利用RNA干扰技术治疗中蜂囊状幼虫病新方法取得进展

<正>中蜂囊状幼虫病自1972年在我国广东省发生后,迅速蔓延至全国的中华蜜蜂主产区,成为饲养的中华蜜蜂毁灭性病害。虽然经40多年人工选育和自然进化,中蜂囊状幼虫病已不再具有毁灭性,但仍是中华蜜蜂饲养最主要的病害。中蜂囊状幼虫病的病原是中蜂囊状幼虫病病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV),其感染1³日龄幼虫,幼虫体内聚集大量的液体和病毒粒     

辽西地区中华蜜蜂囊状幼虫病病毒部分结构基因的克隆及分析

为了检测感染辽西地区中华蜜蜂的囊状幼虫病病毒(Sacbrood bee virus,SBV),克隆辽西地区中华蜜蜂囊状幼虫病病毒部分结构基因并分析,试验设计中华蜜蜂囊状幼虫病病毒5′端2对特异性引物,用Trizol法提取囊状幼虫病病毒总RNA,通过RT-PCR方法扩增病毒基因组的部分序列,转入pMD18-T载体进行克隆扩增后测序。结果表明:测序的SBV部分基因总长831bp,编码序列长496bp,与我国广东省的病毒序列同源性为94%;根据不同地区此病毒5′端序列进行遗传进化分析,发现至少有3个不同的蜜蜂囊状幼虫病病毒基因型。结果说明不同地区SBV5′端结构基因存在的差异可能与致病性有关。     

蜜蜂囊状幼虫病RT-PCR快速检测方法的初步应用

蜜蜂的囊状幼虫病是中华蜜蜂常见且为害严重的疾病,病原为小正链RNA病毒。实验通过RT-PCR的方法检测出了该病毒,经序列测定发现与广东的蜜蜂囊状幼虫病毒基因序列有所差别,推测可能是由于地区和蜜蜂种类差异导致的。     

辽宁地区中华蜜蜂囊状幼虫病的RT--PCR检测

蜜蜂的囊状幼虫病是中华蜜蜂常见且危害严重的疾病。通过RT-PCR方法,我们在辽宁地区检测出了该病,并且辽宁地区的蜂囊状幼虫病病毒与早期我国在广东地区检测到的中蜂囊状幼虫病病毒基因序列有所不同,推测中蜂囊状幼虫病病毒可能存在地区的差异性。     

辽宁地区中华蜜蜂囊状幼虫病的RT-PCR检测

蜜蜂的囊状幼虫病是中华蜜蜂常见且危害严重的疾病。通过RT-PCR方法,我们在辽宁地区检测出了该病,并且辽宁地区的蜂囊状幼虫病病毒与早期我国在广东地区检测到的中蜂囊状幼虫病病毒基因序列有所不同,推测中蜂囊状幼虫病病毒可能存在地区的差异性。     

蜜蜂囊状幼虫病病毒的基因型分析

为了解蜜蜂囊状幼虫病病毒的遗传进化规律,依据SB14f/SB15r引物所扩增的RNA依赖的RNA聚合酶基因片段序列对该病毒进行基因型分析。结果表明,该病毒主要分为欧洲型、远东型和南非型3个基因型。欧洲基因型分为中欧和英国亚型,远东基因型分为东方蜜蜂和西蜂亚型。提示蜜蜂囊状幼虫病病毒总体上按地域分型。     

囊状幼虫病的病理特征及防治

囊状幼虫病是一种属于马勒托尔族的滤过性病毒引起的蜜蜂幼虫传染病。它在寒季的前期发病,蜜蜂幼虫大量死亡。死幼虫呈囊状形态,囊中充满粒状水液。鉴定囊状幼虫病滤过性病毒时,将死幼虫组织放入氧化硅过滤器或瓷性过滤器内,     

蜜蜂囊状幼虫病防治

<正>蜜蜂囊状幼虫病又称"尖头病"、"囊雏病",是由肠道病毒属的囊状幼虫病毒引起的传染病。西方蜜蜂对该病的抵抗力较强,感染后常可自愈,东方蜜蜂对该病的抵抗力弱,在该病大面积流行时,中蜂几乎遭到毁灭性打击。该病是蜜蜂的主要病害之一。1病原引起蜜蜂囊状幼虫病的病原是肠道病毒属的囊状幼虫病毒。该病毒对外界环境的抵抗力不强,其在59℃热水中只能生存10min,室温干燥     

一种囊状幼虫病毒分子标记的克隆

蜜蜂囊状幼虫病是由囊状幼虫病毒(Sacbrood virus,SBV)侵染蜜蜂幼虫而导致的一种致死性病毒病。本研究根据Gene Bank上SBV多个毒株的基因组信息设计合成一对特异性引物,从出现囊状幼虫病典型症状的中蜂幼虫中扩增出一个大小约为106 bp的特异性SBV106片段,进而将其克隆进p GEM-T载体,经蓝白斑筛选出阳性质粒,Eco RⅠ酶切可得约106 bp大小的目的片段,阳性质粒原菌液测序结果显示该片段与SBV全序列(收录号:AF092924)的相似度达100%,证明该序列为SBV特有序列。上述结果表明SBV106片段可作为检测蜜蜂囊状幼虫病的分子标记,应用于养蜂生产。     

山东省中华蜜蜂中囊病发生情况及防控技术建议规程

正中华蜜蜂囊状幼虫病(ChineseSacbroodDisease),简称中囊病,是由蜜蜂囊状幼虫病毒引起的一种病毒病。中华蜜蜂极易感染该病毒,蜂群一旦发病,蜜蜂死亡率较高,而且会迅速在其他蜂群传播,危害极其严重。山东是传统的中华蜜蜂养殖大省,中蜂饲养具有悠久的历史。2017年,山东省现代农业产业技术体系蜂产业创新团队对我省中蜂主要存养区的蜜蜂病害发生情况进行了详细调查。调查发现,本省近年来中蜂囊状幼虫病发病     

中蜂囊状幼虫病病毒特异性半套式RT-PCR检测方法的建立及应用

基于中蜂囊状幼虫病病毒基因组序列AF469603中的RNA依赖的RNA聚合酶基因,建立该病毒的半套式RT-PCR检测方法.利用建立的方法检测有典型临床症状的病死中蜂幼虫,可扩增到特异的目的片段,序列分析得出,PCR扩增片段与AF469603同源性高于97%,与其他病原无同源性,表明该方法可用于临床诊断和流行病学研究.     

陕北中蜂囊状幼虫病抗病品系的选育

中华蜜蜂,简称中蜂。是我国独有的蜂种,囊状幼虫病是目前危害中华蜜蜂最主要的病害。试验以囊状幼虫病流行后自愈的蜂群为基础选育素材,采用人为感染、逐级淘汰、闭锁繁育、固定有益基因的育种手段,进行中蜂囊状幼虫病抗病品系的选育,大大地提高了其抵抗囊状幼虫病的性能。     

中蜂囊状幼虫病毒多克隆抗体的制备

利用中蜂囊状幼虫病毒（CSBV）灭活疫苗作为抗原制备兔多克隆抗体。利用RT- PCR方法对疑似感染CSBV的中蜂样品进行检测,检测阳性后,经差速离心法纯化CSBV,并用BCA方法检测病毒浓度,将病毒浓度稀释至0.25 mg/mL。按稀释后的CSBV体积的0.3%加入甲醛灭活进行灭活,制备CSBV油乳剂灭活苗,经无菌、安全性和稳定性检验合格后,对新西兰大白兔进行3次免疫,每次间隔2周,对其产生的多克隆抗体进行了SDS- PAGE分析和效价检测,结果表明制备的兔多克隆抗体效价OD值最高可达到1.109。实现了中蜂囊状幼虫病毒高效价多克隆抗体的制备,为深入研究CSBV和综合防治奠定了基础。     

蜜蜂囊状幼虫病研究进展

蜜蜂囊状幼虫病对中蜂危害极大,近年该病危害日趋严重。对蜜蜂囊状幼虫病的病原学、流行病学、诊断方法和防治措施,蜜蜂对囊状幼虫病的防御机制等进行论述。     

长白山区西部中囊病消长规律及时间隔离等防治方法的研究

对近几年传入长白山区西部的中蜂囊状幼虫病消长规律进行了研究,不仅对抗病中蜂和营养杂交中蜂进行了试验观察,而且在试验和调查过程中发现中囊病在长白山区西部传播的链条上有一个可以切断的薄弱环节:在中囊病区内,病蜂病虫断绝,病毒消亡1a左右的地方试养中蜂,不发生中囊病。在此基础上进一步提出了在当地条件下利用时间隔离法防治中囊病。     

四川省东方蜜蜂病毒病感染状况调查

为了解四川省东方蜜蜂主要病毒病:蜜蜂黑王台病毒(BQCV)、畸翅病毒(DWV)、囊状幼虫病毒(SBV)、克什米尔蜜蜂病毒(KBV)、急性蜜蜂麻痹病毒(ABPV)和慢性蜜蜂麻痹病毒(CBPV)的感染状况。采用RT-PCR方法对来自四川省9个地区共270份东方蜜蜂样品进行快速病原学检测。调查结果显示:四川省东方蜜蜂群中有5种病毒的感染;其中,BQCV总阳性率为17.8%,KBV总阳性率为3.0%,SBV总阳性率为1.1%,ABPV总阳性率为1.9%,CBPV总阳性率为2.2%。在被调查的9个地区中,有7个地区蜂群存在至少1种以上病毒病感染的现状,表明四川省东方蜜蜂群疾病感染状况较为严重,其对养蜂业可持续发展的潜在危险需要给予充分关注。     

Prevalence of honeybee viruses in Apis mellifera in Gifu prefecture of Japan

Viral infection damages honeybee colony health. Viruses can be carried by queen bees and apicultural production materials when imported from foreign countries. We investigated seven honeybee viruses in worker bees (Apis mellifera) from 26 healthy apiaries in Gifu, Japan between 2018 and 2019. Black queen cell virus (BQCV) was detected in 23 (88.5%) of the apiaries, followed by Israeli acute paralysis virus (42.3%), deformed wing virus (DWV) (38.5%), and sacbrood virus (3.8%). In phylogenetic analysis, BQCV and DWV in Gifu were related to those in China and South Korea. Additionally, a high prevalence of BQCV was observed among worker bees in BQCV-positive colonies. Therefore, BQCV horizontal transmission among worker bees may contribute to the high prevalence of BQCV in Gifu.     

中蜂雄蜂精液与工蜂中蜂囊状幼虫病毒的检测

为了解同群中蜂雄蜂精液及工蜂中蜂囊状幼虫病毒(CSBV)的感染情况,寻找CSBV交尾传播的间接证据,利用RT-PCR方法对云南省蒙自市东村的3个中蜂群雄蜂精液及工蜂样本的CSBV进行检测。结果显示,3个蜂群的工蜂均被检测出携带CSBV,相对应的本群雄蜂精液样本也被检测出携带CSBV,二者呈正相关关系,雄蜂精液样本的平均感染率达到93.33%。结果表明,雄蜂精液是CSBV的携带者,为CSBV的交尾传播提供了间接证据。