黄芩白术对LPS诱导流产小鼠的保胎作用及子宫内TNF—α含量的影响

为了研究TH1细胞因子TNF－α（肿瘤坏死因子）在流产发生机制中的意义,探讨中药黄苓白术的安胎作用及机理,本试验用细菌脂多糖（LPS）尾静脉注射（每鼠0.1μg）,诱导昆明小鼠流产,ELISA方法测定子宫匀浆中TNF－α的含量。发现LPS诱导流产的小鼠,子宫内TNF－α显著升高。预先口服保胎中药黄芩白术,则显著抑制LPS的作用,使母鼠胚胎吸收率降低,子宫内TNF－α含量也显著降低。这些结果表明,LPS诱导流产与子宫内TNF－α升高有关。保胎中药黄芩白术有抑制母体子宫与胎儿界面TH1细胞因子TNF－α分泌的作用。     

黄芩白术与PXF对LPS诱导流产小鼠的保胎作用及子宫内IL-10含量的变化研究

胚胎在发育过程中会表达父体抗原。这种带有一半同种异体抗原的胎儿并不被母体免疫系统所排斥。这不仅是由于胎盘屏障的保护作用，更重要的是母体胎儿界面产生的免疫调节因子有保护胎儿的作用[1]。尽管如此，妊娠并不象人们所期望的那样一帆风顺。哺乳动物已着床的胚胎发育到正常分娩，约有40％～60％会发生胚胎丢失，其中2／3(约67％)发生在妊娠早期[2]。生殖免疫学观点认为，这些胚胎丢失或流产与妊娠母体Th1细胞因子反应增强有关[3]。Th1细胞因子反应以细胞免疫功能增强，产生肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)、γ-干扰素(IFN-γ)等细胞因子为特征，     

石菖蒲对LPS致流产小鼠的保胎作用及子宫免疫细胞的影响

为研究CD4+/CD8+T淋巴细胞和F4/80+巨噬细胞在流产发生机制中的意义,探讨中药石菖蒲的安胎作用机理,本试验选用细菌脂多糖(LPS)给小鼠尾静脉注射(0.1μg/只)制造流产模型,免疫组织化学方法检测小鼠子宫中CD4+,CD8+T淋巴细胞和F4/80+巨噬细胞的数量和分布情况.结果显示,应用LPS诱导流产后小鼠子宫中CD4+T淋巴细胞数量增多,CD8+T淋巴细胞数量无明显变化,CD4+/CD8+升高(P<0.01);F4/80+巨噬细胞数量也显著增多,与对照组比较差异极显著(P<0.01).预先口服保胎中药石菖蒲,能明显抑制LPS的作用,使小鼠流产率和胚胎吸收率降低,CD4+/CD8+比值降低,F4/80+巨噬细胞数量也降低.结果表明,LPS诱导小鼠流产与小鼠子宫中CD4+/CD8+比值和巨噬细胞数量有关,石菖蒲能调节小鼠子宫CD4+/CD8+T淋巴细胞和巨噬细胞数量,起到安胎作用.     

黄芩白术对LPS诱导小鼠流产的对抗作用及子宫内IL-2含量的影响

机体免疫系统能够成功地排斥异体组织移植物,并有效地清除侵入体内的各种病原。那么,胚胎在发育过程中,由于带有来自父体的基因,会表达父体抗原。这种带有一半外来抗原的胎儿理应受到母体免疫系统的排斥。然而,事实上正常妊娠的母体对胎儿并不表现排斥反应。这不仅是...     

中药复方制剂对LPS诱导的肠炎小鼠模型的保护作用

为了研究中药复方制剂对脂多糖(LPS)诱导的小鼠肠炎模型的保护作用,将ICR小鼠随机分为空白对照组(灌胃蒸馏水)、LPS造模组(灌胃蒸馏水)、阳性对照组(灌胃5μg/mL地塞米松)、中药复方制剂高剂量组(灌胃200 mg/mL中药)、中剂量组(灌胃100 mg/mL中药)和低剂量组(灌胃50 mg/mL中药)。每组小鼠预防性灌胃7 d,最后一次给药后除空白对照组,其他组小鼠立刻腹腔注射2 mg/mL的LPS,注射6 h后观察小鼠整体状况和粪便状态,评估疾病活动指数。同时检测小鼠血清生化指标,测定血清和肠组织中炎症因子含量,HE染色观察小鼠小肠组织形态。结果：与LPS组相比,不同浓度的中药复方制剂均能够改善小鼠的整体状况及粪便状态,疾病活动指数显著降低(P<0.05)。此外,与LPS组相比,不同浓度的中药复方制剂组小鼠的血清生化指标碱性磷酸酶(ALP)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)显著下降(P<0.05),血清和肠组织中炎性因子的释放量显著降低(P<0.05),肠组织形态趋于正常。本研究结果表明中药复方制剂能够缓解LPS诱导的小鼠肠炎,具有较好的抗炎作用。     

白术多糖对LPS诱导雏鹅脾脏免疫损伤的保护作用

目前鹅的养殖模式仍然以半旱养为主,对水体的依赖形成高温高湿的环境进一步促进细菌的繁殖使体内LPS累积,导致鹅的脾脏免疫功能受损。白术多糖具有调节机体免疫功能的作用,因此本研究旨在进一步探索白术多糖（PAMK）对脂多糖（LPS）处理雏鹅脾脏免疫损伤的保护作用。 本试验选用24只马岗鹅,随机分为四组,每组6个重复。对照组（CON组）和脂多糖组（LPS组）正常饲喂基础日粮,白术多糖组（PAMK组）和白术多糖加脂多糖组（PAMK+LPS组）在饲喂的日粮中添加400 mg/kg的PAMK。在24和26日龄时,CON组和PAMK组的雏鹅腹腔注射0.5 mL生理盐水;LPS组和PAMK+LPS组腹腔注射2 mg/kg?BW LPS溶液,第26日龄注射一小时后采集脾脏。HE结果显示,与CON组相比,LPS组的脾脏细胞排列疏松、细胞萎缩,形态各异,细胞数目减少并伴有凋亡现象 。,动脉周围淋巴鞘面积显著缩小;与LPS组相比,LPS+PAMK组的细胞排列紧密,细胞形态与对照组接近;此外,转录因子（LPS组GATA-3表达水平显著低于CON组和PAMK组,但LPS+PAMK组与LPS组相比,GATA-3表达水平显著升高;LPS组T-bet表达水平显著低于CON组,但LPS+PAMK组与LPS组相比,T-bet表达水平显著升高）,在日常饲粮中添加400 mg/kg的PAMK后发现,细胞因子及转录因子的mRNA表达水平都得到了显著恢复（P＜0.05）。结果表明,在雏鹅发生炎症反应时,白术多糖能够通过调节细胞因子和转录因子的表达水平,缓解雏鹅脾脏的炎症反应,起到一定保护作用。     

保胎无忧散对小鼠诱导性流产的保胎作用

选择保胎无忧散预处理试验小鼠,观察保胎无忧散对米非司酮(RU486)诱导流产作用的抑制效果.结果显示,使用RU486在孕7d,颈部注射后,试验小鼠的流产率达到了100％；应用中药方剂保胎无忧散能有效对抗RU486诱导的小鼠流产,试验中动物模型的流产率从100％下降到40％；组织学观察发现,RU486诱导流产小鼠子宫内膜出现明显损伤,而在中药方剂组,试验小鼠子宫得到了有效的保护.     

原儿茶酸对LPS诱导的小鼠子宫内膜炎的作用机制研究

【目的】 探究原儿茶酸对脂多糖(LPS)诱导的小鼠子宫内膜炎的作用机制。【方法】 将60只小鼠随机分为对照组、LPS组、LPS+不同浓度原儿茶酸(20、40、80 mg/kg)组共5组,每组各12只。对照组小鼠用微量注射器经阴道灌注50 mL生理盐水,LPS组灌注50 mL LPS(1 mg/kg),原儿茶酸治疗组灌注50 mL LPS前1 h分别腹腔注射20、40、80 mg/kg原儿茶酸,注射24 h后,颈椎脱臼法处死所有小鼠。收集子宫组织,通过HE染色检测子宫组织病理变化,用试剂盒检测髓过氧化物酶(MPO)活性,ELISA法检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-6含量;Western blotting法检测p65、核因子-κB(NF-κB)的抑制蛋白(IκB)以及磷酸化p65、IκB(p-p65、p-IκB)蛋白表达水平。【结果】 组织病理结果显示,对照组小鼠子宫组织形态正常,子宫内膜上皮结构正常;LPS组小鼠子宫组织出现严重的炎性细胞浸润和子宫内膜上皮充血及水肿。与LPS组相比,随着原儿茶酸浓度的增加,小鼠子宫组织中炎性细胞明显减少,子宫内膜上皮充血水肿情况也明显得到改善。MPO活性检测表明,与对照组相比,LPS组MPO活性极显著升高(P<0.01);与LPS组相比,原儿茶酸治疗组MPO活性均极显著降低(P<0.01),并呈剂量依赖性。ELISA结果表明,与对照组相比,LPS组小鼠子宫内膜组织中TNF-α、IL-1β和IL-6含量均极显著升高(P<0.01);与LPS组相比,原儿茶酸治疗组小鼠子宫内膜组织中炎性细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6含量均极显著降低(P<0.01),并呈剂量依赖性。Western blotting结果表明,与对照组相比,LPS组p-p65和p-IκB的表达水平均极显著升高(P<0.01);与LPS组相比,原儿茶酸治疗组p-p65和p-IκB的表达水平均极显著降低(P<0.01),且呈剂量依赖性。【结论】 原儿茶酸通过减轻子宫组织的病理变化,降低子宫组织MPO活性,抑制NF-κB信号通路及炎症细胞因子的产生,对LPS诱导的小鼠子宫内膜炎起到保护作用。     

诃子鞣酸对LPS诱导的小鼠子宫内膜炎的保护作用

为探究诃子鞣酸(chebulagic acid, CA)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的小鼠子宫内膜炎的保护作用。本研究体外试验部分,使用MTT法检测CA对小鼠腹腔巨噬细胞活性的影响,通过ELISA和Westen blot分别检测CA对LPS刺激的巨噬细胞促炎性细胞因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)分泌水平和ERK、p38和p65磷酸化水平的影响;体内试验部分,通过ELISA分析CA对LPS刺激后小鼠子宫组织TNF-α、IL-1β和IL-6分泌水平的影响,使用组织免疫荧光法检测小鼠子宫损伤相关因子(HMGB1)的表达水平,通过HE染色法观察小鼠子宫组织的病理变化,使用血常规法分析小鼠全血中白细胞数、中性粒细胞数和单核细胞数的变化。结果显示,CA质量浓度为12.5、25.0、50.0 mg/L对巨噬细胞活性均无显著影响,因此后续试验结果与CA的细胞毒性无关。CA可显著下调受到LPS刺激的巨噬细胞中的TNF-α,IL-1β和IL-6分泌水平,且具有浓度依赖性。此外,CA可显著下调受LPS诱导的巨噬细胞中ERK、p38和p65的磷酸化水平。CA可显著下调...     

泰山盘石散对米非司酮诱导小鼠流产的保胎效果

本试验选择泰山盘石散预处理试验小鼠,观察泰山盘石散对米非司酮(RU486)诱导流产作用的抑制效果,探讨试验中选用中药方剂的保胎作用及可能的作用机制,寻找预防早期胚胎丢失的有效措施.试验中分别给小鼠灌服中药并于第7天颈部注射RU486,结果显示,中药方剂泰山盘石散能有效对抗RU486诱导的小鼠流产,试验中动物模型的流产率从100％下降到50％.     

益母草碱对LPS诱导小鼠子宫内膜炎的抗炎作用研究

【目的】探究益母草碱对脂多糖(LPS)诱导小鼠子宫内膜炎的抗炎作用。【方法】将60只6～8周龄雌性C57小鼠随机分为6组：空白对照组,模型组,益母草碱低、中、高剂量组及地塞米松阳性对照组,每组10只。空白对照组经阴道灌注50μL PBS缓冲液,其余组经阴道灌注50μL LPS(1 mg/mL)建立小鼠子宫内膜炎疾病模型。造模后,益母草碱低、中、高剂量组分别腹腔注射7.5、15.0、30.0 mg/kg益母草碱,阳性对照组腹腔注射5.0 mg/kg地塞米松,每6 h 1次,连续3次。造模24 h后处死小鼠,测定各组小鼠子宫指数;通过HE染色观察子宫组织病理变化;采用ELISA法检测子宫组织白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等相关炎症因子含量及髓过氧化物酶(MPO)活性。【结果】与空白对照组相比,模型组小鼠子宫指数、子宫组织中炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量与MPO活性均极显著升高(P<0.01);与模型组相比,不同剂量益母草碱能不同程度降低LPS诱导子宫内膜炎小鼠的子宫指数、子宫组织中炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6...     

黄芩苷对小鼠的保胎作用及其对细胞因子的影响

本试验旨在研究黄芩苷的促孕保胎作用及其对母胎界面细胞因子的影响。取怀孕小鼠分成5组,除对照组外,其它4组于孕5-7天皮下注射溴隐亭建立流产模型,孕1-7天分别灌服蒸馏水、0.1、0.51、mg黄芩苷。孕3、5、7、10、12天采样,计算流产率,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清及子宫匀浆中干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-10(IL-10)、孕酮的含量。结果孕12天时1 mg黄芩苷组流产率降低,接近对照组,与模型组均有显著差异。孕5天各组血清和子宫匀浆中IFN-γ含量显著上升,其中1 mg黄芩苷组最高。孕酮含量随孕期延长而提高,以0.5和1 mg黄芩苷组最高。表明黄芩苷可剂量依赖性上调孕酮的含量,促进着床期IFN-γ分泌,胚泡附植后又降低IFN-γ的含量,调节着床和妊娠期Th1/Th2细胞因子平衡,影响内分泌-免疫网络,有利于胚胎着床和妊娠维持。     

牛磺胆酸对PD98059介导的NR8383细胞TNF-α的影响

研究牛磺胆酸(taurocholic acid,TCA)对NR8383细胞分泌的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响。采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative,qPCR)法测定TCA对细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated protein kinase,ERK1/2)抑制剂(PD98059)介导的脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的TNF-αmRNA水平的影响,采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immune-sorbent assay,ELISA)测定TCA对PD98059介导的NR8383细胞分泌的TNF-α蛋白水平相对表达量的影响。TCA可显著降低LPS诱导的TNF-α基因、蛋白水平含量(P0.05),PD98059可显著降低TNF-α的表达量。TCA通过影响ERK1/2通路调节LPS诱导的NR8383细胞TNF-α基因、蛋白水平含量。     

苦楝皮妊娠毒性作用及对妊娠早期小鼠子宫NK、 IFN-γ和TNF-α含量的影响

苦楝皮为楝科楝属植物苦楝树(Melia azedarach L．)及川楝树(Melia toosend Sieb．et Zucc．)的根皮及树皮，味苦、性寒，有毒，为杀虫燥湿之良药。主治蛔虫，亦可驱蛲虫，治游风热毒、风疹恶疮及疥癣等症。苦楝皮主要药理成分为川楝素(Toosendanin)，分子式C30H38O11,相对分子质量574．63。川楝素纯品为白色针状晶体，无色、无臭、味苦，易溶于乙醇、甲醇、乙酸乙酯、丙酮等，最早于1953年由四川省中药研究所提取，主要用来驱虫，近年来也用于农业杀虫。川楝素对哺乳动物有一定的毒性，     

Mizolastine对趾叶炎小鼠趾部组织TNF-α表达的影响

采用组织化学和免疫组化的染色方法,检测趾叶炎小鼠趾部组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达水平、炎性细胞、肥大细胞及其脱颗粒的动态变化.结果显示,造模组在免疫后14 d TNF-α表达达到一个峰值,而后表达开始减弱,21 d后表达开始增强,极显著高于同一时相正常组(P<0.01);各治疗组其表达均极显著低于同一时相造模组,其中低剂量治疗组小鼠同一时相均极显著高于正常组(P<0.01),中剂量治疗组小鼠除免疫后前3个时相显著外(P<0.05),免疫后35 d与正常组不显著(P>0.05),高剂量治疗组小鼠除免疫后14 d显著外(P<0.05),其余各时相均与正常组不显著(P>0.05),各治疗组小鼠的TNF-α表达水平并随药物浓度的提高和免疫时间的延长而逐渐减弱,而肥大细胞及其脱颗粒和炎性细胞变化均与TNF-α的表达趋势相吻合.结果表明,Mizolastine可以显著抑制TNF-α的表达.     

黄芩及其成分对RU486诱导小鼠流产的保胎作用及脾脏CD80+、CD86+细胞数量的影响

为了研究共刺激分子CD80(B7-1)、CD86(B7-2)在流产发生机制中的意义,探讨中药黄芩及其成分的安胎作用及机理,本试验用米非司酮(RU486)皮下注射(每鼠90μg)诱导BALB/c小鼠流产,流式细胞仪测定脾脏中CD80 、CD86 细胞的数量。发现RU486诱导流产的小鼠脾脏中CD80 细胞显著升高,CD86 细胞显著减少。预先经口给予保胎中药黄芩及其单体成分黄芩苷和黄芩素,则能显著抑制RU486的流产作用,使母鼠胚胎吸收率降低,脾脏中CD80 细胞数量显著降低,CD86 细胞数量显著升高。这些结果表明,RU486诱导流产与机体共刺激分子CD80 、CD86 有关。保胎中药黄芩及单体成分有调节共刺激分子CD80 、CD86 细胞数量的作用。     

中药“孕宝”对子宫炎病牛肿瘤坏死因子—α含量的影响

为了探讨中药“孕宝”治疗母牛子宫炎提高受胎率的作用机理，本试验用ELISA方法测定了病牛服用中药前后血清及子宫粘液中肿瘤坏死因子－α（TNF-α）的含量（用OD值表示）。结果患子宫炎病牛子宫粘液和血清中OD值均高于健康牛。服用中药使病牛子宫粘液的OD值由0.2358±0.2821下降至0.0653±0．0267（n＝8），对照组病牛由0.2802±0.2772上升至0.3602±0.2763（n＝6）。用药组病牛血清OD值由0.6885±0.1838降至0.5328±0.1058（n＝8），而对照组无明显变化（n＝6）。这些试验表明，中药孕宝有降低子宫炎病牛炎性细胞因子TNF-α的作用。     

橄榄苦苷对LPS诱导小鼠视网膜损伤的保护作用

为研究橄榄苦苷(oleuropein, OP)对LPS诱导小鼠视网膜损伤的保护作用,将SPFKM小鼠随机分成5组,分别为LPS模型组(LPS)、对照组(Control)、OP高、中、低质量浓度(800、400、200 mg/kg)处理组,连续灌胃21 d,从第14天开始,各组小鼠灌胃30 min后,在异氟烷气体辅助麻醉下,小鼠腹腔注射2.0 mg/kg LPS,对照组小鼠腹腔注射2.0 mg/kg生理盐水,连续7 d,建模完成后,检测小鼠血清中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、过氧化氢酶(catalase, CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)活性及白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α (TNF-α)含量,采用免疫组化SP法检测甘油三脂脂肪酶(PNPLA2)在小鼠视网膜各层结构上的分布特点并观察视网膜组织形态学变化。结果显示,OP使小鼠血清中SOD、CAT和GHS-Px活性显著升高(P<0.01),IL-1β和TNF-α含量下降(P<0.05),视网膜中PNPLA2表达量...     

蒲公英提取物对LPS激活小鼠腹腔巨噬细胞炎症因子分泌的影响

采用MTT法检测蒲公英提取物对LPS激活小鼠腹腔巨噬细胞的毒性作用,并应用ELISA法测定蒲公英提取物对脂多糖LPS激活小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α、IL-6和IL-β的含量.结果表明,蒲公英提取物在≤1 mg/mL剂量范围内对巨噬细胞无细胞毒作用,对LPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α,IL-6和IL-1β分泌具有明...     

TNF-α对体外培养奶牛乳腺上皮细胞α-SMA mRNA及蛋白表达的影响

为研究重组人肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA及蛋白表达的影响,本研究采用组织块法体外培养和纯化出BMEC。以不同浓度(0、1 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL)重组人TNF-α作用BMEC,分别于不同时间(12 h、24 h、48 h、72 h)采用实时荧光定量RT-PCR和western blot方法检测α-SMA mRNA相对表达量及其蛋白表达。结果显示,α-SMA mRNA相对表达量12 h TNF-α处理的各组及24 h,10 ng/mL处理组与对照组相比差异显著(p<0.05);随着TNF-α浓度的升高,α-SMA mRNA的相对表达量呈升高趋势;48 h和72 h处理组与对照组相比差异不显著。表明TNF-α对BMECα-SMA mRNA的表达有一定促进作用。然而,α-SMA的蛋白表达量却很低,只有24 h 10 ng/mL处理组检测到目的蛋白的表达。研究表明,外源性TNF-α能够促进BMECα-SMA mRNA和蛋白的表达。