苏云金芽孢杆菌A322菌株发酵培养基和发酵条件的优化

以菌体生长对数末期发酵液OD600值为优化标准,通过单因素和正交试验方法对前期室内实验筛选得到的对棉铃虫(Helicoverpa armigera Hubner)有较高活性的苏云金芽孢杆菌Bt A322菌株进行培养基优化,并进行发酵。结果表明,最佳培养基配方为0.5%黄豆粉+0.5%酵母粉+0.5%葡萄糖+0.5%胰蛋白胨+0.2%碳酸钙+0.1%磷酸二氢钾+0.1%硫酸镁。最佳培养条件为培养时间20 h,初始p H值7.5,发酵温度30℃,摇床转速为200 r·min-1,接种量3%,250 m L三角瓶适宜装35 m L培养基。优化后的菌体生长量OD600值比优化前的提高了44.7%。     

苏云金芽孢杆菌发酵培养基的筛选

采用正交试验对BtWB7菌株发酵培养基进行筛选,结果表明,不同原料对发酵液菌数影响相差较大,其中酵母粉和鱼粉影响最大.本试验获得的最佳摇瓶发酵配方为:玉米粉4%、黄豆饼粉1%、酵母粉2%、鱼粉2.5%和蛋白胨0.1%(质量分数).     

用于烟叶提质的苏云金芽孢杆菌SY-1产淀粉酶条件的优化研究

为了提高苏云金芽孢杆菌 SY-1 菌株淀粉酶活性,提升烟叶生物酶发酵过程中淀粉降解效率,从而提高烟叶品质,以淀粉酶活性为指标,对 SY-1 菌株产酶培养基及发酵条件进行单因素及响应面试验优化。结果显示,SY-1 菌株产淀粉酶的最优培养基及发酵条件：可溶性淀粉+玉米淀粉(m_{可溶性淀粉}∶m_玉米淀粉=1∶1)15.69 g/L,蛋白胨+酵母粉(m_蛋白胨：m_酵母粉=1∶1)16.87 g/L,CaCl₂5.91 g/L;温度 36.83 ℃、转速 189.71 r/min。酶活性为 223.45 U/mL,与优化前相比提高 92.55%。利用优化后 SY-1 酶液处理烟叶,淀粉降解率达 40.68%。与优化前酶液处理相比,淀粉降解率提高 23.80个百分点,优化后酶液处理烟叶中水溶性总糖和还原糖含量分别增加 5.91% 和 7.84%,总氮和烟碱含量分别下降 4.23% 和 2.84%,两糖差降低,糖碱比提高,有利于提高烟叶吃味品质。     

1株广谱苏云金芽孢杆菌及其发酵条件的研究

从土壤中分离出几株广谱杀鳞翅目昆虫的苏云金芽孢杆菌。其中杀虫效果最好的1株C-33血清型为H5，产生近方形和菱形的伴孢晶体，含有cry1Aa、cry1Ab、cry1Ac、cry1C基因，产生144kDa和77kDa的晶体蛋白质。毒力生物测定证明C-33对棉铃虫及甜菜夜蛾有高毒力。对该天然广谱Bt菌株C-33进行了摇瓶发酵和小试发酵试验，结果表明其发酵性能良好。通过2L全自动罐发酵试验，优化了发酵培养基和发酵条件，发酵效价达到3400～3700IU／μl(棉铃虫)。     

纳豆芽孢杆菌高密度发酵条件优化

为有效提高纳豆菌的产率,达到高密度发酵培养的效果,对纳豆芽孢杆菌高密度发酵培养的培养基成分和培养条件进行了优化试验。采用单因素和正交试验方法,最终确定最佳培养基为淀粉20．0g／L,酵母粉2．0g／L,蛋白胨2．0g／L,NH4C11．0g/L,K2HPO4 2．0g／L,KH2P042．0g／L,MgSO41．0g/L。最佳培养条件为：初始pH值6．5;接人菌种的体积分数为0．05;培养温度35℃。在20L发酵罐中高密度发酵培养,纳豆芽孢杆菌活菌数达2．95×10^14 cfu／L,较优化前提高近一个数量级。     

地衣芽孢杆菌1411-1羽毛角蛋白固体发酵工艺的优化及角蛋白酶的初步研究

对角蛋白高效降解菌地衣芽孢杆菌菌株1411-1固体发酵条件进行了优化,着重考察了培养基含水量、起始pH值、温度、接种量及外源添加物的影响,并确定了优化的发酵周期,同时对角蛋白酶的提取进行了初步研究.研究结果表明,1411-1的最适固体发酵条件为:培养基含水量75%,pH值10.0,温度40℃,菌液接种量0.15 ml/g,发酵周期88 h,氮源对固体发酵有显著的抑制作用,碳源的影响不显著;角蛋白酶的最适提取条件为:以碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(pH值10.0)作为提取剂,4℃下提取60 min.     

苏云金杆菌液态发酵培养基的优化

对苏云金芽孢杆菌液体发酵法的培养基进行优化,确定其适宜的配方为4%葡萄糖,4%蛋白胨,2.5%酵母水溶性浸出物,0.5%无机盐混合.在此条件下,经过32 h发酵后,还原糖0.49%,生物效价4 234.00IU·μL-1,晶体含量0.55%,菌体湿重18.72%.     

饲用枯草芽孢杆菌发酵条件的优化

对枯草芽孢杆菌的发酵培养基和发酵条件进行了筛选优化.通过单因素试验及正交试验方法,确定了该枯草芽孢杆菌的优化培养基为:葡萄糖0.5%、淀粉0.3%、豆粕3%、磷酸氢二钾0.3%、磷酸二氢钾0.15%、硫酸镁0.05%、酵母膏0.02%、氯化铁0.01%、碳酸钙0.01%、3.08%硫酸锰0.2mL.最适发酵条件为:发酵温度30℃,初始pH 7.0～7.2,摇床转速220 r/min,接种量10%.发酵罐放大培养最佳放罐时间20～22 h,获得的菌体数量约为158亿/mL.     

饲用枯草芽孢杆菌发酵条件的优化

对枯草芽孢杆菌的发酵培养基和发酵条件进行了筛选优化。通过单因素试验及正交试验方法,确定了该枯草芽孢杆菌的优化培养基为：葡萄糖0.5%、淀粉0.3%、豆粕3%、磷酸氢二钾0.3%、磷酸二氢钾0.15%、硫酸镁0.05%、酵母膏0.02%、氯化铁0.01%、碳酸钙0.01%、3.08%硫酸锰0.2 mL。最适发酵条件为：发酵温度30℃,初始pH 7.0～7.2,摇床转速220 r/min,接种量10%。发酵罐放大培养最佳放罐时间20～22 h,获得的菌体数量约为158亿/mL。     

苏云金芽孢杆菌的发酵生物学研究初报~①

本文通过对苏云金芽孢杆菌连续6罐的车间发酵试验,对试验菌种、配方及工艺作了多方面调察,并对发酵过程中 pH 变化、温度变化、生长曲线及同步性作了较详尽的探讨。试验结果表明:筛选的 Bt150菌株,用Ⅵ号生产配方能够取得毒力2000IU/ul 以上的发酵水平。     

响应面法优化芽孢杆菌NBIN-863的发酵工艺

采用响应面分析法对苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)NBIN-863的发酵培养基进行优化,应用Plackett-Burman设计法对影响NBIN-863发酵的关键因子进行筛选,通过最陡爬坡路径法确定主要影响因素的响应中心点,并进一步采用中心组合设计和响应面分析法确定最优培养基。将发酵液稀释后进行线虫毒性研究,结果表明,影响该菌株芽孢产量的关键因素为淀粉和豆粕的浓度。通过响应面分析法的拟合和推算,得到淀粉和豆粕浓度分别为35.2 g/L和34.7 g/L,测得NBIN-863发酵液的晶体含量为5.4 mg/mL,稀释后对线虫的致死率为81.0%,与预测值(81.2%)十分接近,比优化前NBIN-863的实际致死率(45.0%)提高了80%。     

胶冻样芽孢杆菌培养条件及发酵工艺的优化

通过单因子及正交试验,对一株胶冻样芽孢杆菌的培养基组成(碳、氮、生长因子、无机盐)及工艺条件(温度、起始pH值、装液量)进行了研究。结果表明,比较理想的配方是：糖蜜2%、豆粕粉0．5%、MgSO_4·7H_2O 0．1%、K_2HPO_4 0．05%、CaCO_3 0．1%;起始pH值7．5,培养温度36℃,装液量30 ml/250 ml锥形瓶。在此基础上利用70 L发酵罐进行发酵,培养周期33 h,芽孢量可以达到9．58×10~8 cfu/ml,高于国家规定的液体菌肥5×10~8 cfu/ml标准,解决了原配方不产芽孢的难题,培养周期缩短了一半。     

埃里格孢菌FEL3产SW发酵培养条件的优化

【目的】对埃里格孢菌(Undifilim oxytropis)FEL3产苦马豆素(SW)的发酵条件进行优化。【方法】在不同碳源(葡萄糖、蔗糖、乳糖、燕麦片、可溶性淀粉)、氮源(豆粉、酵母膏、牛肉膏、蛋白胨、硝酸钠、氯化铵、硫酸铵)、无机盐(MgSO4.7H2O,FeSO4.H2O,ZnSO4.H2O,CaCl2.2H2O,CuSO4.5H2O,KH2PO4)、初始pH(4.5,5.0,5.5,6.0,6.5,7.0,7.5)和接种量(体积分数2%,4%,6%,8%,10%)培养条件下,将埃里格孢菌FEL3接种到液体培养基中,培养15 d后,测定菌丝湿、干质量浓度和菌液中SW浓度,选择最佳培养条件。【结果】当碳源为燕麦片、氮源为豆粉、无机盐为CuSO4.5H2O、培养基初始pH为6.5~7.0、接种量为体积分数8%时,埃里格孢菌FEL3菌丝湿、干质量浓度和菌液中SW浓度均较高。【结论】得到了埃里格孢菌FEL3产SW的最佳培养条件,为用埃里格孢菌FEL3大量生产SW奠定了基础。     

枯草芽孢杆菌8-32产抗真菌物质发酵条件优化

为提高枯草芽孢杆菌菌株8-32抗真菌物质的产量,在单因素试验基础上,采用Plackett-Burman设计法找出影响菌株Bacillus subtilis 8-32产抗真菌物质的主要因素为培养时间、装液量和可溶性淀粉含量。采用最陡爬坡试验逼近最大响应区域,运用Box-Behnken试验设计及响应面分析法对3个显著影响因子的最佳配比进行优化,得到最佳发酵工艺参数为培养时间72.28h,装液量59.80mL/250mL三角瓶,可溶性淀粉含量1.51%。优化后抑菌圈直径从试验设计初期的14.21mm提高至24.51mm。     

微孢根霉产凝乳酶的发酵条件优化

筛选得到一株高产凝乳酶的菌株F518,鉴定为微孢根霉。通过单因素试验优化了微孢根霉F518液体发酵产凝乳酶的发酵条件。结果表明:发酵产酶的最适碳源为酒糟,最适氮源为酵母浸粉,培养基最适初始pH为5.0。在优化后的发酵条件下30℃培养72h,微孢根霉F518产凝乳酶活性最高,达到1 001SU/mL。微孢根霉F518在凝乳酶生产方面有很大的应用前景。     

不同碳源和氮源对米曲霉产酶影响的研究

以米曲霉3.4383作为原始菌株,经紫外诱变,通过培养筛选,得到一株变异菌株UV-2。其蛋白酶和纤维素酶活比原始菌株(蛋白酶2526 U/g,纤维素酶987 U/g)提高较多,达到3250和1145 U/g,且遗传稳定性好。研究了不同氮源和碳源对米曲霉UV-2产蛋白酶和纤维素酶的影响。确定了饲料酶制剂生产中最佳的氮源和碳源分别为豆粕和麸皮,并进一步确定发酵培养基中最佳的氨源和碳源比为1∶5。     

大丽轮枝菌拮抗细菌多粘芽孢杆菌7-4菌株发酵产抗菌蛋白条件的优化

为了提高大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)拮抗细菌多粘芽孢杆菌(Bacillus polymyxa)7-4菌株的发酵产抗菌蛋白量,采用单因素法对B.polymyxa7-4菌株发酵培养基所需的碳源、氮源、无机盐进行了筛选,并采用正交试验与单因素试验对7-4号菌株的发酵培养基组成及培养条件进行了优化,最终确定最适发酵培养基及培养条件为:葡萄糖5.0%,大豆蛋白胨5.0%,MnSO40.02%,MgSO4.7H2O 0.10%,培养基初始pH 7.5,种龄10~12 h,30℃摇床培养48 h。经过优化抑菌圈直径增加了50.4%。     

海洋细菌GM-1-1产芽孢发酵培养基和摇瓶发酵条件优化

[目的]优化海洋解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)GM-1-1的产芽孢发酵培养基和摇瓶发酵条件,为该菌株的开发和应用提供理论依据.[方法]以GM-1-1菌株发酵液中的细菌总数和芽孢产率为检测指标,采用单因素和正交试验对该菌株产芽孢发酵培养基和摇瓶发酵条件进行优化;GM-1-1菌株发酵完成后喷雾干燥制成菌粉,加入不同助剂制成有效含量为1010 CFU/g的可湿性粉剂用于水稻纹枯病田间防治试验.[结果]GM-1-1菌株产芽孢最佳发酵培养基配方为麦麸0.75%、花生饼粉2.5%、CaCO30.05%;最佳发酵条件为pH 7,温度30℃,250 mL三角瓶装液量60 mL,接种量8%,转速200 r/min,培养时间54 h.优化后GM-1-1菌株发酵培养基的细菌总数和芽孢产率分别达7.40×109个/mL和89.42%.田间防治试验结果表明,GM-1-1可湿性粉剂对水稻纹枯病的防治效果最高可达82.06%.[结论]优化后的培养基和发酵条件可有效提高GM-1-1菌株的细菌总数和芽孢产率,且培养基成本低、来源广泛.GM-1-1可湿性粉剂对水稻纹枯病有较好的防治效果,可用于生产菌剂并推广应用.     

响应面法优化绿色木霉H06产孢培养条件

在单因素试验的基础上,采用响应面法(response surface methodology,RSM)对绿色木霉菌H06菌株产孢培养条件进行了优化.首先利用Plackett-Burman试验设计筛选出影响产孢的3个主要因素:装液量、接种量和培养温度.在此基础上运用最陡爬坡路径法逼近最大响应值区域,最后利用响应面分析法确定主要因子之间的交互作用及最佳条件.结果显示,绿色木霉H06菌株的最佳发酵条件为:转速200 r/min,装液量74.70 mL/250mL,接种量5.83％,pH 7.5,温度29.50℃,培养时间72 h,菌龄48 h.H06菌株最大理论孢子含量为7.64×109个/mL.经3次平行试验验证,实际平均孢子含量与预测孢子含量相近,比之前的孢子含量提高133％.