饵料、盐度对金乌贼幼体生长的影响

针对金乌贼（Sepia esculenta Hoyle）幼体培育困难的技术问题,以不同的饵料组合投喂金乌贼幼体。试验结果显示,卤虫幼体、配合饲料、糠虾、小虾、冰鲜鱼虾饵料组能满足其正常生长营养需求,60d成活率可达67％。通过金乌贼幼体在不同盐度水体培育下成活率的测定,确定其可在盐度24～37的水域正常存活。     

中华绒螯蟹幼体副溶血性弧菌病的病原分离与药敏试验

受副溶血性弧菌感染的河蟹蚤状幼体的症状为：幼体游动无力，头胸甲发红，色素加深，背刺常折断，摄食减少，肠胃空；感染副溶血性弧菌大眼幼体的症状为：幼体游动无力，不能逆水游动、甚至平游，上下翻“筋头”，体表发红，有时附肢也红，色素加深，眼柄上色素细胞扩大呈树枝状。一、材料与实验方法１．病原菌分离及培养基直接从育苗场采得发病的中华绒螯蟹蚤状幼体，在验室内将中华绒螯蟹幼体用载玻片压碎，在显微镜下见大量的病原菌，用接种环挑取病原菌在培养基上划培养２４小时后再进一步进行分离、提纯病原菌，置于温箱（２５℃）中培…     

副溶血弧菌引起中国对虾红腿病的组织病理及防治

用５２种药物对中国对虾红腿病致病菌－副溶血弧菌进行药物敏感试验,结果表明：氯霉素,复方新诺明,红霉素,痢特灵等抑菌能力最强。选择氯霉素,复方新诺明作为预防和治疗的首选药物,结果,用二者制作药饵,预防效果好,但治疗效果较差,用二者药浴效果也差,池塘生产试验证明,二者可有效控制病情,组织病理显示,病虾心脏,鳃,肝组织均可见大量细菌。     

文蛤病原菌(溶藻弧菌)的分离与性状及病文蛤组织的电镜观察

近年来,江苏南部沿海在8～10月份常发生文蛤大批死亡,从病文蛤体内分离到病原菌,经人工感染试验得到证实。病原菌为革兰氏阴性短杆菌,以极生单鞭毛运动,在TCBS琼脂平板上形成黄色大菌落,在固体培养基上能游动。发酵葡萄糖产酸不产气,精氨酸—碱反应阴性,赖氨酸、鸟氨酸脱羧阳性。在无盐蛋白胨水中不能生长,在10％NaCl 蛋白胨水中生长良好。在43℃下能正常繁殖。对弧菌抑制剂0/129(150μg)和新生霉素(5μg)敏感,被鉴定为溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus Sakazaki)。病文蛤超薄切片的电镜观察表明,肠上皮及肝组织被细菌侵袭。病原菌在肠上皮细胞质中增生,形成上百个细菌的集群。上皮细胞核变形,被挤向一侧,线粒体内嵴模糊,部分上皮细胞微绒毛的结构被严重破坏,细菌周围的组织被腐蚀成空斑。     

鸡大肠杆菌病的病原分离鉴定及病理组织学观察

大肠杆菌属于肠杆菌科的埃希菌属的兼性厌氧菌,是革兰氏阴性无芽孢,散在或成对存在的的直杆菌。大肠杆菌靠鞭毛运动,大多数都有一种菌毛,很少数有2种或多种菌毛的菌株。一般没有明显可见的荚膜,但几乎都有微荚膜。在普通肉汤培养基上可见直径约3 mm的圆形菌落。对鸡大肠杆菌病的病原分离鉴定及病理组织学观察进行介绍。     

虾类肌肉白浊病病原和病理的研究进展

本文针对虾类肌肉白浊病易感染的罗氏沼虾、凡纳滨对虾、中国对虾进行了分析。从病毒、细菌、寄生虫和环境因素方面,总结了近十几年来虾类肌肉白浊病的病原和病理特征。归纳了虾类肌肉白浊病的流行病学、检测方法及综合防治。     

拟态弧菌感染黄颡鱼的动态病理损伤及病原分布研究

以1.0×106CFU·m L~(-1)拟态弧菌(Vibrio mimicus)浸浴感染黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco),于第0、第4、第8、第16、第24、第36、第48、第60、第72小时剖杀取样,研究病理损伤及病原菌的体内动态分布。结果显示,皮肤肌肉、鳃、肠道出现病变最早,其中皮肤肌肉损伤最严重。第16小时表皮变性、坏死,鳃上皮肿胀,肠绒毛水肿;第24~第48小时表皮坏死、脱落,真皮严重出血,肌纤维变性、坏死,鳃出血,上皮局部坏死,肠上皮变性与灶性坏死;第48~第72小时皮肤肌肉坏死更严重,形成溃疡灶,鳃灶性坏死。肾、肝、脾与心36 h后相继出现不同程度的淤血、出血,变性和灶性坏死。q PCR检测发现,第4小时即在鳃、肠、皮肤肌肉检出病菌,细菌含量分别为1.3×102CFU·mg~(-1)、2.6×102CFU·mg~(-1)、4.7×102CFU·mg~(-1);鳃与皮肤肌肉中菌量随时间延长而增加,第72小时皮肤肌肉中菌量达到4.5×107CFU·mg~(-1);第24小时后相继在肾、肝、脾、心检出病菌,菌量介于1.9×10~4.7×102CFU·mg~(-1)之间。结果表明皮肤、鳃和肠道是病菌的入侵位点,并在体内多组织、器官分布。     

细菌QJ2对对虾病原性哈维氏弧菌的拮抗作用

对气味黄杆菌(Flavobacteria ordoratum)QJ2及其去细胞上清液(CFS)对对虾病原性哈维氏弧菌(Virio harveyi)Z3G2、E022的拮抗作用进行了研究.QJ2的CFS对病原菌表现显著的拮抗性能,在6h内使数量为105 ～106cfu@mL-1的病原菌Z3G2、E022均降为0.经热、酸碱、蛋白酶处理的CFS,抑菌活性均有不同程度下降,结果为经60℃处理60min的CFS,经6h使Z3G2细菌数降为0,经15min使E022数量降为最低,为初始菌数的 63.0%经100℃处理10min,CFS使Z3G2和E022数量分别在1h和15min降为最低,各为初始菌数的23.7%和 72.1%;经pH4作用30min,CFS使Z3G2和E022数量分别在15min和1h降为最低,各为初始菌数的88.3%和 15.9%,而经pH12处理30min后,CFS没有使病原菌数下降,但使病原菌以比对照组细菌低的速率缓慢上升; 经蛋白酶K于37℃作用60min后,CFS在15min时使Z3G2和E022数量降为最低,各为初始菌数的15.0%和 66.1%.在人工水体中,QJ2活菌对病原菌也具有显著的拮抗性能,在24h内使Z3G2、E022数量下降到最低值,各下降了1.6、2.4 Log1o数量级.结果表明QJ2产生的抗性物质为细菌素,对病原性哈维氏弧菌具有良好的拮抗作用.     

罗氏沼虾肌肉白浊病的病原和组织病理

对患肌肉白浊病的罗氏沼虾进行细菌分离、寄生虫检查、组织病理观察以及虾池的水质分析和疾病的流行病学调查,排除了细菌、寄生虫以及水质环境因素造成该病的可能性,并发现病症多发生在体长0 8～3cm的幼虾中,而体长3cm以上的虾病症明显减轻。病虾的显微和亚显微组织病理观察发现,病虾腹部白浊的肌肉组织肌纤维肌浆内存在嗜碱性包涵体,肝胰腺、血细胞、心脏和鳃组织细胞胞浆内也有嗜碱性包涵体出现,包涵体内有大量以晶格状排列、无囊膜的二十面体球状病毒颗粒,直径为(23.6±3.8)nm(n=40)。在包涵体外的胞浆内,尤其在白浊肌肉组织肌纤维肌浆内也分布有大量病毒。心脏和鳃组织出现不同程度的变性,肌肉组织、肝胰腺、血细胞除变性外还出现坏死;肌肉组织病变尤为严重,肌肉白浊症状是肌肉组织变性、坏死的结果。将病虾白浊肌肉组织以口服方式感染健康虾,健康虾出现与自然发病虾一样的症状,发病率和死亡率亦与自然感染病虾相近,表明上述二十面体球状病毒是罗氏沼虾肌肉白浊病的病原。     

金乌贼荧光标志方法的研究

建立一种简单实用的标志方法,对更好地评价金乌贼增殖放流效果和渔业资源现状非常重要.以金乌贼为实验对象,利用荧光物质茜素络合指示剂(Alizarin Complexone,ALC)浸泡金乌贼幼体,对其内壳进行标志,所用荧光染色剂浓度为(6.0～8.0)×10-3%,浸孢染色时间24 h.将标志组和对照组的金乌贼幼体分别暂养于1.5 m×1.5 m×1.5 m水泥池30 d,后将暂养的幼体放养于面积为2 667 m2的室外土池,并在60 d后,将平均胴背长达91.4mm(对照组)、87.6 mm(标志组)金乌贼幼体移入室内水泥池越冬,整个实验历时210 d.实验期间,分别在标志后15、30、45、60、90、210 d对金乌贼进行随机取样,解剖出内壳观察标志色保留状况并对金乌贼生长发育及存活率进行测量.结果显示,标志金乌贼的成活率为100%;方差分析显示,标志组和对照组金乌贼的生长发育差异不显著(P0.05);210 d后内壳骨针部仍清晰保留初染时的半椭圆形淡紫色圆圈;实验所采用的ALC内壳标志方法操作容易,可一次性大量进行标志处理,鉴别简单,无需借助其它仪器,肉眼便可直接观察到标志色,并且标志色保持率高,保留时间长,是一种理想的标志金乌贼的方法.     

青岛近岸金乌贼繁殖群体形态特征及遗传分化

为探究青岛近岸金乌贼(Sepia esculenta)繁殖群体结构及其结群历时长、产卵期内亲体规格递减的结群现象,运用形态学度量方法结合微卫星分子标记技术,对青岛薛家岛近岸前、中、后3个不同洄游时期金乌贼繁殖群体的形态特征和遗传分化水平进行统计分析,探究其亲缘关系并量化差异水平。主要结果如下:形态学主成分分析(PCA)结果显示,前3个主成分的累积贡献率为60.067%,低于85%;判别分析(D_A)结果显示, 3个时期繁殖群体的判别准确率介于66.7%～82.1%,两者的散点图结果一致,均显示3个群体未明显占据不相重叠的区域。微卫星标记结果表明, 3个时期繁殖群体的遗传距离D_A介于0.12～0.16,群体遗传分化指数为0.0014～0.0064,利用Structure判断最佳理论组群为1,表明其亲缘关系较近。综合分析认为,虽青岛近海不同洄游时期金乌贼繁殖群体的规格差异较大,但形态学参数差异较小,遗传距离较近且遗传分化水平较低(F_(st)0.05),未呈现明显的群体分化。     

养殖金乌贼卵子发生和卵巢发育的组织学观察

为了深入了解金乌贼(Sepia esculenta Hoyle)的生殖生理特性,本研究采用解剖学方法及组织切片技术,观察和描述了金乌贼卵巢形态和卵子各个时相结构特征及其变化规律。研究结果表明,金乌贼卵子发生过程的主要特征表现为,卵子成熟之前滤泡细胞一直存在且伴随着其结构变化,滤泡细胞解体与卵黄物质出现同步发生,卵黄物质从无到有再到大量积累直至充满整个卵母细胞,细胞核则随着滤泡细胞内折逐渐发生偏移直至最后消失。研究还发现金乌贼卵巢内卵子发生不同步且形态差异显著,未成熟的卵子粘连在卵巢基质上,依次环布于卵巢基质周围,越靠近中心,卵母细胞发育程度越低;成熟后的卵子游离在卵巢腔中,经过输卵管排出体外。根据卵巢内卵子的大小和形态、滤泡细胞形态及卵黄形成情况,将金乌贼卵子发生分为增殖期(卵原细胞期)、小生长期(无滤泡期,单层滤泡期,双层滤泡期)、大生长期(滤泡内折期,卵黄形成早期,卵黄形成晚期)、成熟期、退化吸收期共5个时期9个时相。卵巢发育分期则是以卵子时相为基础,根据卵巢的外观形态、性腺系数以及切面上优势卵子的时相,把卵巢分为Ⅰ~Ⅵ共6个时期。金乌贼卵巢发育和卵子发生的动态观察与描述,对丰富头足类繁殖生物学理论及提升人工繁殖技术都具有重要意义。     

金乌贼纳精囊组织结构及其精子的储存和利用

为揭示金乌贼精子进入纳精囊及产卵过程中的精子利用方式,丰富金乌贼繁殖生物学研究内容,本研究利用实验生态学和组织切片技术,检测了交配后不同时间段雌性口膜表面精子囊和纳精囊中精子数量的变化,观察分析了雌性金乌贼纳精囊的组织结构。结果显示,金乌贼纳精囊位于繁殖期雌性个体口膜腹面的突起处,共1对。纳精囊开口于口膜内表面,通过一根中央管连通整个纳精囊。中央管内壁含有大量褶皱和纤毛。在中央管两端,有12~20个储精小囊与之相连。储精小囊四周具有发达的环肌,其中储存有大量精子,并且大部分精子头部均朝向腔室内壁。完成一次交配后,雌性金乌贼对精子囊和纳精囊中精子的利用可以分为三个阶段,主要利用精子囊中的精子(交配后1~2 d);由利用精子囊中的精子向纳精囊中的精子过渡(交配后2~3 d);主要利用纳精囊中的精子(交配后3 d以上)。研究表明,从精子囊释放出的精子进入雌性口膜表面的褶皱中,通过自身运动到达纳精囊。进入纳精囊的精子通过自身运动及中央管内壁纤毛的摆动进入储精小囊,其中大部分精子头部朝向储精小囊内壁有规律地分布。在产卵过程中,雌性优先利用精子囊中的精子,而在精子囊中精子不足时,纳精囊通过肌肉收缩以及纤毛摆动将其中的精子逐渐释放出来,卵子在雌性口膜附近完成体外受精。     

基于繁殖群体与补充群体结构特征的金乌贼资源增殖策略优化

利用青岛近岸海域连续监测数据,分析金乌贼繁殖群体及补充群体结构特征,比较不同洄游时期繁殖亲体的绝对生殖力与卵子规格,以及补充群体的扩散迁移过程,为金乌贼繁殖亲体筛选、增殖模式优化及放流海域合理规划等提供参考。结果显示,5—7月陆续洄游至青岛近岸的金乌贼繁殖亲体的胴长、体质量及其怀卵量随采样时间推移均呈逐渐下降趋势,前期繁殖亲体成熟卵细胞的卵径和卵重显著高于中期和后期亲体。金乌贼产黏性卵,通常将受精卵黏附于海藻或其他附着物上,其幼体生长迅速。受繁殖亲体结群期长及分批产卵等繁殖习性影响,补充群体的胴长、体质量离散水平亦随秋季采样时间推移不断升高。补充群体规格的离散可促进空间生态位分化,增加营养生态位宽幅,该生殖策略有利于减小种内摄食压力。基于金乌贼繁殖生态学特征,建议集中采集前期洄游亲体开展人工苗种繁育,以提升繁育效率,保证大规格苗种供应;依据其分批产卵习性,大规模增殖放流可分批进行,以减小种内饵料竞争,提高放流群体成活率;5—7月在近岸水深15～20 m的缓流区投放人工产卵附着基,也是一种有效的资源原位修复手段。今后应进一步探究金乌贼受精卵放流技术,优化其资源修复模式,降低增殖成本,提高资源增殖效率。     

金乌贼雄性规格和社群数量对求偶与交配行为的影响

为探讨不同规格雄性金乌贼(Sepia esculenta)在求偶交配过程中的竞争及优势等级,采用实验生态学方法,在室内可控条件下分别设置1L1S组、1L2S组和1L4S组(L和S分别表示大规格雄性和小规格雄性,数字表示实验中雄性金乌贼数量),连续摄像观察和记录金乌贼的繁殖行为。结果显示:(1)繁殖过程中金乌贼具有明显的领域行为和护卫伴游行为。(2)随着群体中小规格雄性比例的增加,处于优势地位的大规格雄性个体的优势等级发生变化,主要表现为大规格雄性护卫伴游时间、成功交配次数逐渐减少,而小规格雄性护卫伴游时间、成功交配次数逐渐增多。(3)当群体中小规格雄性较少时,大规格雄性常常主动攻击小规格雄性,而当小规格雄性数量远大于大规格雄性时,小规格雄性主动向其他雄性发起攻击,以争取护卫权和交配权。研究表明,雄性金乌贼的规格和数量对于求偶竞争以及交配行为具有显著影响。随着繁殖群体中小规格雄性增多,大规格雄性成功交配次数逐渐降低。1L4S组成功交配次数稍高于1L2S组,显著高于1L1S组(P0.05)。人工苗种繁育过程中选择合适规格的雄性亲体和合理的雌雄比例,对提高金乌贼繁殖效率具有重要意义。     

不同底质和温度对金乌贼仔乌饥饿耐受能力的影响

采用实验生态学方法,以金乌贼(Sepia esculenta)初孵仔乌为实验对象,研究饥饿胁迫下仔乌的行为、体征等的变化,以及不同底质(细沙组、无底质组、沙泥组)和温度条件对仔乌耐饥饿能力的影响,以期为其增殖放流最佳时期的选择和放流海域的合理规划提供参考。结果显示,饥饿对仔乌的形态特征、行为方式、活力状态等影响较大,饥饿12 d时仔乌全部死亡。水温25℃条件下,细沙组、无底质组和沙泥组的饥饿不可逆点(PNR)分别为7.5 d、8 d和9.5 d;饥饿前7 d,各组的累积死亡率相差不大,之后由高到低依次为细沙组、无底质组、沙泥组;饥饿10 d后,3个实验组仔乌的体重损失率分别为7.72%±2.80%、6.95%±2.64%和5.30%±2.41%。无底质条件下,28℃组、25℃组和22℃组的PNR时间分别为7 d、8 d和9.5 d;28℃组的死亡率显著高于其他两组(P0.05);饥饿10 d后,3组仔乌的体重损失率分别为8.90%±1.65%、6.95%±2.64%和5.79%±3.54%。实验结果表明,底质粒径较小的沙泥组对缓解仔乌饥饿起到积极影响,而粒径较大的细沙底质的作用与沙泥底质相反,随水温的升高会降低仔乌的饥饿耐受力,使其提前进入PNR。     

The effects of temperature in the life cycle of two consecutive generations of the cuttlefish Sepia officinalis (Linnaeus, 1758), cultured in the Algarve (South Portugal)

We are presently culturing the 4^th generation of thecuttlefish, Sepia officinalis in our laboratory. A firstgeneration (F1) was grown from eggs collected from the wild (Ria Formosa–South Portugal) during the summer, at mean temperatures of 27°C ± 3°. In the present study, a second generation(F2), originated from eggs laid in the laboratory by females from F1 wascultured between the start of autumn and the end of spring, at meantemperaturesof 15 °C ± 4 °C. The life cycle ofcuttlefish from F2 was compared to F1. Populations of 30 cuttlefish were usedineach experiment. Cuttlefish were grown from one day old until the cycle wascompleted (when the last female in each population had died). Cuttlefish fromF2cultured at much lower temperatures had a longer life cycle, of almost 9 months(260 days) compared to cuttlefish from F1, which completed their cycle in lessthan 6 months (165 days). Cuttlefish from F2 grew significantly larger (U =0.00; p < 0.01) with mean weights of 343.3 ± 80.5 g and248 ± 33.1 g for males and females, respectively, comparedtoF1 (199.6 ± 40 g and 143.3 ± 30.9 g formales and females, respectively). Females from F2 had higher fecundity (225eggsfemale^–1) compared to females from F1 (144 eggs perfemale^–1), produced bigger eggs (t = 45.60752; p < 0.0001),weighing 0.74 ± 0.18 g, compared to 0.46 ± 0.11 fromF1,and bigger hatchlings (t = 7,144783; p < 0.0001), weighing 0.10 ±0.02g, compared to 0.09 ± 0.02 g for the summerpopulation.     

First multi-generation culture of the tropical cuttlefish Sepia pharaonis Ehrenberg, 1831

Sepiapharaonis, the pharaoh cuttlefish was cultured through multiplegenerations in the laboratory (5 consecutive generations) using closed,recirculating water filtration systems. The eggs of the original parentalgeneration (G_P) were spawned by a wild caught Gulf of Thailandfemale in alocal fisheries laboratory, then packed and shipped air cargo to Texas wherehatching occurred. The culture temperature ranged 25°–28°C, except for one generation that was chilled intentionallyto21 °C and then warmed to 25 °C after 9.6months. Spawning occurred as early as day 161. Spawning output was high in allgenerations except the group that was cultured at 21 °C. Eggfertility was low in captivity (< 20%), but hatchling survival was high(>70%). The average egg incubation time was 13.6 d at 25–28°C. The largest spawn resulted in 600 viable hatchlings andthesmallest resulted in 11 hatchlings. The cuttlefish ate a wide variety ofestuarine crustaceans and fishes as well as frozen shrimp. There were noapparent disease problems since survival from hatching to maturity was over70%.The average life span for cuttlefish cultured at 25–28°Cwas 8.9 months and 12.3 months at 21 °C. Size at hatching wasmeasured for fourth generation (G₄) hatchlings; the mean weight athatching was 0.103 g and the mean mantle length was 6.4mm. The largest cuttlefish cultured was a male 300 mmML and 3,045 g; the oldest cuttlefish lived 340 d.This cuttlefish species presents an excellent choice for commercial mariculturebecause of its rapid growth, short life span, tolerance to crowding andhandling, resistance to disease and feeding habits.