山西部分种猪场猪伪狂犬病分子流行病学调研

猪伪狂犬病可引起母猪繁殖障碍、仔猪死亡并破坏猪的免疫系统,严重危害养猪业的发展。为了查清山西该病流行情况,对山西11个地市58个规模化种猪场进行了猪伪狂犬病分子流行病学调研。结果表明,山西种猪场猪伪狂犬病广泛存在,用PCR试剂盒检测猪伪狂犬病病毒感染率,最高的地区是朔州,为28.57%,最低的地区是晋中,为2%,平均为9.12%;用猪伪狂犬病病毒gE抗体检测试剂盒检测其感染gE抗体阳性率,最高的地区是朔州,为14.86%,最低的地区是吕梁,为1%,平均为3.20%;山西大部分种猪场都免疫猪伪狂犬病gE基因缺失弱毒疫苗,用猪伪狂犬病病毒gB抗体检测试剂盒检测其疫苗免疫gB抗体阳性率,最高的地区是晋城,为94.82%,最低的地区是长治,为41.26%,平均为79.33%。调研查明,山西种猪场普遍感染猪伪狂犬病病毒,疫苗免疫效果比较理想,但地区之间差异较大,今后要进一步加强该病的防疫免疫工作,有效控制其流行。     

2018~2019年河南部分猪场和屠宰场猪伪狂犬病血清学调查

调查分析2018~2019年河南省猪伪狂犬病血清学感染情况。采用阻断ELISA方法对2018~2019年河南省18个市的猪进行猪伪狂犬病感染抗体检测,检测样品份数7861份。结果发现,2018~2019年猪伪狂犬病感染抗体个体阳性率分别为29.42%、 23.33%;种猪场阳性率分别为18.86%、 15.29%,商品代养殖场阳性率分别为35.32%、 27.09%、屠宰场阳性率分别为47.22%、 41.06。总体猪伪狂犬病感染情况2019年低于2018年。猪伪狂犬病污染面比较广,但总体状况有所好转,呈下降趋势。     

2020—2021年河南省部分猪场和屠宰场猪伪狂犬病血清学调查

研究用ELISA方法对2020—2021年河南省18个市的猪进行猪伪狂犬病感染抗体检测,检测样品份数为39523份。结果显示,2020—2021年猪伪狂犬病感染抗体个体阳性率分别为20.93%、17.28%;种猪场阳性率分别为14.78%、9.54%,商品代养殖场阳性率分别为21.56%、20.93%;屠宰场阳性率分别为24.45%、19.16%。可见,河南省部分猪场和屠宰场总体猪伪狂犬病感染情况2021年低于2020年,说明该病防控与净化工作取得一定成效。     

两种检测猪伪狂犬病gB抗体方法比较

为评价化学发光免疫分析法在临床检测猪伪狂犬病gB抗体中的适用性,将其与IDEXX公司ELISA抗体检测方法进行比对试验.对110份猪血清进行猪伪狂犬病gB抗体化学发光免疫分析法与ELISA法的检测.结果显示,以ELISA法为标准,化学发光免疫分析法检测猪伪狂犬病gB抗体的灵敏度、特异性、符合率分别为98.31%、100%、99.10%,Kappa=0.96,说明化学发光免疫分析法与ELISA法的符合率较高,且其操作步骤更简便,更省时,可以用于临床猪血清样品的猪伪狂犬病gB抗体的检测.     

规模猪场种猪伪狂犬病血清抗体和病原检测与分析

采集武汉市两个规模猪场的370头份种猪血液和鼻拭子样本,运用ELISA方法对血清样本进行猪伪狂犬病抗体检测,结果两个猪场种猪的伪狂犬病gB抗体平均阳性率分别为77.1%和77.9%,猪伪狂犬病gE抗体平均阳性率分别为2.4%和3.9%;运用PCR方法对种猪鼻拭子样本进行猪伪狂犬病病原检测,结果显示,猪伪狂犬病病毒的阳性率分别为1.2%和5.4%.检测结果对猪场伪狂犬病的控制和净化具有指导意义.     

河南省猪伪狂犬病流行病学调查

为了解河南省猪伪狂犬病的流行情况,2010年8月-2011年7月对河南省豫东、豫西、豫南、豫北和郑州市不同规模猪场的1285头猪采血,用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法进行抗体检测,结果显示,被检的1285头猪中猪伪狂犬病血清抗体阳性率平均为30.97％,其中豫东、豫西、豫南、豫北和郑州市的血清抗体阳性率分别为36.19％、20.62％、29.96％ 、42.41％和25.68％,各地区之间血清抗体阳性率差异极显著(P＜0.01);不同规模养殖场的猪伪狂犬病血清抗体阳性率差异显著(P＜0.05),其中规模化养猪场的阳性率低,小型养殖场的阳性率高.     

辽宁省规模化猪场猪伪狂犬病感染状况的血清学调查

猪伪狂犬病是猪的重要传染病之一,为了了解规模化猪场猪伪狂犬病的感染状况,本研究采用IDEXX公司的阻断ELISA试剂盒对2015年7~11月采自辽宁省3个规模化猪场的1039份血清样品进行了PRV野毒感染的检测与分析。结果表明,猪场1没有感染猪伪狂犬病,猪场2和猪场3猪伪狂犬病的感染较严重,阳性率分别达56%和78%,而且猪场2和猪场3不同猪群的感染情况也有所不同。结果说明,规模化猪场间猪伪狂犬病的感染状况存在着很大的差异。本研究对于了解辽宁省部分地区猪伪狂犬病的流行情况,进而制定正确的防控策略提供了依据。     

猪伪狂犬病血清学诊断与防制

伪狂犬病是由疱疹病毒科的伪狂犬病病毒引起的一种家畜及野生动物的传染病,在世界各地广泛流行。在我国,该病对猪的危害很严重,能引起仔猪的高发病率,成年猪症状微轻,常呈现隐性带毒,成为新的传染源。用血清学方法检测猪血清中伪狂犬病病毒抗体,在猪伪狂犬病的诊断、流行病学调查及疫苗免疫效果的检测上有一定的意义。本试验应用间接ELISA方法检测猪伪狂犬病病毒抗体,调查猪伪狂犬病的流行情况,     

猪伪狂犬病免疫抗体及感染抗体消长规律研究

为了解猪伪狂犬病抗体在猪体内的消长规律,进一步为河南省猪伪狂犬病的预防和净化提供理论依据,本研究挑选了10家伪狂犬病毒gE基因缺失疫苗免疫的规模化猪场,每场随机采集100份血清,采用gB和gE ELISA方法检测猪血清抗体。同时对gE ELISA检测结果为阳性的样品,用病原学FQ-PCR方法进一步检测。结果:gB ELISA检测结果免疫抗体群体平均S/N0.1、免疫合格率90%、样本间变异值15%的猪场,其gE ELISA感染抗体和病原学检测结果为阳性; gB免疫抗体S/N值OU≤0.1,样品间CV值CO≤15%,猪群平均免疫抗体阳性率90%的猪场,其gE ELISA感染抗体和病原学检测结果为阴性。综合工作实际,笔者得出结论:免疫猪场猪群免疫抗体阳性率应长期维持在90%以上,样品间CV值应≤15%;非免疫猪群,gE或gB抗体长期检测结果为阴性,才能达到猪场猪伪狂犬病的预防和净化目的。     

2013~2016年广西猪伪狂犬病流行病学调查分析

[目的]全面了解广西猪伪狂犬病毒(PRV)的流行特点,为相关部门制定科学的猪伪狂犬病防控措施提供决策参考.[方法]于2013年6月~2016年8月从广西12个地市不同规模猪场采集疑似猪伪狂犬病阳性组织样品473份和血清样品5041份,通过PCR和ELISA分别对组织样品和血清样品进行PRV病原和野毒抗体检测.[结果]广西地区规模猪场的组织样品和血清样品PRV阳性率分别为26.43%和24.50%,且组织样品PRV病原阳性率与血清样品野毒抗体阳性率基本一致,以2015年的PRV阳性率最低、2016年的PRV阳性率最高.在广西地区一年四季均能检测到PRV,且组织样品的PRV病原阳性率和血清样品的野毒抗体阳性率均以第三季度(秋季)最低,分别为19.80%和14.95%.除了梧州市和防城港市的检测样品未检出PRV外,其他10个地市的检测样品均能检出PRV,说明广西规模猪场普遍存在PRV感染,且以南宁、玉林、北海和桂林等地市较严重.[结论]广西规模猪场普遍存在PRV感染,尤其是2016年PRV阳性率明显上升.因此,要求养猪业发达的地市应加大对PRV的防控力度,实时监控PRV的流行趋势,避免混合感染,并做好净化工作.     

广西种猪场CSF、PRRS、PCV2与PR监控效果研究

采用PCR和RT—PCR对2004～2008年广西种猪场猪瘟（CSF）、猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪伪狂犬病（PR）进行监控。结果表明,2004～2008年广西种猪场CSF、PRRS、PR、PCV2均有不同程度的发生,其中2004年阳性率最高,2008年阳性率最低（全部为阴性）。从2004～2008年,组织样品的PRRSV阳性率呈逐年下降趋势;CSFV和PRV的阳性率变化趋势相似,即2004年较高、2005年有所下降、2006年有所反弹、2007～2008年呈下降趋势;PCV2阳性率变化趋势则是在2005～2006年出现一个峰值。在公猪精液方面,PRRSV、PRV、PCV2阳性检出率呈逐年下降趋势。不同年份内不同疫病对种猪场的影响程度也存在差异。可见,以PCR和RT—PCR来监控种猪场疫病具有较高的可行性。     

贵阳地区新发生猪传染病的血清学检测

采用血清学方法对贵阳地区部分种猪场、规模饲养场及农村散养户猪群分别进行PPV、PRV、PRRS、PCV及APP抗体水平监测。以乳胶凝集试验检测PPV抗体阳性率为0%（0/160）;以间接ELISA检测PCV和PRRS的抗体阳性率分别为14%（28/200）和0.62%（1/160）;以竞争ELISA检测PRV的gpI抗体阳性率为19.14%（36/188）;以间接血凝试验检测APP的抗体阳性率为19.14%（36/188）。结果表明,PPV和PRRS似乎不是引起贵阳地区猪繁殖障碍的主要原因,而PRV和APP在非免疫猪群中的抗体阳性率较高,应引起该地区养猪业的高度重视。     

贵州省几种猪繁殖障碍性疫病的血清学调查

采用乳胶凝集试验和间接ELISA试验,分别对贵州省部分地区种猪场和规模场猪群进行猪细小病毒、猪伪狂犬病毒、猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒及猪Ⅱ型圆环病毒抗体水平检测。结果:免疫猪群中猪细小病毒感染、猪伪狂犬病及猪繁殖障碍与呼吸综合征抗体阳性率分别为81.6%(124/152)、84.0%(221/263)和62.7%(406/648);非免疫猪群中猪细小病毒感染、猪伪狂犬病、猪繁殖障碍与呼吸综合征及猪Ⅱ型圆环病毒感染抗体阳性率分别为17.6%(79/449)、13.8%(61/442)、5.4%(19/352)和15.9%(83/519)。表明,猪细小病毒感染、猪伪狂犬病免疫效果比较理想,贵州省猪群中可能存在上述4种疫病的感染,应当引起养猪业的高度重视。     

河南省猪伪狂犬病的流行动态及防制研究

对河南省１９ 个猪场发病仔猪的检测发现,许多被检仔猪存在ＰＲＶ 感染,发病猪场占全省猪场的９ ．６ ％ ,其ＰＲＶ 阳性检出率平均为３４ ．５ ％ ,占被检发病仔猪的３５ ．８ ％ ,并呈快速上升趋势。对３ 个ＰＲＶ 污染猪场采取了综合控制措施,取得了较好的效果,为养猪场控制此病提供了可靠的方法。     

Seroprevalence of Hepatitis E Virus in Human and Pigs in Pig Farms from Guangdong Province,Southern China

Hepatitis E is caused by hepatitis E virus (HEV), which has been classified into four genotypes. Genotypes 3 and 4 are regarded as zoonotic pathogens. Accumulating researches indicate that genotype 4 is the main HEV strain circulating in China, and there are high levels of seropositive pigs and human in some provinces of China. In this study, serum samples from pigs and from human occupationally exposed to pigs were obtained from pig farms in Guangdong Province, in subtropical southern China, in order to investigate for the first time the prevalence of anti-HEV immunoglobulin G (IgG) in the region. Antibodies against HEV were detected by Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) using a commercially marketed kit. The results showed that high numbers of pigs (74/94; 78.7%) and human (50/94; 53.2%) from three pig farms in Guangdong Province were positive for anti-HEV IgG. The correlation coefficient relating the prevalence in pigs and human on different farms was 0.920. The seropositive rate in males (human) was 48.8% (20/41) and that in females was 47.7% (9/19), which showed no statistically significant difference. These data indicated that there was a high prevalence of anti-HEV antibodies in pigs and in human with occupational exposure to pigs. The risk of infection with HEV in both human and pigs in Guangdong Province appeared to be age-dependent, to a certain extent. This study provided basic data for further researches on HEV and was a reminder that more attention should be paid to HEV infection both in pigs and workers on pig farms in the study region.     

猪伪狂犬病毒gB基因序列分析

2011年以来我国多省免疫猪伪狂犬病毒gE基因缺失苗猪场出现变异型猪伪狂犬病毒(PRV)感染,经典猪伪狂犬病毒疫苗(Bartha-k61)对该病无法提供100%有效保护,已有研究发现变异型PRV和经典PRV gE基因存在特征性变异。为明确变异型PRVgB基因特征,本研究对GenBank中登录的部分PRV代表株gB基因进行分析比较。结果表明,我国经典型和变异型PRV在gB蛋白氨基酸编码区第395位、453位、562位和739位存在特征性差异,但不同来源PRVgB基因的核苷酸和氨基酸同源性分别在98.1%~100%和96.1%~100%。从相互之间的遗传进化关系可以看出,PRV遗传进化出现两个大的遗传分支,呈现明显的地域性。新发变异型和经典型PRV在中国PRV遗传进化分支上呈现各自独立进化小分支;我国近年分离的貉源和约克夏梗犬源与新发变异型PRV则处于同一进化小分支。     

广西猪伪狂犬病的流行监测及防控工作重点

为调查猪伪狂犬病（PR）目前在广西的流行情况,于2006～2008年对广西13个市122个不同规模猪场进行流行病学调查,并对163份病料及61份血清进行检测。结果显示,163份病料经PCR检测出阳性病料6份,阳性率为3．7％;对6株广西PRV gE胞外基因进行克隆测序比较及遗传进化分析发现,广西PRV毒株变异不大,6株广西PRVgE基因与国内外其他毒株之间核苷酸序列同源性均很高,介于96．4％～100．0％之间,氨基酸同源性为93．6％～100．0％,亲缘关系较为密切,应为同一毒株遗传进化而来;61份血清经gE—ELISA检测出阳性血清7份,阳性率11．5％,表明部分猪场存在PRV隐眭感染。调查结果肯定了广西在PR防控工作中取得的成绩,提出做好免疫、加强监测、淘汰隐性感染猪、提高猪体免疫力、净化种猪群是今后PR防控工作的重点。     

Research and development of a novel subunit vaccine for the currently circulating pseudorabies virus variant in China

Pseudorabies (PR) is a devastating viral disease which leads to fatal encephalitis and respiratory disorders in pigs. Commercial gE-deleted live pseudorabies virus (PRV) vaccine has been widely used to control this disease in China. However, the new-emerging variants of PRV compromises the protection provided by current vaccines and lead to the outbreak of PR in vaccinated pig herds. Several killed and live vaccine candidates based on current PRV variants have been reported to be effective to control the disease. A subunit vaccine based on gB protein, one major PRV glycoprotein which elicits strong humoral and cellular immune responses, however, was never evaluated for protection against the current circulating PRV variants. In this study, full-length PRV gB protein was successfully expressed in baculovirus/insect cells in the soluble format and was tested on 3-week-old piglets as a subunit vaccine. Compared with unvaccinated pigs, the gB-vaccinated pigs developed specific antibody-mediated responses and were protected from the virulent PRV HN1201 challenge. All vaccinated pigs survived without showing any PRV-specific respiratory and neurological signs, but all unvaccinated pigs died within 7 days after HN1201 challenge. Hence, this novel gB-based vaccine could be applied as an effective subunit vaccine to control PRV variant in China.