球孢白僵菌MZ041016菌株对平菇厉眼蕈蚊的毒力

利用球孢白僵菌MZ041016菌株5种孢子悬浮液浓度(3.6×104～3.6×108个/mL)对平菇厉眼蕈蚊成虫和幼虫进行室内毒力测定。在3.6×108个/mL浓度下成虫死亡率最高达86.72%,幼虫死亡率最高达87.69%,成虫的LC50为2.319×105个/mL,幼虫的LC50为3.082×105个/mL。在3.6×104～3.6×108个/mL浓度处理下成虫的LT50依次为8.57、6.14、5.18d和4.28d,幼虫的LT50分别为8.09、6.03、4.96d和4.53d。球孢白僵菌MZ050724菌株在室内对平菇厉眼蕈蚊的成虫和幼虫有较强的毒力。     

虫生真菌对节瓜蓟马种群的控制作用

室内试验表明,在1.5×108个/ml孢子浓度下,白僵菌对节瓜蓟马成虫、蛹和若虫的寄生率分别为70%、50.20%和17.78%,而在相同浓度下绿僵菌的寄生率较低。在2×108个/ml孢子浓度下田间土壤和植株喷施球孢白僵菌,5d后可使蓟马成虫减少49.22%。     

4种虫生真菌对朱红毛斑蛾幼虫的室内毒力测定

以朱红毛斑蛾幼虫为研究对象,研究1株自朱红毛斑蛾幼虫僵虫上分离得到的球孢白僵菌Beauveria bassiana PfBb,与3种常用虫生真菌(金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae Mafz01、卵孢白僵菌B. brongniartii 400和球孢白僵菌B.bassiana DSXJ-07)进行致病力比较,以期筛选出高效的虫生真菌用于朱红毛斑蛾的生物防治。采用浸虫法,测定4种虫生真菌不同浓度下朱红毛斑蛾幼虫的校正死亡率及僵虫率。室内毒力测定结果表明,金龟子绿僵菌Mafz01、卵孢白僵菌400、球孢白僵菌DSXJ-07和球孢白僵菌PfBb对朱红毛斑蛾幼虫的致死中浓度分别为3.1×10~8、1.1×10~8、1.9×10~7和2.8×10~5孢子/mL;1.0×10~9孢子/mL浓度处理下的僵虫率分别为52.5%±6.45%、52.5%±6.45%、73.75%±6.29%和97.50±2.89%,且球孢白僵菌PfBb处理后的朱红毛斑蛾幼虫僵虫率显著高于其他3种虫生真菌。4种虫生真菌对朱红毛斑蛾幼虫毒力大小依次为球孢白僵菌PfBb球孢白僵菌DSXJ-07卵孢白僵菌400金龟子绿僵菌Mafz01。推荐使用浓度大于1.0×10~7孢子/mL的球孢白僵菌PfBb防治朱红毛斑蛾幼虫。     

防治假眼小绿叶蝉的虫生真菌高毒菌株的筛选及田间防治效果

茶小绿叶蝉Empoasca spp.是我国最重要的茶树害虫,几乎对所有化学农药都产生了很高的抗药性,亟需开发经济有效的生物农药。本研究通过对从茶小绿叶蝉上分离的1株爪哇棒束孢Isaria javanicus和4株自其它叶蝉上分离的球孢白僵菌Beauveria bassiana的胞外蛋白酶活性测定,初选出活性较高的爪哇棒束孢和两株球孢白僵菌;对假眼小绿叶蝉低龄若虫的生物测定结果显示,爪哇棒束孢毒力最强,分别比两株球孢白僵菌高2.33～7.26倍和6.08～27.26倍,在1×108孢子mL 1浓度条件下第13 d的致死率达100%,LT50为5.9 d。通过随机区组设计进行的田间防治试验结果表明,使用爪哇棒束孢菌株配制的IJOD-1悬乳剂以7.5×1013孢子hm 2的剂量常量喷施,对假眼小绿叶蝉虫口的防治效果在第11 d时为50.32%;第25 d时追加1次放菌,在第55 d时的防治效果达68.40%。     

环境因子对球孢白僵菌侵染桔小实蝇致病力的影响

本文测定了温湿度、紫外线及常见杀虫剂等环境因子对球孢白僵菌B6菌株侵染桔小实蝇致病力的影响。结果表明,在19℃~31℃的温度范围内,B6菌株对桔小实蝇成虫、蛹与老熟幼虫均有致病力。在19℃~25℃条件下,桔小实蝇上述三种虫态的死亡率均随着温度的升高而增加,但在28℃和31℃温度条件下,桔小实蝇的死亡率则随着温度升高而降低。在1.8×108孢子/ml浓度条件下,成虫在25℃温度条件下的致死中时LT50为6.6d,在31℃的LT50为30.2d。在不同温度条件下,B6菌株对桔小实蝇成虫的致死中时差异较大。湿度越大,球孢白僵菌致病力越强,桔小实蝇的死亡速率越快。球孢白僵菌孢子萌发率随着紫外线照射时间增加而逐步降低。测定了7种常见的杀虫剂对球孢白僵菌菌落的生长影响,其中25%高效氯氟氰菊酯、2.0%阿维菌素、40%辛硫磷和10%除尽对菌落生长有促进作用。     

蒙古拟地甲成虫高致病力球孢白僵菌的筛选

【目的】筛选对蒙古拟地甲（Gonocephalum mongolicum）成虫具高毒力的球孢白僵菌（Beauveria bassiana）菌株,为此害虫的生物防治提供真菌资源。【方法】将5株供试球孢白僵菌配制为1.0×108孢子/mL的悬浮液,采用浸虫法测定对蒙古拟地甲成虫的致死率以及致死中时（LT50）。筛选出高毒力菌株后,测定该菌株对试虫的致死中浓度（LC50）。同时利用体视镜观察试虫被该菌株侵染后的症状。【结果】在5株供试菌株中,Bb06对蒙古拟地甲成虫致病力最高。该菌株处理20 d后引起的试虫校正死亡率为82.97%,显著高于其他菌株;其LT50为11.09 d,显著短于其他菌株。计算结果表明Bb06处理20 d后对试虫的LC50为0.40×106孢子/mL。蒙古拟地甲成虫被Bb06侵染后活动逐渐变得迟缓且进食量减少,试虫头部以及腹部陆续长出白色菌丝,直至将整个虫体覆盖,并产生大量分生孢子。【结论】Bb06菌株对蒙古拟地甲成虫致病力较高,具有进一步开发利用的价值。     

绿僵菌对“Q型”烟粉虱2龄若虫的致病性及与毒力关联的培养性状研究

烟粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)是我国农业上重要害虫,已对当今市场上多种杀虫剂产生严重抗性。本文研究了8株来自不同寄主的绿僵菌Metarhizium spp.菌株对Q隐种烟粉虱2龄若虫的致病性和与毒力关联的培养性状。结果表明,菌株Mf96对"Q型"烟粉虱2龄若虫具有很强的毒力,以1.0×108孢子/m L的孢子液接种到2龄若虫体表上,累积校正死亡率达89.5%,LT50为3.65 d,致死率明显高于其它菌株。以1.0×108、1.0×107、1.0×106和1.0×105孢子/m L悬浮液处理时,烟粉虱2龄若虫累计死亡率随浓度和接种后时间增加而增加,LC50为1.20×107孢子/m L。供试的8株绿僵菌菌株的胞外蛋白酶也被测定,菌株Mf96的胞外蛋白酶活性最高,达3.64 U/m L。菌株Mf96在SDAY培养基上,具有生长速度快、萌发率高和产孢量大等优点。菌株Mf96在烟粉虱的生物防治中具有较大的应用潜力。     

3种微生物杀虫剂对红火蚁的毒力测定

采用药膜法和毒饵法测定了微生物杀虫剂白僵菌、绿僵菌和苏云金芽孢杆菌对红火蚁的毒力.结果表明,受药36 h后,3种微生物杀虫剂浓度分别为5×107、1×108、2×108孢子(芽孢)/mL时,对红火蚁有较强的毒力,并随药剂浓度的提高而增强.3种微生物杀虫剂对红火蚁的毒力水平由高到低依次是白僵菌＞苏云金芽孢杆菌＞绿僵菌,LC50分别是2.919 8×105、4.706 8×106、1.401 8×107孢子(芽孢)/mL.     

三株球孢白僵菌对草地贪夜蛾的毒力比较

为筛选有效防治草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda的微生物制剂,采用室内生物测定法测定从北京市、浙江省和海南省土壤样品中分离获得的3株球孢白僵菌Beauveria bassiana菌株bbbj、bbzj和bbhn对草地贪夜蛾3龄幼虫的毒力,并比较这3株菌株的产孢情况和合成白僵菌素的能力。结果显示,分离自北京市的菌株bbbj对草地贪夜蛾3龄幼虫的毒力最强,LC50为3.37×105个孢子/mL;其次为浙江省的菌株bbzj,毒力略逊于菌株bbbj;海南省的菌株bbhn毒力最弱,其在试验最高浓度108个孢子/mL处理7 d后对草地贪夜蛾3龄幼虫的致死率低于50%。菌株bbbj的产孢量远高于另外2株菌株,并且其菌丝结构上着生大量芽生孢子簇,而且菌株bbbj菌体中的白僵菌素含量最高,培养5 d后,分别为菌株bbzj和bbhn的40.08倍和65.85倍。虽然补充白僵菌素可以提高菌株bbhn的毒力,但是草地贪夜蛾幼虫对白僵菌素敏感度不高。表明球孢白僵菌菌株bbbj对草地贪夜蛾幼虫有较高的毒杀活性,具有作为草地贪夜蛾生防菌株的潜力。     

球孢白僵菌与三种农药对萝卜蚜的协同防治效果

前期选育得到了侵染蚜虫的球孢白僵菌高毒力菌株,但蚜虫发育繁殖快而白僵菌侵染致病慢的问题制约了该菌株的应用。为此,进行了白僵菌及吡虫啉、乐果、高效氯氰菊酯不同浓度单独处理,以及菌药混合处理对萝卜蚜的生物测定比较,结果表明,白僵菌浓度在0.08×106~50×10~6孢子/m L,可导致萝卜蚜47.0%~89.3%的死亡率。以2×10~6孢子/m L中等浓度白僵菌分别与1/10推荐浓度的吡虫啉、1/5推荐浓度的乐果和高效氯氰菊酯进行混用处理,可使萝卜蚜死亡率显著提高到97.3%~100%,LT50由76.8 h缩短到46.9~56.5 h。通过孢子萌发率检测表明球孢白僵菌与3种农药有较好的相容性。本试验证明白僵菌与3种农药具有良好协同增效作用,并确定了菌药混用的适宜浓度,为田间治蚜工作中制定减施化学农药、提高白僵菌防效策略提供科学依据。     

白僵菌对西花蓟马若虫的致病力和对巴氏钝绥螨的影响

本文测定了5株球孢白僵菌Beauveriabassiana对西花蓟马Frankliniellaoccidentalis1龄若虫的致病力,获得3株毒力较高的菌株：TL．7、sz．15和RSB,在1×10^8孢子．mL^-1浓度下的西花蓟马l龄若虫死亡率分别为90．8％、92．5％和100％;结合测定的致死时间与致死浓度,得出菌株RSB为最优菌株（LT50为2．383d,LC50为1．53X10’孢子．mL^-1）。以西花蓟马1龄若虫为猎物,测定菌株RSB对其天敌巴氏钝绥螨Amblyseiusbarkeri的影响。结果表明：用菌株RSB（1×10’孢子．mL^-1）处理的巴氏钝绥螨可发育为成螨;发育历期、雌成螨寿命和平均每雌每天产卵量分别为5．9d、33．850d和1．78粒,与对照均差异不显著,说明西花蓟马的高效白僵菌菌株RSB对其天敌巴氏钝绥螨不存在显著的负面影响。本文结果表明白僵菌可在田间与巴氏钝绥螨协同控制重大外来入侵害虫西花蓟马。     

球孢白僵菌对西花蓟马成虫的毒力及体表侵染的扫描电镜观察

本文在室内测定球孢白僵菌Beauveria bassiana CYT4菌株对西花蓟马Frankliniella occidentalis成虫的致死作用,并电镜观察分生孢子在西花蓟马成虫体表的侵染过程。结果表明：白僵菌的致死率随孢子浓度的增加而增加,1×109、1×108、1×107和1×106孢子.mL-1的孢悬液接种试虫第6d的致死率分别为83.57%、66.08%、49.78%和20.22%;0.04μL.mL-1和0.06μL.mL-1的多杀菌素与1×108孢子.mL-1白僵菌孢悬液混合后对试虫接种第5d的致死率分别为89.42%和95.76%,而单独施用菌液为58.19%,单独施用多杀菌素仅为45.55%和61.33%,表明二者混合能提高对西花蓟马成虫的致死率。扫描电镜观察发现,经白僵菌孢悬液处理的西花蓟马成虫虫体,在触角基节、复眼、足部褶皱区、刚毛窝、翅、产卵器和各体节连接处均有大量孢子附着和萌发,但腹部孢子量很少,尤其在节间膜处几乎无孢子;孢子在1h时即附着在体表,12h时已萌发,36h时有穿透体壁现象,48h后整个虫体被菌丝包被。     

几丁质酶基因在球孢白僵菌中的超表达提高其对马尾松毛虫的毒力

几丁质酶在虫生真菌穿透寄主体壁的过程中起一定作用,但其与真菌毒力的关系尚不清楚。本研究通过几丁质酶基因在球孢白僵菌Beauveria bassiana中的超表达以及超表达菌株的毒力变化研究了该基因与毒力的关系。将几丁质酶基因Bbchit1通过芽生孢子转入野生型球孢白僵菌中,获得多拷贝的转化子;转化菌株在胶体几丁质诱导培养基中酶活最大值高于出发株4.2倍,表明该几丁质酶基因在转化菌株中得到超表达。毒力测定发现转化子对马尾松毛虫Dendrolimus punctatus的致死中浓度比出发株降低84.5%,在2.5×107孢子/ml浓度下的致死中量减少84.5%,致死中时缩短0.7d,因此毒力大大提高。第2~9d感病死虫数与转化子第1~8d酶活呈极显著正相关（P〈0.01）,而与出发株不相关（P〉0.05）。这些证据表明,几丁质酶与毒力的关系是复杂的,在分泌达到一定阈值后与毒力才有明显的相关关系。     

球孢白僵菌可湿性粉剂对马铃薯甲虫的防治效果

从受感染的马铃薯甲虫Leptinotarsa decemlineata（Say）分离出菌株1513,经鉴定为球孢白僵菌Beauveriabassiana（菌种保藏号为ACCC32222）。为了评价其对马铃薯甲虫的防治潜力,本研究测定了不同浓度白僵菌对不同龄期马铃薯甲虫幼虫的毒力作用。结果表明,在室温条件下（22～28℃）,处理9 d时1～2龄幼虫的僵虫率与孢子浓度成正比,其LC50为3.09×107孢子mL 1;处理8 d时,对3～4龄幼虫的LC50为9.92×107孢子mL 1;而孢子浓度为1×107孢子mL 1时,虫卵未受到明显的抑制。田间施菌2250 g hm 2时,在新疆新源县的防治效果较好,18 d时98.87%的虫体落地,地表僵虫率为53.91%;而在新疆尼勒克县,仅在土壤中发现僵虫,僵虫率为19.61%。     

七种化学杀虫剂与球孢白僵菌TST05菌株的相容性研究

本文测定了7种常用化学杀虫剂高效氯氰菊酯、高氯甲维盐、辛硫磷、高效氯氟氰菊酯、阿维菌素、阿维杀虫单、虫酰肼对球孢白僵菌TST05菌株菌丝生长及孢子萌发、生长及产孢的影响,以研究化学药剂与球孢白僵菌TST05菌株的相容性,为化学杀虫剂和白僵菌制剂混合应用提供依据.结果表明,在田间常用浓度下,7种杀虫剂对该菌株的菌丝生长抑制率为27.93％～38.74％.虫酰肼组的孢子萌发率为33.19％,几乎不形成菌落,产孢量仅为0.05×106个/mL;而其余6种杀虫剂组的孢子萌发率为50.34％～70.62％,能形成较致密的菌落,产孢量为(2.51～3.58)×106个/mL.杀虫剂对该菌株的抑制作用随着浓度的降低而减小,田间浓度再稀释5倍后,各处理组孢子萌发率升高到72.08％～84.92％;产孢量为(3.01～9.61)×106个/mL.在田间浓度下,虫酰肼与该菌株不相容;其余6种杀虫剂的相客性较好.并且相客性随着杀虫剂浓度的降低而提高.     

一株侵染柑橘木虱的球孢白僵菌的分离及鉴定

从柑橘木虱虫体分离得到一株具有强致病性的虫生真菌GZMS-28,本文测定了该菌株对柑橘木虱的致病性,并分析了其rDNA ITS基因序列。试验结果表明,该菌株对柑橘木虱具有较强的致病性,浓度为1.0×108个/mL的分生孢子悬浮液处理柑橘木虱成虫7d后,其校正死亡率达到95.7%。菌株GZMS-28的培养特征与白僵菌属球孢白僵菌较为一致,其rDNA ITS序列与GenBank中白僵菌属多个球孢白僵菌菌株的对应序列相似性达到99%以上,因此将菌株GZMS-28鉴定为球孢白僵菌Beauveria bassiana。     

白僵菌孢子不同浓度对萧氏松茎象成虫的毒力差异

应用白僵菌在1×10^5个孢子／ml、1×10^6个孢子／ml、1×10^7个孢子／ml、1×10^8个孢子／ml和1×10^9个孢子／ml 5个不同浓度对萧氏松茎象成虫进行毒力测定。其中以10^9个孢子／ml毒力最强,接种20d后,平均校正死亡率达100％,白僵率达95％,对萧氏松茎象成虫的致死和白僵速度最快,其LT50分别为8．39d和9．52d,10^8个孢子／ml次之,分别为9．30d和11．20d。各浓度对萧氏松茎象成虫的致死率和白僵率均随时间的增加而增加。在同一时间,致死率和白僵率均随孢子浓度的增加而增加。虽然10^9个孢子／ml和10^8个孢子／ml毒力强,但所需孢子量大,不适合应用于生产实践;10^7个孢子／ml毒力也很强,所需孢子量适中,因此较适合在生产实践推广应用。     

球孢白僵菌对桃蚜的毒力测定

球孢白僵菌（Ｂｅａｕｗｅｒｉａｂａｓｓｉａｎａ）的６个菌株（ｂｂｓｇ８７０２、ｂｂｓｇ８７０１、ｂｂ－ｓｇ８８０１、ｂｂｄｎｕ８８０３、ｂｂｄｎ８８０４和ｂｂｄｎ８８０６）对桃蚜（Ｍｙｚｕｓｐｅｒｓｉｃａｅ）的生物测定证明,所测朱对桃蚜具有毒力。运用时间－剂量－死亡率模分析死亡率随时间和剂量的变化趋势,菌株ｂｂｓｇ８７０２对桃蚜的毒力最强,其次是ｂｂｓｇ８８０１、ｂｂｄｎ８８０６、ｂｂｄｎ８８０４     

一株侵染草地贪夜蛾成虫的球孢白僵菌的分离鉴定

草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda(J. E. Smith)是一种全球性重大玉米害虫,于2019年入侵我国云南。2020年8月,从云南省大理弥渡西庄村玉米田采集被虫生真菌感染的草地贪夜蛾雌成虫,经在室内分离培养,结合病原菌分生孢子与菌丝等形态及ITS序列相似性分析,确定感染草地贪夜蛾成虫的真菌为球孢白僵菌Beauveria bassiana,菌株编号为SHL-2020。经生物测定,该菌对草地贪夜蛾雌、雄成虫均具有较强的侵染致病作用。用该菌1×10~8个/mL分生孢子菌悬液接种处理后第7天时,草地贪夜蛾雌、雄成虫累计死亡率分别为90.0%和86.7%。以上结果表明,从罹病草地贪夜蛾雌成虫上分离获得的球孢白僵菌SHL-2020菌株对草地贪夜蛾雌雄成虫具有良好的生防潜力,该研究为草地贪夜蛾生物防治提供了理论依据和物质基础。