香榧品种遗传变异与品种鉴定的ISSR分析

利用ISSR方法对香榧本地9个实生品种和8个优良无性系的遗传变异和品种间的遗传关系进行了分析,从50个随机引物中筛选出12条多态性引物用于正式扩增,共扩增出104个DNA片段,其中88个片段为多态性扩增片段,占总扩增片段的84.6％。根据ISSR引物的扩增图谱,确定部分供试品种的特异条带。基于Nei's遗传距离分析,利用UPGMA法构建了分子树状图。聚类结果把供试的香榧9个实生品种和8个优良无性系分为两大组,第一组包括大圆榧、米榧、旋纹榧、獠牙榧、芝麻榧、落霜榧、象牙榧,第二组包括小圆榧、茄榧和细榧优良无性系。     

三十七个山东牡丹品种DNA指纹图谱构建与EST-SSR标记遗传多样性分析

以中国常熟尚湖牡丹园引栽的37个山东牡丹品种为试材,采用筛选出的10对多态性高、稳定性好且在染色体上分布均匀的EST-SSR标记引物,研究山东牡丹37个品种DNA指纹图谱和遗传多样性。结果表明:10对EST-SSR标记引物在37份材料中共扩增出了共计58个多态性基因型,平均每对引物5.8个,变幅2~13种;10对引物的多态性频率(FP)平均值为0.60;筛选出的4对核心引物可以将37个牡丹品种完全区分,以遗传相似系数0.69为阈值可将供试37个试牡丹品种分成5类。EST-SSR标记在供试牡丹品种间多态性差异较大,适合用于牡丹的DNA指纹图谱的构建。     

香榧性别鉴定的RAPD和SCAR标记

为了对香榧幼苗进行早期的性别鉴定,利用RAPD标记技术对香榧品种中的雌性和雄性群体进行了分析。在300条RAPD随机引物中,用引物S250扩增得到了1条大约600bp雄性特异性片段,将其命名为S250-600。进一步对该RAPD标记片段进行回收、克隆和测序,获得了593bp的该标记的核苷酸特定序列。根据对该片段的序列分析结果,设计了1对引物,成功地将RAPD标记转化为SCAR标记,命名为SW-593。将该序列递交至GenBank数据库,接收号为:EU670673。利用该SCAR标记对香榧的雌性和雄性个体进行性别鉴定,结果表明,该SCAR标记在雄性个体中均能稳定出现,说明此SCAR标记是一个与香榧雄性基因连锁的标记,可以用来对香榧品种进行大规模的性别鉴定。     

不同梨品种的AFLP分子鉴别

利用8对引物对30个梨品种进行AFLP分析。结果表明:共检测到203个标记,其中多态性标记为135条,占所有标记数的66.5%,证明不同梨品种在DNA水平上存在广泛的遗传差异。根据AFLP标记结果计算不同梨品种间的遗传距离,通过聚类,发现所有品种聚为4个组:第1组主要是日本梨及与日本梨有亲缘关系的部分品种;第2组为中国砂梨品种;第3组只有2个品种:黄冠梨和清香梨,它们的一个共同亲本为新世纪梨;第4组是康德梨,其亲本中有1个是西洋梨,被单独聚为一类。从聚类结果看,不同的品种之间表现出了一定的地域相关性。     

桂花SCoT标记体系的建立及其在遗传多样性分析中的应用

以‘籽银桂’桂花叶片DNA为材料,以2 × Es TaqMasterMix 预混液为基本体系,针对影响SCoT-PCR反应的退火温度、模板DNA用量、引物浓度等因素进行优化,建立了适于桂花SCoT分子标记的反应体系。12 μL反应体系含有30 ng模板DNA,引物浓度为0.4 μmol ? L-1,不同的引物退火温度分别为48、49.9、54.3或56 ℃。利用该体系对12个桂花品种进行分析,扩增条带清晰,扩增产物在150 ~ 2 200 bp之间。12 条引物共扩增出244条带,其中多态性条带238条,多态性比率为97.47%。在相似系数0.57水平处,‘九龙桂’形成第Ⅰ组,其余11个品种形成第Ⅱ组。第Ⅱ组中‘柳叶桂’、‘香云’、‘早籽黄’、‘大花金桂’、‘桂冠籽金桂’、‘鹅黄’、‘籽金桂’和‘醉云’8个花色不完全相同的品种聚在一起;‘金桂’、‘早银桂’和‘籽银桂’3个不同花色的品种聚在一起,说明品种间的亲缘关系与花色不完全相关,这与其它分子标记结果一致。     

RAPD在枇杷品种鉴定中的应用

运用RAPD(RandomAmplifiedPolymorphicDNA,即随机扩增多态性DNA)分析技术,对16个枇杷品种的基因组DNA进行RAPD分析,从几个随机引物中筛选出2个随机引物能从各个品种的基因组DNA扩增出DNA片段,在16个枇杷品种中2个引物扩增出19个DNA片段,其中3个为公共,16个为多态性或单态性DNA片段,表明不同枇杷品种基因型间存在着极为丰富的遗传多样性,扩增的DNA指纹图谱可将16个品种一一区分,为枇杷品种鉴定提供了新的方法,同时也为分子标记辅助育种提供了依据。     

体细胞无性系变异技术在园艺植物育种中的应用

综述了园艺作物中体细胞无性系变异诱变技术在育种中的应用,以及利用离体诱导技术结合物理化学诱变所获得的育种进展。体细胞无性系变异结合诱导突变大大提高了变异率,获得了许多有用的突变性状,最近有人利用体细胞无性系变异克隆获得番茄抗腐烂病突变体Cmm(Clavibacter michiganense subspmichiganense),另外结合γ射线诱变,获得香蕉早熟品种“Klue Hom Thong KU1”和“Novaria”。同时利用分子标记辅助选择可以在早期对有用的候选基因型做出鉴别。     

蝴蝶兰EST 资源SSR 标记分析与开发

 利用SSRIT软件对NCBI上蝴蝶兰的8 188条EST序列按照碱基重复单元数8以上的标准进行SSR位点查找,发掘出246条EST序列,共含有261个SSR位点,检出率为3.19%。二核苷酸重复是最主要的重复类型,占SSR总数的94.25%。SSR的不同重复单元中,最常见的重复单元是：(TA)_n和(GA)_n,其余出现频率较高的依次为(TC)_n、(AT)_n和(AG)_n。设计了32对EST-SSR引物,以蝴蝶兰品种‘V31’的DNA为模板进行PCR扩增,发现16对引物能扩增出预期产物。进一步用这16对引物对16个蝴蝶兰品种（系）进行PCR扩增,9对引物有多态性,多态性条带数在2 ~ 12个之间。结果表明,设计开发的蝴蝶兰的EST-SSR标记是有效的。     

新疆主栽杏品种自交不亲和SFB基因的检测

 为系统鉴定新疆主栽杏品种自交不亲和SFB基因型,以新疆25个主栽杏品种为试材,利用蔷薇科保守序列设计引物对叶片基因组DNA进行SFB基因特异PCR扩增,筛选出有效的扩增引物;对成功扩增的杏品种的特异条带克隆测序,在GenBank上进行BLASTN比对,确定各品种的SFB基因型。结果显示：引物组合Ⅱ-1、Ⅳ-2,1-Ⅰ、1-Ⅱ对新疆杏品种的扩增效果最好,成功地在18个品种上扩增出了5种大小不同的条带,14种不同的基因型,其中两     

果树分子标记技术研究进展

随着分子生物学及分子克隆技术的发展和完善,诞生了直接从DNA水平上进行遗传分析的分子标记技术。为果树新品种的定向选育、加速育种进程和提高选育效率提供了新的技术手段。本文介绍了分子标记的原理、特点及其在果树上的研究进展,并对其在果树的分子遗传图谱和指纹图谱的构建、品种鉴别、系谱分析和分类、基因定位等方面的应用进行了综述。     

分子标记辅助选育萝卜雄性不育系

利用Ogura CMS不育基因orf138特异标记及细胞核育性恢复基因Rfo的KASP标记,在苗期对6个可育的中国水果萝卜育性基因型进行鉴定。结果表明:6个水果萝卜的细胞质均为正常可育胞质。细胞核育性恢复基因Rfo的基因型在不同单株间存在差异,所鉴定的60个单株中,基因型rfrf、Rfrf、Rf Rf分别占40.0%、33.3%和26.7%。以日本白萝卜品种献夏37为不育源,选择具有rfrf基因型的单株与不育源进行杂交与回交,经过5代的回交及父本自交,获得4个不育率100%、遗传稳定、整齐度高的绿皮绿肉水果萝卜雄性不育系及保持系。利用这些雄性不育系配制杂交组合,获得7个优良的杂交组合。分子标记辅助选育萝卜雄性不育系,避免配制大量杂交组合及田间育性鉴定,提高了选择效率与精准度。     

榧树种质资源调查与评价

榧树(Torreya grandis Fort.ex Lindl)种子是我国特有的著名干果,为了对榧树种质资源进行有效保护和开发利用,采用实地调查、采集标本、室内烤种、成分分析等方法,对浙江、安徽、江西、福建等榧树分布区的种质资源进行了系统研究。结果表明,榧树资源分布不均,仅少数地方资源保存较好;榧树种内性状变异复杂,不同单株间种子的单粒质量、种核单粒质量、出核率、核形指数及营养成分等变异大,存在一些综合性状优良、品质达到或超过香榧的优株;将香榧和榧树中的优良株系、类型分归于7个主要品种和类型。在榧树中应主要收集一些种子具有综合优良性状、特殊性状和有潜在利用价值的单株;香榧则重点在于收集种子高产、稳产、优质和具特殊性状的优株,对古树及古树群也应加以保护。     

香榧茎段离体培养再生植株的研究

对香榧茎段不定芽诱导研究的结果表明,不定芽诱导的最佳培养条件为:培养基为B5+KT0.1mg/L+IBA0.5mg/L+0.08%活性炭+2%葡萄糖,培养温度为20℃,光强不高于400lx,该条件下的不定芽诱导率可达55%。将不定芽培养在1/2B5+IBA0.1mg/L+0.08%活性炭+2%葡萄糖的生根培养基上,生根率最高达到40%。通过器官发生途径国内外首次建立了香榧离体再生体系和快繁体系,并获得了完整的再生植株,为今后开展香榧的遗传转化和品种改良奠定了基础。     

Cultivar identification and genetic diversity analysis of broccoli and its related species with RAPD and ISSR markers

A total of 18 genotypes of broccoli were subjected to random amplified polymorphic DNA (RAPD) and inter-simple sequence repeat (ISSR) marker analysis. Seventy-four RAPD and eight ISSR primers generated 344 and 67 polymorphic bands, respectively. All broccoli genotypes could be distinguished with two-primer combinations, indicating that RAPD and ISSR markers can be used to efficiently identify broccoli cultivars. These 18 broccoli genotypes could be separated into two major sub-groups. The first major sub-group (A) included 13 genotypes and the second major sub-group (B) was comprised of five genotypes belonging to early-maturating cultivars. Genetic diversity analysis was performed on the 18 broccoli genotypes, one radish genotype, and six related Brassica accessions. All accessions could be clustered into two groups (radish and Brassica) based on the unweighted pair group of arithmetic average (UPGMA) cluster analysis. The UPGMA analysis indicated that broccoli is most closely related to cauliflower, than to cabbage and Chinese cabbage.     

香榧新品种‘玉山鱼榧’的选育

‘玉山鱼榧’是从磐安县野生榧树古树中选育出的新品种,母树为实生起源古树,通过无性繁殖培育子代。该品种种实、种核比当前香榧主栽品种‘细榧’大,种核表面有2~6只榧眼,成熟期较迟。种实长倒卵状椭圆形,假种皮维管束直或扭曲,平均单个鲜质量10.8 g,纵径3.74 cm,横径2.28 cm,种形指数1.65,假种皮厚0.35 cm,鲜出核率36.39%,干出核率67.15%;种核平均单个鲜质量3.9 g,纵径3.37 cm,横径1.49 cm,核形指数2.28,壳厚0.08 cm,干核出仁率66.55%;种仁平均单个干质量1.6 g,脂肪含量48.6%,总糖含量0.83%,蛋白质含量18.02%,品质佳,商品性能优良。在浙江磐安开花期4月中旬,成熟期第二年9月中旬,种实发育期17个月,树势强,结果早,丰产,稳产,经济寿命长。幼苗和幼树喜阴湿,怕高温干旱和强日照,开始结实后又需要有充足的阳光,根系耐湿性差,怕积水。采用SSR分子标记对‘玉山鱼榧’的遗传鉴定表明,‘玉山鱼榧’与‘细榧’在DNA水平上存在明显的差别。‘玉山鱼榧’适宜在浙江省香榧产区栽培,其栽培技术要求与‘细榧’相同。     

番茄粉红色果实相关基因的dCAPS和InDel标记开发与应用

采用SuperBSA方法分别构建100份粉红色番茄材料和100份红色番茄材料的DNA混合池,对测序结果的SNP位点进行分析。结果表明:在1号染色体上的127个SNP位点中,有6个与番茄果实颜色高度相关,其中1个位点与粉红色果实高度相关。利用该SNP位点开发了1个共显性d CAPS标记,在红色、粉红色和杂合F_13种基因型之间的多态性较好。同时,利用番茄重测序数据分析番茄起源时发现,在粉红色番茄中SIMYB12基因的上游存在1个603bp的缺失,利用该缺失突变位点开发了1个共显性In Del标记,在红色、粉红色和杂合F_13种基因型之间也表现出较好的多态性。利用新开发的2个标记对F_2群体进行遗传分析,鉴定结果与田间表型观察结果符合度均达到95%以上,表明这2个标记可以用于番茄苗期分子标记辅助选择。     

樱桃种质SCoT分子标记与叶片表型性状关联分析

利用本研究中建立的樱桃SCoT标记分析体系,进行适宜引物筛选,进而对12个樱桃品种进行SCoT分子标记、叶片表型性状遗传多样性及两者关联分析.结果 显示:从102条SCoT标记引物中筛选出46条适宜樱桃遗传分析的标记引物,筛选率达45.1％;参试的18条SCoT引物共获得等位位点数77个,其中多态性位点65个,多态性比...     

香榧体细胞胚发生的研究

 以香榧胚为外植体进行体细胞胚的诱导, 在SH + 6-BA 0.1 mg/ L + 2,4-D 0.5 mg/ L 的培养基上愈伤组织诱导率可达到69.8 %; 愈伤组织经过数次继代后转移至1/ 2 SH + 6-BA 0.1 mg/ L + NAA 0.1mg/ L 培养基上可诱导体细胞胚的形成, 诱导率可达70.3 % , 体细胞胚在合适的培养基上可继续生长和增殖。这是国内外首次通过组织培养成功获得香榧体细胞胚的报道。