鸭IgG提取方法的比较试验

用辛酸－硫酸铵法提取鸭IgG并与传统提取方法硫酸钠、硫酸铵法进行比较，结果表明，3种方法回收的IgG依次为12．35、8．36和10．14mg/mL，而且辛酸－硫酸铵法回收IgG纯度高，可用于免疫标记，比色谱层析快速、操作简单、价格低廉。用该法以鸭卵黄提取IgG，回收的IgG为13．58mg/mL，氯仿法为8．55mg/mL，PEG不能回收；辛酸－硫酸铵法从鸭卵黄得到的IgG活性最高。     

介绍一种快速提取免疫球蛋白G的方法

介绍一种快速提取免疫球蛋白Ｇ的方法吴健敏，袁书智，贺荣莲广西区兽医研究所５３０００１目前，提取免疫球蛋白Ｇ（ＩｇＧ）常用的方法有饱和硫酸按盐析法、离子交换层析法、凝胶过滤法、亲和层析法等，这些方法往往操作繁琐、费时费力，对ＩｇＧ活性影响较大。现介绍一...     

鸭血清IgG的提纯方法比较

本文对鸭血清分别采用了硫酸钠法、辛酸-硫酸铵法、硫酸铵法进行了鸭IgG的提取。提取后的鸭IgG样品用纯度和蛋白含量两个指标来衡量。用辛酸-硫酸铵法提取的鸭IgG样品蛋白含量为9.45mg/ml,纯度能达到用于免疫标记技术的要求,而且操作简单、价格低廉,适于从大批量样品中提纯鸭IgG;用硫酸钠法提取的鸭IgG样品蛋白含量为9.14mg/ml,相对较高,但纯度较低;用硫酸铵法提取的鸭IgG样品蛋白含量、浓度都较低。     

血清免疫球蛋白G提取方法的比较研究

我国是猪的生产大国,猪血的产量很大,而对猪血的应用非常有限,主要用作饲料和废物。在猪血中存在大量的活性物质,如免疫球蛋白、转移因子、胎球蛋白等,这些物质对致癌基因转化、生长启动、抵抗疾病有重要作用[1]。猪血中由于基础免疫的作用,每一头猪的血液中都存在着大量的抗体,如果能把这些抗体提取和纯化,能有效地治疗各种传染病,同时也能对猪血加以开发利用。从血液中提取免疫球蛋白,常用的方法有盐析法(如多聚磷酸钠絮凝法、硫酸铵盐析法)、有机溶剂沉淀法(如冷乙醇分离法)、有机聚合物沉淀法、变性沉淀法等,许多科技工作者对提取免疫球…     

卵黄抗体三种提取方法的比较研究

运用硫酸铵法、聚乙二醇(PEG)法、冷乙醇法对卵黄抗体进行提取,并使用间接竞争酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定所得卵黄抗体的特异性,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测其纯度,用Nanodrop2000测其蛋白浓度并计算提取量,比较三种方法所得抗体的特异性、纯度和提取量。结果显示,三种提取方法所得卵黄抗体特异性高低依次为硫酸铵法、冷乙醇法、PEG法;纯度高低依次为硫酸铵法、冷乙醇法、PEG法;三种方法的提取量高低依次为PEG法、硫酸铵法、冷乙醇法。经综合分析与评价,硫酸铵法的抗体特异性较好、纯度较高、提取量也较高,且其操作方法相对简便,是比较具有优势的提取方法。     

两种纯化兔抗酸性红73免疫球蛋白G方法的比较研究

分别采用饱和硫酸铵法和辛酸—硫酸铵法纯化兔抗酸性红73(acid red 73,AR73)免疫球蛋白G(IgG)。通过二喹啉甲酸(BCA)法、十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)试验、间接ELISA法分别测定IgG的浓度、纯度及效价。结果显示,饱和硫酸铵法所提IgG浓度为36.44 mg/mL,最高效价达1.6×10⁵;辛酸—硫酸铵法所提IgG浓度为15.79 mg/mL,最高效价达3.2×10⁵。提示,辛酸—硫酸铵法IgG纯度优于饱和硫酸铵法。     

几种从鸡血浆中提取免疫球蛋白IgY方法的比较

鸡卵黄免疫球蛋白是产蛋母鸡受免疫刺激后产生免疫反应,被选择性地转移到卵黄中唯一的免疫球蛋白类物质,因其优良的生物学活性而被广泛应用于免疫学诊断和医药等领域。Ig Y主要存在于鸡卵黄和血清中,从血液中分离Ig Y将会使禽类血液这一天然蛋白资源得到充分利用。文章主要对比研究了Protein G柱洗脱分离提取Ig Y、冰乙醇分级离心法、两步硫酸铵沉淀法、聚乙二醇两步沉淀法和聚乙二醇/硫酸铵联合沉淀法五种方法提取血浆中Ig Y,并对提取产物进行纯度、含量和活性的测定。结果显示五种提取方法中,采用聚乙二醇/硫酸铵联合沉淀法分离纯化鸡血浆中的Ig Y,所得Ig Y纯度及活性相对较佳。     

禽类全血DNA不同提取方法的比较

以4个不同禽类品种(金定鸭、长乐灰鹅、象洞鸡和闽南火鸡)为试验材料,采用4种不同方法从其全血中提取DNA,比较不同方法的DNA提取效率。结果表明:由于品种之间DNA存在差异,DNA的质量和产率也有显著差异,金定鸭全血DNA用树脂法效果最佳;长乐灰鹅和闽南火鸡全血DNA用酚-氯仿法效果最佳;而盐析法是提取象洞鸡全血DNA的最佳方法。     

甜叶菊绿原酸对蛋雏鸡血清免疫和盲肠菌群的影响

评价不同剂量甜叶菊绿原酸对蛋雏鸡血清免疫和盲肠菌群的影响,为饲用添加剂研发提供基础参数支持。选用1日龄健康海兰蛋鸡300只,随机分为5个处理组:空白对照组、阳性对照组(1.0 g/L杜仲提取物)和试验组(0.7、2.0、4.0 g/L甜叶菊绿原酸),在7、14日龄和21日龄时分别向试验组饮水投入甜叶菊绿原酸,每日1次,连续饲喂5 d后,利用ELISA检测血清免疫指标,根据平板菌落计数法检测盲肠细菌数。结果显示:① 7日龄开始投服时,绿原酸不仅促进肠道益生菌的生长,还对不同种类杆菌也有影响;蛋雏鸡血清IL-1β、IL-2也有升高趋势。② 14日龄开始投服时,调节肠道菌群的效果和杜仲提取物相近;对蛋雏鸡IL-1β、IL-2的影响均不显著。③ 21日龄开始投服时,绿原酸可显著影响肠道菌群平衡;对蛋雏鸡IL-1β、IL-2有降低趋势。给不同日龄蛋雏鸡添加甜叶菊绿原酸,可以增强其机体免疫功能,改善盲肠菌群,其中7日龄添加2 g/L甜叶菊绿原酸的效果最明显。这预示绿原酸可以作为新型抗生素替代品用于蛋雏鸡,但其作用机制需更进一步研究。     

甜叶菊异绿原酸盐对产蛋初期蛋鸡产蛋性能、血液免疫指标及脂质代谢指标的影响

试验旨在研究甜叶菊异绿原酸盐对产蛋初期蛋鸡产蛋性能、免疫指标及脂质代谢指标的影响。选取健康且生产性能相近的20周龄海兰灰蛋鸡540只,随机分为3组,每组设置6个重复,每个重复30只,对照组饲喂基础饲料,试验组分别在基础饲粮中添加100 mg/kg（低剂量组）、200 mg/kg（高剂量组）甜叶菊异绿原酸盐,预试期7 d,正试期28 d。结果表明：(1)与对照组相比,低、高剂量组对产蛋率、平均蛋重、料蛋比均无显著性影响（P>0.05）;但均能显著降低劣蛋率（P<0.05）。(2)与对照组相比,低、高剂量组均可显著降低蛋鸡血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素（IFN-γ）、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)含量（P<0.05）,低、高剂量组可显著提高血清白介素-10(IL-10)、免疫球蛋白M(IgM)含量（P<0.05）,高剂量组能够显著提高血清免疫球蛋白G(IgG)含量（P<0.05）。(3)与对照组相比,低、高剂量组均可以显著降低TC和LDL-C含量（P<0.05）,并显著提高HDL-C含量（P<0.05）,但对TG含量无...     

不同免疫途径对商品蛋雏鸡新城疫黏膜及血清抗体的影响

通过不同的免疫途径对商品蛋雏鸡进行免疫,探讨不同的免疫途径对商品蛋雏鸡新城疫(Newcastle disease,ND)黏膜抗体及血清抗体的影响。结果表明,同时用新城疫弱毒疫苗免疫后,不同的免疫途径产生的新城疫黏膜抗体及血清抗体效价有较大差异。采用喷雾法于3日龄首免,15日龄二免,25日龄三免,鸡体产生保护水平(6 log2)以上的ND黏膜抗体和血清抗体最快、抗体水平最高、维持时间最长、总体免疫效果最好,而采用饮水免疫的试验组产生的ND黏膜抗体和血清抗体水平均不高,总体免疫效果最差。     

枸杞多糖对蛋鸡产蛋性能、血清生化及免疫指标的影响

文章旨在评估日粮添加不同水平枸杞多糖对蛋鸡生产性能、血清生化及免疫指标的影响.试验将30周龄产蛋性能一致的540只海兰褐壳蛋鸡随机分为3组,每组6个重复,每个重复30只.试验为期6周,对照组蛋鸡饲喂基础日粮,处理组蛋鸡饲喂基础日粮+50和100 mg/kg枸杞多糖.结果:50 mg/kg枸杞多糖组蛋鸡的平均蛋重显著高于...     

孕马血清促性腺激素(PMSG)提取方法的研究

应用生物化学制备技术,对PMSG的提取进行了研究,发现偏磷酸氢氧化钠pH分离-低温乙醇沉淀-透析法的脱杂蛋自效果优于硫酸胺盐析-透析法,更优于偏磷酸pH分离-离子交换法,而氯化钠盐析法则达不到脱杂蛋白的效果;血清中PMSG的效价损失随着脱去杂蛋白的增多而增大;在所采用的冻干曲线下,脱去杂蛋白愈多,则冻于过程中PMSG的损失就愈小。     

菊粉对蛋雏鸡生长性能、免疫器官指数和血清免疫球蛋白的影响

试验旨在通过在蛋用雏鸡日粮中添加0.2%、0.4%和0.8%的菊粉,研究菊粉对蛋雏鸡生长性能、免疫器官指数和血清免疫球蛋白的影响,以及菊粉替代抗生素对蛋雏鸡的应用效果.试验选用了1日龄海兰褐蛋用雏鸡400只,随机分为5组,每组4个重复,每个重复20只鸡.Ⅰ组为对照组,饲喂基础日粮,其余为试验组,在基础日粮中分别添加0.2%、0.4%和0.8%菊粉和抗生素,试验期为5周.结果表明:各添加比例菊粉对蛋雏鸡日采食量影响差异不显著(P>0.05),添加0.8%菊粉和抗生素对雏鸡日增重、料重比、成活率、免疫器官指数、IgA、IgG影响显著(P<0.05).结论:菊粉有促进雏鸡生长,提高雏鸡免疫器官指数和增加血清免疫球蛋白含量的作用,尤其以0.8%添加比例菊粉效果最好,可替代抗生素部分作用在蛋雏鸡日粮中添加使用.     

棘球蚴基因工程苗免疫羊血清抗体的检测

2000年5－12月用ELISA法对青海省贵南县的棘球蚴基因工程苗免疫羊血清抗体进行了检测。结果：免疫前抗体阳性率为30．3％，保护率为3．03；一免后阳性率为40．40％，保护率为2．02％；二免后阳性率为89％，保护率为72％。说明对羔羊加强免疫后可获得痕好的群体保护力。     

离子沉淀法、溶剂萃取法提取茶多酚的比较研究

从茶叶中提取茶多酚的方法主要有离子沉淀萃取法、有机溶剂萃取法、树脂吸收法、超声波提取法等,但应用最广的提取方法是离子沉淀萃取法和有机溶剂萃取法。其中盐离子沉淀提取法是生产高纯度茶多酚的一种廉价方法,该法选择性强,产品纯度高,无须使用大量的氯仿等有机试剂,成本低。     

草石蚕水苏糖的乙醇提取方法研究

水苏糖(Stachyose)属于棉子糖属半乳糖苷类非还原性功能性低聚糖。提取水苏糖的主要工业原料为草石蚕(Chi-nese artichoke),又名宝塔菜、地牯牛、甘露子、地瘤等,在我国重庆、江苏、河北等地都有种植。草石蚕块茎螺旋状,含约12%~15%以水苏糖为主的低聚糖[1]。水苏糖提取国内外研究较少。从植物原料中提取糖类常用的方法有热水浸提法、酸浸提法、碱浸提法、酶法等。由于许多糖提取原料细胞粗大,壁厚,用水提法糖类难以从胞内扩散出来,需要多次浸提,提取温度较高,或将植物材料研磨较细,操作时间长,得率低。用乙醇溶液作为提取剂,不仅选择性好…     

胶体金免疫层析法与ELISA法对牛的新孢子虫血清抗体检测结果的比较

新孢子虫病(Neosporosis)是由犬新孢子虫(Neospora caninum)寄于宿主所引起的一种原虫病[1].牛、绵羊、山羊、马、鹿等均可作为中间宿主,终末宿主是犬[2].     

酵母多糖对产蛋后期蛋鸡生产性能、免疫功能、血清生化指标和抗氧化能力的影响

本试验旨在研究饲粮添加不同剂量酵母多糖对产蛋后期蛋鸡生产性能、免疫功能、血清生化指标和抗氧化能力的影响。选取健康、体重及产蛋率相近的52周龄海兰褐蛋鸡720只,随机分为4个组,每组6个重复,每个重复30只。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂在基础饲粮中添加500、1 000和1 500 mg/kg酵母多糖的饲粮。试验预试期7 d,正试期36 d。结果表明：1)与对照组相比,500和1 000 mg/kg酵母多糖组产蛋后期蛋鸡产蛋率有提高的趋势(P=0.063),分别提高了0.73%和4.29%。2)与对照组相比,500、1 000和1 500 mg/kg酵母多糖组蛋鸡脾脏指数有提高的趋势(P=0.076),分别提高了20.48%、32.53%和18.07%;1 000 mg/kg酵母多糖组肝脏指数较对照组以及500和1 500 mg/kg酵母多糖组显著提高(P<0.05)。3)1 500 mg/kg酵母多糖组蛋鸡血清免疫球蛋白M含量显著高于其他组(P<0.05)。4)与对照组相比,500和1 000 mg/kg酵母多糖组蛋鸡血清谷丙转氨酶(ALT)活性和500 mg/kg酵...