实验性免疫应激雏鸡免疫器官抗体生成细胞的动态变化研究

本试验用新城疫I系苗肌肉注射 2周龄健康雏鸡 ,剂量是 2头份 /只 ,复制免疫应激模型。通过对免疫应激后第 1、 3、 5、 1 0、 1 5、 2 0d的法氏囊、胸腺、脾脏和盲肠扁桃体各器官组织病理学、活性B淋巴细胞和IgG、IgM抗体生成细胞的动态变化研究 ,结果发现 :(a)与对照组相比 ,各器官中浆细胞、巨噬细胞 (MΦ)、淋巴细胞数量增多 ,而且脾脏、盲肠扁桃体中的淋巴小结数增多。 (b)各免疫器官中活性B淋巴细胞在第 5天开始显著增多 ,并且在第 1 0天达到高峰 (P <0 0 1 )。 (c)各免疫器官中IgG抗体生成细胞在应激第 1 5天达到高峰 ,呈持续增长趋势 ;IgM抗体生成细胞法氏囊在第 5天 ,脾脏和盲肠、扁桃体在第 1 0天达到高峰 ,以后缓慢下降 ,且仍显著高于对照组(P <0 0 1 )。这表明在本试验的免疫应激条件下体液免疫功能未被抑制。     

新城疫弱毒联苗对雏鸡新城疫免疫效果的观察

本试验雏鸡在相同饲养管理条件下,14日龄时分别用N79单苗、N79-H120联苗、N79-IBD(三价)联苗接种对照组(ND)、ND+IB组、ND+IBD组试验雏鸡,接种后的第7天、14天和21天,通过HA和HI实验,随机抽样测定其血中抗新城疫抗体的含量及其消长,发现N79-H120联苗、N79-IBD(三价)联苗产生的抗鸡新城疫的抗体效价明显低于N79单苗,差异极显著(P＜0.01).     

传染性法氏囊病Vero细胞灭活疫苗的研究

传染性法氏囊病Ｖｅｒｏ细胞灭活疫苗的免疫试验表明,用０．５和０．８ｍＬ／只剂量分别肌肉接种。１０￣１４日龄首免,８ｄ后可检出病毒特异性抗体,１４ｄ抗体Ｐ／Ｎ值为３．８￣５．６。病毒中和抗体滴度为１：３２￣１．６４;２１ｄＰ／Ｎ值为６．３￣６．８,中和抗体滴度平均为１：１２０４￣１：２０４８,此时血清抗体对鸡的保护率为８５．７％。３０￣３５日龄二免,１４ｄ后Ｐ／Ｎ值５．０￣５．２,中和抗体滴度高达１     

猪流行性腹泻病毒感染Vero细胞的细胞病理学研究

对感染猪流行性腹泻病毒(PEDV)的Vero细胞进行透射电镜观察发现:在病毒感染初期(6h),尽管细胞结构完整,部分细胞线粒体、粗面内质网扩张,胞浆出现空泡;随着感染时间的增长(12h),病毒粒子逐渐增多,细胞质内出现较多空泡状结构,病毒粒子先后出现在胞浆及细胞核内部;感染24h后,病毒粒子数目显著增多,空泡化明显,出现细胞核分解,细胞融合更加明显;感染最后阶段(48h),空泡化严重,核质固缩,细胞间大量融合,病毒粒子出芽排出。以上结果,为揭示猪流行性腹泻病毒的感染与致病机制积累了数据。     

两种鸡大肠杆菌油佐剂灭活苗对雏鸡免疫效果的比较

为了探讨用鸡胚和普通培养基增殖的大肠杆菌在免疫效果方面有无差异,用致病性大肠杆菌地方菌株与标准菌株混合,经鸡胚及固体培养基增殖后,制成两种油佐剂灭活疫苗,分别免疫10日龄雏鸡,免疫后21d抗体达到峰值,抗体在3log2以上维持35d以上,免疫后42d用混合菌液对两种菌苗免疫组分别进行攻击,鸡胚苗免疫组对混合菌液的攻击保护率为93.3%,常规培养苗免疫组对混合菌液的攻击保护率为83.3%。     

Vero细胞体外培养条件的优化

为了优化一种适合Vero细胞体外快速生长,且生长状态良好的培养条件,笔者对比了2种不同培养条件下的细胞生物学观察结果,Vero细胞经台盼兰活体染色,改进培养条件后细胞活体率为97.8%,比原始培养条件下活体率明显增高,且该方法具有简便、易行、成本低等优点,值得进一步推广应用。     

传染性法氏囊病Vero细胞灭活疫苗的研究

传染性法氏囊病Ｖｅｒｏ细胞灭活疫苗的免疫试验表明,用０．５和０．８ｍＬ／只剂量分别肌肉接种。１０～１４日龄首免,８ｄ后可检出病毒特异性抗体,１４ｄ抗体Ｐ／Ｎ值为３．８～５．６．病毒中和抗体滴度为１∶３２～１∶６４;２１ｄＰ／Ｎ值为６．３～６．８,中和抗体滴度平均为１∶１０２４～１∶２０４８,此时血清抗体对鸡的保护率为８５．７％．３０～３５日龄二免,１４ｄ后Ｐ／Ｎ值５．０～５．２,中和抗体滴度高达１∶２０４８～１∶８１９２,对鸡的保护率为１００％．二免后１１２ｄ（１４７日龄）抗体仍保持较高水平,Ｐ／Ｎ值为３．２～３．４．野外试验表明,这种疫苗安全、有效。在３０００只蛋鸡群平行试验,灭活苗比活苗抗体水平高出０．２个光密度值,抗体持续期长。接种灭活苗的鸡群５个月内未发生此病。     

牛环形泰勒焦虫裂殖体胶冻细胞苗对水牛的免疫效果观察

牛环形泰勒焦虫裂殖体胶冻细胞苗对水牛的免疫试验表明：参试牛安全性１００％,有效保护率达９９．９６％,全部顺利度过６～８月焦虫病流行季节,取得了满意的效果。     

实验性免疫应激对雏鸡体液免疫功能的影响

根据鸡新城疫I系疫苗 (NDI)免疫剂量不同 ,将 2 0 0只 2周龄健康雏鸡随机分成 4组 ,检测免疫器官中IgG抗体生成细胞的动态变化及接种后ND抗体消长的变化。结果 :①试验组雏鸡的胸腺、法氏囊、脾脏、盲肠扁桃体中IgG抗体生成细胞持续增多 ,第 2 1d试验组与对照组差异极显著 (P<0 .0 1)。②接种后 ,试验组ND抗体从第 3d开始下降 ,第 5d降到最低 ,与对照组相比差异极显著(P <0 .0 1) ,第 9d试验组ND抗体开始回升 ,第 2 1d试验组极显著高于对照组     

Vero细胞两阶段扩大培养工艺研究

两阶段珠到珠转移方法（包含最初8h的间歇搅拌和接下来的连续搅拌阶段）可以实现Vero细胞的扩大培养,按照新老载体2：1的比例放大,载体空载率能从最初的66．7％降到3．5～6．3％。在间歇搅拌阶段,转速对新载体建桥率没有显著影响,但在连续搅拌阶段,60r／min转速仅能使载体空载率降低到28．9％,甚至比35r／min连续搅拌产生的空载率还高8％。在新老载体1：1放大过程中,5eg／mL的胰酶不能促进细胞在载体Cytodex-3间的转移,最后的载体空载率仍高达10．8％。这些研究结果为Vero细胞通过珠到珠转移方式在其他系统或以更大扩增倍数进行的放大培养过程提供了重要信息。     

串联型黄色荧光蛋白在Vero细胞中的表达

试验旨在探索串联型黄色荧光蛋白(YFP)在真核细胞中的表达,以便于构建用于球虫转基因研究的载体.用PCR方法克隆了不含鼠鸟氨酸脱羧酶PEST序列的目的DNA片段YFP-1和YFP-2,并将其依次连接于原始载体pd2EYFP-N1以替换d2EYFP报告基因,将重组载体电转染Vero细胞,观察荧光情况.结果显示,重组载体pYFP-YFP-N1能够在Vero细胞中正常表达,串联型YFP基因可用于球虫转基因中载体构建.     

MD疫苗免疫增强剂对HVT雏鸡免疫活性细胞的影响

用鸡马立克氏病疫苗免疫增强剂与马立克氏病火鸡疱疹病毒苗（HVT）同时免疫雏鸡，然后观察免疫器官中免疫活性细胞（ANAE^T淋巴细胞，PMG^ 浆细胞）的变化情况，结果显示：1日龄雏鸡HVT免疫后，加MD免疫增强剂雏鸡免疫器官中的T淋巴细胞和浆细胞数同相应不加增强剂的雏鸡相比呈现明显的增多，尤其是在第7天和14天这种增多表现更突出。     

人参水溶性蛋白对Vero细胞增殖影响的研究

采用MTT法测定不同浓度人参水溶性蛋白对非洲绿猴肾细胞(Vero)增殖的影响。研究表明,人参水溶性蛋白对Vero细胞增殖具有抑制作用(P<0.001)。     

雏鸡注射佐剂后免疫活性细胞的测定

<正> 我们在给1日龄雏鸡腹膜腔内注射稳定的油包水佐剂,预防雏鸡对白痢病的自然感染获得成功以后,又对24只2日龄雏鸡进行了试验。在雏鸡腹膜腔内注射稳定的油包水佐剂,经一定时间后,应用E—玫瑰花环形成试验,测定鸡体内T淋巴细胞的变化情况,并用腹水和实质脏器涂片测定其它免疫活性细胞的变化情况,以探明前者试验结果的内在原理。     

鸡新城疫(ND)免疫的方法及程序

鸡新城疫又称亚洲鸡瘟或伪鸡瘟,是以呼吸困难、下痢、神经紊乱、黏膜和浆膜出血为主要特征的病毒性疾病.主要感染幼雏和中雏,2年以上鸡感染性低.近年来,由于免疫程序不当,或有其他疾病存在,抑制了ND抗体的产生,而引起免疫鸡群发生ND并呈现非典型症状和病变,有时在产蛋鸡仅表现为产蛋下降,给该病的诊断带来不利因素.     

日粮加碘对雏鸡ND免疫效果的影响

应用血凝抑制试验、醋酸纤维素薄膜电泳法和α－乙酸萘酯酶染色法以及淋巴细胞转化实验等技术，研究日粮加碘（５ｘ１０￣（－６）和５０ｘ１０￣（－６））对雏鸡免疫功能有何影响的问题。结果表明，适当提高日粮碘含量对维鸡体液免疫未见明显影响，但对细胞免疫有较为明显的增强作用。     

新孢子虫速殖子灭活苗对沙鼠的免疫保护性试验

为验证2种新孢子虫速殖子灭活苗的免疫保护作用,以沙鼠为试验动物,用2种不同佐剂疫苗对沙鼠进行免疫,21 d后用新孢子虫速殖子(1×106/只)进行皮下攻毒,观察死亡情况.试验结果表明,第Ⅰ种疫苗保护率为85%(17/20),第Ⅱ种疫苗保护率为80%(16/20),并在死亡沙鼠组织DNA均扩增出新孢子虫特异的基因片段.     

日粮锌含量对雏鸡ND免疫效果的影响

将120只1日龄商品代迪卡鸡随机分成A、B、C3组,每组40只,并分别用玉米——豆饼型基础日粮(含锌76×10~(-6))和添加100×10~(-6)及200×10~(-6)锌的饲料进行饲喂,然后用NDⅡ系疫苗免疫接种(据HI抗体滴度的下降情况确定接种时间),间隔一定时间,分别取样,检测各项指标。结果表明,基础日粮中加100×10~(-6)和200×10~(-6)锌能提高血清HI抗体滴度和γ球蛋白百分含量;也能增强淋巴细胞的转化能力和提高外围血酯酶染色活性T细胞的百分含量。