黑果枸杞产业现状及快速繁殖技术研究

为掌握黑果枸杞组培快繁技术,促进产业发展,以野生黑果枸杞为研究对象,对其不定芽增殖、诱导生根的培养条件进行筛选,并探讨产业发展措施。结果表明,黑果枸杞组培苗最佳初代培养基是MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+30mg/g蔗糖+6mg/g琼脂,达到83.3%的萌芽率;最有利于不定芽增殖的继代培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA 0.1 mg/L+30mg/g蔗糖+6mg/g琼脂,芽增殖系数达3.63;最佳生根培养基1/2MS+NAA 0.1mg/L+IBA 0.1 mg/L+15mg/g蔗糖+6mg/g琼脂,生根率达到100%。     

鄂西红豆离体培养及植株再生研究

【目的】对外植体采用特殊处理方法,并对不同培养时期的基本培养基进行调整,以建立高效、快速、繁殖系数高的鄂西红豆再生技术体系。【方法】以成熟度为80%的鄂西红豆种子为外植体,通过向培养基中添加不同质量浓度和配比的植物生长调节物质,筛选适宜的芽诱导培养基、继代增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基,并对诱导生根培养的试管苗进行炼苗移栽,观察其成活率。【结果】最适芽诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+KT0.5mg/L+NAA 0.5mg/L+维生素B10.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L+活性炭1.5g/L,诱导率达85%;最适芽继代增殖培养基为WPM+6-BA 1.5 mg/L+KT 0.3 mg/L+TDZ 0.02 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L+活性炭1.5g/L;无根苗壮苗培养基为WPM+NAA 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L+IAA 1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L+活性炭1.5g/L。当无根苗生长到4~5cm时形成完整植株并转接到生根培养基上诱导生根,最适生根培养基为1/2WPM+IBA 0.5mg/L+NAA 1.5mg/L+新型基因诱导生根剂0.05mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L+活性炭1.5g/L。【结论】建立的鄂西红豆再生技术体系可获得75%~85%的正常萌芽,生根率达85%以上,瓶苗移栽成活率达90%。     

红心火龙果离体培养技术研究

【目的】通过红心火龙果离体培养技术研究,建立其组培快繁技术体系,为规模化育苗提供技术支撑。【方法】以红心火龙果幼嫩茎段为外植体,以MS为基本培养基,通过添加不同外源激素配比,筛选出不定芽发生、增殖、壮苗及生根诱导等不同阶段的最适培养基。【结果】最佳消毒方法为使用75%酒精消毒10 s,无菌水冲洗1次,再用0.1%升汞消毒4.5 min,无菌水冲洗5～8次。最适不定芽诱导培养基是配方为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 1.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂4.6 g/L,发芽率达87.03%;最适不定芽增殖培养基的配方为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 1.5 mg/L+AC 0.2 g/L+蔗糖30 g/L+琼脂4.6 g/L,不定芽的增殖系数高达7.33;最适生根培养基的配方为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L+AC 0.2 g/L+蔗糖30 g/L+琼脂4.6 g/L,生根率达100%。最佳移栽基质为V (珍珠岩)∶V (红土)∶V (腐殖土)=1∶1∶1,植株成活率高达98.9%。【结论】建立了以茎段为外植体的红心火龙果组培快繁技术体系,不定芽诱导率和增殖系数高,组培苗生根情况好,移栽成活率高。     

柠条组织培养体系的建立

为了建立柠条的组织培养体系,用KF/MS加激素培养法,选择不同的消毒剂,对柠条茎段愈伤组织诱导,并进行芽分化、芽的继代增殖和生根培养。结果表明,次氯酸钠的消毒效果最好,最适浓度为2%,且浸泡外植体的最佳时间为8 min;诱导芽分化的基本培养基以KF+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂7 g/L为宜,继代增殖最适培养基配方为KF+6-BA 1.2 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂7 g/L,适合生根的最佳培养基为1/2 MS+NAA 0.3 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L+活性炭0.5 g/L。     

不同菊花品种的组培扩繁技术

以盆栽菊花品种带芽茎段为外植体,以MS为基本培养基,探讨了不同的植物生长调节剂及其组合对不定芽的诱导、增殖及生根的影响.结果表明:(1)在诱导培养基MS+ 6-BA 2.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7.0 g/L的诱导下,11份菊花品种的诱导效果显著不同,‘Breeze Ivory’诱导效果最好,诱导率为91.7％; (2)‘Breeze Ivory’适宜的增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7.0 g/L,增殖系数达12.1;(3)‘Breeze Ivory’适宜的生根培养基为1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7.0 g/L,生根率达100％,平均每株根数为12.6;(4)‘Breeze Ivory’适宜的移栽基质为河沙,成活率可达98％.     

无患子优选树茎段离体培养体系的建立

【目的】筛选无患子茎段离体快繁最佳培养基,建立无患子优良种苗快速繁育体系。【方法】以野外选优获得的无患子树带腋芽茎段为外植体,采用L9(33)正交试验对影响外植体灭菌的HgCl2浓度、HgCl2与酒精的作用时间,不定芽诱导萌发中的6-BA、NAA及蔗糖用量,继代增殖中6-BA与KT用量和芽苗生根中的MS培养基无机盐水平、6-BA和2,4-D用量进行优化。【结果】75%酒精浸泡1 min,再用0.2% HgCl2处理7 min是无患子茎段灭菌的最佳方法,其外植体成活率高达83.33%;MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+20.0 g/L蔗糖是无患子茎段腋芽萌发的适宜培养基,诱导率高达96.67%;MS+0.7 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT是无患子茎段腋芽增殖的适宜培养基,30 d可增殖4.13倍;1/3 MS+0.5 mg/L 6-BA+0.7 mg/L 2,4-D是诱导芽苗生根的适宜培养基,平均生根率为41.50%。【结论】建立的无患子离体培养体系为:外植体茎段用75%酒精浸泡1 min,再用0.2% HgCl2灭菌7 min,在MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+20.0 g/L蔗糖培养基中诱导腋芽萌发,在MS+0.7 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT培养基中进行增殖培养,在1/3MS+0.5 mg/L 6-BA+0.7 mg/L 2,4-D培养基中进行生根培养。     

耐盐闽粤石楠组培快繁体系的建立

【目的】建立耐盐闽粤石楠组培快繁技术体系。【方法】以耐盐闽粤石楠实生苗茎段为试验材料，采用正交试验设计和方差分析，探讨外植体最佳灭菌处理、腋芽诱导、不定芽增殖和生根培养的最佳培养基。【结果】耐盐闽粤石楠带芽茎段的最佳灭菌方法为洗衣粉漂洗 20 min、流水冲洗 60 min、75%。乙醇灭菌 10 s、0.15%氯化汞灭菌 3 min，无菌水清洗 5 次，外植体成活率最高、为 76.67%。最佳诱导培养基为 MS + 1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+30 g/L 蔗糖 + 5.5 g/L 琼脂，有利于腋芽诱导，此培养条件下诱导率为 73.33%，平均萌芽数 1.03 个，显著高于其他处理，且不定芽叶绿色，长势较好；最佳增殖培养基为 1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+ 30 g/L 蔗糖 + 5.5 g/L 琼脂，有利于不定芽增殖，此培养条件下增殖系数达 3.1，显著高于其他处理，且不定芽分化多，叶色绿，长势良好；最佳生根培养基为 1/2MS+0.4 mg/L IBA+ 30 g/L 蔗糖 + 5.5 g/L 琼脂，有利于不定芽生根，此条件下培养 60 d 生根率为 87%，平均根数 6.22 条，平均根长 3.78 cm，显著高于其他处理，且根系健壮。【结论】初步建立耐盐闽粤石楠组培快繁体系，为沿海滩涂利用提供种苗支持。     

白鹤芋试管苗丛芽增殖与生根诱导试验

以白鹤芋‘甜芝’、‘美酒’两个品种蘖芽为外植体,在MS培养基中添加不同种类和浓度的激素,进行组培快繁试验。试验结果表明:MS+IBA 0.25mg/L+TDZ 0.2mg/L或6-BA 2mg/L+IBA 0.5mg/L为‘甜芝’、‘美酒’适宜芽增殖培养基,最适合‘甜芝’生根诱导培养基:1/2MS+30g/L蔗糖+5g/L琼脂+IBA 0.3mg/L,最适合‘美酒’生根诱导培养基:1/2MS+30g/L蔗糖+5g/L琼脂+IBA 0.1mg/L。     

海南三七根茎芽基部的组培快繁

以海南三七根茎芽基部为外植体,对根茎芽基部进行初代诱导、继代增殖、生根壮苗培养,并对其组培苗移栽基质进行筛选,建立海南三七根茎芽基部的组培快繁技术体系。结果表明:根茎芽基部最佳诱导培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.10 mg/L+3%蔗糖+卡拉胶粉10.0 g/L+10%椰汁;继代增殖比较合适的培养基为MS+6-BA 3.0~8.0 mg/L+NAA 0.10 mg/L+3%蔗糖+卡拉胶粉10.0 g/L+10%椰汁;生根最佳的培养基为MS+NAA 0.10 mg/L+3%蔗糖+卡拉胶粉10.0 g/L+10%香蕉泥+活性碳1.0 g/L;组培苗移栽合适的基质为进口泥炭、红壤和腐叶土的混合基质或纯进口泥炭。     

苦楝组培快繁技术优化试验

为解决苦楝组织培养中出现的芽苗玻璃化、叶黄化、愈伤组织异常等问题,以苦楝半年生种子实生苗带腋芽茎段和茎尖为外植体,诱导出无菌芽,进行培养方法改进及培养基优化对比试验。结果表明：适宜的芽诱导培养基是MS+0.4 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+30 g/L蔗糖+3.5 g/L琼脂;最佳继代增殖培养基是改良MS+0.8 mg/L6-BA+0.3 mg/L KT+0.3 mg/L IBA+1 g/L花宝1号+40 g/L蔗糖+3.8 g/L琼脂,增殖系数达到3.93;适宜的生根培养基是1/2 MS+0.6 mg/L ABT 6号+0.2 mg/L NAA+15 g/L蔗糖+3.2 g/L琼脂,平均生根率达到93.56%。     

绶草组织培养及再生体系建立的研究

以野生绶草为试验材料,选取其花序轴、幼叶、肉质根为外植体,建立组培及再生体系。研究结果表明:花序轴为绶草组培最佳外植体材料,诱导率达到85%。最适诱导培养基为MS+3.0%蔗糖+0.75%琼脂+6-BA 1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L;最适增殖培养基为MS+3.0%蔗糖+0.75%琼脂+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+椰汁100 g/L;最适生根培养基为1/2 MS+2.0%蔗糖+0.5%琼脂+IBA 0.4 mg/L+NAA 0.4mg/L+活性炭0.5 g/L。     

胜利百号甘薯脱毒种苗离体繁殖培养基优化

以甘薯品种胜利百号脱毒试管苗为材料,以不同浓度的MS为基本培养基,分别添加不同浓度的6-BA、NAA和蔗糖,通过正交试验筛选胜利百号脱毒试管苗离体培养的适宜增殖培养基,试验结果表明胜利百号甘薯试管苗的最适增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.03 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂6.5 g/L;通过单因子试验筛选适宜试管苗根诱导及生长的基本培养基和NAA浓度,结果表明适宜的胜利百号试管苗生根培养基为1/2MS+NAA 0.01 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂6.5 g/L。     

蓝靛果组培快繁技术研究

蓝靛果是一种待开发的天然保健食品,营养价值丰富,传统繁育方式繁殖系数低,速度慢无法满足市场需求。试验利用组织培养方式,通过研究其初代、继代、生根培养中各激素水平的含量,可进行组培快速繁育,加快苗木繁育速度,保持苗木优良特性,而且不受季节、时间和病虫害的影响,可全年生产试管苗,大大提高了繁殖系数和工作效率。结果表明:初代培养使用MS+0.4mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+30g/L蔗糖+6g/L琼脂的培养基诱导蓝靛果腋芽萌发效果最好,MS+0.6mg/L6-BA+0.15mg/LNAA+30g/L蔗糖+6g/L琼脂为最适继代增殖培养基,1/2MS+0.1mg/LNAA+30g/L蔗糖+6g/L琼脂为最适生根培养基。     

广西优良珍贵树种灰木莲的组织培养

【目的】探索灰木莲组培快繁体系,为灰木莲的进一步开发和利用提供参考依据。【方法】以灰木莲盆栽苗的带芽茎段为外植体,以MS为基本培养基,通过添加不同种类、不同浓度植物生长调节剂,研究不同培养基对腋芽萌发、芽增殖及生根的影响。【结果】1~5号培养基均可以诱导灰木莲腋芽萌发,其中3号培养基MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L腋芽萌发速度最快,芽的诱导率89.3%;添加KT（Kinetin,激动素）的10~13号培养基增殖系数为2.2~2.7,没有添加KT的6~9号培养基增殖系数为1.8~2.2,11号培养基 MS+6-BA 0.3 mg/L +NAA 0.05 mg/L+KT 1.0 mg/L芽的增殖系数可达2.7,为最适宜的增殖培养基;添加生长调节剂浓度在0.5 mg/L以上的17~21号培养基能诱导灰木莲组培苗生根,其中NAA浓度为0.5、1.5 、2.0 mg/L生根率分别为33.3%、45.4%、58.3%,21号培养基 1/2MS+NAA 2.0 mg/L上生根率最高。【结论】初步建立灰木莲组织培养体系,组培苗的芽诱导率和增殖率较高,苗木长势良好。     

豌豆再生体系的建立

【目的】建立用于豌豆组织培养与转基因的再生体系.【方法】利用植物组织培养的外植体的消毒、接种、脱分化、再分化和生根等方法进行豌豆再生体系的建立.【结果】以‘陇豌1号’为试验材料,其胚轴为豌豆愈伤组织诱导最佳外植体;适宜诱导培养基为MS+1.0mg/L 2,4-D+0.2mg/L 6-BA;最佳增殖培养基为:MS+1.0mg/L NAA+1.0mg/L 6-BA;胚轴在MS+0.2mg/L NAA+2.0mg/L 6-BA培养基中分化率最高,达26.21%,MS+B5+0.5mg/L NAA+2.0mg/L 6-BA条件下最适宜子叶的分化(14.80%);不定芽在1/2 MS+0.5mg/L NAA下生根率最高,达66%.【结论】‘陇豌1号’的这一再生体系可用于其转基因受体系统的建立和种苗的组培快繁.     

铁线莲组培快繁技术研究

[目的]研究不同激素浓度对铁线莲诱导、增殖和生根的影响,建立铁线莲组培快繁技术。[方法]以铁线莲茎段为外植体,在MS培养基中加入不同浓度的6-BA、NAA和IBA,研究不同激素浓度对其腋芽诱导分化、诱导芽增殖和继代苗生根的影响。[结果]铁线莲腋芽诱导效果以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L为最佳;增殖培养以MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.50 mg/L为最佳;继代苗生根培养以MS+6-BA 1.5 mg/L+IBA 2.0 mg/L最佳。[结论]建立了铁线莲组培快繁技术体系,为其规模化生产提供理论依据。     

小花山奈的组培快繁

以小花山柰无菌苗的芽基部为外植体,对芽基部进行继代增殖、丛生芽诱导以及生根培养基的筛选,建立了小花山柰无菌苗芽基部的组培快繁体系。结果表明:小花山柰无菌苗芽基部继代增殖比较合适的培养基为MS+6-BA 8.0~10.0 mg/L+NAA 0~0.10 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L,最佳的继代增殖培养基为MS+6-BA 8.0 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L;丛生芽诱导比较合适的培养基为MS+6-BA 3.0~5.0 mg/L+NAA 0.05~0.10 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L,最佳的丛生芽诱导培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L;生根最佳的培养基为MS+NAA 0.10 mg/L+香蕉泥15%+活性炭1 g/L+白沙糖30 g/L+卡拉胶粉9.5 g/L。     

长角豆组织培养繁育技术研究

【目的】探讨长角豆"卡苏达"(Ceratonia siliqua L.‘Casuda’)的组织培养快速繁育技术,为其在我国的成功引种及种质资源保存奠定基础。【方法】以引自西班牙的长角豆"卡苏达"种子为外植体,培养无菌苗后,取其茎段作为组培材料,在筛选出初代基本培养基的基础上,又进行了继代增殖培养基和生根诱导培养基的筛选,最后对长角豆组培生根苗进行了炼苗和移植。【结果】长角豆种子无菌苗在DKW+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L IBA+25g/L蔗糖的增殖培养基上生长最好;最适继代增殖培养基为DKW+0.8mg/L 6-BA+0.1mg/L IBA+60mg/L L-赖氨酸+25g/L蔗糖;最佳生根培养基为1/2DKW+0.4mg/L IBA+20g/L蔗糖,生根率为93.33%,生根苗移栽后的平均成活率达到92.36%。【结论】成功建立了长角豆的组织培养再生体系,为长角豆"卡苏达"的快速繁育提供了技术支持。     

美洲矾根品种紫宫殿组织培养与离体快繁研究

对美洲矾根品种紫宫殿进行组织培养与离体快繁研究,探讨了以紫宫殿品种新芽作为外植体的较为适合的消毒方式,以及丛芽诱导、增殖、生根的最佳培养基和培养方法.结果表明:以75％乙醇45s、0.1％氯化汞8min、50％山农一号(内生菌型)溶液中浸泡10 min的消毒效果较好,在MS培养基中添加琼脂粉6 g/L、蔗糖3％、2.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA对芽的诱导效果最好,丛芽继代增殖的最佳培养基为MS+脂粉6 g/L+蔗糖3％ +6-BA 0.4 mg/L+NAA 0.04 mg/L,生根的最佳培养基为1/2MS+活性炭0.6 g/L+蔗糖2％+ NAA 0.8 mg/L+ IBA0.5mg/L.     

紫花山奈的组培快繁研究

以紫花山柰无菌苗的芽基部为外植体,对芽基部进行继代增殖、丛生芽诱导以及生根培养基的筛选,建立了紫花山柰无菌苗芽基部的组培快繁体系。结果表明:紫花山柰无菌苗芽基部继代增殖比较合适的培养基为MS+6-BA 8~12 mg/L+NAA 0~0.1 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L,最佳继代增殖培养基为MS+6-BA 8 mg/L+NAA 0.1 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L;丛生芽诱导较合适的培养基为MS+6-BA 3~5 mg/L+NAA 0.05~0.1 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L,最佳的丛生芽诱导培养基为MS+6-BA 3 mg/L+NAA 0.05 mg/L+椰汁10%+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉10 g/L;生根较佳的培养基为MS+NAA0.1 mg/L+香蕉泥10~15%+活性炭0.5~1.0 g/L+白砂糖30 g/L+卡拉胶粉9.5 g/L。