动物病毒受体阻断剂的研究进展

病毒进入宿主机体后,病毒粘附蛋白(VAP)首先与宿主靶细胞膜特异受体结合,被吸附到宿主敏感细胞上,然后通过膜融合等方式侵入细胞中,完成脱囊膜或脱壳并进行复制、转录及装配等增殖过程。许多研究通过不同的途径试图寻找可以阻断病毒吸附的抑制剂,已取得了重要进展。近年来国内外文献表明,硫酸乙酰肝素(HS)是细胞膜上许多病毒的特异受体或者辅助受体,用一些可溶性的肝素,如肝素钠、硫酸软骨素可以特异阻断病毒的吸附和侵入。另外,具有糖结合活性的植物凝集素及一些糖类衍生物可以与细胞膜上的某些病毒特异受体糖蛋白结合,从而不同程度地抑制病毒和宿主细胞的结合。本文对该领域研究成果作一综述,旨在为今后对水产动物病毒阻断剂的研究提供参考。     

动物病毒细胞受体研究及应用

细胞受体是介导病毒入侵的决定因素。本文阐述动物病毒与细菌受体间的关系，一般来说二者之间是一对一，但也有多个病毒共用一个受体或一个病毒有多个受体的情况。病毒与受体的相互作用启动子病毒的生命特环，包括结合和进入的过程；一些寻找病毒受体的直接观察法及分子生物法。介绍了一些已经确定的病毒受体及其在对虾病毒病研究中的应用。     

草鱼成纤维细胞gcngr1基因的表达分析

Ngr1(nogo-66 receptor)是在哺乳类上发现的一种神经元受体,可调节轴突的可塑性并抑制损伤中枢神经系统(CNS)的再生,最新研究还发现它是哺乳动物呼肠孤病毒(mammalian reovirus)的神经受体。草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus,GCRV)可引发草鱼(Ctenopharyngodon idellus)出血病导致高死亡率,开展GCRV受体相关研究可有助于了解病毒的致病机制。该研究在草鱼吻端成纤维细胞(PSF)中克隆到草鱼ngr1 c DNA序列(下文简称为gcngr1),发现其与哺乳动物呼肠孤病毒神经受体基因Ngr1有相似的结构序列;采用q RT-PCR方法检测该基因在PSF细胞的表达情况,结果显示受草鱼呼肠孤病毒(GCRV-GD108株)感染后gcngr1 m RNA的表达量显著上升,与病毒的增殖趋势基本一致;病毒经病毒抗体孵育后再感染PSF细胞,细胞中病毒的增殖水平下降,gcngr1m RNA的表达量也显著下降。该研究结果提示gcngr1与病毒的感染相关,为进一步分析gcngr1是否为GCRV神经元受体提供依据。     

哈尔滨兽医所在国际上首次发现B型禽偏肺病毒细胞受体

正近日,由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所王笑梅研究员和高玉龙研究员指导的博士研究生贠炳岭在《生物化学(J Biol Chem)》杂志上发表最新成果,在国际上首次鉴定出B型禽偏肺病毒的细胞受体。禽偏肺病毒入侵宿主细胞的前提是病毒囊膜和细胞膜融合在一起,这一过程是由细胞受体介导的。尽管国际上多个团队尝试鉴定该病毒的细胞受体,但均未成功。近年来,哈尔滨兽医所禽免疫抑制病创新团队在该项研究中取得了突破性进展。通过生物信息学分析结合     

鳜脑组织细胞系的建立及其病毒敏感性研究

鱼类细胞是开展鱼类病毒分离鉴定、功能基因分析以及生物制品制备等研究的重要物质基础。鳜(Siniperca chuatsi)是深受养殖者和消费者欢迎的养殖品种。随着鳜鱼养殖产量的逐年增加,其病害问题尤其是病毒病问题也日趋严重,但是,可用于鳜鱼病毒分离和基因功能分析的鳜细胞系缺乏。本研究采用组织块消化法,对来源鳜脑组织的细胞进行原代培养,建立了鳜脑组织细胞系,命名为MFB。MFB细胞在28℃含10%胎牛血清的L-15中已稳定传代超过70次,第25代鳜脑组织细胞的染色体众数为56。采用免疫荧光细胞化学技术(β-tubulin和Neu-N)鉴定MFB细胞的神经元纯度,结果显示,培养的MFB细胞为神经元类细胞。病毒敏感性实验结果显示,鳜蛙虹彩病毒(MFRaIV)、大口黑鲈蛙虹彩病毒(LMBRaIV)和大鲵虹彩病毒(GSIV)均可在MFB细胞中产生典型细胞病变效应,病毒滴度分别为108.68±0.12、108.36±0.15、1010.15±1.85 TCID50/mL。使用脂质体Lipofectamine®2000将pEGFP-N1转入MFB细胞,转染效率可达20%。本研究建立的鳜脑组织细胞系不仅对多种蛙虹彩病毒敏感,而且转染质粒效率较高,为鳜病毒性病原的分离及基因功能研究奠定了前期基础。     

我国科学家首次发现B型禽偏肺病毒细胞受体

正近日,由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所王笑梅研究员和高玉龙研究员指导的博士研究生贠炳岭在《生物化学(J Biol Chem)》杂志上发表最新成果,在国际上首次鉴定出B型禽偏肺病毒的细胞受体。该项研究筛选并确定了整合素αvβ1是B型禽偏肺病毒的细胞受体。受体重建实验进一步证实整合素αvβ1能够介导禽偏肺病毒感染非易感细胞     

鱼类肿瘤坏死因子基因和受体的研究进展

肿瘤坏死因子(Tumer nerosis factor,TNFα)是机体抵抗寄生虫、细菌和病毒入侵感染时的一种重要的介质,而且TNFα在机体内还起着其他治疗方面的功能,包括抗肿瘤、休克和胚胎发育等。TNFα主要由几种免疫细胞产生,如单核细胞或巨噬细胞、天然杀伤(NK)细胞、嗜中性白细胞和激活的B细胞等。TNFα的许多生物学活性都是通过与细胞膜表面的受体(TNFRI)结合后而发挥作用的。随着分子生物学技术的发展,基因克隆技术的完善,鱼类免疫学研究取得了显著的进步,尤其是TNFα基因自2000年后相继在几种鱼类中被克隆测序并进行了表达方面的研究,因此本文就肿瘤坏死因子基因及受体的功能及近来在鱼类中的研究概况进行了综述。     

i大鲵病毒性出血病细胞培养灭活疫苗研制成功

9月下旬,中国水产科学研究院长江水产研究所鱼类病害研究室与鱼类养殖与育种研究室的科研人员在前期成功分离大鲵病毒性出血病病原——大鲵虹彩病毒的基础上,又成功研制出大鲵病毒性出血病细胞培养灭活疫苗。这项研究已经建立了细胞大规模培养、病毒大量增殖、病毒灭活的方法,灭活疫苗已经通过细菌检验、细胞培养安全性试验与鱼体安全性试验。疫苗的免疫保护效力试验正在进行中。     

鱼类的干扰素系统及干扰素功能

干扰素系统是机体对抗病毒感染的一道重要防御系统,它与细胞免疫、体液免疫及其他非特异性免疫协同作用抵抗病毒的侵染。在干扰素系统中产生的干扰素是一种广谱抗病毒剂,其作用是通过对细胞表面受体作用使细胞产生抗病毒蛋白,抑制病毒在宿主细胞中的复制。还可增强自然杀伤细胞（NK细胞）、巨噬细胞和T淋巴细胞的活力,从而起到免疫调节作用,增强抗病毒能力,在一定程度上还影响细胞生长和分化等多种生物活性。本文将对鱼类的干扰素系统及干扰素功能作综述报道。     

硬骨鱼类鳃黏膜免疫相关分子的研究进展

鳃为鱼类重要的呼吸器官，是鱼类进行离子交换、酸碱调节和含氮废物排泄的重要结构基础，也是鱼类重要的外周黏膜免疫器官之一，在抵御病原微生物侵染过程中发挥重要的免疫屏障作用。当前，硬骨鱼类鳃黏膜免疫反应是研究热点之一。本文首先对硬骨鱼类鳃的结构和特点进行分析，之后综述了抗菌肽、干扰素、白细胞介素、Toll样受体、补体等先天性免疫相关分子以及T细胞受体和免疫球蛋白等适应性免疫相关分子在硬骨鱼类鳃黏膜中的表达规律、分子功能，最后探讨了化学因素(重金属、杀虫剂等)、生物因素(细菌、病毒、真菌、和寄生虫等)以及营养物质和疫苗等对硬骨鱼类鳃黏膜结构的影响，以期为深入研究鳃在鱼类黏膜免疫反应中的角色和应答机制提供指导，为硬骨鱼类病原性疾病的免疫防控策略的制定提供理论基础。     

斑点叉尾鮰病毒囊膜蛋白ORF6在昆虫细胞中的表达

为构建基于杆状病毒表达系统的CCV新型亚单位疫苗,将CCV的囊膜蛋白基因ORF6克隆至杆状病毒转座载体pFastBacTM 1质粒中,并将阳性重组转座质粒转化进含穿梭载体Bacmid的感受态细胞DH10Bac中,获得重组子rBacmid-ORF6。在脂质体介导下将该重组子转染sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒AC-ORF6。AC-ORF6感染的sf9昆虫细胞,经超薄切片电镜观察,可见重组杆状病毒呈多粒包埋,经间接免疫荧光、Western-blotting检测,CCV的ORF6蛋白可以在感染了AC-ORF6的sf9细胞中表达。研究表明,获得了插入ORF6基因的重组杆状病毒,并且该基因可以在重组杆状病毒介导下在昆虫细胞中表达,从而为基于CCV ORF6的杆状病毒亚单位疫苗研究奠定了基础。     

Host tropism of infectious salmon anaemia virus in marine and freshwater fish species

The aquatic orthomyxovirus infectious salmon anaemia virus (ISAV) causes a severe disease in farmed Atlantic salmon, Salmo salar L. Although some ISA outbreaks are caused by horizontal transmission of virus between farms, the source and reservoir of the virus is largely unknown and a wild host has been hypothesized. Atlantic salmon are farmed in open net‐pens, allowing transmission of pathogens from wild fish and the surrounding environment to the farmed fish. In this study, a large number of fish species were investigated for ISAV host potential. For orthomyxoviruses, a specific receptor binding is the first requirement for infection; thus, the fish species were investigated for the presence of the ISAV receptor. The receptor was found to be widely distributed across the fish species. All salmonids expressed the receptor. However, only some of the cod‐like and perch‐like fish did, and all flat fish were negative. In the majority of the positive species, the receptor was found on endothelial cells and/or on red blood cells. The study forms a basis for further investigations and opens up the possibility for screening species to determine whether a wild host of ISAV exists.     

我国鲍养殖病害研究进展

本文综述了我国鲍养殖病害的现状，流行病学、病原学、诊断和防治等方面的最新研究进展。近来在病毒和细菌性病原研究方面取得一些进展，一些常见暴发性传染病的致病原得到了确认，但有关这些病原的分子生物学特性、快速诊断方法以及有效的防治方法等方面尚等深入研究。     

鳗鲡疱疹病毒的分离与鉴定

为获知鳗鲡"脱粘败血病"与病毒的关系,实验用蔗糖密度梯度离心的方法从发病的欧洲鳗鲡内脏器官组织匀浆液中纯化了病毒粒子,负染后利用电镜观察;进一步用EO细胞对病毒进行了分离、培养,并对感染病毒的细胞进行超薄切片,电镜观察;然后,提取病毒DNA,利用鳗鲡疱疹病毒的PCR检测方法对其进行了鉴定。结果显示,接种匀浆上清液的EO细胞出现细胞融合的病变效应;分离病毒的病毒粒子具囊膜,大小约为200 nm;从感染病毒的细胞上清液DNA中扩增出特异性条带,序列测定与比对分析表明,该序列与鳗鲡疱疹病毒欧洲株(AngHV-1)的序列完全一致。研究表明,利用EO细胞分离了一株鳗鲡病毒,经形态观察和DNA分析,确认该病毒为鳗鲡疱疹病毒,命名为AngHV-FJ。该研究为深入开展鳗鲡疱疹病毒的致病机制及鳗鲡"脱粘败血病"的防控研究奠定了重要基础。     

口蹄疫的研究进展

口蹄疫是由口蹄疫病毒感染引起的一种急性、热性、高度接触性传染病,该病以流行快、传播广、发病急、危害大为特征,对我国乃至世界畜牧业生产带来极大的威胁。现就口蹄疫病毒的发现,病原特征、流行病学、临床症状、防治措施、疫苗研究等方面进行全面阐述,以供同行参考。     

The effectiveness of the paramunity inducer Baypamun (PIND-ORF) for the prevention and metaphylaxis of an experimental infection with the infectious bovine rhinotracheitis virus in cattle

Efficacy of the paramunity inducer Baypamun (PIND-ORF) was evaluated by an IBR challenge trial in cattle, as one model for infectious diseases in bovine. Prophylactic treatment with Baypamun protected cattle against manifestation of clinical symptoms after experimental IBR infection. The degree of protection depended on the time between paramunization and challenge infection. Even in metaphylactically paramunized cattle Baypamun reduced the IBR symptoms. In correlation to the reduction of clinical symptoms paramunization also reduced virus excretion by more than 99% in treated cattle compared to non paramunized animals. The induction of interferon following IBR infection was investigated in paramunized cattle. Application of Baypamun enabled treated animals to react faster with interferon synthesis following IBR infection than control animals did. The demonstration of the status of paramunity following Baypamun application in cattle provides a concept in the prevention of infectious disease in the practice.     

Inhibition of infectious pancreatic necrosis virus infectivity by extracts of rainbow trout, Salmo gairdneri Richardson, tissue

Abstract. Extracts of healthy rainbow trout liver, kidney, spleen and whole fry inhibited plaque production of infectious pancreatic necrosis virus (IPNV) in cell cultures. The mode of inhibition is not known, although it appears not to be manifest at the cellular level, as pre-treatment of the cell cultures with tissue extracts did not inhibit plaque production. Any effect on the virus itself was not permanent as the inhibition could be mitigated by treatment of virus/extract mixtures with 1,1,2-trichloro-1,1,2-trifluoroethane. The inhibition may be caused by prevention or reduction of virus attachment to the cell surface or, alternatively, the tissue extract may cause aggregation of the virus and thereby reduce the number of available infectious units. The inhibitory effect is also lost by dilution of the extract, reinforcing the claim that adequate dilutions of fish extracts prior to attempted virus isolation are necessary, especially for the detection of carrier fish.     

鱼类的鳃病及其防治方法

引起鱼类鳃病的病原体主要包括以下几种：细菌、病毒、霉菌、原生动物、单殖吸虫和甲壳类。本文对这些疾病的症状作了描述，并提出了综合防治措施。     

PCR技术在对虾病毒病检测上的应用及研究进展

聚合酶链式反应PCR具有特异性强、灵敏度高、快速简便及重复性好等优点,多种临床样品均可用PCR进行检测,现已开发出多种PCR新技术,用于生物学科的各个领域。本文对PCR技术的原理及其在动物疫病尤其是对虾病毒病的检测中的应用及研究进展做一综述,以期对对虾病毒病的诊断与防治有所帮助。