阿维菌素拥有“绿色”前景

阿维菌素是一类具有杀虫、杀螨、杀线虫活性的十六元大环内酯化合物，由链霉菌中的灰色链霉菌Streptomyces aver-mitilis发酵产生。由日本北里大学大村智等和美国默克公司首先开发成功。     

阿维菌素高产菌的育种研究进展

阿维菌素是阿维链霉菌产生的具有杀虫活性的大环内酯类抗生素,在农业和畜牧业中应用广泛。对近年来的研究概况,从产特定组分阿维茵素菌种选育、阿维菌素高产菌选育和阿维菌素的改造创新等方面进行了综述。     

阿维菌素生产菌的复合诱变

为筛选阿维菌素高产菌株,提高阿维链霉菌的发酵单位,降低生产成本,本试验主要采用紫外诱变结合不同类型抗生素的双重筛选方法对出发菌株AW-8进行诱变选育.结果表明:共筛选出具有链霉素单抗高产菌株16株,正突变率为10.7％;筛选出具有利福平单抗高产菌株27株,正突变率为14.2％;筛选出具有链霉素和利福平双抗高产菌株6株,...     

麦芽糖转运相关基因的表达对阿维菌素合成的影响

阿维菌素是由阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)发酵产生的大环内酯类化合物,是一种应用广泛的生物农药。对阿维链霉菌中麦芽糖转运系统基因的表达量对阿维菌素合成的关系进行了初步研究。克隆malEFG基因至链霉菌整合型和多拷贝表达载体,分别转化阿维链霉菌野生型菌株ATCC31267和阿维菌素高产菌株GB165中,结果不同的阿维链霉菌转化子阿维菌素的产量都有一定程度的提高。野生型菌株阿维菌素转化子的产量是出发菌株的3~3.2倍,高产菌株的转化子阿维菌素的产量提高了40%~60%。     

甲胺基阿维菌素苯甲酸盐与阿维菌素的杀虫活性研究

比较了甲胺基阿维菌素苯甲酸盐和阿维菌素对朱砂叶螨、蚕豆蚜虫、小菜蛾、棉铃虫、甜菜夜蛾的杀虫活力。实验结果表明:1.甲胺基阿维菌素苯甲酸盐对螨的杀虫活力相当于阿维菌素;2.甲胺基阿维菌素苯甲酸盐对小菜蛾的杀虫活力略高于阿维菌素;3.甲胺基阿维菌素苯甲酸盐对棉铃虫的杀虫活力较高于阿维菌素;4.甲胺基阿维菌素苯甲酸盐对甜菜夜蛾的杀虫活力明显高于阿维菌素;5.甲胺基阿维菌素苯甲酸盐对蚜虫的杀虫活力明显低于阿维菌素。可见,甲胺基阿维菌素苯甲酸盐对鳞翅目杀虫活力比阿维菌素强;对螨类杀虫活力相当;而对同翅目杀虫活力明显低于阿维菌素,特别是在对蚜虫上特别明显。     

阿维菌素Bla组分高产菌株的高通量选育

为筛选阿维菌素高产菌株,建立了阿维菌素高产菌株的高通量初筛及复合诱变技术选育高产菌株的方法.初筛首先采用24孔板培养突变株,发酵培养5 d,甲醇直接浸提固体培养物,最后利用96孔板-酶标仪检测浸提液在紫外波段245 nm吸收.以阿维链霉菌(Streptromyces avermitilis)编号为AV-X-95的阿维菌素产生菌作为出发菌株,通过紫外线(UV)照射45 s和亚硝基胍(NTG)处理60min的组合诱变方法对出发菌株的孢子悬液进行了连续的诱变处理.研究结果表明,1 728株突变子的经高通量初筛后得到8株高产菌株,经摇瓶复筛和稳定性考察得到高产菌株AW4-329,其Bla产量较出发菌株提高了15.1%.     

甲胺基阿维菌素苯甲酸盐与阿维菌素的杀虫活性研究

比较了甲胺基阿维菌素苯甲酸盐和阿维菌素对朱砂叶螨、蚕豆蚜虫、小菜蛾、棉铃虫、甜菜夜蛾的杀虫活力。实验结果表明：1．甲胺基阿维菌素苯甲酸盐对螨的杀虫活力相当于阿维菌素；2．甲胺基阿维菌素苯甲酸盐对小菜蛾的杀虫活力略高于阿维菌素；3．甲胺基阿维菌素苯甲酸盐对棉铃虫的杀虫活力较高于阿维菌素；4、甲胺基阿维菌素苯甲酸盐对甜菜夜蛾的杀虫活力明显高于阿维菌素；5、甲胺基阿维菌素苯甲酸盐对蚜虫的杀虫活力明显低于阿维菌素。可见，甲胺基阿维菌素苯甲酸盐对鳞翅目杀虫活力比阿维菌素强；对螨类杀虫活力相当；而对同翅目杀虫活力明显低于阿维菌素，特别是在对蚜虫上特别明显。     

吸水链霉菌应城变种种内融合子FR-008产生新抗生素的杀虫活性

利用吸水链霉菌应城变种(Streptomyces hygroscopicus var.Yingchengensis)的两个不同营养缺陷型的突变株WNF-2-1-90(Leu~-)和WNF-2-1-135(Arg~-)为亲本,在PEG的助融下进行了种内原生质体融合。从获得的融合子中发现有一株稳定的原养型融合子FR-008,除产生亲本所能产生的5102-Ⅰ号和5102-Ⅱ号抗生素外,尚能产生亲本不能产生的对某些酵母菌具有活性的新抗生素。该抗生素还对孑孓具有很强的致死活性。兹将实验结果简报于后。FR-008发酵物的滤饼用80%甲醇浸提,浸提液加压浓缩至水相,用水饱和正丁醇提取;发酵滤液也用水饱和正丁醇提取。合并两者的正丁醇提取液,在50℃以下减压浓缩至小体积。     

阿维菌素B1a组分高产菌株的高通量选育

为筛选阿维菌素高产菌株,建立了阿维菌素高产菌株的高通量初筛及复合诱变技术选育高产菌株的方法。初筛首先采用24孔板培养突变株,发酵培养5 d,甲醇直接浸提固体培养物,最后利用96孔板-酶标仪检测浸提液在紫外波段245 nm吸收。以阿维链霉菌(Streptromyces avermitilis)编号为AV-X-95的阿维菌素产生菌作为出发菌株,通过紫外线(UV)照射45 s和亚硝基胍(NTG)处理60 min的组合诱变方法对出发菌株的孢子悬液进行了连续的诱变处理。研究结果表明,1 728株突变子的经高通量初筛后得到8株高产菌株,经摇瓶复筛和稳定性考察得到高产菌株AW4-329,其B1a产量较出发菌株提高了15.1%。     

阿维链霉菌原生质体制备方法的研究

对阿维链霉菌原生质体制备进行了研究,结果表明:阿维链霉菌原生质体制备的最佳条件为在35 mL含0.5%甘氨酸的YEME培养基中接种孢子悬液,28℃、200 r/min培养40 h;3 000 r/min收集菌丝体,用10.3%蔗糖溶液清洗2次;溶菌酶浓度为4mg/mL的P缓冲液悬浮菌丝体,30℃下处理50 min完成原生质体制备。以50%PEG1000为促融剂,原生质体融合率最高。     

紫外诱变吸水链霉菌选育高产农用抗生素菌株

[目的]为抗生素产生菌在农业生产中的应用奠定基础。[方法]以小麦赤霉菌为指示菌,以从吸水链霉菌海南变种S101菌株分离到的S510菌株为出发菌株,经紫外诱变后分别采用琼脂块法和二级摇瓶复筛法对其进行初筛和复筛,以选育出高产菌株,分析发酵培养基pH值和培养时间对发酵液效价的影响。[结果]当发酵培养基的pH值为5.5~6.5时,发酵液效价较高,最适pH值为6.0。发酵液的效价在72 h后可维持在较稳定的范围内,最佳发酵时间为96 h。通过连续2次紫外诱变,菌株的产抗生素能力比初始菌株提高了30.06%。将获得菌株在斜面培养基上连续传代5次后,仍有稳定的遗传性状。[结论]采用紫外诱变法选育该链霉菌是有效的。     

南昌链霉菌(Streptomyces nanchangensis)固体种子培养的研究

本研究进行了南昌链霉菌孢子培养基和培养条件的筛选。筛选到的培养基和培养条件,使南昌链霉菌每支斜面孢子达5亿多,是高氏培养基产孢量的7.5倍,培养时间缩短了7～10天。同时初步探讨了南昌链霉菌在固体培养基上孢子的消长变化及对摇瓶发酵产素的影响,发现该菌在固体培养基上能周期性地产生多代孢子;摇瓶发酵,接种第一代孢子南昌霉素 A 产量最多,接种第二代孢子则高效杀虫组分 B 的效价最高。     

阿维菌素与氰戊菊酯复酯对桃蚜的增效作用

阿维菌素与氰戊菊酯的各种配比均对桃蚜丰在着不同程度的增效作用，其中以阿维菌素与氰戊菊酯按有效成分1：24的比例复配增效作用最为明显，共毒系数达到297．84，室内药效试验也表明，20％混剂乳油（0．8％阿维菌素＋19．2％氰戊菊酯）的药效明显高于20％氰戊菊酯乳油，与0．9％阿维菌素乳油相当。     

阿维菌素2010年市场展望

2009年是中国农药产业发展史上最困难的一年,受国际金融危机影响,国内农药出口减少,一部分原药出口转内销,国内市场价格战为主要形式的竞争加剧,另外由于天气影响虫灾整体较轻,市场需求不旺,导致不少农药,丰产企业销售和利润双双下降,总体上呈现萎缩的状况。     

一株链霉菌发酵液对小菜蛾的杀虫作用研究

为了合理开发和利用链霉菌发酵液,通过测定链霉菌菌株HNll8发酵液对小菜蛾卵和不同龄期幼虫的杀虫活性,研究其杀虫作用。结果表明：链霉菌菌株HNlt8发酵液对小菜蛾卵无作用,对2龄和3龄小菜蛾幼虫防效较好,校正死亡率平均值达到70％以上,可以确定该菌株具有一定的杀虫活性。     

重离子辐照阿维菌素产生菌的诱变选育

应用不同剂量12C+6重离子束对出发菌株ZJAV-A1进行辐照选育,并应用高效液相色谱法测定发酵液中有效组分B1a的含量.结果表明:当重离子束12C+6离子的辐照剂量为50Gy时,B1a含量的延变率最高,为34.2%;诱变后的菌落共培养出4种菌型,即草帽型、馒头型、光秃型和皱缩型,其中,草帽型高产菌株ZJAV-Y203的发酵液中B1a组分比出发菌株提高了51.43%.说明利用12C+6重离子束辐照处理阿维菌素产生菌,可以得到高产B1a组分的诱变菌株,其诱变效果显著.     

培养基成分和补料对阿维菌素发酵过程中除虫链霉菌菌丝形态的影响

研究了阿维菌素发酵过程中培养基成分和补料对菌丝形态的影响,以及在这些条件下菌丝形态、菌体代谢以及产量之间的相互关系。结果表明:碳氮源种类和碳氮比与菌体生长密切相关,对除虫链霉菌前期的菌丝形态影响较大。只有当除虫链霉菌为密实的球状时,才能获得较高的阿维菌素产量;进一步通过调控使发酵中后期菌丝形态保持一定的菌球尺寸(球核面积、核区周长和菌丝球面积)对维持阿维菌素合成有利。     

菌株MY02发酵培养基的优化设计

以龟裂链霉菌MY02菌株为试材,采用单因子试验与均匀试验相结合的方法,通过二次多项式回归分析,筛选出活性组分SN06最佳发酵培养基配方,并建立了多元二次回归数学模型。菌株MY02优化发酵培养基的最佳配方:淀粉质量分数为2.69%,花生饼粉质量分数为1.39%,(NH4)2SO4质量分数为0.18%,CaCO3质量分数为0.14%,NaCl质量分数为0.16%。根据回归模型计算出SN06理论效价与实测效价相比较,二者非常接近,拟合误差小。     

农用抗生素TS99产生菌YH9407的初步研究

从辽宁省丹东地区的土壤样品中分离到一株新的杀真菌链霉菌YH9407,其产生的次级代谢产物对多种植物病原真菌和细菌有较强的抑制作用。该菌株在各种合成培养基上生长良好 ,气生菌丝和孢子堆为灰白色 ,基内菌丝一般为浅黄色 ,有的可产生黄色可溶性色素 ;孢子丝柔曲或直立 ,直径为0.17～0.22μm,孢子呈球形或卵圆形 ,直径为(0.6～0.8)μm×(0.8～1.2)μm ;通过与杀真菌链霉菌已知种在形态特征、培养特征和生理生化特性方面的比较 ,YH9407为杀真菌链霉菌的一个新菌株 ,暂命名为StreptomycesfungicidicusNo.9407     

江西柑桔产业现状与展望

对江西柑桔生产现状、存在的主要问题作了简介,并对江西今后柑桔产业发展提出了建议。