鹅生长激素基因外显子单核苷酸多态性分析

以莱茵鹅、四川白鹅、豁眼鹅、皖西白鹅和朗德鹅5个鹅品种为试验材料,根据鸭、鹅生长激素基因序列设计了3对引物扩增第2、第3、第5外显子,用PCR-SSCP方法进行单核苷酸多态性分析,并对不同鹅品种进行群体遗传学分析。结果显示:在鹅GH基因第2外显子上共发现2个单碱基突变位点,第39个碱基处的T→C突变未发生氨基酸变化,为沉默突变;第74个碱基处T→C单碱基突变导致第25个氨基酸由缬氨酸(V)变为丙氨酸(A);鹅群中表现出10种基因型(AA、AB、AC、AD、BB、BC、BD、CC、CD、DD)。统计结果发现:10种基因型在鹅品种间分布存在极显著差异(P0.01);所有鹅品种均处于Hardy-W e inberg平衡状态。群体遗传分析显示:杂合度、有效等位基因数朗德鹅最低,豁眼鹅最高;朗德鹅PIC为0,四川白鹅为中度多态外,其他品种均为高度多态。表明鹅GH基因在不同鹅品种中具有丰富的单核苷酸多态性,可以进一步作为候选基因来分析其与生产性状的相关性。     

贵州黑山羊FSHR基因第1外显子遗传多态性分析

以贵州黑山羊为对象,研究促卵泡素受体（FSHR）基因的遗传多态性。测定表明FSHR基因第1外显子,没有任何突变,显示在15只母羊中的FSHR基因第1外显子661bp核苷酸系列中不存在多态性,本研究为探索该受体基因在繁殖中的作用打下基础。     

贵州黑山羊GDF9基因外显子2的多态性分析

通过对贵州黑山羊GDF9基因第二外显子进行PCR、双向测序、比对,以检测研究其遗传多态性,结果表明：在所有检测样本中均未发现GDF9基因的FecGH突变;仅有2只高繁殖力（3羔以上/胎）母羊在767位点发生了C→T的变异,均为杂合体AB型,导致脯氨酸突变为亮氨酸,突变的发生率为14.29%,而在低繁殖力母羊中均未发现该突变,该突变可能与贵州白山羊的高繁殖力有关。     

萨能奶山羊杂交海南黑山羊效果分析

测定并比较海南黑山羊、萨能奶山羊及其F1B和F1W的体质量与体高、体斜长、胸深、胸宽、胸围、腰角宽等体尺指标,并对海南黑山羊与F1B和F1W的产奶性能做了比较。结果表明:F1B和F1W的体质量分别比海南黑山羊提高5.24%和29.80%,杂交效果显著;与海南黑山羊相比,F1B除体高外其余体尺指标均有不同程度提高;F1W各体尺指标均有较大幅度提高,除体斜长差异不显著外,其余各指标均达到了显著或极显著程度;F1W的产奶性能与海南黑山羊相比有较大幅度提高,杂交效果显著。     

海南黑山羊研究进展与产业发展思路

海南黑山羊是地方特色山羊品种,是海南畜牧业特色优势产业,其产品深受当地、两广及东南亚地区消费者喜爱。近来年,由于近亲繁育,海南黑山羊品种退化。随着社会经济发展,需求增加,其价格不断上涨。本文综述了海南黑山羊的产业现状、研究进展、初步提出了产业发展思路。     

甘南藏羊GH基因第4外显子多态性与肉用性能的相关性分析

为探索GH基因与绵羊肉用性能的相关性,利用PCR-SSCP方法,对甘肃甘南‘欧拉型’、‘甘加型’和‘乔科型’藏羊(共154只)GH基因第4外显子进行了多态性检测,并从其中随机选择62只(‘欧拉羊’22只、‘甘加羊’22只、‘乔科羊’18只)进行肉品质测定及相关性分析.结果表明:甘南藏羊GH基因在第4外显子存在AA和AB 2种基因型,AB型个体在1 286bp处存在T/C的杂合;检测到的多态位点与肉用性能相关性分析表明,‘欧拉羊’的AA型个体的屠宰率和剪切力显著高于AB型个体(P<0.05),但AB型个体的背最长肌在宰后24h时的pH值显著大于AA型(P<0.05),‘甘加羊’与‘乔科羊’不同基因型各指标间均差异不显著(P>0.05).     

贵州黑山羊和黔北麻羊MSTN基因DraI酶切多态性分析

以贵州黑山羊和黔北麻羊为材料,根据山羊MSTN基因序列(GenBank登录号:EF588035)设计1对引物,用PCR-RFLP法对该序列进行多态性分析。结果表明:PCR扩增片段207 bp处存在TTTTA的插入,导致出现1个DraI酶切多态性位点,黑山羊纯合野生型(AA)为优势基因型,杂合型(AB)和纯合突变型(BB)为非优势基因型,A等位基因为优势基因;黔北麻羊纯合野生型(CC)为优势基因型,杂合型(CD)和纯合突变型(DD)为非优势基因型,C等位基因为优势基因。     

海南黑山羊GH1基因nsSNPs功能性预测及生物信息学分析

为了研究海南黑山羊生长性状的分子遗传信息,试验利用GH1基因筛选可能影响海南黑山羊生长性状的功能性突变位点。结果表明在GH1基因外显子1、2、3、4区域共检测到10个SNP位点,有4个错义突变,6个为同义突变。第一外显子350bp处发生的G→A导致氨基酸由原来的甘氨酸（Gly）变为丝氨酸（Ser）,第二外显子739bp处发生G→A突变导致氨基酸由原来甘氨酸（Gly）变为丝氨酸（Ser）,第三外显子1101bp处发生A→G突变导致氨基酸由原来天冬氨酸（Asp）变为甘氨酸（Gly）,第三外显子1154bp处发生C→T突变导致氨基酸由原来精氨酸（Arg）变为色氨酸（Trp）。利用生物信息学方法对nsSNPs进行功能性预测、并进行mRNA二级结构、蛋白质二级结构和三级结构进行分析和建模,预测到Exon2-739G→A（G85S）,Exon3-1120G→A（D129G）、Exon3-1154C→T（R147W）3个突变位点属于有害突变,对蛋白功能有较大影响,可能是导致海南黑山羊个体矮小,生长缓慢的功能性SNP。     

贵州黑山羊促黄体素β基因多态性及其与产羔数的关系

通过对贵州黑山羊LHβ基因序列进行分析,研究贵州黑山羊LHβ基因的多态性及其与产仔数问的关系.结果表明,在贵州黑山羊30只母羊的LHβ基因832 bp核苷酸系列中,共发现2个变异位点,分别位于138 bp和240 bp处,均为同义变异,其中240 bp处碱基由C变成T,且变异前后的平均产仔数相同,而在138 bp处的碱基由G变成C,形成AA和AB 2种基因型,AB基因型的羊比AA基因型的平均产仔数多产1.02只,且差异显著(P<0.01).说明,LHβ基因138 bp住点的多态性与贵州黑山羊繁殖性能之间可能存在相关性.     

海南黑山羊引种和圈养驯化操作技术

根据本场多年饲养经验,总结海南黑山羊引种、隔离、驯化等操作技术,以期能解决养殖户在引种、驯化过程中存在的误区,避免不必要的损失。     

牛MBL1基因启动子区单核苷酸多态性

为研究牛甘露糖结合凝集素1(mannose-binding lectin 1, MBL1)基因启动子区单核苷酸多态性,采用聚合酶链式反应限制片长多态性(restriction fragment length polymorphism, RFLP)、单链构象多态性(single-strand conformation polymorphism, SSCP)及直接测序的方法检测了1 073头中国荷斯坦奶牛、69头鲁西黄牛和24头渤海黑牛启动子区-2194(A>C)、-1446(T>C)、-1330(G>A)三个位点的不同基因型分布。结果表明,在-2194位点和-1330位点处渤海黑牛只检测到两种基因型(AA/AC,GG/GA);而鲁西黄牛群体中在-1330位点处没有检测到AA型。三个品种牛群在该三个位点的优势等位基因相同,分别为A、C、G,频率为A(CH 0.900 1/LYC 0.760 9/BBC 0.937 5 )、C(CH 0.604 8/LYC 0.768 1/BBC 0.625)和(CH 0.725 1/LYC 0869 6/BBC 0.895 8)。三个品种牛的优势等位基因相对保守,需进一步研究分析这3个多态位点与牛生产性状的关系。     

四种牧草饲喂海南黑山羊羔羊育肥效果初报

在精料投喂量相同的情况下,用4种牧草不同搭配比例对3月龄海南黑山羊羔羊进行育肥。结果表明,热研4号王草(Pennisetum×P.americanumcv.ReyanNo.4),热研11号黑籽雀稗(Paspalumatratum.cvReyanNo.11),热研5号柱花草(Stylosanthesguianensiscv.ReyanNo.5)和热研8号坚尼草(Panicummaximumjacq.cvReyanNo.8)在2.35:1.1:0.95:0.6的配比情况下育肥效果较好,与用常规饲草育肥相比差异显著。在牧草饲喂相同的情况下,精料的不同投喂量对羔羊育肥也有一定的影响。结果证实,随着精料添加量的增加,日平均增重也相继增加。但在经济效益方面,每日饲喂300g精料时的育肥利润最高。试验结果可为海南黑山羊羔羊的合理、高效、经济育肥提供科学的依据。     

信阳水牛GH基因多态性与部分生长性状的相关性

采用PCR-SSCP及DNA测序技术,以106头信阳水牛为材料,采集血样,提取基因组DNA,以GenBank公布的牛GH基因序列（NC₀07317）为参照序列,设计PCR引物,对GH基因的第2、3外显子及部分内含子进行了遗传变异检测,并将其多态性与部分生长性状进行了相关分析。结果表明:每个位点的PCR产物经SSCP分析均出现不同的带型,第2外显子存在1处SNP（G413A）,第2内含子存在4处SNPs（G495C,A523C,A541G,G699A）,信阳水牛GH基因的GH-P3位点的多态性与部分生长性状没有显著相关性。     

3个鸡种A-FABP基因单核苷酸多态性的研究

利用PCR—RFLP技术(限制性内切酶为TaqⅠ)检测尤溪麻鸡、鹿苑鸡、隐性白羽鸡3个鸡种的脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(A—FABP)基因第1和第3外显子的单核苷酸多态性(SNP)。结果表明：在该位点上,3个鸡种的A—FABP基因均存在SNP,外来品种隐性白羽鸡以杂合子cc居多,地方鸡种以cc居多,3个鸡种均含有较高频率的等位基因c,其中以尤溪麻鸡最高,而以隐性白羽鸡最低;对第3外显子扩增片段(375bp)进行回收测序,发现在第3外显子1805位存在SNP,尤溪麻鸡与鹿苑鸡c突变为r,的频率(分别为0．7344、0．7188)明显高于隐性白羽鸡c突变为71的频率(0．5156)。A—FABP第1外显子(85位点)的SNP不影响A—FABP的氨基酸序列变化,而第3外显子(1805位点)的SNP影响A—FABP的氨基酸序列变化,由脯氨酸转变为丝氨酸,说明该多态性可能通过A—FABP基因表达水平而影响鸡的肉质。     

德保矮马生长激素基因的克隆与序列分析

克隆和分析德保矮马的生长激素(GH)基因全序列.阳性重组质粒测序表明:德保矮马GH基因碱基序列全长1 922 bp(GenBank登录号为EU939447),包含完整的5个外显子和4个内含子.与纯血马比较,有19个碱基位点突变,其中11个位于外显子区域,有义突变4个,第924位碱基C→T致使第70位氨基酸由Thr→Ile,第1 249位碱基C→T使第112位氨基酸Pro→Leu,第1 287位碱基A→T使第125位氨基酸Ser→Cvs,第1 309位碱基A→C使第132位氨基酸Asp→Ala.以GH编码区构建物种的亲缘进化树,GH基因在进化中比较保守.     

海南黑山羊早期生长发育规律研究

通过对海南黑山羊早期体重的基本统计量、相关系数计算及Logistic生长曲线的拟合,分析了海南黑山羊早期生长发育规律。结果表明:海南黑山羊早期体重的变异都很大,有很大的选择提高空间;海南黑山羊母羊初生、6月龄和周岁体重都严重退化;可以用2月龄体重作为海南黑山羊体重早期选择的指标;海南黑山羊生长曲线为Wt=18.695×(1 0.5822e-0.5043t)-1(R2=0.9910,P<0.01),拐点月龄M=1.0728(32.184d)。     

不同营养水平精料对生长前期海南黑山羊生产性能和血液生化指标的影响

[目的]研究不同营养水平精料对海南黑山羊生产性能和血清生化指标的影响。[方法]选取健康、体重接近的海南黑山羊60只,共分4个处理组,每处理组3个重复,每个重复5只羊,其中1个为对照组(不进行补料),试验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别补饲不同营养水平的3种试验日粮1号料、2号料和3号料,3个试验组精料补充量按照每只羊200 g/d进行补料。[结果]与对照组相比,添加不同水平精料(试验组)对海南黑山羊的末重的影响没有达到显著水平(P0.05),而对海南黑山羊的平均日增重有显著影响(P0.05)。试验Ⅱ组海南黑山羊的平均日增重最高,料重比最低;不同营养水平精料对舍饲生长前期海南黑山羊的血液球蛋白含量的影响达到显著水平(P0.05)。[结论]补饲不同营养水平精料对海南黑山羊的生产性能和血清生化指标产生影响,在补充饲料量相同的情况下以试验Ⅱ组的补饲效果最好,建议给生长前期海南黑山羊补饲2号料。     

基因突变和单核苷酸多态性分析技术新进展

基因突变和单核苷酸多态性分析是确定生物性状与某种遗传变异的关系、探讨生物物种内基因的差异、了解生物种间亲缘和进化的关键技术，对生物群体遗传学、生物分类学研究都有着重要的理论意义和实用价值。对近20年来基因突变和单核苷酸多态性检测技术及应用的研究进展进行了全面概述，特别对20世纪90年代发展起来的几种最新技术进行了详细介绍，并展望了这些技术在农业上的应用前景。