宁夏贺兰山农牧场日光温室根结线虫天敌真菌的分离和初步鉴定

从宁夏贺兰山农牧场日光温室采集的病根、病土样品中获得427个根结线虫样品,其中204个雌成虫,68条幼虫,155个卵.通过分离,从根结线虫雌成虫、幼虫和卵上共获得83株真菌分离物,经初步鉴定除13株由于鉴定性状不明显尚未鉴定外,其它分属于镰刀菌属(Fusarium)、链格孢属(Penicillium)和青霉属(Alternaria)等9个属,其中镰刀菌属分离比例较高,占分离总数的26.5%.     

天津地区温室蔬菜根结线虫种类的多重PCR快速鉴定

为了明确天津主要蔬菜产区温室根结线虫的种类,同时实现根结线虫的快速检测,采集天津市6个主要蔬菜产区的22个村庄根结线虫病样,利用了单头线虫多重PCR的方法进行根结线虫种类鉴定。结果表明:危害天津地区温室蔬菜的根结线虫为南方根结线虫Meloidogyne incognita,并未发现其它根结线虫种类。     

宁夏贺兰山农牧场温室蔬菜根际土壤线虫的初步鉴定

于2009年7~8月,对3种宁夏贺兰山农牧场温室蔬菜即黄瓜、辣椒、茄子的根际土壤线虫进行了取样、线虫分离和形态鉴定等研究。结果表明:该地根际土壤线虫有3个目、3个亚目1、0科1、3个亚科的21个属;在西北地区,由于棚室蔬菜大面积种植为根际土壤线虫的繁殖提供了良好的生活环境,尤其是棚室蔬芽复种指数的增加使得根际线虫的种类和数量逐年增多。     

宁夏永宁葡萄育苗圃根结线虫鉴定

对宁夏永宁县葡萄育苗圃中15个葡萄品种的根结线虫进行形态学和分子生物学鉴定。结果表明:宁夏永宁县葡萄育苗圃根结线虫病危害严重,不同葡萄品种的苗木感病症状表现不同。根据根结线虫雌虫和2龄幼虫的形态特征及雌虫会阴花纹,初步鉴定出该地区葡萄根结线虫的种类是南方根结线虫(Meloidogyne incognita)和花生根结线虫(M.arenaria)。利用根结线虫线粒体DNA(mtDNA)通用引物(C2F3/1108)及序列特异性扩增区(SCAR)特异性引物(MI-F/MI-R和Far F/Far R)对葡萄根结线虫的种类再次鉴定,鉴定结果与形态学鉴定结果一致。另外发现不同葡萄品种上根结线虫的种类与数量存在差异,南方根结线虫(M. incognita)占根结线虫群体的88.57%,为优势种群。     

河南省设施保护地蔬菜根结线虫种类调查及鉴定

为了明确河南省设施保护地蔬菜根结线虫的种类和分布,采集了河南省地区17个县市的根结线虫病样,利用形态鉴别法和PCR分子技术进行根结线虫种类鉴定。结果表明,新乡、驻马店等地区黄瓜、番茄等蔬菜受根结线虫的危害严重,根结指数达到49.8以上,对根结线虫进行形态学鉴定和分子鉴定表明,侵染河南省设施保护地内番茄、黄瓜、甜瓜的主要根结线虫种群属于南方根结线虫1号小种,并未发现其他根结线虫种类。     

甘肃省蔬菜根结线虫发生种类与分布

2008～2011年对甘肃省蔬菜根结线虫的发生种类和分布及种群密度进行了调查。结果表明:依据根结线虫2龄幼虫、雌虫、雄虫及卵的形态学特征,明确了甘肃省蔬菜根结线虫种类为南方根结线虫(M.incognita);根结线虫在甘肃省的保护地蔬菜上普遍发生,几乎遍及全省的各个地区,发生严重,受害的蔬菜种类达20多种,其中番茄、黄瓜及苦瓜受害严重,土壤中的线虫群体密度最高达到1 196条/100g。此外,调查还发现,保护地内的一些杂草,如藜、马齿苋、田旋花和龙葵等上也有根结线虫发生。     

根结线虫会阴花纹的染色方法

会阴花纹是根结线虫种类鉴定的主要依据,它的纹路变化对于判断根结线虫的种类具有重要意义.由于根结线虫的个体小,在进行会阴花纹的制片和显微观察时,常常遇到制作易败,观察模糊的现象,因而种类的正确鉴定受到较大影响.在会阴花纹的常规制片基础上,从根结线虫成虫的获得、会阴花纹的切取、片子的制作等方面进行了一定的改进,主要是用甲烯蓝对其会阴花纹进行了处理,其结果与未处理的相比,具有制作简单、快捷,显微观察纹路清晰、图案易辩、利于判断等优点,对于根结线虫的种类鉴定有一定的应用价值.     

广州地区番石榴根结线虫鉴定与14-3-3基因的克隆

【目的】摸清广州地区番石榴根结线虫的种类、分布及致病机制。【方法】观察番石榴根结线虫的雄虫、二龄幼虫、雌虫及其会阴花纹的形态学特征,根据根结线虫的通用引物#C2F3和#1108对线虫mt DNA的COⅡ和lr RNA基因间序列进行PCR扩增,获得750 bp的特异扩增产物,将扩增片段在Gen Bank上进行Blast比对。通过南方根结线虫与北方根结线虫的14-3-3序列设计简并引物,进一步扩增已鉴定的象耳豆根结线虫的14-3-3基因。【结果】广州地区番石榴根结线虫的形态与象耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii)相似;其扩增片段与象耳豆根结线虫(M.enterolobii)比对,序列相似性在99%以上。扩增了象耳豆根结线虫的14-3-3基因,结果显示该基因的开放阅读框包含783 bp的片段,编码261个氨基酸,命名为Me-14-3-3。【结论】广州地区番石榴根结线虫为象耳豆根结线虫(M.enterolobii),14-3-3蛋白基因被成功克隆,扩增结果为进一步研究14-3-3蛋白基因在象耳豆根结线虫生长发育中的功能、摸清致病机制等方面奠定良好的基础。     

浙南山区茄子根结线虫种类鉴定

采用根结线虫2龄幼虫形态特征测量、雌虫会阴花纹形态特征及分子生物学的鉴定方法对浙南山区保护地茄子的根结线虫进行了种类鉴定。结果表明:浙南山区的茄子根结线虫优势种群为南方根结线虫(Meloidogyne incognita)。     

四川柑桔园线虫种类调查初报

本文报道来自四川省26个县市的78份柑桔园土壤样本的植物线虫种类鉴定结果。共鉴定出16个种,其中新种3个:简阳根结线虫(Meloidogyne jianyangensis Yang,Hu & Chen)、合川沟环线虫(Ogma hechuanensis Hu & Zhu)、陈氏拟盘旋线虫(Rotylenchoides cheni n. sp. )。新纪录1个,即Rotyleachus devonensis Van de Berg。分别介绍了每个种的分类地位和分布地区,并明确柑桔根线虫(Tylenchulus semipenetrans Cobb)和简阳根结线虫可寄生于柑桔,而其他种的寄生性有待观察。     

温湿度及酸碱度对南方根结线虫生长发育的影响

通过室内不同温湿度及酸碱度条件培养,观察温湿度和酸碱溶液对南方根结线虫(Meloidogyne incognita)卵孵化和2龄幼虫(J2)存活的影响,为南方根结线虫种群动态的准确预测和科学防治提供理论依据。结果表明:南方根结线虫卵孵化的适宜温度范围是15～30℃,J2适宜存活的温度是10～25℃;土壤含水量在10%～30%内,南方线虫均可生长发育,但含水量为30%时,对卵孵化和J2存活均具有明显的抑制作用;pH 5～8时,南方根结线虫卵孵化率与J2存活率均较高,表明该虫在弱酸弱碱和中性环境中更易生存。由此可见,不同的温湿度和酸碱溶液对南方根结线虫卵孵化和J2存活均有显著影响。     

番茄砧木及品种对南方根结线虫的抗性鉴定

 为了测定3种番茄砧木及7个番茄品种对南方根结线虫的抗病程度, 采用室内盆栽番茄人工接种南方根结线虫法调查番茄植株对根结线虫的抗性指标, 结果表明: 国外引进的5 个番茄抗性品种(Trofeo、Beatrice、1411、Romana、Garry) 及两个番茄砧木( Energy、He-Man) 均为抗性品种; 荷兰的Cairo和国内的耐线虫番茄品种中华一号为感病品种, 番茄砧木Beaufort为中感品种。     

20％辣根素水乳剂对南方根结线虫的室内毒力

为明确20%辣根素水乳剂对番茄南方根结线虫的毒力效果,以1.8%阿维菌素乳油为药剂对照,采用孔板法测定了其对南方根结线虫二龄幼虫和卵的毒力,结果显示：20%辣根素水乳剂对根结线虫二龄幼虫表现出较高的致死效果,8 000倍液致死率仍达到96.5%,10 000倍液时致死率大幅下降到66.6%,两者防效差异显著;其对根结线虫卵的抑制活性较低,100倍液抑制卵的孵化率仅为69.5%。建议在田间防治根结线虫时,辣根素稀释倍数不超过8 000倍,当土壤中线虫卵块较多时将辣根素与其他药剂（如阿维菌素乳油）联合使用。     

刺角瓜对南方根结线虫的抗性及特征分析

采用温室盆栽人工接种鉴定技术,对刺角瓜（Cucumis metuliferus）‘CM3’品系进行了抗南方根结线虫的鉴定,并且对其根结线虫的发育进行了观察。结果表明,刺角瓜‘CM3’对南方根结线虫具有稳定的抗性,根结数量、大小与对照栽培黄瓜（C. sativus）‘9930’存在显著差异。通过南方根结线虫发育状态观察证实,南方根结线虫在侵染栽培黄瓜21 d 后就能产卵完成其生活史,而侵染刺角瓜后发育缓慢或停止,28 d 也不能完成其生活史,只有少量的能够在42 d 时发育到成虫阶段。试验结果为黄瓜抗根结线虫育种提供了有力依据。     

黄瓜及其近缘种对南方根结线虫的抗性及酶响应变化的研究

 选取6份黄瓜品种和2份近缘种(非洲角和酸黄瓜) 进行了南方根结线虫病抗性鉴定, 2份 近缘野生种高抗南方根结线虫病, 6份黄瓜品种为感病类型。接种前后根系酶活性与病情指数相关性分析表明, 超氧化物歧化酶( SOD) 、过氧化物酶( POD) 、苯丙氨酸解氨酶( PAL) 活性变化与其病情指数分别呈显著正相关( r = 0.8278*) 、极显著负相关( r = - 0.9679** ) 和显著负相关( r = - 0.8499*) 。POD同工酶电泳分析表明, 抗病材料酸黄瓜较未接种对照增加了3 条酶带(相对迁移率Rf = 0.126, 0.188,0.944) , 而感病材料北京截头只增加了1条弱带(Rf = 0.396) 。SOD、POD及PAL活性水平可作为甜瓜属作物抗根结线虫病鉴定的生化指标及常规抗性鉴定方法的补充。     

不同辣椒品种对南方根结线虫的抗性评价

采用室内盆栽辣椒人工接种法,鉴定了24个我国北方地区主栽的辣椒品种对南方根结线虫的抗性。结果表明,11个辣椒品种对南方根结线虫表现为高抗,3个辣椒品种表现为中抗,7个辣椒品种表现为抗病,3个辣椒品种表现为高感。     

转新疆野生樱桃李psoRPM1 基因烟草抵抗南方根结线虫

 从新疆野生樱桃李（Prunus sogdiana）抗南方根结线虫单株中分离克隆得到一个能响应南方 根结线虫侵染的抗病基因psoRPM1,利用农杆菌介导方法将其导入烟草中,并对其抗性进行了鉴定。结 果显示,构建的pCAMBA1305.1 表达载体能成功地将psoRPM1 基因导入高度感病的烟草‘W38’中,并 获得了9 株转基因单株。对转基因单株进行抗性鉴定,结果显示转入psoRPM1 基因后使烟草‘W38’对 南方根结线虫的抗性由高度感病变为中度抗病。这一结果预示着psoRPM1 基因可能是一个新的与抗根结 线虫相关的基因。     

丛枝菌根真菌与葡萄南方根结线虫的相互作用及其对寄主的影响

 在温室盆栽条件下对‘巨峰’葡萄扦插苗接种丛枝菌根(AM) 真菌(Glomus versiforme Berch、Gigaspora margarita Becker & Hall 及Glomus mosseae Nicolson & Gedermann) 和南方根结线虫(Meloidogyne incognita) 。结果表明, 供试AM真菌能不同程度地抑制南方根结线虫病害的发生发展, 降低根围土壤中二龄幼虫数量、卵块直径、平均每个卵块的卵量及平均每克葡萄根系上的卵量, 先接种AM真菌后接种南方根结线虫的处理比同时接种二者抑制线虫病害的效果更好。接种AM真菌可提高葡萄植株光合速率, 增加植株高度、茎粗、叶面积、地上部干样质量和地下部干样质量, 这在一定程度上补偿了由于线虫所造成的损害。此外, 接种南方根结线虫降低了G. mosseae 的根内泡囊和入侵点数量、G. versiforme 及Gi . margarita的侵染率;但增加了G. versiforme 及Gi . margarita 的根内泡囊数及入侵点数。因此, 对每一种AM真菌—植物—线虫组合关系不可能作出统一的概括。     

南方根结线虫拮抗放线菌的分离、鉴定与杀线虫活性分析

采用稀释分离法从连作大豆根际土壤中分离到1株放线菌H-2,对其进行了形态学特征、培养特征、生理生化特征鉴定及16S rDNA分析,初步鉴定H-2菌株为小链霉菌(Streptomyces parvus)。离体生物测定了小链霉菌H-2菌株发酵培养滤液对南方根结线虫和小杆线虫的生物活性。结果表明:H-2菌具有较高的选择性杀线虫活性,对南方根结线虫2龄幼虫及其卵囊的孵化具有较好的抑制作用,对土壤中自由生活的小杆线虫毒性微弱;H-2菌株代谢物5倍液处理24 h后,对南方根结线虫2龄幼虫的致死率达74.35%,卵囊孵化抑制率为78.46%,H-2菌株具有较高应用价值。