鸡生长激素基因的研究进展

生长激素(GH)首次于1945年从垂体中得以分离和鉴定,它是由脑垂体前叶合成和分泌的多肽类激素,由190个左右氨基酸组成,分子量约22KD。鸡生长激素(cGH)由191个氨基酸组成,对鸡的正常生长发育是完全必需的,同时对鸡的多种生产性状也有显著影响,如体重、蛋生产、脂肪蓄积、饲料转化     

rPST对猪肉品质的影响

猪生长激素(porcine somatotropin,PST)是动物垂体前叶合成和分泌的一种肽类激素,是由191个氨基酸构成的单链。相对分子质量为22000u,等电点为6。随着基因工程技术的发展,人们已经可以通过rDNA技术生产出重组猪生长激素(recombinantporcine somatotropin,rPST)。经国内外研究证明,它可以显著改善肉品质量,为人类提供更优良的肉制品。1rPST抑制脂肪沉积提高瘦肉率1.1rPST抑制脂肪沉积提高瘦肉率的表现试验表明,给猪饲喂rPST可以明显降低背膘厚和胴体脂肪率,增加眼肌面积,提高瘦肉率。John P等[1]使用不同剂量的rPST均可以显著减少…     

猪生长激素基因及其多态性的研究概况

就猪生长激素（PGH）基因的定位，结构，多态性研究概况作一简要地介绍，并对以后的研究方向作了展望。     

猪重组生长激素对不同杂交肥育猪脂肪代谢调控的研究

选用“长雅”去势公猪和母猪各12头，“长约”去势公猪24头，按2×2×2因子设计，每头每天分别注射重组生长激素4mg或0mg28d，测定重组生长激素对猪组织中脂肪酸合成酶的影响，研究脂肪酸合成酶与胴体沉积的关系以及对重组生长激素的反应。结果表明，猪重组生长激素显著（P＜0.05）降低组织中脂肪酸合成酶的活性，组织中脂肪酸合成酶和酮体脂肪量具有极显著（P＜0.01）的正相关关系。猪重组生长激素对猪脂肪酸合成酶和脂肪沉积的影响，具有明显的性别效应。     

基因重组猪生长激素对不同杂交肥育猪组织中IGF-ImRNA和IGF-I影响的研究

选用长雅和长约去势公猪各12头 ,按2×2因子设计 ,每头每天分别注射基因重组猪生长激素4mg或0mg28天 ,测定生长激素对组织中IGF -ImRNA和IGF -I的影响。结果表明 ,基因重组猪生长激素分别提高长雅和长约去势公猪血浆和半腱肌中IGF -ImRNA含量53.38 %～97.50 %和40.47 %～106.79 % ;分别提高血浆和半腱肌中IGF -I含量44.21 %～72.04 %和56.03 %～58.32 %。血浆与肌肉中IGF -ImRNA、IGF -I具有显著的正相关关系。外源生长激素对肌肉中IGF -ImRNA和IGF -I的影响 ,具有显著的杂交类型效应     

鸡生长激素受体基因的研究进展

生长激素GH是由脑垂体前叶合成和分泌的多肽类激素,是调控整个机体的重要激素,对动物有显著加快肌肉、骨骼生长,降低脂肪含量,促进生长发育及提高饲料报酬的作用。GH在组织和细胞水平发挥其生理作用的第一步是与靶细胞膜表面的生长激素受体(GHR)结合,激活后使两个生长激素受体形成二聚体,从而形成GH(GHR)2复合物(GH分子上有两个GHR结合位点,每一个GH分子能结合两个GHR分子),并激活一系列生化事件,最终产生生物效应。     

生长激素基因多态性与猪部分生产性能的关系

采用PCR-RFLP对南昌白猪(117头)和大约克夏猪(361头)的GH1基因的-119bp～+486bp进行了扩增,并用HhaⅠ酶切,产生4个等位基因:C1(605bp)、C2(498bp+107bp)、C3(449bp+156bp)和C4(449bp+107bp+49bp)。分析了不同基因型对平均初生重、2月龄体重、6月龄体重、料重比、校正背膘厚、平均背膘厚和瘦肉率等生产性能的影响。结果表明,在南昌白猪中,C2C2基因型猪的2月龄体重比C1C1基因型猪的大,差异显著(P<0.05)。在大约克夏猪中,C3C3基因型猪的初生重最小,与C2C4基因型猪的相比,差异极显著(P<0.01);C2C4基因型猪的6月龄体重最大,与C2C3和C3C3基因型猪的相比,差异显著(P<0.05)。     

外源生长激素对不同杂交肥育猪组织中生长激素水平的影响

选用长雅去势公猪和母猪各 16头 ,长约去势公猪 32头 ,按 2× 2× 2因子设计 ,每头每天分别注射生长激素 4mg或 0mg ,持续 2 8d ,测定外源生长激素对组织中生长激素水平的影响。结果表明 ,外源生长激素分别提高血浆、脂肪和肌肉中生长激素含量 2 2 0 0 %～ 54.2 7%、2 3.53%～ 77.38%和 38.96 %～ 14 4 .0 0 %。不同杂交类型 ,组织中生长激素对外源生长激素的反应 ,长雅公猪大于长约公猪 ;不同性别 ,长雅公猪大于长雅母猪     

猪生长激素基因的克隆及在哺乳动物细胞中的表达

应用RT—PCR技术克隆了猪生长激素(pGH)cDNA，该基因编码蛋白的信号肽序列与已有报道的pGH基因存在2个氨基酸残基的差异，而成熟肽却无差异。将pGHcDNA定向插入真核表达载体VRl020，构建了重组真核表达质粒VpGH；利用脂质体法转染哺乳动物细胞COS7，对转染后的COS7细胞进行RT—PCR、ELlSA和免疫荧光分析，分另1在转录和翻译水平证实了目的基因在COS7细胞中得到正确转染表达。     

研究猪品种生长激素(pGH)基因的多态性

本文在对猪品种生长激素基因多态性进行研究的同时,借助于PCR和测序技术,对11个猪品种的生长激素基因全序列多态性进行检测,43个SNPS和1个位于内含子3的7bp缺少片段被检测出,结果表明,猪品种之间的某种遗传分化在某种程度上不仅仅与地理的分布有关,同时和其基因的交流也有着直接性的关系。     

外源性环核苷酸对肉鸡体外培养脑垂体细胞分泌生长激素的影响

本试验了外源性ｃＡＭＰ（环腺苷酸）和ｃＧＭＰ（环鸟苷酸）对肉鸡垂体细胞释放及分泌生物激素的代谢的影响。结果表明，ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ均具有促进垂体释入生长激素绵作用，但ＣＧＭＰ的作用大于ＣＡＭＰ；且不同浓度水平其作用效果也不相同。经观测测定发现，随着ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ浓度的增加，其促进分泌激素作用加强，当ｃＡＭＰ和ＣＧＭＰ浓度分别达到７５微克／毫升和１００微克／毫 时，生长激素达到最高水平，分别为１     

猪生长激素基因在昆虫细胞中的分泌表达

将PCR将增得到pGH基因插入到带有polh启动子和gp67强信号肽序列的杆状病毒转移载体pAcGP67-A中，构建重组质粒pGP67pGH，并与线性化致死缺失型苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒（AcMNPV-OCC)基因组DNA共转染Sf9细胞，构建出重组病毒AcMNPV-pGP67-pGH-OC^-。感染重组病毒的Hi5细胞的表达产物的SDS-PAGE和Western blot结果表明，细胞可溶蛋白和培养液上清中均有一条分子量约为22kDa的猪生长激素特异性反应带，且培养液上清中的目的蛋白分子量比天然pGH略大一些，薄层扫描仪扫描估测可知，重组pGH分别占细胞可溶蛋白的8．98％和培养液上清总蛋白的3.61%。将表达96h的培养液上清浓缩液进行N－糖基化分析，结果显示重组pGH无N－糖基化加工修饰。     

含第1内含子的猪生长激素cDNA基因的构建

以 PCR方法扩增了猪生长激素 ( p GH)基因的第 1内含子 ,经测序表明 ,扩增的 p GH基因第 1内含子的序列与 Vize发表的序列存在 6个碱基的差异 ,同源性达 97.5%,说明 p GH基因第 1内含子具有多态性。此外 ,还发现此内含子存在有转录因子 ATF的结合位点。利用第 2外显子的 Hinf 位点 ,采用将 3个 DNA片段一步连接的方法 ,将扩增的第 1内含子插入到 p GHc DNA的正确位置上 ,从而构建出含第 1内含子的p GHc DNA。     

蕨麻猪生长激素基因的同源性和多态性分析

为了探索蕨麻猪的遗传多样性,对蕨麻猪生长激素基因序列的多态性进行研究,并选择GenBank中14条序列作为比较研究对象;首次成功克隆了7条蕨麻猪生长激素基因,测出5条蕨麻猪生长激素基因DNA序列,其多态性是内含子1有1个转换和1个颠换;内含子2有2个转换。说明蕨麻猪之间的差异可能与内含子的控制有关。蕨麻猪与其他14种猪之间在编码区和非编码区共检测到核苷酸的变异为155个,内含子有119个,外显子有28个,5′端有8个。其中,颠换104个,转换14个,缺失23个,插入14个。出现碱基取代的位点中,大多数是颠换型突变,颠换与转换之比为7.43∶1,存在颠换偏倚现象。对蕨麻猪生长激素基因同源性百分数和趋异数分析,结果发现,蕨麻猪与小型猪相比同源性较近,蕨麻猪与大型猪同源性较远。蕨麻猪等15 种猪生长激素基因序列树状图分析,结果表明,蕨麻猪与Vize猪有较远的亲缘关系;蕨麻猪与贵州榕江香猪亲缘关系最近。     

表达猪生长激素基因的重组腺病毒的构建及对猪生长的促进效果观察

利用复制缺陷型重组腺病毒作为基因表达载体,将猪生长激素（pGH）基因直接转导到猪体内细胞,研究猪生长激素基因在猪体内的促生长作用.用同源重组的方法,构建含pGH基因的重组腺病毒（Ad-pGH）.将其感染293细胞和PK-15细胞,均可检测到pGH.用1 mL此重组腺病毒（1010TCID50）一次性肌肉注射60日龄的杂交长白猪.结果表明,试验组的猪平均增重比对照组的猪增加37%（注射后第4周）和19%（注射后第6周）;饲料报酬提高28%（注射后第4周）和18%（注射后第6周）.试验结果证明,由重组腺病毒表达的pGH具有生物学活性,在猪体内起到明显的促进生长的作用.重组腺病毒介导的pGH基因在猪体内的表达可维持约4周.     

注射生长激素对猪脂肪组织中脂肪合成酶的影响

注射重组猪生长激素(rpGH)能加快生长速度、降低脂肪率、提高瘦肉率。本试验测定了北京黑猪60头,其中试验组30头,每天注射rpGH2毫克,对照组30头注射1毫升75mMNaHCO_3,均连续注射28天后屠宰,在屠宰时测定了血浆游离脂肪酸(FFA)含量(试验组为673.16±232.35微克当量/升,对照组为412.09±241.84微克当量/升),试验猪比对照猪FFA含量增高63.04％,差异极显著(P<0.01)。取肩背部皮下脂肪组织,分别测定葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(0.313±0.064IU/毫克蛋白),NADP-苹果酸脱氢酶(1.199±0.208 IU/毫克蛋白),NAD-苹果酸脱氢酶(0.9425±0.233 IU/毫克蛋白),异柠檬酸脱氢酶(0.324±0.104 IU/毫克蛋白)的活性,试验猪4种酶活性均低于对照组,差异极显著,(P<0.01),上述酶活性与胴体瘦肉率 呈负相关趋势。     

不同组份对猪生长激素脂质体化学稳定性的影响

本文通过逆相蒸发法制备猪生长激素（PST）脂质体，重点是探讨不同组份原料对PST脂质体化学稳定性的影响。经过试验论证，加入抗氧化剂后，包封率明显提高，而且加BHT的效果比加维生素E（VE）的效果要好。通过对大豆卵磷脂和蛋黄卵磷脂的对比实验，证明了蛋黄卵磷脂所制脂质体效果较好，通过测定酸价，丙二醛含量的变化也证明了这一点。为PST脂质体的临床应用做初步的研究。