重组鸡痘病毒表达的鸡IL-1β、IL-2和髓细胞生长因子对新城疫La Sota疫苗免疫效果影响

为研究在新城疫La Sota疫苗免疫不全的情况下，重组鸡痘病毒（rFPV）表达的鸡白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素2（IL-2）和髓细胞生长因子（MGF）是否具有免疫增强作用。10日龄SPF鸡随机分成8组（I～VIII），每组18只，每只接种1个半数保护剂量（PD50）的LaSota疫苗，同时免疫不同剂量的表达鸡IL-1β、IL-2或cMGF的rFPV（rFPV-IL-1β、IL-2、cMGF）。结果：rFPV表达的IL-1β、IL-2或cMGF可以消除鸡痘病毒在免疫早期对雏鸡体重增长的影响；一定剂量的IL-1β和IL-2可使鸡脾脏中CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞的总体水平提高；免疫21d后用新城疫的F48E8强毒经肌肉攻毒。一定剂量的IL．1B和IL一2（I和III组）能提高La Sota疫苗的免疫保护率，而cMGF却没有表现出这种作用。本研究表明rFPV表达的IL-1β和IL-2在一定的剂量下可以增强La Sota疫苗的免疫效果，具有免疫增强作用。     

鸡IL-6真核表达载体的构建及其对新城疫LaSota疫苗的免疫增强作用研究

利用RT—PCR方法从ConA诱导的鸡脾淋巴细胞RNA中扩增出IL-6基因,与pCI—neo连接构建真核表达质粒pCI—IL-6,并研究pCI—IL-6在CEF细胞中的表达及其对新城疫LaSota疫苗的免疫增强作用。研究发现,pCI—IL-6在CEF细胞中得到表达,pCI—IL-6和LaSota疫苗联合免疫组HI抗体、CD4^＋、CD8^＋和CD3^＋T淋巴细胞百分含量从免疫后第14天起均高于LaSota疫苗单独免疫组。其中,HI抗体效价在第14、21和35天时差异显著（P〈0．05）,在第28天时差异极显著（P〈0．01）;CD4^＋、CD8^＋和CD3^＋T淋巴细胞百分含量在第14天后表现为差异显著（P〈0．05）或极显著（P〈0．01）。在免疫后第35天进行攻毒,pCI—IL-6和LaSota疫苗联合免疫组的保护率为89．5％,而LaSota疫苗单独免疫组的保护率为76．5％。结果表明,pCI—IL-6真核表达质粒在鸡体内成功表达,并能明显提高新城疫LaSota疫苗的免疫效果,具有免疫增强作用。     

鸡IL-1β、IL-2、IFN-γ和MGF对表达新城疫病毒HN基因的重组鸡痘病毒免疫效力的影响

将10日龄的SPF鸡和15、28日龄的商品鸡分别随机分组,同时免疫不同剂量的rFPV-HN（表达NDV HN基因重组鸡痘病毒）和表达不同细胞因子（IL-1β、IL-2、IFN-γ、MGF）的重组鸡痘病毒（rFPVs）。在免疫后不同时间,通过检测血液中抗NDV的HN蛋白抗体、脾脏中CD4＋和CD8＋T细胞的变化及攻毒保护率等指标。结果表明：IL-1β或IFN-γ在免疫后期能促进抗HN间接ELISA抗体的滴度上升,而且产生抗体的整齐度好;IL-1β或IL-2可以显著增加脾脏中CD4＋和CD8＋T细胞含量;IL-1β、IL-2或IFN-γ同样可以提高商品鸡攻毒后的存活率。IL-2和IFN-γ在增加脾脏中CD4＋和CD8＋T细胞的数量及攻毒保护方面表现出一定的协同增强作用。     

表达新城疫病毒F HN基因重组鸡痘病毒疫苗的遗传稳定性和免疫效力试验

目前我国主要使用全病毒灭活苗和弱毒活疫苗免疫接种预防新城疫(ND)，虽然这两种疫苗都能产生较好的保护力，但是也存在一些不可克服的缺陷。因此迫切需要研制新型高效疫苗用于防制该病。国内外很多学者都在进行着ND各种基因工程疫苗的研制，NDV—F、HN基因在多种载体中得到表达并取得了较好的保护效力。本实验室已构建了表达NDV F18E8株F、HN基因的重组疫苗rFPV—F、rFPV—HN。本研究对这两种重组鸡痘病毒疫苗的遗传稳定性以及对SPF鸡和商品鸡的免疫保护作用进行了评价。     

白细胞介素-2降低疫苗免疫对鸡上呼吸道损伤的试验报告

为观察新城疫、传染性支气管炎疫苗免疫对家禽上呼吸道的损伤程度、单苗及联苗免疫对呼吸道是否存在免疫伤害差异以及疫苗免疫时使用白细胞介素-2是否能降低疫苗对呼吸道的损伤等现象，我们进行了相关试验。结果显示，新城疫、传染性支气管炎疫苗免疫后确实对呼吸道产生损伤，尤其是存在病原     

鸡IL-2和IL-15基因真核表达质粒对禽流感疫苗的免疫增强作用

根据GenBank中的鸡IL-2和IL-15序列设计了2对引物，采用RT-PCR法从山地乌骨鸡外周血淋巴细胞RNA中克隆了IL-2和IL-15基因，与pcDNA3．1连接构建了真核表达质粒pDNAIL-2和pDNAIL-15，研究了其对禽流感灭活疫苗的免疫增强作用。结果显示，免疫后第10d，pDNAIL-15＋AI灭活疫苗组和pDNAIL-2＋AI灭活疫苗组HI抗体水平显著高于AI灭活疫苗组（P〈0．05）。免疫后第10d，pDNAIL-15＋AI灭活疫苗组CD4^＋淋巴细胞百分含量显著高于pDNAIL-2＋AI灭活疫苗和AI灭活疫苗组（P〈0．05）；免疫后第23d，pDNAIL-2＋AI灭活疫苗组CD4^＋淋巴细胞百分率显著高于pDNAIL-15＋AI灭活疫苗和AI灭活疫苗组（P〈0．05）。证实pDNAIL-2和pDNAIL-15能提高禽流感灭活疫苗的免疫效果。     

以鸡痘病毒为载体的新城疫病毒重组疫苗的免疫效力

构建了表达速发型新城疫病毒（ＮＤＶ）融合蛋白（Ｆ）和血凝素－神经氨酸酶（ＨＮ）糖蛋白的鸡痘重组病毒ＴＲＯＶＡＣ－ＮＤＶ。ＳＰＦ鸡免疫试验表明，一次注射得组病毒有使鸡产生大量血凝抑制（ＨＩ）抗体。并能维持８周以上，而且重凤苗能诱导对经肌肉和呼吸道途径攻击ＮＤＶ的免疫力。带母滞病毒（ＦＰＶ）的免疫力，但ＮＤＶ的特异性体液应签水平降低。     

益生菌对新城疫疫苗免疫雏鸡免疫器官T细胞增殖能力和IL-2mRNA表达影响

为探索益生菌对新城疫(ND)疫苗免疫雏鸡的免疫效果影响。将100只1日龄AA肉鸡随机分为益生菌组、ND疫苗单独免疫组、益生菌联合ND疫苗应用组和空白对照组。采用MTT法和实时荧光定量PCR法检测各试验雏鸡于ND疫苗两次应用后0、7、14、28、42 d胸腺、脾脏中细胞免疫功能及IL-2 mRNA的表达。结果发现,益生菌联合ND疫苗免疫雏鸡后,其胸腺和脾脏中T细胞增殖能力和IL-2 mRNA表达,分别于ND疫苗免疫后7~28 d明显(P0.05或P0.01)高于ND疫苗或益生菌单独应用雏鸡。表明益生菌可通过提高雏鸡免疫器官中T细胞增殖功能和IL-2 mRNA表达,发挥增强ND疫苗免疫效应作用。     

新城疫油佐剂灭能苗免疫调节剂对鸡免疫效果的影响

新城疫油佐剂灭能苗免疫调节剂对鸡免疫效果的影响曾明华沈咏舟魏建忠谢三星（安徽农业大学畜牧水产学院，合肥２３００３６）为了提高机体免疫力，克服雏鸡母源抗体在新城疫（ＮＤ）免疫中产生的不良反应［１］，寻找有效的免疫调节剂不失为一种重要途径。据报道［２］Ｎ...     

浅述影响新城疫免疫效果的因素

鸡新城疫（ND）是当前养鸡业中危害最大的一种病毒性传染病．lop年底笔者在金竹山乡资江村、中连乡民主村各调查了农户100户,因鸡疫病流行,死亡率分别为82．l％和刀．3％,其中大部分死于ND．而ND免疫接种密度分别为78．l％和79．0％．为什么农村多数鸡群在雏鸡时滴过11系苗或haa苗,有的在中雏还注射过1系苗仍会发生ND呢？本文就影响ND免疫效果的因素予以浅述．l母源抗体的干扰产蛋母鸡若接种过ND疫苗,体内就会产生不同程度的抗ND抗体,这些抗体可以通过蛋的孵化由蛋黄传递给雏鸡,雏鸡就会有抵抗该病毒侵袭的保护力,即具有一定…     

中药复方对鸡免疫器官指数及IL-2表达的动态影响

将300只1日龄公雏鸡随机分为3组，两组分别给予中药方Ⅰ和方Ⅱ（由石膏、苍术、黄柏、藿香分别按质量比1：1：1：1和0．5：1：1：1比例组成，按体重0．3mg／kg的剂量饮水），对照组按照常规方法饲养。分别于雏鸡第7、21、35、49日龄时，每组随机抽取5只鸡剖杀，取腔上囊、脾、胸腺测定免疫器官指数和IL-2平均阳性表达率，以探讨中药复方对雏鸡免疫器官指数及其IL-2表达的动态影响。结果显示，随着用药时间的增加，中药方Ⅰ和方Ⅱ可显著（P〈0．05）或极显著（P〈0．01）提高腔上囊、脾和胸腺等免疫器官指数及其IL-2的平均阳性表达率，方Ⅰ对各免疫器官IL-2阳性表达率的影响最为显著（P〈0．05）。证实该中药复方可促进雏鸡细胞免疫水平，增强其非特异性免疫功能，并促进免疫器官的发育。     

表达新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒的筛选

将转移载体P11SF和PN11SF分别与282E4株鸡痘病毒（282E4 strain fowlpox virus，282E4FPV）和大空斑株鸡疽病毒（large plaque strain fowlpox virus，LP FPV）共转染鸡胚成纤维细胞，通过蓝斑筛选，得到4株重组鸡痘病毒rFPV282E4-SFA、rFPVLP，-SFA、rFPV282E4-SFB和rFPVLP-SFB，通过PCR和间接免疫荧光鉴定均为阳性，另外将各重组病毒分别传20代，测其遗传稳定性，结果显示均具有良好的稳定性。对SPF鸡进行免疫效力试验，攻毒后均100％保护，而对于商品鸡，保护率分别为64％、60％、52％和88％。     

鸡沙门菌感染对新城疫疫苗免疫效果的影响

目前沙门菌感染对疫苗免疫效果影响的相关报道还比较缺乏,为了探讨鸡沙门菌强毒株感染对疫苗免疫效果的影响,以新城疫疫苗株为研究对象开展了如下试验,现报道如下。     

IL-2能有效降低ILT疫苗免疫应激反应

传染性喉气管炎(ILT)是由A型疱疹病毒引起的一种急性呼吸道传染病,临床特征表现为:流泪、伸颈呼吸、咳出血痰、拉黄色、绿样粪便,死亡率10%～50%,对产蛋鸡影响极为严重。因此,传染性喉气管炎疫苗的免疫至关重要,该疫苗的免疫有效地预防了疫区喉气管炎的发生。但是,喉气管炎疫苗受环境因素、机体健康水平及疫苗本身的影响,点眼后引起大部分鸡的副作用,尤其是日龄较小的鸡;如:流泪、肿眼、肿头、采食量下降等,如管理不好,继发支原体病或大肠杆菌病,给家禽养殖业带来了隐患。为解决此问题的发生,笔者经多次对比实验,观察分析使用家禽基因工程…     

表达传染性喉气管炎病毒gB基因和新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒疫苗免疫持续期试验

用表达传染性喉气管炎病毒gB基因和新城疫病毒F基因的重组鸡痘病毒（rFPV～gB—F）制备的疫苗免疫4周龄SPF鸡，免疫后的7、14、21、30、60、90、120、150、180d分别采血，分离血清，检测抗FPV和gB的抗体。结果表明重组疫苗免疫后14d，免疫鸡血清抗体已经全部阳转，免疫后的21d血清抗FPV的抗体出现峰值；此后便开始回落，到免疫后的6个月抗体水平已经接近阴性对照的水平。抗gB的抗体在免疫后的第二周达到阳性，之后的六个月都为阳性。在免疫后的每个月将免疫鸡取20只再分成两组。分别用新城疫强毒与传染性喉气管炎强毒的攻击。在免疫后的第一个月对新城疫的保护率为8／10，第2个月对新城疫的保护为7／10，第3个月为2／10，因此对新城疫的免疫保护期为2个月。在免疫后的5个月内可以使免疫鸡对传染性喉气管炎强毒攻击的保护率达到8／10以上，免疫后的6个月对ILT为8／13．因此rF—PV-gB—F对传染性喉气管炎的免疫保护期为5个月。