泥蚶幼虫及稚贝饵料的研究

在泥蚶[Arca(Anadara)granosa Linne]人工育苗中，选择适宜的饵料和掌握适当的投饵量，是育苗成功的关键因素之一。关于泥蚶幼虫和稚贝的饵料，国外尚未见过报道。国内在七十年代，浙江省海洋水产研究所温州分所、福建省水产研究所、广东省海丰养殖场等单位，曾采用牟氏角毛藻、三角褐指藻、扁藻和小球藻等做为泥蚶幼虫的饵料，取得了一定的成效。     

关于泥蚶人工育苗技术的探讨

泥蚶（Ｔｅｇｉｌｌａｒｃａ ｇｒａｎｏｓａ Ｌｉｎｎａｅｕｓ）俗称血蚶,是山东南部沿海名贵水产品,在我国南方销量很大,给沿海渔民带来了可观的经济收入。但近年来,由于采捕失控,环境污染严重,造成资源急剧减少,文登、崂山、薛家岛等几个主要自然苗种产地形不成规模,有的几乎绝产。因此,发展泥蚶人工育苗显得尤其重要。 泥蚶的人工育苗南方开展较多,北方虽也有一定进展,但是在出苗量上尚没有大的突破。１９９７年笔者同黄海水产研究所在日照市岚山育苗场贝类车间进行了泥蛐人工育苗试验,报道如下：１育苗设施条件１．１蚶苗…     

低坝蓄水泥蚶养殖技术

2002年我们对500亩潮间带滩涂进行改造,建成了低坝蓄水养殖区,进行泥蚶养殖。通过两年来的低坝蓄水泥蚶养殖试验,泥蚶亩均产600千克,最高产量可达800千克,是平涂泥蚶养殖产量的1.5-2倍。现将低坝蓄水泥蚶养殖技术总结如下。     

乐清湾泥蚶、缢蛏体内及养殖水环境细菌菌群的初步调查

本文对浙江省乐清湾滩涂和池塘养殖的泥蚶和缢蛏体内及养殖环境细菌菌群组成进行了初步调查。2000年7月—2001年7月间分四个季度进行采样分析。细菌总数分析表明，蒲歧和翁样海水中细菌总数在10^3—10^5个／mL之间，蒲歧和翁样两地每次海水样品部是池塘细菌总数高于滩涂；无论哪个季节和采样点，在一年内泥蚶和缢蛏体内的细菌总数均高于水中的细菌总数，且缢蛏体内细菌总数高于泥蚶，翁样贝体内细菌总数几乎均高于蒲歧贝体内细菌总数。对贝体内细菌属组成分析表明，在不同季节，同一滩涂或池塘中泥蚶和缢蛏体内菌群的组成及优势菌属比较相近，蒲歧滩涂和池塘、翁样滩涂和池塘贝体内菌群的组成及优势菌属具有一定的相似性；贝体内细菌优势菌属具有明显的季节性变化，在夏季(2001年7月31日)，以弧菌属和气单胞菌属占优势，而在冬季则以莫拉氏菌属占优势。     

乳山湾泥蚶繁殖期及蚶苗的生长与分布

本文报道了对山东乳山县乳山湾泥蚶(Tegillarca granosa)的繁殖期、蚶苗的生长和分布等所调查的结果。调查表明，7月初、7月中旬和8月上旬是乳山湾泥蚶的繁殖盛期；蚶苗入冬时的壳长可达5毫米左右，甚至超过8毫米，蚶苗生长的适宜温度是23-28℃，其月增长可达1．3-1．4毫米；蚶苗的分布与潮位呈明显的负相关，蚶苗集中在低潮线至中潮区下部的狭长地带，在这地带潮位越高蚶苗个体越大；蚶苗分布与底质的关系密切，当底质中直径为190微米的颗粒占65-85％时，蚶苗的分布量较大。文中对采苗预报和采苗时间的确定等提出了建议。     

阳江乐清两地泥蚶肌肉组织营养成分研究

研究结果表明,泥蚶肌肉中含有氨基酸和脂肪酸各18种,氨基酸总含量平均为42．76mg／g,其中必需氨基酸占氨基酸总量的36．17％,呈鲜味和甘味游离氨基酸占氨基酸总量的50．42％;脂肪酸总含量平均为25．86mg／g,其中不饱和脂肪酸占脂肪酸总量的48．88％。统计分析表明,两个地区相比较,阳江泥蚶肌肉中的氨基酸和脂肪酸总含量更为丰富,但乐清泥蚶肌肉的营养结构更佳,营养价值更为突出。     

低坝蓄水养殖泥蚶技术

海门市包场镇沿海滩涂自1999年起进行开发利用，虽已对潮下带滩涂进行了平涂自然性养殖，对潮上带滩涂通过改造进行了高涂蓄水养殖，但尚有数千亩潮间带滩涂未开发利用。从2002年起，对500亩潮间带滩涂进行改造建成了低坝蓄水养殖区，并养殖了我国沿海一种经济价值较高的海产贝类——泥蚶，其肉含丰富的蛋白质和维生素，蚶血鲜红，肉味可口，是传统的滋补食品，为人们所喜爱。2年来的低坝蓄水养殖泥蚶亩产达600奴，最高产量800kg，是平涂养殖泥蚶产量的1．5～2倍，这是潮间带滩涂开发利用的一种新型养殖模式。现将低坝蓄水养殖泥蚶技术总结如下：     

泥蚶与对虾混养技术

泥蚶[Arca(anadara0grahosa]分布较广,太平洋和印度洋沿岸皆有。我国主要产地是广东、福建、浙江、山东、河北等地。泥蛐喜栖息在内湾、河口或浅海风浪较小、水流畅通的软泥滩涂上,其栖息的泥层较浅,稚贝多生活在表层下1～2毫米的泥中,大蛐生活在1～3厘米深处。泥奴主要滤食底栖硅藻,此外,还摄食部分其它小型浮游动物、单细胞藻及有机碎屑等。泥姐的生长速度和环境条件有关,特别是与海水比重和潮区影响有关。比重在1．015左右,生长最快,1．022以上生长较慢;在低潮区的比中、高潮区的生长快,蓄水养蛐又比一般养蚣生长快,这为虾…     

泥蚶低盐度海水育苗稳产技术

笔者于1999-2003年间在浙江温州翁垟镇三屿从事泥蚶育苗生产，总结出一套切实可行的低盐海水生产泥蚶苗种的高产稳产技术工艺，为低盐地区开展泥蚶人工苗种繁育生产提供参考。     

温度和pH值对乐清养殖泥蚶蛋白酶的影响

应用分光光度计比色法测定了pH值和温度对乐清养殖泥蚶蛋白酶活性的影响。结果表明：乐清养殖泥蚶蛋白酶的最适pH值为2.6和5．8，最适温度为40℃。     

泥蚶亲贝工厂化人工培育技术研究

于2001年3-4月在浙江乐清进行了泥蚶亲体工厂化人工促熟培育，前期饵料以小新月菱形藻，微绿球藻为主，后期待温度升至25℃以上时，投喂微绿球藻，金藻，扁藻，室内培育时间30-45d即能达到生产标准，比自然成熟提前20-30d。     

泥蚶血细胞耐饥饿及抗菌力特性的研究

显微镜下观察泥蚶血细胞抗菌能力以及在不同饥饿条件下细胞形态结构的变化。结果表明:经饥饿处理后,泥蚶血细胞随着时间的迁移,出现细胞形态不规则、胞质色泽变浅、胞质颗粒物减少、胞膜边缘光滑度减小等现象。血细胞对大肠杆菌、奥斯陆莫拉氏菌、脲放线杆菌均具较高的噬菌率,噬菌实验过程中血细胞形态结构以及细胞组分不断产生变化。细胞抗菌活性检测结果表明:血细胞对三者都具有一定的抗菌活性,活性依次为:大肠杆菌>奥斯陆莫拉氏菌>脲放线杆菌。     

泥蚶受精过程的细胞学荧光显微观察

采用荧光染色剂ＤＡＰＩ已固定的泥蚶成熟卵和受精卵进色染色的方法,在显微镜下观察泥蚶受精细胞学过程。通过ＤＡＰＩ的染色,在荧光显微镜下可清楚观察到,泥蚶的成熟未受精卵处于第一次成熟分裂的中期,精子入卵后分裂再次启动,释放出第一和第二极体,完成成熟分裂,部分受精卵的第一极体有极明显的分裂现象,精子入卵的部位是随机的,且自精子入卵至成熟分裂完成,入卵的精子在形态等方面将发生一系列变化,形成雄性原核。雌雄     

泥蚶血清及血细胞免疫功能研究

初步研究了泥蚶(Tegillarca granosa)血细胞离体条件下的吞噬作用以及血清因子对其的影响,并测定经大肠杆菌注射以后,泥蚶血清中抗菌、溶菌、酚氧化酶(PO)、超氧化物歧化酶(SOD)活力的变化。结果表明,泥蚶血清能促进血细胞对大肠杆菌的吞噬,但不能识别鸡红细胞。大肠杆菌激发后泥蚶血清中抗菌活力在1h、15h和30h时实验组均显著高于对照组。溶菌活力实验组均高于对照组,但在15h差异不显著。PO活力实验组均低于对照组,在30h时差异极显著。SOD活力在1h时显著低于对照组,而在30h时显著高于对照组。     

泥蚶生长性状相关AFLP分子标记的筛选

以浙江乐清泥蚶养殖群体为育种基础群,经过2代连续选育获得了泥蚶快速生长品系,生长对比试验发现其在壳长、壳高、壳宽、总体质量等性状上都表现出了显著的生长优势。为了研究快速生长品系的遗传结构并筛查生长性状相关的分子标记,利用AFLP标记技术对泥蚶快速生长品系和对照组群体的基因组DNA进行了PCR扩增和电泳检测。采用40对多态性丰富的引物组合在64个个体中共扩增出2180条带谱,扩增位点总多态性比例达85.6%。从Nei’s基因多样性和Shannon’s信息指数反映的遗传多样性来看,选育品系的遗传多样性略高于对照组群体。群体遗传分化系数GST(0.0224)和基因流Nm(22.2811)数据显示,两群体间遗传变异很小,存在明显的基因流动。通过比对AFLP指纹图谱的位点差异,在2180条扩增带中共筛选出了7个显著性差异位点,其中2个位点只在选育品系中出现,2个位点在选育品系中出现的频率极显著高于对照组(P<0.01),另有3个位点在对照组中出现频率显著高于选育品系(P<0.05)。据此初步确定这些位点为与生长性状相关的候选标记。     

泥蚶血清及血细胞免疫功能研究

初步研究了泥蚶（Ｔｅｇｉｌｌａｒｃａｇｒａｎｏｓａ）血细胞离体条件下的吞噬作用以及血清因子对其的影响,并测定经大肠杆菌注射以后,泥蚶血清中抗菌、溶菌、酚氧化酶（ＰＯ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力的变化。结果表明,泥蚶血清能促进血细胞对大肠杆菌的吞噬,但不能识别鸡红细胞。大肠杆菌激发后泥蚶血清中抗菌活力在１ｈ、１５ｈ和３０ｈ时实验组均显著高于对照组。溶菌活力实验组均高于对照组,但在１５ｈ差异不显著。ＰＯ活力实验组均低于对照组,在３０ｈ时差异极显著。ＳＯＤ活力在１ｈ时显著低于对照组,而在３０ｈ时显著高于对照组。     

泥蚶人工育苗及滩涂养成技术研究

通过对泥蚶人工育苗及养成技术生产试验,从饵料、水质、幼虫培育、附着变态、技术、管理措施等方面进行了探讨,取得泥蚶人工育苗生产性突破。共繁育泥蚶苗40．7亿粒,填补了泥蚶工厂化育苗省内空白。     

不同地理种群泥蚶的形态差异与判别分析

泥蚶(Tegillarca granosa Linnaeus)为印度椢魈洋海域的广温广盐性贝类,在我国主要分布于山东以南沿海,是我国沿海滩涂的主要经济养殖贝类.有关泥蚶人工育苗、繁殖与生长和生理生化等方面的研究已有较多报道[1-9],但种内形态特征的地理变异未见报道.本文利用多变量形态度量学方法对我国山东、浙江、广西和韩国4个地理种群泥蚶的形态变异进行了比较研究,探讨了泥蚶种内的形态变异特点与地理分化规律、并建立判别函数,为泥蚶地理种群的识别、种质保护和良种选育提供理论依据.     

泥蚶金属硫蛋白的鉴定、原核重组表达及其组织细胞分布

采用RT-PCR方法扩增、克隆和鉴定了泥蚶(Tegillarca granosa)的金属硫蛋白(Metallothionein,MT)基因(TgMT)的开放阅读框(ORF)。基于金属硫蛋白氨基酸序列构建的系统进化树表明,泥蚶和魁蚶(Scapharca broughtonii)的亲缘关系最近。利用ORF序列,构建原核重组表达质粒。重组质粒经PCR、酶切鉴定及测序验证后转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3),经IPTG诱导,表达重组蛋白,重组蛋白的分子量约为28.3 kD。可溶性分析表明重组蛋白主要以可溶性形式存在。用His-tag柱亲和纯化重组蛋白,并利用重组蛋白制备了兔抗血清。Real-time PCR和Western blot实验表明,金属硫蛋白在泥蚶的各个组织中都有表达,并且在消化腺中的表达量最高。采用激光共聚焦显微镜,对泥蚶的消化腺进行免疫组化定位分析,发现泥蚶的MT主要存在于消化腺腺管上皮细胞的胞质中。泥蚶MT的克隆和表达研究为进一步研究该蛋白在环境监测中的作用、探讨细胞解毒的分子生物学机制奠定了基础。     

化学物质诱导泥蚶幼虫附着变态的研究↑（*）

1996年8～9月间在室内用8种化学诱导物对泥蚶变态前期幼虫进行附着变态诱导实验。结果表明,8种药物对泥蚶幼虫的变态均有一定的诱导作用。其中,3-HT、EPI和NE对幼虫变态的诱导作用极显著,有效浓度范围较广;KCl和Ala的诱导作用较显著,有效浓度范围较窄;而Try、CABA和Ach只有某些浓度组的诱导效果明显,诱导效率对浓度的信赖性较强。从诱导物浓度来看,10-4mol/L的Ala、GABA和10-5mol/L的EPI诱导效果最好,与对照组相比,变态率均提高12%以上。不同处理时间试验表明,处理时间的长短与幼虫的变态率无一致的相关性关系,因药而异;总的来看,处理时间不超过8h的诱导效果较好,时间过长诱导率降低(GABA除外)。其中,用10-5mol/L的Ala处理1～4h或10-5mol/L的EPI处理4h效果最好,与对照组相比,变态率均提高25%以上。8种药物中,只有Try表现出对幼虫明显的毒性影响,Try的浓度越高,处理时间越长,幼虫的死亡率越高,用10-4mol/L的Try处理幼虫3h,死亡率达89%。