The B and T Cell Responses to Orf Virus Infection of Ovine Skin

Abstract— Local scarification and infection with orf virus induced an influx into the dermis of a significantly greater number of T cells than scarification alone. These cells accumulated underneath the early lesion caused by the scarification and later within epidermal pustules which formed as a result of infection. Cells of the γδ, T₄ and T₈ subsets were all implicated in this response. Dermal B cell numbers also rose in response to infection but relatively fewer B cells were found within pustules. Dendritic cells reactive for IgM were prominent under the initial lesion caused by scarification and dense aggregations occurred under the degenerating epidermis about 72 h after infection. Résumé— L'infection par scarification locale de virus de l'ecthyma contagieux du mouton a provoqué un influx de lymphocytes T dans le derme significativement plus important que lors de scarification seule. Ces cellules s'accumulaient sous les lésions précoces provoquées par la scarification et plus tard au niveau des pustules resultant de l'infection. Les lymphocytes T3, T4 et γδ, étaient impliqués dans cette reaction. Le nombre de lymphocytes B dermiques augmentait aussi en réponse à l'infection, mais peu d'entre eux étaient retrouvér dans les pustules. Les cellules répondant à l'lgM étaient majoritaires sous les seules lésions provoquées par scarification et des agrégations denses apparaissaient sous l'épiderme dégénéré 72 heures aprés l'infection. Zusammenfassung— Die lokale Skarifikation und Infektion mit dem Orf-Virus führte zum Einwandern von einer signifikant größeren Anzahl von T-Zellen in die Dermis, als die Skarifikation allein. Die Zellen akkumulierten sich unter der frühen Skarifikationsläsion und später innerhalb der epidermalen Pusteln, die sich durch die Infektion ergaben. Zellen der Gamma-delta-, T4-und T8-SubpopuIationen waren an dieser Reaktion beteiligt. Auch die Anzahl dermaler B-Zellen stieg als Antwort auf die Infektion, aber innerhalb der Pusteln wurden, relativ gesehen, weniger B-Zellen gefunden. Die auf IgM reaktiven Denritenzellen hoben sich unter der initialen Läsion durch die Skarifikation hervor, dichte Aggregationen fanden sich unter der degenerierenden Epidermis ungefähr 72 Stunden nach der Infektion. Resumen Infección e introducción por medio de multiples punturas cutáneas del virus Orf, produjo un mayor aflujo de linfocitos T en la dermis que punturas de manera aislada. Éstas células se acumularon debajo de la lesión primaria causada por las punturas y de forma tardía en las pústulas epidérmicas, las cuales se formaron como resultado de la infección. Las células del tipo yó de los subgrupos T4 y T8, se encontraron todas implicadas en esta respuesta. Los números de linficitos B en la dermis se vieron aumentados como reacción a la infección, pero menos en las pústulas, relativamente. Células dentríticas reactivas a la IgM fueron prevalentes en la lesión inicial por las multiples punturas, y 72 horas despues de la infección, se detectaron agregaciones densas que ocurrieron bajo la epidermis en degeneración.     

The Pathological Changes and Polymorphonuclear and Mast Cell Responses in the Skin of Specific Pathogen-free Lambs Following Primary and Secondary Challenge with Orf Virus

Abstract— The primary and secondary responses in the skin of specific pathogen free (SPF) lambs to scarification and orf virus infection were studied and the temporal changes in numbers of dermal polymorphonuclear and mast cells were examined. The clinical and histopathological changes after primary infection were similar to those previously described after secondary infection although there was a more severe reaction and an increased timescale. It is concluded that relevant data on the cellular processes involved in the host response to orf virus can be obtained from previously infected animals. Two stages of cutaneous response were identified histologically; (i) repair of the injury and (ii) reaction to virus replication, which, as determined by antigen location, initially seemed to occur within the newly repaired epidermis. The second stage comprised a localised inflammatory response and epidermal proliferation beneath it, resulting in isolation of the infected zone. The response involved neutrophils, basophils and possibly mast cells but not eosinophils. Résumé— Les résponses primaires et secondaires dans la peau d'agneaux SPF à la scarification et à l'infection par le virus de l'ecthyma contagieux ont étéétudiées, ainsi que les modifications dans le temps du nombre de leucocytes et de mastocytes dermiques. Les modifications cliniques et histologiques après une primoinfection étaient similaires à celles que l'on à décrites précédemment lors d'infection secondaire, encore que la réaction soit plus sévère et plus durable. Il a été conclu que des données fiables concernant les processus cellulaires impliqués dans la réponse de l'hôte au virus de l'ecthyma contagieux pouvaient être obtenues à partir d'animaux qui avaient déjàété infectés. Deux étapes ont été identifiées histologiquement dans la réponse cutanée: (i) réparation du traumatisme et (ii) réaction à la réplication virale, qui, comme le démontre la localisation de l'antigène, semble initialement se faire dans l'épiderme cicatriciel. La seconde étape comprend une réponse inflammatoire localisée et une prolifération épidermique sous-jacente, aboutissant à une excision de la zone infectée. La réponse implique une participation des neutrophiles, des basophiles, des mastocytes mais, pas des éosinophiles. Zusammenfassung— Die primären und sekundären Reaktionen in der Haut von spezifisch-pathogen-freíen (SPF) Lämmern nach Skarifikation und Infektion mit ORF-Viren wurden untersucht und Daten über die temporafen Veränderungen in der Zahl der dermalen polymorphonukleären Zellen und Mastzellen erhoben. Die klinischen und histopathologischen Veränderungen nach der primären Infektion ähnelten denen die nach sekundärer Infektion beschrieben wurden. Die Reaktion war jedoch schwerer und die Dauer länger. Man schließt daraus, daß relevante daten über die zellulären Prozesse, die bei der Reaktion des Wirtsorganismus auf ORF-Viren beteilligt sind, von schon früher intizierten Individuen erhalten werden können. Histologisch lassen sich zwei Stadien unterscheiden: (I) Reparation des Defekts und (II) Reaktion auf die Virusreplikation, die—auch Antigenlokalisierung bestimmt—anfangs zeitlich mit der neu hergestellt Epidermis zusammenfällt. Das zweite Stadium umfaßt eine lokalisierte Entzündungsreaktion mit einer darunterliegenden, epidermalen Proliferation, wodurch der infizierte Bereich abgestoßen wird. An der Reaktion sind neutrophile und basophile Granulozyten, möglicherweise auch Mastzellen beteiligt, nicht aber eosinophile Granulozyten. Resumen En este trabajo se describen las respuestas primarias y secundarias en la piel de corderos SPF (specific pathogen free) después de una escarificación y aplicación de virus del ectima; así como los cambios que se producen en los polimorfonucleares y las células cebadas de la dermis. Los cambios clínicos e histopatológicos después de la infección primaria fueron semejantes a los observados después de la infección secundaria, aunque la infección fue más intensa y más duradera. Se concluye que se pueden obtener datos relevantes sobre los procesos celulares que participan en la respuesta del hospedador contra el virus del ectima a partir de animales infectados previamente. Histológicamente se identificaron dos etapas en la respuesta cutánea; (1) preparación de la agresión y (2) reacción a la replicación viral, que, de acuerdo con la localización del antígeno, parece ocurrir inicialmente en la epidermis recientemente regenerada. La segunda etapa consistía fundamentalmente en una respuesta inflamatoria localizada y en una regeneración epidérmica junto a la misma, que resultaba en una escisión de la zona infectada. En la respuesta participaban neutrófilos, basófilos y probablemente células cebadas aunque no eosinófilos.     

Location and Spread of Orf Virus Antigen in Infected Ovine Skin

Abstract— Studies of the distribution of orf antigen in ovine skin following scarification and infection indicate that the virus does not immediately replicate in the damaged epithelium; antigen first appears immediately under the stratum corneum at the centre of a newly-formed epidermis which develops to cover the wound. It now seems likely that the virus initially infects the cells of the stratum basale at the margins of the wound and is transferred to the daughter cells which traverse across the exposed dermis to form the basis of the new epidermis. Replication appears to begin during differentiation of the new epidermis at a stage which has still to be identified. The infection spreads laterally and uniformly from the new epidermis, initially in the outer stratum spinosum and subsequently throughout the entire depth of the epidermis except the stratum basale. A similar pattern of spread occurs in the hair follicle but only to a level above that of the sebaceous gland duct. Résumé— Les études sur la distribution de l'antigène de l'ecthyma dans la peau de mouton après scarification et infection indiquent que le virus ne se réplique pas immédiatement dans l'épithélium endommagé; l'antigène apparaît d'abord immédiatement sur la couche cornée au centre d'un épidemic néoformé qui se développe pour recouvrir la blessure. Il apparaît maintenant probable que le virus infecte initialement les cellules de la couche basale aux marges de la blessure et qu'il est transmis aux cellules filles qui franchissent le derme mis à nu pour former la base du nouvel épiderme. La réplication semble commencer durant la différentiation du nouvel épiderme à un stade qui n'est pas encore identifié. L'infection s'étend latéralement et uniformément à partir du nouvel épiderme, au départ dans la partie externe de la couche de Malpighi puls ensuite à travers toute l'épaisseur de l'épiderme sauf la couche basale. Un phénomène d'extension similaire se produit dans le follicule pileux mais seulement au dessus du niveau des canaux sébacés. Zussammenfassung— Untersuchungen über die Verteilung von orf-Antigenen in der Haut von Schafen nach Skarifikation und Infektion zeigen, daß sich das Virus nicht safort im beschädigten Epithel vermehrt; Antigen ist zuerst direkt uriter dem Stratum corneum im Mittelpunkt einer neu gebildeten Epidermis, die sich zur Abdeckung der Wunde bildet, zu finden. Es scheint jetzt wahrscheinlich, daß das Virus zunächst die Zellen des Stratum basale im Randbereich der Wunde infizieret und dann auf Tochterzellen übertragen wird, die die exponierte Dermis überqueren, um eine neue Epidermis zu bilden. Die Replikation scheint während der Differenzierungsphase der neuen Epidermis zu einem Zeitpunkt zu beginnen, der noch genauer bestimmt werden muß. Die Infektion breitet sich lateral und gleichmäßig von der neuen Epidermis aus, und zwar anfänglich im äußeren Bereich des Stratum spinosum und anschließend durch die gesamte Tiefe der Epidermis mit Ausnahme des Stratum basale. Ein ähnliches Ausbreitungsmuster gibt es im Haarfollikel, jedoch nur bis oberhalb des Ausführungsganges der Talgdrüse. Resumen Los estudios realizados sobre la distributión del antígeno orf en la piel de oveja después de infección mediante escarificación indican que el virus no se replica de forma inmediata en el epitelio lesionado; el antígeno aparece en primer lugar debajo del estrato córneo en la región central de un epitelio neoformado que se desarrolla para cubrir la zona herida. Parece ser que el virus incialmente infecta las células del estrato basal de los márgenes de la herida y que después es transferido a las células hijas que se desplazan por encima de la dermis para formar la nueva epidermis. La replicación parece inciarse durante la diferenciación de la nueva epidermis, en un estadío que todavía no se ha identificado. La infección se extiende lateralmente de una forma uniforme a partir de la nueva epidermis, en principio en el estrato espinoso y posteriormente a toda la epidermis excepto al estrato basal. Un patrón similar de extensión se observa en los folículos pilosos, aunque sólo por encima de la glándula sebacea.     

Changes in the MHC Class II+ Dendritic Cell Population of Ovine Skin In Response to Orf Virus Infection

Abstract— Class II+ dendritic cells were widely distributed throughout normal ovine skin in two main locations: a) in or immediately adjacent to the epidermis and epidermal appendages and b) in the vicinity of the blood vessels. They are unlikely to represent a homogeneous population particularly since Langerhans cells, which previously have been found throughout the epidermal appendages, were located only in the epidermis using acetylcholinesterase staining. Following infection with orf virus, a dense mass of closely associated class II+ dendritic cells develops in the exposed necrotising dermis, adjacent to infected hair follicles and under infected degenerating epidermis. These cells interact and appear to form a barrier to invasion, a framework for immune defence and a template for subsequent epidermal repair; they seem to provide the basis of a highly integrated local dermal defence system. Résumé— Des cellules dendritiques de classe II+étaient largement réparties dans la peau ovine normale dans deux principales zones a) dans l'épiderme et les annexes épidermiques ou dans leur voisnage immédiat b) au voisinage des vaisseaux sanguins. Il est peu probable qu'elles représentant une population homogène particulièrement parce que les cellules de Langerhaps, qui ont été découvertes précédemment dans l'ensemble des annexes épidermiques, furent localisées seulement dans l'épiderme en utilisant une coloration à l'acétylcholinesterase. Après une infection par le virus de l'ecthyma, il se forme une masse dense de cellules dendritiques de classe II+étroitement associées, dans le derme nécrotique atteint, adjacente aux follicules pileux infectés et sous l'épiderme dégénératif infecté. Ces cellules interagissent et apparaissent former une barrière à l'invasion, un cadre pour les défenses immunitaires et un patron pour la réparation épidermique ultérieure; elles semblent fournir les bases d'un système de défense dermique local hautement intégré. Zusammenfassung— Klasse II+-Dendritenzellen waren in der gesamten Haut von normalen Schafen in vorwiegend zwei Bereichen verbreitet: a) in oder unmittelbar neben der Epidermis und der epidermalen Anhangsgebiete und b) in dor Nähe dar Blutgefäße. Sie stellen wahrscheinlich keine homogène Population dar, da die Langerhanszellen, die früher übarall in den epidermalen Anhangsgebilden nachgewiesen wurden, bei Acetylcholinesterase-Färbung nur in der Epidermis zu finden waren. Nach einer Orf-Virus-Infektion formiert sich eine dichte Masse aus eng verbundenen Klasse II+-Dendritenzellen in der betroffenen nekrotisierenden Dermis unmittelbar neben den infizierten Haarfollikeln und unter der infizierten, degenerierenden Epidermis. Diese Zellen stehen untereinander in Verbindung und bilden anscheinend eine Barrière gegen die Invasion, ein Gorüst für die Immunabwehr und einen Ausgangs punkt für die anschließenden Reparaturvorgänge in der Epidermis. Sie scheinen als Basis eines hochentwickelten lokalen Abwehrsystems der Haut zu fungieren. Resumen Células dendríticas de class II+ se observaron en gran cantidad en la piel de la oveja especialmente en dos localizaciones: a) en la epidermis, en la dermis muy próxima a la epidermis y en anejos cutáneos y b) en las proximidades de los vasos sanguíneos. No parece tratarse de una población homogénea de células puesto que las células de Langerhans, que previamente se habían encontrado en los anejos epidérmicos, se encontraron únicamente en la epidermis utilizando técnicas de detección del acetilcol-inesterasa. Después de la infección con el virus del ectima contagioso ovino se observó una masa de células dendríticas de clase II, dispuestas de forma muy densa, en las proximidades de la dermis necrosada y de los folículos pilosos y de la epidermis infectada. Eatas células interaccionan entre si y parecen formar una barrera contra la invasión, una red inmunitaria de defensa y participar en la reparación de la epidermis; parece ser que esta población de células dendriticas son la base de un sistema de defensa dérmico local altamente integrado.     

羊传染性脓疱病毒感染山羊皮肤成纤维上皮细胞差异表达miRNA分析

旨在研究羊传染性脓疱病毒（orf virus,orfv）感染山羊皮肤成纤维细胞（goat skin fibroblasts cell,GSF）对GSF细胞microRNA（miRNA）表达谱影响,探究miRNA在orfv感染过程中的作用及调控机制。分别提取感染和未感染orfv的GSF细胞总RNA,构建miRNA文库,利用高通量测序技术进行miRNA差异表达分析,对差异表达miRNA靶基因进行预测,并进行GO和KEGG分析,随机选取10个差异miRNA进行RT-qPCR验证。结果显示,orfv感染组和未感染GSF细胞组相比共有678个显著差异表达的miRNA（fold change≥1.5）,其中,上调表达miRNA有509个,下调表达miRNA有169个,uniq_miRNA的Venn图分析显示,感染组和对照组共有的miRNA仅占8.21%;GO和KEGG分析显示,差异表达miRNA主要参与脂质代谢、受体及细胞因子信号转导等细胞生物学过程,RT-qPCR验证结果与高通量测序结果一致。本研究结果表明,orfv感染GSF细胞对其编码的miRNA有显著影响,获得大量GSF细胞编码的与orfv感染相关的差异miRNA,为进一步从宿主miRNA层面揭示orfv感染和致病机制提供了参考依据。     

A Study of the Number and Distribution of Cutaneous Mast Cells in Cats with Disease not Affecting the Skin

Resumen— El propósito de este estudio era investigar el número de mastocitos dérmicos en diferentes partes de la piel de gatos con enfermedad que no afecta a la piel. Se hizo un recuento de el número de mastocitos en 10 partes diferentes de la piel de 12 gatos sin evidencia de enfermedad de la piel. Se fijaron muestras de biopsia de piel en fijador Carnoy y formalina neutral atenuada, y se tiñeron con azul touluidina. Se realizaron recuentos de celulas de 6 campos de alto poder (400), de cada parte. Los recuentos de mastocitos combinados para todos los gatos, todas las partes y ambos fijadores variaban de 0–60 con un promedio de 12.5 por campo de alto poder y eran mas altos en el aspecto caudal del pabellón auricular y en la barbilla. El tipo de fijador usado no pareció influir en el recuento de mastocitos. [Foster, A. P. A study of the number and distribution of cutaneous mast cells in cats with diseases not affecting the skin (Un estudio de el número y distribución de mastocitos cutaneos en gatos con enfermedad que no afecta a la piel).
Abstract— The purpose of this study was to investigate the number of dermal mast cells in different skin sites from cats with disease not affecting the skin. The number of mast cells in the skin of 12 cats without evidence of skin disease was counted from 10 different skin sites. Skin biopsy samples were fixed in Carnoy's fixative and neutral buffered formalin and stained with toluidine blue. Cell counts from 6 high power fields (400) were made for each site. Mast cell counts combined for all cats, all sites and both fixatives ranged from 0 to 60 with a mean of 12.5 per high power field and were highest from the caudal aspect of the pinna and the chin. The type of fixative used did not appear to influence mast cell counts.     

雏鸡感染马立克氏病病毒后免疫器官组织抗体生成细胞的变化

以马立克氏病病毒（ＭＤＶ）感染１日龄肉用雏鸡，在感染后５、２５、４５ｄ采取法氏囊、脾脏、盲肠扁桃体和哈德尔腺，用彩色免疫金银染色法检查免疫器官组织中ＩｇＧ、ＩｇＭ和ＩｇＡ抗体生成细胞数量的动态变化。结果：ＭＤＶ感染雏鸡的法氏囊、脾脏和哈德尔腺中以ＩｇＧ抗体生成细胞居多，ＩｇＧ、ＩｇＭ和ＩｇＡ抗体生成细胞均较正常对照鸡显著减少；盲肠扁桃体中以ＩｇＡ抗体生成细胞居多，ＩｇＡ、ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体生成细胞数量显著低于正常对照鸡。由此表明，ＭＤＶ感染鸡全身免疫器官和消化道、呼吸道局部粘膜体液免疫机能明显抑制。     

NO对柔嫩艾美耳球虫感染鸡盲肠粘膜大细胞及组胺的影响

将试验鸡分为5组，每组18只，除空白对照组外，其他组鸡均用柔艾美耳球虫（E.tenella)进行免疫和攻毒接种，其中3组分别给予氨基胍（AG），N^W-硝基－L－精氨酸甲酯（L－NAME）和L-精氨酸（NOS底物，L－Arg）处理，结果表明，血清中NO^-2浓度以AG处理组最低，L－NAME处理组和L－Arg处理组比空白对照组明显升高，但都显著低于免疫攻毒组（P＜0．05），AG处理组盲肠肥大细胞（MC）数与空白对照组无明显差异，而极显著地高于其他组（P＜0．01），免疫攻毒组盲肠MC数明显高于L－NAME处理组和L－Arg处理组，而L－NAME处理组与L－Arg处理组之间则没有明显差异，AG处理组鸡盲肠组胺（HT）含量极显著高于其他组（P＜0．01）；LAME处理和L－Arg处理组的HT含量差异不显著，但都高于空白对照组而你于免疫攻毒组。体外试验明，磷酸组织胺能够明显抑制伴刀豆球蛋白A对鸡外周血淋巴细胞的诱导增殖作用（P＜0．01），结果提示，E.tenella感染鸡盲肠MC数与HT含量之间未见明显的相关性，活化的MC或其分泌物HT和NO产生有一定抑制作用，另一方面，NO也可能抑制MC的增殖。     

鸭病毒性肠炎病毒强毒在人工感染鸭体内形态结构和发生学的电镜观察

为研究鸭病毒性肠炎病毒(DEV)CH强毒株在感染鸭体内的分布和形态学发生规律，应用透射电镜和超薄切片技术对人工感染DEV的成年鸭各组织器官进行观察。结果表明：感染后12h在脾脏和法氏囊首先观察到少量的DEV出现，24h后在脾、胸腺和法氏囊以及死亡鸭的肝、肠和胰中均观察到具有典型的疱疹病毒粒子及其核衣壳形态的DEV。DEV病毒核衣壳有空心型、致密核心型、双环型和内壁附有颗粒型4种形态，存在胞核和胞浆两种装配方式。病毒成熟有两种方式：一为细胞核内核衣壳在核内获得皮层，通过核内膜获得囊膜成为成熟病毒；二为核内核衣壳通过内外核膜进入胞浆，核内和胞浆内的核衣壳在细胞浆中获得皮层，然后在各种质膜上获得囊膜，最后成熟病毒通过细胞破裂或其他方式释放到细胞外。伴随着病毒的复制、装配和成熟，细胞中出现多种核内和胞浆包涵体、核内致密颗粒、核内微管和中空短管、胞浆电子致密小体等结构。     

The Effect of Intradermal Injection of GM-CSF and TNF-α on the Accumulation of Dendritic Cells in Ovine Skin

Abstract— Intradermal recombinant ovine (rov) GM-CSF was associated with the accumulation over 5 DAys of MHC Class-II+ dendritic cells at the injection site, as well as increased numbers of neutrophils, eosinophils and lymphocytes when compared to control injection sites receiving heat-inactivated cytokines. Most of the dendritic cells were adjacent to the epidermis and dermal structures such as hair follicles, sweat glands and blood vessels. Fewer than 10% of the accumulating MHC Class-II+ dendritic cells expressed the CD1 antigen and none expressed detectable CD lib or CD lie antigens. They did not appear to be proliferating. Injection of rov TNF-α was associated with an increase in MHC Class-II+ dendritic cells that was significant only in the epidermis and only at 2 DAys following the first of four daily injections. Increased numbers of neutrophils and lymphocytes, but not eosinophils, were also recorded. Injection of rov TNF-α together with rov GM-CSF enhanced the accumulation of the MHC Class-II+, CD1+ subpopulation of dendritic cells compared to either cytokine alone. GM-CSF in particular is involved in an in vivo pathway supporting the accumulation of predominantly MHC Class-II+ CD1^- dendritic cells which are a minor population in unchallenged skin. Résumé— Des injections intradermiques de GM-CSF recombinant ovin sont associées à l'accumulation en 5 jours de cellules dendritiques MHC classe II(+) au site de l'injection, ainsi qu'à une augmentation du nombre de neutrophiles, éosinophiles et lymphocytes, comparativement à ce qui est observe aux points d'injection témoins qui ont reçu des cytokines inactivées par la chaleur. La plupart des cellules dentritiques sont adjacentes à l'épiderme, aux follicules pileux, aux glandes sudoripares et aux vaisseaux sanguins. Moins de 10% des cellules dendritiques MHC classe II(+) accumulées expriment l'antigène CD1 et aucune n'exprime les antigènes CD11b et CD11c. Elles ne semblent pas proliférer. L'injection de TNF alpha recombinant ovin est associée à une augmentation des cellules dendritiques MHC classe II(+) qui est significative seulement dans l'épiderme, et seulement 2 jours suivant la première des quatre injections. Une augmentation du nombre de neutrophiles et de lymphocytes, mais pas des éosinophiles est également notée. L'injection simultanée de TNF alpha recombinant ovin et de GM-CSF recombinant ovin favorise l'accumulation d'une sous population de cellules dendritiques MHC classe II(+), CD1(+), comparativement à ce qui est observé en utilisant les cytokines séparément. GM-CSF en particulier est in vivo à l'origine de l'accumulation de cellules dendritiques MHC classe II(+), CD1(—) qui forment une population mineure dans la peau. [Haig, D. M., Hutchison, G., Green, I., Sargan, D., Reid, H. W. The effect of intradermal injection of GM-CSF and TNF-α on the accumulation of dendritic cells in ovine skin (Effect de l'injection intradermique de GM-CSF et de TNF alpha sur l'accumulation de cellules dentritiques dans la peau du mouton).     

ND野毒感染病鸡MDA含量和SOD活性研究

对22日龄健康AA肉鸡和新城疫野毒（NDN）感染肉鸡组织中丙二醛（MDA）含量和超氧化物化酶（SOD）活性研究结果显示：ND野毒感染病鸡心、肝、肾等组织MDA含量和SOD活性发生明显改变。结果提示,自由基参与了ND发生发展怕致病过程,在NDV诱导的细胞凋亡过程中自由基可能起关键作用。     

毒害艾美耳球虫初次感染雏鸡免疫器官IL-2和淋巴细胞增殖功能变化

应用组织匀浆涂片和酸性α-醋酸萘酯酶（ANAE）染色及细胞培养技术和四甲基偶氮唑盐（MTT）测定法对毒害艾美耳球虫（eimeria necatrix，E．necatrix）初次感染雏鸡免疫器官的T细胞比例、白细胞介素-2（interleukin-2，IL-2）诱生活性、T细胞和B细胞对ConA或PMA的增殖功能的动态变化进行了较全面系统的研究。结果发现，E．necatrix初次感染雏鸡，其胸腺和脾脏T细胞比例分别于感染后7～21d和7～24d明显高于对照雏鸡；IL-2诱生活性分别于感染后16～18d和18～21d较对照雏鸡显著升高；T细胞对ConA的增殖反应分别在感染后14～16d和10～18d明显增加。法氏囊和脾脏B细胞对PMA的增殖反应分别于感染后14～24d和14～21d显著高于对照雏鸡。表明E．necatrix初次感染雏鸡免疫器官的IL-2调节及细胞免疫和体液免疫功能均明显提高。     

鸭肝炎病毒对雏鸭肝组织中MDA和GSH-PX的影响

对雏鸭分别感染弱毒株、中毒株、强毒株肝炎病毒后，在ld、3d、5d、7d分别测定对照组和实验组肝组织中丙二醛(MDA)的含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)的活性。结果表明，雏鸭感染鸭肝炎病毒(DHV)后肝组织中MDA含量和GSH—Px活性发生明显变化，其中，实验组在5d时MDA含量显著增多，而GSH—Px的活性明显降低。结果提示，自由基参与了鸭病毒性肝炎(DVH)发生发展的致病过程，在DHV诱导的细胞凋亡过程中自由基可能起关键作用。     

The Use of Two Immunosuppressive Drugs,Cyclosporin A and Tacrolimus,to Inhibit Virus Replication and Apoptosis in Cells Infected with Feline Immunodeficiency Virus

An in vitro model of acute and chronic infections with feline immunodeficiency virus (FIV) was used to examine the effect of two immunosuppressive agents, cyclosporin A (CsA) and tacrolimus (also known as FK506), on the inhibition of the replication of the virus and of apoptosis. Both drugs significantly suppressed virus production in a dose-dependent manner in acutely and chronically infected cells. The ability of FK506 to inhibit virus replication was much lower than that of CsA, and was accompanied by marked antiproliferative activity. Treatment of infected cells with either CsA or FK506 did not affect the rise of free intracellular Ca2+ but did protect the cells against apoptosis. Thus, the antiviral activity of CsA and FK506 makes these compounds promising candidates for the development of drugs suitable for the treatment of AIDS.     

贫血病雏鸡Lasota疫苗免疫后免疫器官组织T细胞亚群变化

应用微波间接酶标抗体染色法(WIEAS)对鸡贫血病毒(CAV)感染雏鸡Lasota疫苗免疫后免疫器官组织的CD4^ 、CD8^ T细胞数量及CD4^-与CD8^ T细胞比值的变化进行了动态研究，结果发现，CAV感染1日龄雏鸡Lasota疫苗免疫后，其胸腺、脾脏和盲肠扁桃体的CD4^ 、CD8^ T细胞数量及CD4^ 与CD8^ T细胞比值均程度不同地低于CAV未感染Lasota疫苗免疫对照雏鸡。表明，CAV感染雏鸡免疫器官组织对Lasota疫苗的细胞免疫应答机能降低或减弱。     

Development of a Latex Agglutination Test Using The Major Epitope Domain of Glycoprotein E of Pseudorabies Virus Expressed in <Emphasis Type="Italic">E. coli</Emphasis> to Differentiate Between Immune Responses in Pigs Naturally Infected or Vaccinated with Pseudorabies Virus

A 0.8 kb DNA fragment encoding the major epitope domain of glycoprotein E (gE) of pseudorabies virus (PRV) was inserted downstream of the T7 promoter of an expression vector, pET-28b, to yield the recombinant plasmid pETgE804. After induction by isopropy1-β-D-thiogalactopyranoside (IPTG), a high level expression of fusion protein was obtained. SDS-PAGE and western immunoblotting analysis showed that the fusion protein was 38 kDa and could bind with antisera against PRV. The protein existed mainly in the form of the inclusion body. After being denatured and renatured, the protein was used to prepare the latex antigen. The concentration of antigen, temperature and time for sensitization were optimized. The latex agglutination test (LAT) was able to differentiate sera of PRV-infected pigs from those of gE-deletion vaccine-immunized pigs. The diagnostic specificity and sensitivity of the developed gE latex agglutination test (gE-LAT) were also evaluated by using sets of sera. The diagnostic specificity and diagnostic sensitivity of the gE-LAT were 96.77% and 95.76%, respectively. For comparison between gE-LAT and a commercial blocking enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA), 260 serum samples were tested. The coincidence frequency of both assays was 96.94% (252/260). No significant difference was found between the two methods (p>0.05). For comparison between the abilities of gE-LAT and gE-ELISA to detect sera with low titres of gE-specific antibody, 66 sera from 22 pigs were tested. The data indicate that the gE-LAT is of similar sensitivity to gE-ELISA. These results indicate that gE-LAT using recombinant gE might be very useful as a routine screening method for the differential diagnosis of PRV infection.     

SPF雏鸡感染REV后外周血液中免疫球蛋白含量和免疫器官与体重比值的动态变化

实验研究ＳＰＦ雏鸡感染ＲＥＶ后外周血液中免疫球蛋白含量和免疫器官与体重比值的动态变化。结果,ＲＥＶ鸡合肥体病毒感染１日龄ＳＰＦ雏鸡后,外周血液的免疫球蛋白ＩｇＧ、ＩｇＭ和ＩｇＡ含量均较正常对照鸡明显下降;胸腺重量与体重的比值显著低于对照雏鸡;法氏囊重量与体重的比值有降低的趋势;脾肝重量与休重比值在７～３５ｄ较对照组明显下降。