雪松和黄山松对松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)的抵抗性

 过去3年的调查表明,在江苏南京镇江松材线虫病区内雪松(Cedrus deodara)自然枯死相对很少,在采得的22株枯死雪松松材中,从未查见松材线虫。在1987-1989年用松材线虫分离物1号、3号或4号(分别分离自江苏和深圳罹病黑松Pinus thunbergii和马尾松P.masso-niana病材中),分5次接种60株4或7-8年生雪松苗或20多年及30多年生雪松树,仅2株4年生接种苗发病死亡,从死苗中分离到的松材线虫数量远低于接进的虫量。可见雪松苗期至成材期在江苏病区都能高度抵抗松材线虫。     

日本松材线虫和南京松材线虫对雪松和马尾松的致病性研究

用来自日本的木质包装材料上截获的松材线虫和南京松材线虫进行对雪松Ｃｅｄｒｕｓｄｅｏｄａｒａ和马尾松Ｐｉｎｕｓｍａｓｏｎｉａｎａ的致病力试验，发现日本松材线虫能使４～５年生雪松苗２０％发病，１０％左右枯死，而南京松材线虫则没有致病力；１０年生雪松对两种松材线虫具有高度抗性。这两种松材线虫都能使马尾松中度感病和１０％左右的枯死     

马尾松(Pinus massoniana)感染松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)的研究

1987—1988年在江苏南京—镇江松材线虫疫区内采(征)集143份自然枯死或濒死马尾松样本,在94份(65.7%)样本中查见松材线虫。有关林分中马尾松的病枯情况不一,在句容桥头一下蜀一线、江宁汤山和六合方山等处有过相当多的马尾松发病死亡。表明松材线虫是当地马尾松自然枯死的主要原因。人工测定了无黑松林区5年生浙江富阳马尾松苗及混栽黑松林区4—5年生江苏马尾松苗对两种松材线虫分离物的反应,结果指出,供试松苗都表现中度感染或高度感染,并有20%或70—80%的病枯株。接种林间马尾松,初步证实马尾松对松材线虫的抗性随树龄变化。1—2年生马尾松苗高感松材线虫,病枯株率高达85.7%;树龄25年以上的成材树病枯株率约30%;而10年左右的幼树则无一发病死亡。     

马尾松(Pinus massoniana)感染松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)的研究

 1987-1988年在江苏南京-镇江松材线虫疫区内采(征)集143份自然枯死或濒死马尾松样本,在94份(65.7%)样本中查见松材线虫。有关林分中马尾松的病枯情况不一,在句容桥头一下蜀一线、江宁汤山和六合方山等处有过相当多的马尾松发病死亡。表明松材线虫是当地马尾松自然枯死的主要原因。人工测定了无黑松林区5年生浙江富阳马尾松苗及混栽黑松林区4-5年生江苏马尾松苗对两种松材线虫分离物的反应,结果指出,供试松苗都表现中度感染或高度感染,并有20%或70-80%的病枯株。接种林间马尾松,初步证实马尾松对松材线虫的抗性随树龄变化。1-2年生马尾松苗高感松材线虫,病枯株率高达85.7%;树龄25年以上的成材树病枯株率约30%;而10年左右的幼树则无一发病死亡。     

三种松树对松材线虫的抵抗性研究(摘要)

1987～1988年在江苏南京测定了雪松Cedrus deodara、火炬松 Pinus taeda 和湿地松 P.elliottii 对松材线虫Bursaphelenchus xylophilus 的抵抗性。人工接种证实,2次接种的46株雪松成材树(20多年生和30多年生)包括加大接种体量高达50000条线虫/株的6株处理树均表现正常。在分2次接种的4年生幼苗中(共44株),仅2株表现死亡,从死苗中分     

松材线虫萎蔫病在我国南方林区的流行能力

通过人工接种松材线虫测定6个“北带”马尾松种源和2个“中带”马尾松种源的3～6年生苗的感病性。接种苗枯死率为37.5%至80%,与马尾松在全国现有疫区内普遍不同程度自然发病枯死的情形一致。7个种源接种苗的平均枯死率(53.5%)低于黑松对照(89.4%)。表明国内的马尾松种源对松材线虫中等或中等以上感病。测定国内重要疫区的5个代表性松材线虫株对8年生黑松和3年生马尾松苗的致病力,枯株率分别为90%以上和30%～90%。由此分析了松材线虫萎蔫病在南方林区流行的极大可能性。     

松材线虫伴生细菌与松树萎蔫病关系的初步研究

利用马尾松水培离体松枝作接种材料,接种消毒后的松材线虫、线虫虫体上分离到细菌分离物GD1以及两者的混合体。结果表明,单独接种消毒后的松材线虫蔌细菌分离物GD1均不能使松枝萎蔫,只有两者混合接种才能使松枝发病枯死。从而说明了松材线虫的伴生细菌对松树萎蔫病的发生起着重要的作用。     

松材线虫对马尾松的致病性及其早期诊断试验

本试验通过从枯死松树分离繁殖的松材线虫 Bursaphelenchus xylophilus 接种3～4年生马尾松苗,观察到接种株第45天开始出现外观症状,三个月内接种株相继枯死。在枯死株中分离出大量松材线虫,表明松材线虫对马尾松具有明显的致病性。试验还通过酸性品红染色追踪树液流,观察到松材线虫侵染早期,其松脂管的薄壁细胞受破坏,松脂从松脂管渗漏至周围的管胞中,使水溶性染剂不能着色而出现白斑,树液移动受阻。而对照株中染剂可在植株管胞中自由移动,不会产生白斑,松脂流动只限于松脂管内。而在这段时间接种株和对照株外观上生长正常,并无明显差异。因此,通过酸性品红染色追踪树液流,观察植株根茎横切面白斑的出现可作为早期诊断马尾松松材线虫病的一种方法。     

草莓线虫病研究Ⅰ.江苏草莓上发生的夏矮线虫病

1986年至1987年,多次对从江苏南京和句客不同地块内采集的草莓矮缩病株地上部(大鸡冠300株,宝交早生200株和美国6号30株)进行分离,都获得同一种滑刃属线虫。经研究,这种线虫与Christie(1942)原始报道的Apbelenchoides besseyi以及从水稻干尖线虫病病种上分到的A.besseyi在形态特征上完全相同或相似,因此将其鉴定为Apbelcnchoides besseyi Cbristie,1942。对分自江苏草莓和稻种的A.bessezi进行人工培养,然后交互接种草莓和水稻,在两种线虫处理中都出现了典型的草莓矮缩和水稻干尖症状,并从有关病株内分离到与接种相同的线虫,由此证实江苏草莓夏矮病的发生。     

草莓线虫病研究Ⅰ.江苏草莓上发生的夏矮线虫病

 1986年至1987年,多次对从江苏南京和句客不同地块内采集的草莓矮缩病株地上部(大鸡冠300株,宝交早生200株和美国6号30株)进行分离,都获得同一种滑刃属线虫。经研究,这种线虫与Christie (1942)原始报道的Apbelenchoides besseyi以及从水稻干尖线虫病病种上分到的A.besseyi在形态特征上完全相同或相似,因此将其鉴定为Apbelcnchoides besseyi Cbristie,1942。
对分自江苏草莓和稻种的A.bessezi进行人工培养,然后交互接种草莓和水稻,在两种线虫处理中都出现了典型的草莓矮缩和水稻干尖症状,并从有关病株内分离到与接种相同的线虫,由此证实江苏草莓夏矮病的发生。     

马尾松发生松材线虫萎蔫病的紧急警报

一、1986年松材线虫的调查经过和鉴定结果 1986年南京市郊松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)萎蔫病普遍发生。经我们建议,自10月中旬开始由南京市农林局、南京市中山陵园管理处、江苏省农林厅林业局周元生局长等和南京农业大学线虫实验室,从南京市郊(中山陵园区的江苏省植物所、汤山乡、西岗、雨花台、东善桥林场、铁心、江浦县)以及镇江市句容县、苏州市昆山县等地采集或征集了枯死、濒死的黑松和马尾松树林材样本60多份,用线盘法     

马尾松萎蔫病树一种线虫分离物的鉴定

 2002年从贵阳市南明区采集到濒临死亡的马尾松标样,用改进的浅盘分离法对其进行了病原物的分离、纯化、形态学及分子生物学鉴定。结果表明,萎蔫死亡松树分离出的线虫形态特征与Mamiya报道的拟松材线虫形态特征相符。用伞滑刃线虫ITS区(internal transcribed spacer)通用引物VRF1(5'CGTAACAAGGTAGCTGTAG 3')和VRF2(5'TC-CTCCGCTAAATGATATG 3')对其基因组DNA进行PCR扩增,并对其PCR产物进行回收、克隆和测序。测序结果显示,此ITS序列与南京松材线虫的同源性为77.6%,与基因库已报道拟松材线虫序列U93554的同源性为93.5%,而与云南拟松材线虫江川种群、峨山种群和西畴种群的同源性为97.9%。通过以上形态学和分子生物学的研究,将贵阳市南明区采集到的马尾松萎蔫病树线虫分离物鉴定为拟松材线虫(Bursaphelenchus mucronatus)。     

日本的松树萎蔫病及其防治

松材线虫Bursaphelenchus xylophilus可危害树种达43种之多,其寄主除松属外,还有云杉属、冷杉属、落叶松属和雪松属的一些树木。它的分布范围除日本和美国外,还有法国、意大利、联邦德国、朝鲜等国家。我国也早在1983年就报道了南京地区上万株黑松由于松材线虫的危害而死亡。松材线虫是一个重要的林木检疫性线虫,一旦在松林中传播蔓延,就会造成严重的损失,无论树势强弱、树龄大小,几个月内就会枯死,因此,引起了许多国家的重视。在日本,除北海道以外,已经遍及全日本的天然林和人工林。所以造成今天这样广泛的流行,有两个原因,     

松材线虫萎蔫病的发生和研究进展

松材线虫萎蔫病是日本森林的特大病害。它的发生特点是病原线虫由昆虫传播,不是土壤传染而是地上部受侵,使木质部分被害,最后导致全株性枯萎死亡。1934年 Steiner 和 Buhrer 首次报道美国长叶松 Pinus palustris 原木内的松材线虫,定名为 Aphelenchoides xylophilus。以后改为现名 Bursaphelenchus xylophilus(Stei-ner & Buhrer,1934)Nickle,1970。当时不了解松树萎蔫病和松材线虫之间的联系,直到1971年在日本通过接种才证实它是松树     

黑松13个抗病家系对松材线虫的抗性反应及组织病理学观察

 为评估自日本引进的抗性黑松对松材线虫(Pine Wood Nematode,PWN)的抗病性,选用3个不同来源的PWN强毒和中强毒虫株采用皮接法接种,对1.5年生的黑松13个优良家系进行抗病性测定。结果表明,引进的黑松大部分家系对3个PWN虫株都表现出一定的抗病性,但针对不同虫株,抗病各家系间差异明显,其中有7个家系(3、4、5、6、9、11和12号)表现良好。同时,为探讨引进黑松家系感染PWN后的组织病理反应,对12号抗性家系进行组织病理学研究。观察表明,松材线虫在抗性黑松和普通黑松中的纵向扩散速度差别不明显,但其在抗性黑松内的横向扩散速度比在普通黑松内要慢,且抗性黑松体内木射线细胞和围绕树脂道泌脂细胞的薄壁细胞,出现病变要比普通黑松晚;在接种后同一时间取茎段的同一部位发现,抗性松苗组织解剖结构及细胞的病变和破坏程度要比普通松苗轻。     

松材线虫口岸检疫方法

通过2001～2007年在南京机场、新生圩等3口岸现场采集的695批次木材料样本进行检疫,4次发现了松材线虫;总结了切合口岸实际的松材线虫检疫方法;针对口岸上截获松材线虫时常出现仅有幼虫的问题,研究了用真菌进行单异活体培养和松材线虫罹病木保湿法培养松材线虫的两种快速培养方法;9种真菌选择培养松材线虫效果表明,灰葡萄孢是培养松材线虫的最有效真菌,盘多毛孢等用作培养松材线虫也有一定效果.     

新疆塔城地区甘薯茎线虫病原鉴定

为研究新疆塔城地区甘薯茎线虫病的病原种群分类地位,2010年从乌兰乌苏镇发病地块采集病薯样本,通过贝曼漏斗法分离线虫后,对其致病性进行了室内接种测定,在显微镜下观察病原线虫形态和测量特征数值.结果表明:该线虫具有很强的致病力,接种薯块全部发病,与田间发病薯块症状相同;线虫虫体侧区有6条侧线,尾末端钝圆,雌虫后阴子宫囊较长,常延伸到尾长的3/4,这些典型分类特征与马铃薯腐烂线虫形态特征相符,且所测量数值与其基本一致.研究结果表明该病原线虫为马铃薯腐烂茎线虫(Ditylenchus destructor Thorne),新疆地区应加强病区甘薯种薯及种苗的管理.     

拟松材线虫携带的可培养微生物种群研究

以云南松濒临枯死木为对象,利用贝尔曼漏斗法获得植物寄生性线虫,借助形态学和PCR-RELF相结合的方法鉴定出拟松材线虫,在此基础上,对其所携带的可培养微生物进行了分离纯化和鉴定,证实拟松材线虫共携带26种细菌和4种真菌,所携带可培养微生物随着拟松材线虫人工培养代数的增加,其多样性下降,人工培养3次以后,微生物的种类从30种降到9种。未纯化线虫致病性显著高于继代培养线虫,继代培养次数越多,致病性下降越快,说明体表可培养微生物参与了拟松材线虫的致病过程。     

苹果再植病及病原线虫种的研究

 再植苹果苗表现典型的再植病,其症状为:根系分生能力差,生长缓慢,根组织尤其输导根上发生许多黑色病斑,地上部长势差,长梢抽生困难,定植成活率低。从再植苹果苗的根内分离到了线虫,经鉴定为草地根腐线虫(Pratylenchus pratensis(de Man, 1880) Filipjev,1936),并首次阐明为苹果再植病病因之一。不同栽培措施下,幼苗根内线虫密度不同:再植前土壤消毒比不消毒低,接种VA菌根比不接种低,清耕比覆草低,种植三叶草或万寿菊后线虫密度低。这4种栽培措施配套使用可能成为控制苹果再植病的潜在途径之一。     

水稻品种抗黑条矮缩病人工接种鉴定方法

为建立科学有效的水稻品种抗黑条矮缩病人工接种鉴定方法,分别研究了病毒在介体体内的循回时间、接种时间、接种强度、水稻接种苗龄4个因素对鉴定效果的影响。结果显示,病毒在介体体内的循回时间为12~15天或21~24天条件下,鉴定效果优于8~11天和16~17天处理;接种48~72 h条件下,鉴定效果优于12~24 h处理;有效接种强度4~20虫/苗条件下,鉴定效果优于1~3虫/苗处理;水稻接种苗龄0.5~2.5叶龄条件下,鉴定效果优于2.5~3.5叶龄处理。由此构建了水稻抗黑条矮缩病人工接种鉴定方法:循回时间为12~15天、接种时间48~72 h、有效接种强度4~20虫/苗和水稻接种苗龄0.5~2.5叶。在此条件下对不同抗性表现的水稻品种进行鉴定,其鉴定结果与重病区田间鉴定没有显著性差异,表明所建立的人工接种鉴定方法能客观地反映水稻品种对黑条矮缩病的抗性水平。