五味消毒饮加味体外抑菌和抑制新城疫病毒试验

为了解五味消毒饮及加味对临床分离致病菌的体外抑制作用及对新城疫病毒(NDV)在鸡胚内增殖的抑制作用,采用水煎醇沉法得到五味消毒饮及加味的供试水煎液,琼脂扩散法和试管倍比稀释法测定对11株分离菌的体外抑制作用;鸡胚法测定五味消毒饮加味对新城疫病毒(NDV)在鸡胚内增殖的抑制作用。结果表明,五味消毒饮对沙门菌(鸡)、链球菌(猪)、无乳链球菌(奶牛)、2株表皮葡萄球菌(奶牛)、绿脓杆菌(奶牛)和金黄色葡萄球菌(奶牛)的最小杀菌质量浓度(MBC)分别为大于1、1、0.5、0.5(0.5)、0.5和1 g/mL,五味消毒饮加味的MBC分别为1、0.5、0.25、0.25(0.25)、0.5和1 g/mL;五味消毒饮加味0.2、0.1和0.05g/mL对NDV在鸡胚内增殖与对照组比较具有显著的抑制作用(P0.05或P0.01),药毒混合组预防组治疗组。五味消毒饮加味抑菌作用优于原方,并对NDV在鸡胚内增殖具有抑制作用。     

单抗标记检测新城疫病毒免疫胶体金试纸条的研制

利用柠檬酸钠还原氯金酸,形成胶体金颗粒,选择直径20 nm的胶体金颗粒标记单克隆抗体4E8,用兔抗鼠二抗喷洒在硝酸纤维素膜上作为对照线,用另一株单抗5E6作为检测线,制备成胶体金试纸条。用试纸条检测120份泄殖腔样品,结果与病毒增殖后HA法测得的结果符合率为95.8%,HA效价在1∶2以上,试纸条均能检测为阳性,与其他病毒的阳性血清没有交叉反应,且室温下可有效保存6个月。试纸条应用方便、快速,适合临床推广以及流行病学调查。     

中药玫瑰花口服液对新城疫病毒抑制作用的体内试验

通过人工感染雏鸡,测定了玫瑰花口服液对新城疫病毒的抑制作用。结果表明,中药玫瑰花口服液对人工感染新城疫病毒的雏鸡具有显著的预防和治疗作用,并可延长雏鸡的存活时间,其抑制作用优于西药金刚烷胺。     

新城疫病毒分子生物学研究进展

新城疫是由新城疫病毒（NDV）引起的一种能导致大多数禽类消化道、胃肠道和中枢神经系统损伤为主要特征的、急性高度接触性传染病。1926年该病首次被发现于印度尼西亚的爪哇,1927年Doyle在英国的新城首次分离报道并将其命名为新城疫病毒,引起的疾病称为新城疫。我国于1948年分离到NDV,但据载1935年曾有过＂鸡瘟＂流行,可能是由NDV引起。     

新城疫病毒洛阳分离株HN基因真核表达载体的构建

采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从新城疫病毒洛阳分离株中扩增出HN基因片段,通过DNA重组技术将该基因片段重组于pcDNA3真核表达载体上,构建pcDNA3-HN重组质粒。通过用PCR扩增、酶切电泳分析的方法对重组DNA进行鉴定,成功构建了新城疫病毒洛阳分离株HN基因真核表达载体。     

新城疫病毒对不同日龄及抗体水平的肉仔鸡致病性研究

将正常免疫的AA肉仔鸡于10、20及30日龄时,按抗体水平的高低分成2组(H组、L组),接种新城疫病毒建立人工致病模型,对攻毒鸡群的症状、病理变化及抗体水平进行动态观察.结果发现,日龄及抗体水平不同的肉仔鸡均表现非典型新城疫,淋巴组织广泛性坏死是其主要病变,L组比H组病情严重.发病率及病理变化的程度10日龄时攻毒低于20与30日龄攻毒,各感染组鸡的抗体水平均呈先迅速下降后逐渐回升的消长规律,但L组抗体水平始终低于H组.试验结果表明,日龄及抗体水平与抵御新城疫病毒的攻击能力密切相关.     

新城疫病毒对不同日龄及抗体水平的肉仔鸡致病性研究

将正常免疫的AA肉仔鸡于10、20及30日龄时,按抗体水平的高低分成2组(H组、L组),接种新城疫病毒建立人工致病模型,对攻毒鸡群的症状、病理变化及抗体水平进行动态观察.结果发现,日龄及抗体水平不同的肉仔鸡均表现非典型新城疫,淋巴组织广泛性坏死是其主要病变,L组比H组病情严重.发病率及病理变化的程度10日龄时攻毒低于20与30日龄攻毒,各感染组鸡的抗体水平均呈先迅速下降后逐渐回升的消长规律,但L组抗体水平始终低于H组.试验结果表明,日龄及抗体水平与抵御新城疫病毒的攻击能力密切相关.     

禽肉产品中禽流感与新城疫病毒多重RT-PCR检测方法的建立

根据禽流感病毒NP基因和新城疫病毒F基因各设计1对引物,经优化单项RT-PCR(sRT-PCR)反应体系,建立的多重RT-PCR(mRT-PCR)同时检测禽流感、新城疫的极限分别为10-2.5 EID50/0.1 mL和10-3.75 EID50/0.1 mL,mRT-PCR检测禽流感的敏感性与sRT-PCR一致,mRT-PCR检测新城疫的敏感性较sRT-PCR敏感性下降2个数量级。特异性试验表明,mRT-PCR仅检测到不同亚型(H1、H3、H5、H6和H9)禽流感、不同毒力新城疫病毒,对其他9种禽病原体和SPF鸡尿囊液均未扩增出片断。mRT-PCR检测39株禽流感H1、H5和H9亚型病毒、41株不同宿主源新城疫病毒,结果与sRT-PCR、HI试验完全一致;mRT-PCR和病原分离法同时检测人工感染鸡的组织脏器,2种方法检测禽流感的符合率为93.8%(30/32),检测新城疫的符合率为95.2%(20/21);采用mRT-PCR和病原分离法同时对35份进口禽产品、32份鸡粪拭子检测,2种方法检测禽流感的符合率为100%(67/67),对新城疫的符合率为97.1%(65/67)。病原分离法的检出率虽高于mRT-PCR,经统计学分析,两者差异不显著。     

用胶体金免疫电镜技术检测新城疫病毒

应用柠檬酸三钠还原法制备了20 nm的胶体金颗粒标记NDV抗体,并且用直接电镜、免疫电镜和胶体金免疫电镜技术比较观察了新城疫病毒.证明胶体金免疫电镜技术作为检测NDV的检测方法具有简单、快速、准确和无污染等优点.     

新城疫病毒诱导黄粉虫抗病毒肽的效果分析

观察鸡新城疫病毒(NDV)诱导黄粉虫是否产生抗鸡新城疫病毒肽.先用鸡胚培养鸡新城疫病毒以扩增病毒,然后提取病毒液备用,接着用鸡新城疫病毒液接种刺伤黄粉虫幼虫,2～3天后提取黄粉虫体内的抗病毒物质,测定其血凝效价和鸡新城疫病毒诱导鸡胚发病抑制试验结果.结果表明黄粉虫抗病毒肽在血凝抑制试验中的效价为1:64;在鸡新城疫病毒诱导鸡胚发病抑制试验中有一定效果,但不明显.     

鸡新城疫病毒耐热冻干保护剂的研究

对利用耐热保护剂制成的新城疫病毒冻干品的研究表明 :制品在 3 8℃条件下 8、14和 2 1d ,其中较理想一组冻干病毒的EID50 / ( 0 .1ml)由 10 6 .33分别下降为 10 3.6 7、10 4 .33、10 3.6 7。     

消毒液对新城疫病毒的杀灭效果

应用血凝试验检测“天刃”牌消毒液(pH值为6.5和7.5)对新城疫病毒(NDV)的杀灭效果。将2种pH值不同的消毒剂做1∶10稀释,与1∶500的DNV等量混合,在体外分别作用2、10min后,进行鸡胚尿囊腔接种,培养72h,收集鸡胚尿囊液测定血凝价以判断消毒剂对NDV的杀灭效果。结果表明:2种消毒剂在1∶10稀释的情况下对NDV杀灭效果明显。     

鹌鹑新城疫病毒的分离鉴定及病原学特性的研究

从某一表现呼吸道症状和拉黄绿色稀便的发病鹌鹑群中分离到 1株病毒 ,经HA、HI试验、血清中和试验、动物回归试验和病毒生物学特性测定 ,最终确认所分离毒株为新城疫病毒 ;经对分离株的MDT、ICPI和IVPI等致病指数的测定 ,表明该毒株为新城疫强毒株。     

中药成分与新城疫病毒感作后对病毒感染活性的影响

将5种浓度的当归多糖、黄芪多糖、板蓝根多糖、淫羊藿多糖、蜂胶多糖、淫羊藿黄酮、蜂胶黄酮、黄芪皂苷和人参皂苷分别与新城疫病毒La Sota株混合感作144 h和272 h后,加到已培养36 h的鸡胚成纤维细胞(CEF)中，继续培养72h，采用中性红染料吸收法测定CEF增殖变化,判定中药成分对病毒感染活性的影响。结果表明，所有中药成分几乎所有浓度均影响或显抑制病毒的感染活性，且与感作时间有一定的相关性。     

饥饿疗法治疗产蛋鸡强毒新城疫的临床效果

新城疫对产蛋鸡危害严重,即使在免疫状况良好的鸡群中仍会爆发该病,造成较高的死亡率。目前,常规治疗强毒新城疫的方法主要是联合使用抗病毒类和抗生素类药物,或对发病鸡群进行紧急接种,但治疗效果欠佳。本文借鉴传统中医辟谷治病的原理,对发病鸡群采取饥饿疗法进行治疗,取得了较好的效果。     

黄芪多糖、淫羊萑多糖和淫羊萑总黄酮的城疫毒感染细胞的影响

将黄芪多糖（APS）、淫羊萑多糖（EPS）、淫羊萑总黄酮（EF）分别与新城疫病毒（NDV）Ⅰ、Ⅳ系以3种顺序加入到培养24h的鸡胚成纤维细胞（CEF）中，即先加中药后接种病毒、先接种病毒后加中药、病毒和中药混合感作后同时加入。于病毒接种后72h测定NDVⅠ系的半数组织培养感染剂量（TCID50）和NDVⅣ系的血凝效价，以评价3种中药成分对NDV感染细胞的影响。结果表明，APS和EPS仅在先于病毒加入时对NDV有抑制作用，而EF无论以何种方式给药均呈抑制作用。提示它们有一定的抗病毒作用，且与其浓度有相关性。     

不同醛化方法制备的红细胞对鸡NDV血凝试验的影响

进行了不同醛化方法制备的红细胞对新城疫的血凝(HA)影响试验。结果表明:2种红细胞在新城疫HA试验中的结果基本一致;而且用PBS液和生理盐水作稀释液的试验结果也基本一致。     

NDV F与ChIL-18融合基因"自杀性"质粒的构建

根据GeneBank公布的鸡新城疫病毒(NDV)Lasota株F基因和鸡源性白细胞介素18(ChIL-18)基因序列分别设计特异性引物,且在鸡NDV F基因引物上游引入BamH Ⅰ位点、下游引入Sal Ⅰ位点,在Ch IL-18基因引物上游引入Sal Ⅰ位点、下游引入Hind Ⅲ、BamH Ⅰ位点.以鸡新城疫病毒Lasota株RNA为模板RT-PCR扩增其F基因,将F基因插入pMD18-T的BamH Ⅰ与Sal Ⅰ位点中.同时扩增上游带有Sal Ⅰ位点、下游带有Hind Ⅲ、BamH Ⅰ位点的ChIL-18基因,并将其插入到含有F基因的pMD18-T质粒的Sal Ⅰ、Hind Ⅲ位点之间,从而使NDV F基因与ChIL-18基因形成具有一个完整阅读框的融合基因,然后将融合基因片段定向克隆到pSFV单一启动子(CMV)下游,构建成F-ChIL-18融合基因重组"自杀性"质粒pSFV-F-ChIL-18.