盐藻醛缩酶的盐适应性及其与物质积累的关系

在不同N aC l质量浓度下培养盐藻,分析盐藻醛缩酶的盐适应性及其与物质积累的关系。试验结果表明,在NaCl质量浓度为40～120 g/L时,盐藻醛缩酶活性与盐度具有正相关性;在NaCl质量浓度为120～200 g/L时,盐藻醛缩酶活性与盐度具有负相关性;在NaCl质量浓度为120 g/L时,盐藻醛缩酶活性最高。盐藻醛缩酶是一种高盐适应酶。盐藻醛缩酶活性与盐藻细胞密度、叶绿素形成和蛋白质积累均呈正相关关系。在盐藻醛缩酶活性最高时,盐藻物质积累量最多。     

铜对盐藻生长与物质积累的调控作用

实验研究了不同浓度的铜对盐藻细胞生长与物质积累的调控作用。结果表明:培养液中供给铜过多或过少都不利于盐藻细胞的生长与物质积累。以培养基中125μg/L的铜浓度对盐藻细胞生长、蛋白质合成与β-胡萝卜素积累的促进作用最大。这一铜浓度可用于盐藻的生产性培养。当培养液中铜浓度较高(175μg/L)或较低(25μg/L)时,单个盐藻细胞中的蛋白质与β-胡萝卜素含量较高,但因培养液中细胞密度较低,盐藻细胞积累的物质总量仍然较少。在铜浓度较高或较低的逆境条件下,盐藻可能通过适应性反应形成了逆境蛋白质与胡萝卜素等。     

陈化介质对盐藻生长与物质积累的影响

为能更好地培养利用盐藻,向培养基中添加不同组分的陈化介质进行对比试验。试验结果表明,陈化的原介质和煮介质,不仅均极显著抑制盐藻细胞的生长增殖,而且均极显著抑制盐藻细胞叶绿素和β-胡萝卜素的形成,而原介质和煮介质相比,他们的作用差异性不显著。陈化的蛋介质对盐藻细胞的生长增殖、叶绿素和β-胡萝卜素的形成无显著作用,而对盐藻细胞蛋白质积累有显著促进作用,可能是蛋介质中的蛋白质起了营养物质的作用。陈化介质中失去平衡的矿质营养元素和盐藻细胞的其他代谢产物等可能是抑制盐藻细胞生长与物质积累的主要原因。     

锰对盐藻生长与物质积累的调控作用

试验结果表明,培养液中锰质量浓度过高或过低都不利于盐藻细胞的生长与物质积累。培养基中锰质量浓度为4.0 mg/L时,盐藻细胞生长、蛋白质合成与β-胡萝卜素积累最多。当培养液中锰质量浓度较高(8.0 mg/L)或较低(2.0 mg/L)时,单个盐藻细胞中的蛋白质与β-胡萝卜素含量较高。但此时,因培养液中细胞密度较低,盐藻细胞积累的物质总量仍然较少。在锰质量浓度较高或较低的逆境条件下,盐藻可能通过适应性反应形成了逆境蛋白质与胡萝卜素等。     

锰钼组合在盐藻生长与物质积累中的作用

研究了微量元素锰、钼的不同质量浓度组合对盐藻细胞生长与物质积累的影响.试验结果表明,培养液中适当锰钼质量浓度的组合对盐藻细胞的生长和物质积累有促进作用,而锰钼质量浓度过高或过低则都是相对不利的.在试验的9种锰钼质量浓度组合中,以培养液中4 mg/L锰和60 μg/L钼质量浓度组合对盐藻细胞的生长和物质积累促进作用最好,它可使培养液中的盐藻细胞密度、蛋白质积累量和β-胡萝卜素积累量均达到最高.培养液中6 mg/L的锰和80 μg/L的钼质量浓度组合可使单个盐藻细胞中β-胡萝卜素、蛋白质积累量最高,但可能仅是在锰、钼过多的逆境条件下,盐藻细胞的适应性反应.     

6-BA与盐藻生长的关系

试验结果表明,在6-BA质量浓度较低时,6-BA与盐藻生长正相关;在6-BA质量浓度较高时,6-BA与盐藻生长负相关;培养液中1.5 mg/L的6-BA是盐藻的最佳促生长质量浓度,且6-BA对盐藻生长的促进效果可被萘乙酸(NAA)提高.     

锌锰组合对盐藻生长和蛋白质、β－胡萝卜素积累的影响

为了探索培养盐藻的微量元素条件,实验研究了微量元素锌、锰的不同浓度组合对盐藻细胞生长与物质积累的影响。结果表明,培养液中适当锌锰浓度的组合对盐藻细胞的生长和物质积累有促进作用,而锌锰浓度过高或过低则都是相对不利的。在试验的9种锌锰浓度组合中,以培养液中6mg/L的锌和4mg/L的锰浓度组合对盐藻细胞的生长和物质积累促进作用最好,它可使培养液中的盐藻细胞密度、蛋白质积累量和β-胡萝卜素积累量都达到最高。培养液中8mg/L的锌和6mg/L的锰浓度组合可使单个盐藻细胞中β-胡萝卜素和蛋白质积累量都最高,但可能仅是在锌、锰过多的逆境条件下,盐藻细胞的适应性反应。     

盐度对盐生杜氏藻生长及其色素积累的影响

试验结果表明.在试验盐度范围内(30～120).较低的盐度有利于盐生杜氏藻生长和分裂,最大细胞密度为8.92×105cell/ml.对照组仅为3.81×105cell/ml;盐度为60时.β-胡萝卜素含量最高,为102 mg/g.对照组仅为36 mg/g;盐度为30时,叶绿素a含量最高,为82 mg/g.对照组最低,为17 mg/g;低盐度有利于细胞蛋白质合成.蛋白质最高含量为37.5%,对照组仅为27.9%.     

柠檬酸铁对盐生杜氏藻生长和色素积累的影响

研究了柠檬酸铁对2株盐生杜氏藻OUN04和盐生杜氏藻OUN09生长和色素积累的影响。试验结果表明,盐生杜氏藻OUN04生长最适的Fe浓度为0.05 mmol/L,密度达1.115×106cell/ml,对照组为8.29×105cell/ml,0.25 mmol/L Fe组密度最低(7.0×105cell/ml);最大β-胡萝卜素含量(83.2mg/g)出现在0.25 mmol/L Fe浓度组中,对照组(63.4 mg/g)最低;Fe浓度为0.25 mmol/L时有最大的chll_a含量(98.4 mg/g),对照组为80.2 mg/g;建立了杜氏藻对Fe吸收的动力学方程。盐生杜氏藻OUN09生长最适的Fe浓度为0.05 mmol/L(密度1.31×106cell/ml),对照组为1.185×106cell/ml,最大β-胡萝卜素含量为130.2 mg/g(0.05 mmol/L Fe组),对照组为70.4 mg/g,pH值变化和Fe的吸收情况与盐生杜氏藻OUN04相似。     

VB6对盐藻色素形成、细胞生长和蛋白积累的影响

将盐藻接入不同质量浓度的VB6培养液中,检测其对盐藻色素形成、细胞生长与蛋白质积累的影响。试验结果表明,VB6对盐藻的作用效应表现为低质量浓度促进高质量浓度抑制。能够使盐藻β-胡萝卜素、叶绿素a、叶绿素b形成最多、细胞繁殖最快、蛋白质积累量最大的VB6质量浓度为250μg/L。在此质量浓度下,每个细胞中的蛋白质含量相对较低,这可能是由于盐藻细胞快速繁殖所致。     

盐藻运动特性及其影响因素

为了揭示盐藻的运动特性,在不同条件下观察了玻璃U形管两端盐藻的密度变化。结果表明,盐藻运动受光照、ATP、丙二酸钠和粘度的影响。盐藻具有向光源方向聚集的运动特性;供给ATP时盐藻运动加速,加入丙二酸钠时盐藻运动减慢,盐藻的运动是一个消耗能量的过程;增加介质粘稠度会使其运动速度减慢。     

盐藻运动特性及其影响因素

为了揭示盐藻的运动特性,在不同条件下观察了玻璃U形管两端盐藻的密度变化。结果表明,盐藻运动受光照、ATP、丙二酸钠和粘度的影响。盐藻具有向光源方向聚集的运动特性;供给ATP时盐藻运动加速,加入丙二酸钠时盐藻运动减慢,盐藻的运动是一个消耗能量的过程;增加介质粘稠度会使其运动速度减慢。     

盐生杜氏藻的生物学特性及其开发利用

盐生杜氏藻(Dunaliella salina),是一种富含β-胡萝卜素的极具经济价值的单细胞藻类,目前对它的研究和利用越来越广。本文介绍了盐藻的生物学特性、开发利用和培养条件。     

盐藻超氧化物歧化酶提取条件的研究

采用比较的方法对盐藻SOD提取条件进行了研究.试验结果表明,取盐藻培养液10 ml,4000 r/min离心15 min,收集盐藻细胞,溶于蒸馏水中冻融3次,超声波破碎2 min,再4000 r/min冷冻离心20 min,上清液具有高SOD活力,可用于盐藻SOD的进一步研究与利用.     

高温胁迫对盐藻和塔胞藻叶绿素荧光动力学的影响

利用调制式叶绿素荧光仪(Water-PAM)测定了高温胁迫(35～50 ℃)下盐藻(Dunaliella salina)和塔胞藻(Pyramimonas sp.)叶绿素荧光动力学特性的变化.测定的主要参数有:光系统Ⅱ(PSⅡ)的最大光能转化效率(Fv/Fm),PSⅡ的潜在活性(Fv/Fo),PSⅡ的实际光能转化效率(諴SⅡ=yield),光合电子传递效率(ETR),光化学淬灭(qP)和非光化学淬灭(NPQ).结果表明,与对照组(25 ℃)相比,高温胁迫下2种绿藻的叶绿素荧光参数Fv/Fm、Fv/Fo、諴SⅡ、ETR和qP均明显降低,并且随着胁迫温度的升高,胁迫时间的延长,下降幅度也逐步增大;高温胁迫下盐藻的NPQ先升高后下降.塔胞藻的NPQ随时间的变化趋势与温度有关,35 ℃和45 ℃处理下,塔胞藻的NPQ随着处理时间的延长而逐渐下降;40 ℃处理下NPQ则先下降后上升.盐藻的耐热性较好,在40 ℃和45 ℃下处理10 min后,经过一定的时间各荧光参数可恢复到接近对照水平,在50 ℃下处理10 min后各荧光参数则不能恢复.塔胞藻的耐热性较差,在35 ℃和40 ℃处理10 min后,经过一定的时间后各荧光参数可基本恢复,而在45 ℃下处理10 min后则不能恢复.本研究还对高温胁迫下2种绿藻的响应机制以及叶绿素荧光技术在筛选耐高温微藻品系中的应用进行了初步探讨.     

盐生杜氏藻的培养技术与应用

盐生杜氏藻 ( Dunaliella salina)属绿藻门 ( Chlorphyta) ,团藻目 ( Volvocales) ,盐藻科 ( Dunaliellaceae)。它含有丰富的蛋白质 ,而碳水化合物和脂肪含量相对较低。在高盐度、强光照和低氮的环境条件下 ,盐生杜氏藻体内β-胡萝卜素的累积速度很快。生长在海南岛三亚盐场的盐生杜氏藻 ,其蛋白质含量高达 48.89%,必需氨基酸指数 ( EAAI)达到 85 .1。在人类的食物中 ,只有大豆、花生仁的蛋白质含量可与之相比。杜氏藻无细胞壁 ,体型变化较大 ,有梨形、卵形、椭圆形或纺锤形。大小差异很大 ,大的长约 2 0 μm,宽 14μm;小的长约 9μm,宽…     

缢蛏过氧化氢酶基因的克隆及其功能

过氧化氢酶(catalase, CAT)是抗氧化酶体系的主要成员,在维持机体氧化还原平衡、抵御病原感染过程中具有重要作用。为研究CAT基因在软体动物应答病原胁迫过程中的作用,实验采用RACE技术通过克隆和序列拼接获得了缢蛏CAT基因的全长cDNA序列,并命名为ScCAT。ScCAT基因全长为2 840 bp,编码508个氨基酸。序列分析显示,Sc CAT蛋白含有1个CAT核心结构域(25～410),1个保守的酶活性位点(61FNRERIPERVVHAKGAGA78)和1个亚铁血红素结合位点(351RLFSYPDTH359)。多序列比对和系统进化树分析结果显示,Sc CAT属于CAT基因家族,且与无脊椎动物文蛤的亲缘关系最近。组织分布显示,ScCAT在所有检测的组织中均能表达,其中在肝胰腺中表达量最高,鳃中次之,血细胞中的表达量最低,分别为闭壳肌的85.67倍、50.09倍和0.76倍。在副溶血弧菌胁迫下,ScCAT在缢蛏肝胰腺中的表达明显上升,且在12 h达到最高值,为对照组的3.56倍;酶活性测定结果显示,副溶血弧菌胁迫显著诱导缢蛏肝胰腺和鳃组织中的CAT活性。为进一步探讨Sc CA...     

柴油对斑马鱼超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的影响

研究了不同浓度的柴油处理液对斑马鱼死亡率、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的影响。结果表明:380号柴油处理对斑马鱼的96h半致死浓度为450mg/L;低浓度的柴油处理对斑马鱼肌肉中SOD和CAT活性起诱导作用,而高浓度则起抑制作用,在处理浓度为300mg/L时SOD和CAT活性达到最高值,在试验过程中存在明显的"毒理兴奋"作用。建议以斑马鱼肌肉中SOD和CAT活性变化作为水环境监测的生物指标,从而达到评价水生生态环境的目的。     

盐胁迫条件下盐藻的生长及特异表达蛋白的研究

采用不同NaC1浓度培养盐藻.通过分光光度法记录其生长状态.试验结果表明,在NaC1浓度为1.0～2.0 mol/L时.盐藻生长状态良好;NaCl浓度为3.0～4.0 mol/L时盐藻生长缓慢;盐藻经不同NaCI浓度培养0.5、5、23 h后抽提蛋白,所获得的粗提蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,观察不同NaCI浓度培养液中生长的盐藻可溶性蛋白质SDS-PAGE图谱.发现在低NaC1浓度(1.0～2.0 mol/L)下培养时23、51 kD蛋白略有变化但变化不大;在高NaC1浓度(3.0～4.0 mol/L)下胁迫5、23 h时23 kD蛋白显著增加;高NaC1胁迫23 h时51 KD蛋白含量下降明显.验结果证明51、23 kD蛋白可能与盐藻耐盐机制有关.     

杜氏盐藻和亚心型扁藻混合培养生长的初步研究

在实验室条件下研究了杜氏盐藻和亚心型扁藻在单独培养和相同接种比例混合培养下的生长情况。结果显示,单独培养盐藻的生长经历了3个明显的阶段,生长曲线呈现"S"型;单独培养扁藻与混合培养藻在18 d内还未到达稳定期,仍保持一定的生长态势。混合培养、单独培养盐藻以及单独培养扁藻的最大光密度值(OD680)分别为0.784、0.702和0.765。混合培养藻的生物量(0.841 mg/ml)也稍高于单独培养盐藻(0.582 mg/ml)和单独培养扁藻的生物量(0.819 mg/ml)。试验结果表明,混合培养盐藻和扁藻具有一定的促进藻生长和提高生物量产出的潜力。