利用miRNA芯片筛选不同月龄香猪肝脏中差异表达的miRNA

为研究miRNA在香猪发育时期的调控功能,试验对3和7月龄香猪肝脏组织中存在表达差异的miRNA进行了筛选。提取3和7月龄香猪肝脏组织总RNA,通过与miRNA芯片杂交,经统计学分析,以变化倍数≥2倍（P<0.05）为阈值,筛选3和7月龄香猪肝脏中表达丰度差异的miRNA,并运用实时荧光定量PCR进行验证。结果发现,与3月龄相比,7月龄香猪肝脏中有11条miRNA表达下调和9条miRNA表达上调,下调倍数最多的是miR-27b,上调倍数最多的是miR-155。对选取的4条差异表达的miRNA进行实时荧光定量PCR反应,结果显示,4条miRNA表达变化趋势与芯片结果一致。本研究结果表明,不同月龄香猪肝脏中的miRNA表达丰度有差异,其中一些可能参与了机体生长发育时期肝细胞的脂肪代谢过程。     

精氨酸对左旋硝基精氨酸甲酯诱导猪宫内生长受限的缓解作用

本研究旨在探讨L-精氨酸(L-Arg)对左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)诱导的猪宫内生长受限的缓解作用.试验选取40头预产期相近、2～4胎次的长白×大约克夏妊娠母猪,随机分为4个处理:处理Ⅰ(正对照)、处理Ⅱ(负对照,注射L-NAME)、处理Ⅲ(L-NAME+1.0%L-Arg)和处理Ⅳ(1.0%L-Arg),每个处理10个重复,每个重复1头母猪.孕85～105 d,处理Ⅱ、Ⅲ世猪连续21 d于颈背部皮下多点注射2.5 mL的L-NAME溶液以诱导宫内生长受限(IUGR),剂量为15.0 mg/kg BW.处理Ⅰ和Ⅳ母猪则以相同方式注射等体积的生理盐水.于妊娠第85天、第105天耳静脉采血,分娩时取胎盘血液以测定一氧化氮(NO)、总一氧化氮合酶(TNOS)含量.记录窝产仔数、窝活仔数、窝仔重、窝活仔重、仔猪初生重及活仔初生重,计算IUGR发生率.结果表明:1)在妊娠后期母猪饲粮中添加1.0%精氨酸,窝产活仔数由11.20头显著提高到12.60头(P<0.05),窝活仔重由16.21 kg提高至18.26 kg(P<0.05),仔猪IUGR发生率由17.49%降低至6.35%(P<0.05);2)注射L-NAME的母猪窝产活仔数降低了19.64%(P<0.05),窝活仔重降低了27.14%(P<0.01),而仔猪IUGR发生率则显著提高至34.49%(P<0.01).但在注射L-NAME的同时给母猪补充1.0%精氨酸后,窝产活仔数、窝活仔重达正常水平,仔猪IU-GR发生率与正对照组差异不显著(P>0.05);3)给妊娠母猪注射L-NAME,胎盘血清NO、TNOS合成量显著降低(P<0.01),但饲粮中补充1.0%精氨酸后,胎盘血清NO、TNOS合成量恢复至正常水平.由此可知,给妊娠期母猪饲粮中添加1.0%精氨酸后抵消或逆转了由L-NAME诱导的胎盘血清TNOS、NO合成最降低及胎猪生长受限作用,促进了胎猪在宫内的生长发育,并有效地预防了IUGR的发生.     

猪宫内生长迟缓及其防治研究进展

宫内生长迟缓(IUGR)是养猪生产中的主要问题之一。由于胎源性调控效应,胎儿生长受阻可降低新生仔猪的成活率,永久性阻碍仔猪的生长,降低饲料转化率和危害其身体健康。并对体组成和肉质产生不利影响。认识IUGR的发生机制对预防其发生,提高机体健康状况,从而提高生产性能具有重要意义。开展多学科交叉的创新研究,对设计新一代营养平衡的妊娠日粮、发展新型的管理方案将发挥重要作用。     

精氨酸对胎鼠宫内生长迟缓的影响

通过探讨日粮添加精氨酸（Arg）对胎鼠宫内生长迟缓的影响,为Arg应用在动物生产上提供理论基础。试验将120只雌性小白鼠随机分为6组：0．0％Arg组、0．25％Arg组（基础日粮添加0．25％Arg,下同）、0．5％Arg组、0．75％Arg组、1．0％Arg组、1．5％Arg组,试验期间各组自由采食和饮水。每组随机抽取10只孕鼠进行眼球摘除采血,颈椎脱臼处死孕鼠,剖腹取胎鼠、胎盘和子宫,分别称重,记录胎鼠数、胎儿宫内发育迟缓（IUGR）数、死胎数（含吸收胎数）、胎鼠重、子宫重和相应的胎盘重。结果：（1）所添加的Arg浓度对孕鼠无毒性作用;（2）与对照组相比,日粮添加0．5％Arg可降低死胎率达54．70％（P〈0．05）,从而极显著提高胎鼠数（P〈0．01）;（3）日粮中添加0．5％ArgIUGR率比对照组降低了约64．9％（P〈0．05）。结论：日粮添加精氨酸可以降低死胎率和IUGR率,提高胎鼠数和胎鼠重。     

高能饲粮对育成期蛋鸡肝脏miRNA表达谱的影响

本研究利用高能和低能饲粮饲喂育成期蛋鸡,运用small RNA测序方法对肝脏中miR-NA进行检测,对其表达量进行分析,对差异表达miRNA进行靶基因预测,并对差异表达的预测靶基因进行基因本体论(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析.结果表明:与低能组相比,高能组有2个miRNA表达显著上调...     

低钙胁迫对胎猪脂质代谢的影响

猪群的钙磷代谢紊乱是影响猪场经济效益的长久问题之一。妊娠母猪缺钙易致猪群的生产性能下降,其仔猪出生后的育肥效果又相对较差,进一步造成生产利润的丢失。本文就妊娠母猪发生钙流失对胎猪脂质代谢方面的影响进行了深入地研究。试验将20头健康的7～8胎龄母猪随机分为对照组（control,CON）和低钙组（low-calcium,LCa）,每组10头作生物学重复。按不同钙磷比配置日粮,于母猪妊娠第85天连续饲喂至第114天分娩。仔猪出生后立即采集其血液和肝肾组织样本。运用代谢组学技术分析仔猪代谢通路的变化;生化仪检测血清中的脂类物质;ELISA方法检测脂质代谢指标;荧光定量检测脂质代谢相关基因的表达。结果表明：低钙胁迫主要影响了胎猪的甘油磷脂代谢通路,同时对脂肪酸代谢及棕榈酸的合成等也造成了一定的干扰;仔猪血清中脂类物质的含量无明显变化（P>0.05）;低钙胁迫显著影响了胎猪体内FAS、Visfatin以及Resistin的分泌（P<0.05）;低钙组仔猪肝中SCD、LDLR,肾中SCD、FABP4、HSD17B12以及ABCC4基因的mRNA表达量显著降低（P<0.05）。以上结果提示,妊娠母猪缺钙可致使胎猪脂质代谢受影响,可能会不利于其生长发育。     

日粮中添加发酵中草药对产蛋后期蛋鸡肝脏组织miRNA表达谱的影响

为了探究发酵中草药对蛋鸡产蛋后期肝脏与脂代谢相关miRNA的影响,试验将480只体重相近、饲养管理水平一致的产蛋后期京红蛋鸡随机分为2组,每组4个重复,每个重复60只,对照组(GA组)饲喂基础日粮,试验组(GF组)饲喂基础日粮+4 g/kg发酵中草药。试验结束后,剖杀试验鸡。取肝脏观察表观形态,无菌取肝脏组织进行转录组测序,并采用生物学信息方法分析miRNA首位碱基偏好性、差异表达miRNA、靶基因预测及功能注释,构建miRNA-mRNA蛋白质相互作用网络,并通过实时荧光定量PCR验证转录组测序结果的准确性和可靠性。结果表明：对照组肝脏肿大,边缘钝圆,颜色呈蜡黄色;试验组肝脏轮廓光滑整齐,质地紧密,颜色呈赤褐色。长度为18～24 nt和26～29 nt的miRNA首位碱基偏好为U,25 nt miRNA的首位碱基偏好为A,30 nt miRNA的首位碱基偏好为G。共筛选到14个差异表达miRNA,其中上调miRNA 4个,下调miRNA 10个;筛选出208个差异表达miRNA预测靶基因,大多数靶基因显著富集在细胞增殖、有机氮化合物的生物合成过程、调节细胞增殖和转移酶活性等GO条目上,...     

恩诺沙星致猪肝脏蛋白质差异表达

采用双向电泳技术和质谱分析技术分析小型猪肝脏的蛋白质表达,以探讨恩诺沙星对猪肝脏蛋白质表达的影响。结果显示,与空白对照组相比,在低剂量组(5mg/kg)、中剂量组(25mg/kg)和高剂量组(125 mg/kg)都发现了glyoxalase domain-containing protein 4(GLOD4)的表达显著下降(P0.05),在中剂量组和高剂量组中都发现了线粒体stress-70protein(HSP70)的表达显著下降(P0.05)。结果表明,恩诺沙星会对部分猪肝脏蛋白质表达造成影响。     

microRNA在猪中的研究进展

microRNA（miRNA）是一类在真核生物中广泛存在的非编码小RNA,通过与目标基因的3'端非编码序列结合,在转录后水平上调控基因的表达,参与许多生物学过程,包括细胞生长、分化、增殖和凋亡等。miRNA的生物合成始于细胞核,分为3个阶段,即pri-miRNA、pre-miRNA、成熟的miRNA分子。前两个阶段在细胞核中完成,第三阶段转移到细胞质中完成。miRNA具有在真核细胞中广泛存在、长度21~24 nt、序列具有高度保守性3个特点。研究表明,miRNA参与调控猪胚胎期肌肉发育、胚后期肌肉生长及肉质性状形成,猪前体脂肪细胞分化和脂质沉积,猪体的免疫应答,以及影响病原与机体的相互作用等过程。因此,了解更多的猪miRNA研究进展,可以加深对猪肌肉发育、脂肪代谢、疾病免疫等分子机制的理解,为生猪的健康养殖提供参考。     

Determine the Different Expression miRNAs in Different Months Old Xiang Pigs by miRNA Microarray

To determine the roles of miRNA in the developmental stages of Xiang pig,we investigated the miRNA expression patterns in different months old of Xiang pigs.The total RNA from 3 and 7 months old of Xiang pigs were collected separately. Then,the total RNA were hybridized with the miRNA microarray and the threshold (fold-change>2, P<0.05) were used to identify the different expression miRNA. The quantitative Real-time PCR was performed to verify the microarray result. Compared to the 3 months old group,there were 11 miRNA down regulated and 9 miRNA were up regulated in the 7 months old group. The lowest down regulated miRNA was miR-27b whereas the highest up regulated one was miR-155.The result of quantitative Real-time PCR consistented with the microarray result. The result suggested that some of the dysregulated expression of miRNA might participate in the lipid metabolism in hepatic cells.     

子宫内发育迟缓对新生仔猪胰腺和胃发育的影响

本试验研究了子宫内发育迟缓对新生仔猪胰腺和胃发育的影响。从14窝新生仔猪(长白×大约克×米猪)中选出28头仔猪,每窝选正常(NW)和IUGR仔猪各1头。14对仔猪分成新生(5对)、3日龄(5对)和7日龄(4对)三组。试验结果表明,IUGR与NW仔猪胰腺重和胃重随日龄增长而增加(P<0.01)。各日龄IUGR仔猪胰腺重量和胃重低于NW仔猪(P<0.05或P<0.01)。各日龄IUGR仔猪胰腺和胃的蛋白质、DNA和RNA含量,胰腺腺泡大小和腺泡细胞大小,胃底腺区胃壁厚度均小于NW仔猪(P<0.01或P<0.05)。各日龄IUGR仔猪胰蛋白酶总活性和胰凝乳酶总活性显著低于NW仔猪(P<0.05)。新生和3日龄IUGR仔猪胰脂肪酶的总活性,7日龄IUGR仔猪胰淀粉酶总活性低于NW仔猪(P<0.05)。结果提示IUGR显著影响仔猪胃和胰腺的重量、生化组成和酶的活性。     

胎盘糖代谢对猪宫内发育迟缓的调控作用

宫内发育迟缓（intrauterine growth retardation,IUGR）是指胚胎或其器官在怀孕期间生长和发育受阻,表现为后代生长发育受限或停滞。初生低体重或极低体重是IUGR仔猪的主要特征。IUGR严重影响新生仔猪的存活和后期的生长发育。诱发IUGR的原因包括母体在妊娠期间养分摄入不足、发病、环境应激以及子宫和胎盘功能异常等。猪作为多胎家畜,受IUGR影响最为严重,主要原因在于妊娠期间母猪无法提供足够的养分满足子宫角上所有胎儿正常生长发育的需要。胎盘作为母子之间唯一的联系,胎盘营养物质能否正常转运与代谢是影响胎儿发育的重要因素。碳水化合物是胎儿宫内发育最主要的能量底物,胎盘的糖类转运及代谢异常对IUGR的形成至关重要。在糖代谢的过程中,葡萄糖、磷酸戊糖和果糖可以通过葡萄糖转运蛋白、胎盘滋养层细胞和血管生成等对仔猪宫内发育起到调控作用。文章阐述了胎盘糖代谢对仔猪宫内发育迟缓的调控作用,以期为减少IUGR发生及改善IUGR仔猪的生长发育提供科学依据。     

亮氨酸改善宫内发育迟缓的作用及机理

试验旨在研究日粮中添加亮氨酸对宫内发育迟缓(IUGR)大鼠的改善及其作用机理。试验采取限饲方法建立大鼠IUGR模型,在基础日粮中添加亮氨酸进行处理。试验共分5个处理组:全量组、限饲组、丙氨酸组、精氨酸组和亮氨酸组,每组10只大鼠,处理期为整个孕期,妊娠第20天宰杀孕鼠,测母鼠胎盘重、胚胎重、胚胎鼠窝重。采用Real-timePCR检测胎盘IGF-II、子宫激素受体(ER)以及孕激素受体(PR)的基因表达量。结果表明:亮氨酸显著增加了胚胎鼠重、胎盘重和产仔数。此外,亮氨酸也显著提高了胎盘的IGF-II和子宫ER、PR的基因表达量。结果提示,大鼠日粮中添加亮氨酸可以通过改变胎盘和子宫转运功能改善IUGR。     

miR-27a和miR-378在中外猪种背最长肌中的差异表达研究

为了研究miRNA表达量与肉质风味表型指标的相关性,试验采用荧光定量PCR技术(Q-PCR)检测了4个猪种背最长肌中miR-27a和miR-378的差异表达。结果表明:背最长肌组织中2种miRNA的表达水平在4个猪种中趋于一致。相关性分析显示,2种miRNA在背最长肌中的表达水平与肌内脂肪含量和硫胺素含量呈正相关,与肌纤维直径、眼肌面积和瘦肉率呈负相关。表明miR-27a和miR-378对猪肉品质具有正调控作用,而对猪胴体品质具有负调控作用。该研究可为阐明miRNA在猪肌肉生长和脂肪沉积过程中的调控机制提供基础数据。     

猪CA5B基因的序列特征和表达分析

旨在通过分析猪CA5B(线粒体碳酸酐酶 VB,carbonic anhydrase 5b,mitochondria;CA5B/CA VB/Car5b)基因的序列特征和时空表达,解析CA5B对猪组织器官发育和代谢的影响.本研究采集6头240日龄贵州猪(公、母各3头)的心、肝、脾、肺、肾、皮下脂肪、背最长肌、睾丸、卵巢,采...     

猪胎及仔猪消化道发育的研究进展

猪消化道发育的情况直接影响了营养物质的消化吸收与利用,因而找出其发育规律能更好的指导仔猪的饲养管理。本文综述了猪从胚胎到断奶以后消化道组织器官、消化腺分泌、肠道吸收能力的发育情况,为合理配制仔猪日粮及饲养管理等方面提供依据。     

限时采食对猪生长性能和肝代谢的影响

旨在研究限时采食对猪生长性能和肝转录谱及代谢谱的影响。本试验选择体重相近((56.29±1.93) kg)、健康的杜×长×大三元杂交猪12头随机分为对照组和限时采食组。每组6个重复,每个重复1头猪。对照组(CON)自由采食;限时采食组(TRF)每天饲喂3次(分别在7:00、12:00、17:00),每次饲喂足量饲料,每次采食时间为1 h。试验共计21 d,每天记录采食量,每周称重,计算料重比。试验结束屠宰全部试验猪,采集静脉血测定血液生化指标,采集肝用于代谢组和转录组测定。结果显示,与对照组相比,限时采食组猪平均日增重显著升高(P<0.05),料重比显著降低(P<0.05)。与对照组相比,限时采食组猪血清总胆汁酸浓度有下降趋势(P<0.1),而丙氨酸转氨酶和肌酸激酶的浓度有上升趋势(P<0.1)。限时采食显著增加抑制蛋白质分解基因的表达(P<0.05),减少肝总蛋白质的分解,使肝中氨基酸水平下降。此外,限时采食还显著上调脂肪酸代谢相关基因的表达(P<0.05),增加肝脂肪的合成,减少肝脂肪酸含量。综上所述,限时采食可以影响肝中的氮代谢和氨基酸代谢,改变脂肪酸和蛋白质在肝中的代谢,进而调控生长猪对营养物质的利用并影响猪的生长性能,这提示可以通过饲喂模式改善动物生长和代谢。