分离鉴定及药敏试验

对贵州省某养猪场发生仔猪黄痢的病例进行病原分离鉴定,病仔猪直肠拭子接种至普通营养琼脂平板、麦康凯琼脂平板,经革兰氏染色镜检和生化试验,鉴定为大肠埃希氏菌;药敏试验表明,该菌对头孢哌酮、头孢曲松高度敏感,对环丙沙星、庆大霉素和卡那霉素等药物不敏感。根据药敏试验指导用药后,仔猪恢复健康。     

1株鸡源奇异变形杆菌的分离鉴定及药敏试验

[目的] 阐明青海省大通县某鸡场病鸡发病原因,为奇异变形杆菌病防控提供参考。[方法] 无菌采集病鸡肝脏、脾脏和泄殖腔拭子等样品,接种普通琼脂和SS琼脂平板进行细菌分离纯化培养,挑取平板上生长的疑似菌落进行革兰染色镜检,再将分离的菌落接种生化鉴定管进行生化鉴定,同时通过PCR扩增16S rDNA和tuf特异性基因并测序。将分离菌接种雏鸡进行致病性试验,采用K-B法评价分离菌对27种抗菌药物的敏感性。[结果] 分离菌为短杆、长杆状多形性杆菌,生化特性与奇异变形杆菌相符。PCR成功扩增出1 400 bp的16S rDNA,序列比对显示与奇异变形杆菌同源性最高,为99.9%。雏鸡致病性试验结果表明,该株奇异变形杆菌对雏鸡有致病性。药敏试验结果显示,该菌株对哌拉西林、头孢吡肟和头孢噻肟等高度敏感,对环丙沙星、奥格门汀中度敏感,对氨苄西林、阿莫西林和头孢唑啉有耐药性,提示该菌对头孢类药物高度敏感。[结论] 分离到的一株奇异变形杆菌对鸡具有较强的致病性,且对多种药物表现出耐药性。     

从病性鉴定标本分离出的沙门氏菌

作者于1976～1980年3月,5年之间在岩手县对41例家畜、家禽以下痢为主征的疾病进行了病性鉴定,对其中23例(56％)判定为沙门氏菌病。分离菌株数达161株,由鸡分离出鸡沙门氏菌和婴儿沙门氏菌;而由猪则分离出德尔比沙门氏菌,鼠伤寒沙门氏菌,利文斯通沙门氏菌及B群菌。另外从牛分离出鼠伤寒沙门氏菌及肠炎沙门氏菌,但前者占大半。从分得的沙门氏菌来看,由鸡及猪分离的菌株耐药性菌株的检出率低,其耐药型也为SM或TC单药耐药型。反之,由牛分离者全部菌株为耐药型,其耐药模型也多属多种药物耐药性,特别是AM-SA-TC三种药物耐药性菌检出的很多。     

左旋咪唑对鸡马立克氏病疫苗免疫效果的影响

左旋咪唑为咪唑衍生物，是兽医临诊广泛应用的驱线虫药物，具有广谱、高效、药源充足、性质稳定等优点。Renoux等（１９７１）发现该药能增强小鼠布氏杆菌菌苗免疫效果后，引起了人们极大的兴趣，对左旋咪唑的免疫调节作用进行了广泛的研究。一、材料和方法１．动物：１日龄健康黄羽雏鸡，购自中国农业科学院畜牧研究所养鸡场。２．药品与试剂：左旋咪唑，南京第二制药厂生产批号９７０９０１；HVT冻干疫苗，１０００羽／瓶，北京中海物保健科技有限公司生产，批号９９０４１３；鸡新城（ND）LoSta弱毒＋传染性囊病（IBD）弱毒冻干二联…     

鹅沙门氏菌的分离鉴定及药敏试验

目的:对送检的疑似沙门氏菌的病死鹅进行病原菌的分离鉴定及药敏试验,为沙门氏菌病的实验室诊断提供参考资料,为养殖户用药提供指导。方法:对从病死鹅肝脏中分离得到的细菌进行培养,革兰氏染色,镜检,生化试验以及药敏试验。结果:从病死鹅的肝脏中分离到一株革兰阴性单个存在的杆菌。该菌在营养琼脂上生长为半透明、灰白色、圆形、湿润、隆起、中等大小的菌落。在麦康凯琼脂平板上为透明、表面光滑湿润、圆形、隆起的小菌落。该菌能利用葡萄糖既产酸又产气,利用麦芽糖只产酸,不利用乳糖和蔗糖,MR试验为阳性,VP试验为阴性,吲哚形成试验为阴性。结论:该送检病死鹅是由于感染了沙门氏菌病而引起的死亡。     

艾叶挥发油体外抗菌试验

本试验采用超声波萃取方式提取河南蕲艾艾叶挥发油。用麦康凯琼脂培养基、HE琼脂培养基及营养琼脂培养基对大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌进行复苏培养,并将复苏后的菌种接种营养肉汤于37℃振荡培养箱中进行4 h增菌培养。吸取菌液2 mL到营养琼脂平板,菌液平板中贴3张彼此有一定间距的滤纸纸片(Φ:5 mm),每种菌做6个梯度(5.00、2.50、1.25、0.60、0.30、0.15μL/L),每个梯度做3个重复,并做相应对照(氟苯尼考、庆大霉素、空白)。每张纸片中央用微量移液器加上等量艾叶提取物,置37℃恒温培养箱中培养,测定大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌在加入艾叶提取物后的抑菌圈的大小。试验结果表明:提取物浓度越高,抑菌作用越明显。艾叶提取物对大肠杆菌的效果最好,对鸡白痢沙门氏菌相对较差。5.00μL/L组效果最好、2.50μL/L组次之,1.25、0.60μL/L组对大肠杆菌有抑菌作用,但对鸡白痢沙门氏菌无抑菌作用,0.60μL/L以下浓度对大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌均无抑菌作用。     

鸡病原性大肠杆菌的分离与鉴定

鸡大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的多种疾病的总称。为了掌握我市鸡大肠杆菌病病原性 ,笔者进行了病原性大肠杆菌的分离与鉴定。现报告如下。1　材料与方法1.1　菌株的分离 :共 4 0株 ,分别从当地鸡场病死鸡脏器中分离。取具有典型病理变化的鸡尸肝脏、心血、脾脏及淋巴结涂抹于普通琼脂平板上 ,置 37℃温箱中培养2 4 h后取出 ,观察单个菌落的生长情况。选取典型菌落接种到普通琼脂斜面上 ,置 37℃温箱中培养 2 4 h后 ,进行生化鉴定。1.2　菌株的鉴定1.2 .1　培养特性及形态染色　将上述纯培养物 ,接种于麦康凯和 S.S.琼脂平板、三糖铁…