油菜萝卜质不育系测交后代恢复材料F_2(TC_1)的选育及细胞遗传学研究

以Ad-6(F5)与甘蓝型油菜OguCMS测交后代可育株F2(TC1)为材料,研究了测交后代的形态特征及体细胞染色体数目和花粉母细胞的减数分裂行为.结果表明,F2(TC1)的特征类似于Ad-6(F5),体细胞染色体数为2n=35～40.花粉母细胞减数分裂过程能够完成,但出现许多异常现象.在PMCMI期出现有较高单价体及多价现象,并且还有染色体桥存在.中期及后期有落后染色体存在,后期Ⅱ还出现有多极分裂现象.在四分体时期,除四分体外,还有二分体、三分体、五分体、六分体存在,其中三分体所占比例较高.这些现象说明,F2(TC1)还很不稳定,这可能是由于外源遗传物质与油菜的遗传背景不协调造成的.     

甘蓝型油菜萝卜细胞质雄性不育恢复材料的创制

【目的】探讨外源萝卜恢复基因的导入途径与筛选方法,转育甘蓝型油菜萝卜细胞质雄性不育（Ogu CMS）恢复材料,为甘蓝型油菜Ogu CMS育种应用创造条件。【方法】以萝-蓝（Raphanobrassica,2n=58）为供体材料,利用嫁接克服远缘杂交生殖障碍导入外源恢复基因,对获得的属间杂种依次进行甘蓝型油菜性状、自（异）交结实性状以及恢复率稳定性状等特征特性强化筛选。【结果】育成一份甘蓝型油菜Ogu CMS纯合恢复材料CLR650,体细胞染色体数目为38-40条,减数分裂过程中部分细胞存在染色体落后及形成染色体桥等异常现象,但细胞异常对花粉正常形成没有明显影响,恢复株自交、测交均为100%可育。以基于Ogu CMS恢复基因（Rf0）设计的特异分子标记进行检测,证明该材料存在Ogu CMS恢复基因。以与之连锁其它萝卜分子标记分析比较,表明其萝卜片段长度短于国外同类恢复系R113。【结论】CLR650的育成为甘蓝型油菜Ogu CMS创制了新型恢复材料。     

用光谱反射率诊断小麦叶片水分状况的研究

以 Ad- 6 (F5 )与甘蓝型油菜 Ogu CMS测交后代可育株 F2 (TC1 )为材料 ,研究了测交后代的形态特征及体细胞染色体数目和花粉母细胞的减数分裂行为。结果表明 ,F2 (TC1 )的特征类似于 Ad- 6 (F5 ) ,体细胞染色体数为 2 n=35～ 40。花粉母细胞减数分裂过程能够完成 ,但出现许多异常现象。在 PM CMI期出现有较高单价体及多价现象 ,并且还有染色体桥存在。中期及后期有落后染色体存在 ,后期 还出现有多极分裂现象。在四分体时期 ,除四分体外 ,还有二分体、三分体、     

甘蓝型油菜新不育系恢复材料花药培养影响因素的研究

本试验用油菜新不育胞质恢复系为材料进行花药培养,对花药培养的一些影响因素进行了初步研究,结果表明:①NER愈伤诱导以MS基本培养基较好,附加激素为:2,4-D 2mg/L、6-BA0.5mg/L、NAA 0.5mg/L最佳。②株龄不同愈伤诱导率差异显著。从110 d到141d,出愈率随着株龄增加而增加,差异达到0.01显著水平。到141d达到最高,后逐渐下降。③适当增加2,4-D浓度,2,4-D与6-BA混用有利于愈伤的诱导。④将6-BA浓度从 mg/L提高到4mg/L新不育系恢复材料绿苗诱导率增加,在2mg/L6-BA的激素水平上添加玉米素(ZT)0.5mg/L绿苗诱导率增加2.47%。     

甘蓝型油菜萝卜细胞质雄性不育恢复材料的创制(英文)

[目的]萝卜细胞质雄性不育(OguCMS)是甘蓝型油菜杂种优势利用理想途径,但由于恢复基因仅存在于萝卜基因组难以直接利用,转育萝卜恢复基因是实现甘蓝型油菜OguCMS应用突破的关键。[方法]本研究以萝-蓝(Rap hanobrassica,2n=58)为恢复基因供体材料,利用嫁接克服远缘杂交生殖障碍,并对获得的属间杂种通过甘蓝型油菜性状、自(异)交结实性状以及恢复率稳定性状等强化筛选,育成了一份甘蓝型油菜OguCMS纯合恢复材料CLR650。[结果]该恢复材料体细胞染色体数目在38～40条之间,减数分裂过程中部分细胞存在染色体落后及形成染色体桥等异常现象,但细胞异常对正常花粉最终形成没有明显影响,恢复株自交、测交均为100%可育。以基于OguCMS恢复基因(Rf0)设计的特异分子标记进行检测,证明该材料存在OguCMS恢复基因。以与之连锁其它萝卜分子标记分析比较,表明其萝卜片段长度短于国外同类恢复系R113。[结论]CLR650的育成为甘蓝型油菜OguCMS创制了新型恢复材料。     

甘蓝型油菜NEA胞质不育双低恢复系选育研究

NEA是笔者所在课题组在远缘杂交的辐射诱变后代中发现的一类甘蓝型油菜胞质不育新材料,叶色深绿,营养体旺,不育性稳定彻底,群体不育株率和单株不育度均达100%,完全不同于核不育、Pol-cms和陕2A。恢复源的寻找是NEA育种利用的关键。利用丰富的油菜地方种质资源、创新资源及引进资源,采取辐射诱变和广泛测交方式,发现了能恢复NEA育性的基础材料,进一步的遗传研究表明,恢复NEA育性的是细胞核内一对显性基因。利用含恢复基因的基础材料,进行广泛转育,正反杂交、连续回交、复合杂交、聚敛杂交、测交、连续自交、配合力测定、单株品质测试,选育出一系列稳定纯合的NEA胞质双低恢复系,如NR67、NR722、NR403、NR1917、NR9482。     

灰关联熵在选育油菜质不育系B101A的恢复系上的应用

对11个恢复系与其对应优质油菜质不育系B101A所测配新组合的单株产量进行灰关联熵分析。结果表明,测交新组合的产量与对应恢复系的农艺性状熵关联度为:株高0.9832,一次有效分枝数0.9864,主花序长度0.9892,主花序角数0.9865,主花序角长0.9838,主花序结角密度0.9745,总角数0.9897,角粒数0.9770,千粒重0.9880。熵关联序为:总角数>主花序长度>千粒重>主花序角数>一次有效分枝数>主花序角长>株高>角粒数>主花序结角密度,并以此确定了油菜质不育系B101A的恢复系的选育和筛选方向。     

甘蓝型油菜三隐性核不育材料L7AB及临保系的选育

用从贵州省油料研究所选育的高不育株率材料中发现的异型不育株作母本,自育另一黄籽双低高不育株率材料2822B作父本杂交,其后代经多年测交、自交选育、鉴定和恢复系的筛选,已成功选育了稳定的双低三基因隐性核不育系、保持系和优良恢复系,从而实现了三系配套。     

甘蓝型油菜新不育系恢复材料花药培养影响因素的研究

新不育系（NEA）材料是一种不同于波里马细胞质雄不育系（Polcms）的新胞质雄不育系,该不育系不育性彻底、性状一致、遗传稳定、蜜腺和柱头发育正常、叶色深绿、生长势强、配合力高。经过多年的努力研制出了新不育恢复系（NER）。该试验就这一特殊材料进行花药培养,研究影响该材料的花培影响因素,为以后培育大量花培植株构建DH群体,进行遗传性状、分子标记和基因定位研究以及迅速纯化单倍体等更好地利用该新材料打下基础。     

甘蓝型油菜数量性状的遗传研究 IV.杂一代叶绿素含量及其与亲代和产量的相关分析

研究F_1代叶绿素含量及其与亲代和产量的相关表明:现蕾期和盛花期基因型间叶绿素含量的差异显著性都高于苗期;F_1代与亲代的相关性很低,尤其在苗期;与产量的相关性后两个生育期远高于苗期。     

白菜型油菜萝卜细胞质不育系向甘蓝型油菜转移过程中缺绿症和不育性的恢复

1991～1995年用白菜型油菜萝卜细胞质不育系（低温叶片缺绿）与不同的甘蓝型油菜测交、回交，3a观察了52个组合，其中有30．7％组合出现低温下不缺绿的正常甘蓝型绿色植株（NGP），但组合间NGP发生频率变异较大，从1．4％～100％不等，这种差异可能与核背景有关。绝大多数NGP同时伴随着蜜腺、育性恢复正常，少数NGP为半不育类型，但蜜腺恢复正常。可育的NGP自交后代表现复杂，大致可分为3种类型，绝大多数为NGPⅡ类型。     

芥菜型油菜与甘蓝型油菜种间杂种后代的RAPD分析

 为了揭示芥菜型油菜与甘蓝型油菜种间杂种后代的遗传分离规律 ,用芥菜型油菜四川黄籽作母本与甘蓝型油菜 10 47自交系杂交 ,杂种F1人工自交或用 10 47自交系花粉回交 ,然后将亲本、杂种F1、F2 和BC1代用 16个随机引物进行PCR扩增。共扩增出 98条带 ,其中双亲共有的带 35条 ,四川黄籽特异带 30条 ,10 47特异带 33条。带型统计分析结果表明在芥甘杂种后代中来自 10 47的遗传物质比来自四川黄籽的遗传物质更能传递给后代 ,这种趋势与杂种后代植株的育性无关 ,在回交后代中四川黄籽的遗传物质比在自交后代中丢失更快。并对造成芥甘种间杂种后代分离扭曲的原因进行了探讨。     

Identification of a Cytoplasmic Male Sterile Line NEA in Brassica napus L. and Its Genetic Studies

Male sterile NEA plants were identified in progenies of the radiated 92P×Aggregate-silique in Brassica napus L. In 1993. Their progeny plants from test crossing and open pollination were 100％ male sterile. The double-low male sterile lines JL-4 and JL-18 were bred through successive backcrossing of the double -low variety No. 4 and No. 18 in Brassica napus L. To NEA. Restorer lines 6720 and 6722 with significant heterosis in F1 were developed. The results from investigating the restoring-maintaining relationship and inheritance of the restorer gene indicated that JL-4 and JL-18 were different from both PolCMS and Shan 2A type,and their restorer gene was controlled by a pair of dominant genic genes.     

甘蓝型油菜种子黑色素提取条件的优化

[目的]探讨甘蓝型油菜种子黑色素提取的最佳条件。[方法]以中双5号甘蓝型油菜籽为材料,用碱溶解-酸沉淀法提取甘蓝型油菜种子黑色素,通过单因素试验探讨提取剂NaOH浓度（1％、2％、3％、4％）、提取温度（40、60、80、100℃）、提取时间（1、2、3、4h）、提取次数（1、2、3、4次）、沉淀pH值（1、2、3、4）对甘蓝型油菜种子黑色素提取率的影响,并采用正交试验优化提取条件。[结果]5种因素对甘蓝型油菜种子黑色素提取率均有不同程度的影响。[结论]甘蓝型油菜种子黑色素的最佳提取条件是：NaOH浓度为3％,提取温度为80qC,提取时间为1h,提取次数为2次,沉淀pH值为4,其提取率为13．07％。     

利用BC_3F_1群体定位和分析甘蓝型油菜A7-含油量QTL

【目的】通过构建BC3F1群体对第7连锁群上一个影响油菜籽油分含量的主效QTL(A7-QTL)进行定位确认。【方法】在用SG-DH群体初定位基础上以欧洲品种Sollux为轮回亲本、目标区段含中国亲本Gaoyou等位基因片段的DH系为供体构建近等基因系。用1700个BC3F1单株基因型和其种子(BC3F2)表现型,采用WinQTLCartographer2.5和SPSS11.5软件对A7-QTL进行精细定位以及标记和性状的关联分析。【结果】含油量QTL的置信区间在标记ZAAS849s-R131之间,范围在21.7cM左右,其LOD峰值为9.71,距离两侧最近标记RPSaA3和ZAAS839分别为0.9和2.1cM,QTL的加性效应值是0.75;QTL区段内的单标记方差分析表明:目标区段内4个标记各3种基因型的含油量之间存在极显著差异,标记ZAAS839处的差异最显著(P=1.2×10-10);通过比较含油量和4个标记之间的对应关系,进一步推断QTL最可能位于标记RPSaA3和ZAAS839之间或临近。【结论】用BC3F1群体定位的QTL区间与DH群体分析结果相重叠,但置信区间明显缩小;定位结果进一步确认了A7连锁群上存在油分QTL的真实性,增加了在该区域存有参与控制油菜含油量基因的可靠性;QTL可能存在于标记RPSaA3和ZAAS839临近区域,两标记间距约3cM。     

甘蓝型油菜和诸葛菜属间杂种高世代材料形态学和细胞学分析

[目的]进一步揭示甘蓝型油菜和诸葛菜属间远缘杂种高世代(F8～F10)材料的遗传变异规律。[方法]以甘蓝型油菜和诸葛菜属间杂种高世代群体为材料,对甘蓝型油菜和诸葛菜远缘杂交后代表型偏白菜型油菜变异群体进行形态、细胞学方面的研究。[结果]形态学分析表明,杂种后代叶型、叶色、株型、早花性状偏向白菜型油菜,而二级分枝数、角果长度和千粒重与甘蓝型油菜Oro更为接近;细胞学研究表明,这些杂种高世代材料细胞中已不含诸葛菜染色体,多数植株都为少于38条染色体的亚倍体;与白菜型油菜杂种的减数分裂配对结果显示,这些亚倍体后代细胞中丢失的可能是来自C基因组的染色体,随着世代的增加,体细胞染色体数目都有向甘蓝型油菜2n=38升高和回归的趋势。[结论]该研究为揭示杂种后代亚倍体中丢失染色体的来源及形态学改变的原因奠定基础。     

甘蓝型油菜与芝麻菜远缘杂交研究

 以4个甘蓝型油菜品种为母本,3个芝麻菜材料为父本,研究了单一授粉、混合花粉授粉、重复授粉和GA₃处理柱头后授粉等4种授粉方式对其杂交亲和性的影响。结果表明：甘蓝型油菜与芝麻菜的远缘杂交为高度不亲和,最强的组合是花油3号×凤庆芝麻菜,其亲和指数为0.032。混合花粉授粉降低了其杂交亲和性,花油3号×芝麻菜的亲和指数为0.021。重复授粉和GA₃处理柱头后授粉可以提高杂交亲和性,花油3号×凤庆芝麻菜的亲和指数分别为0.046,0.067。但角果中的种子几乎都是皱瘪的,可见甘蓝型油菜与芝麻菜杂交是受精后不亲和,其杂种胚发育受到阻碍而不能形成正常的种子。     

油菜子叶及下胚轴对潮霉素敏感性研究

[目的]为油菜潮霉素抗性基因的遗传转化提供依据。[方法]以油菜品种沪油19号、苏州青、五月慢的子叶和下胚轴为外植体,研究不同浓度潮霉素处理对其褐化率、出愈率的影响。[结果]潮霉素浓度为3 mg/L时,五月慢、沪油和苏州青的褐化率分别为87.6%、30.7%、40.1%;褐化的临界浓度均为6 mg/L。苏州青下胚轴对潮霉素的耐受性较强,其褐化的临界浓度高于沪油19号和五月慢。潮霉素浓度为6 mg/L时,沪油19号、苏州青、五月慢子叶的出愈率分别为3.7%、2.3%、0,下胚轴的出愈率分别为5.1%、8.1%、2.2%。[结论]以子叶为外植体时,3个品种适宜的潮霉素筛选浓度为6 mg/L;以下胚轴为外植体时,沪油19号和五月慢适宜的潮霉素筛选浓度为6 mg/L,苏州青为9 mg/L。