“83增抗剂”防治烟草花叶病毒病的研究初报

近年烟叶生产因烟草花叶病越来越严重,引起烟叶减产、绝收,国内外有关专家、学者也对该病毒进行防治研究,但迄今没有筛选出较理想的制剂。北京农大病毒研究室研制的NS-83耐病毒诱导剂(83增抗剂),在防治番茄病毒病方面首试成功。平顶山烟草专卖局在中国烟草总公司、北京农业大学的主持下,自1987年以来,开展了“83增抗剂”防治烟草花叶病的应用研究,已取得显著效果。 材料与方法     

大豆花叶病毒病及其防治策略

大豆花叶病毒病及其防治策略智海剑（南京农业大学大豆所２１００９５）大豆花叶病毒病是由大豆花叶病毒（Ｓｏｙｂｅａｎｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ简称ＳＭＶ）引起的一种病害，在我国大豆产区普遍发生，严重影响大豆产量和品质。一、大豆花叶病毒及其危害大豆花叶病毒属于...     

两种不同类型农药防治烟草花叶病毒病药效的比较研究

用生物农药0.5%香菇多糖水剂(抗毒丰)和化学农药20%吗胍.乙酸铜可湿性粉剂(小叶灵)两种药剂对烟草花叶病进行控制,小区试验表明:0.5%香菇多糖水剂(抗毒丰)的防治效果在80%以上且有较好的持效作用;20%吗胍.乙酸铜可湿性粉剂(小叶灵)的防治效果在70%左右,并且两种药剂对烟草均表现出不同程度的促进生长作用。     

宁南霉素防治烟草花叶病毒病应用技术研究及示范推广

针对制约大理州烟草产量和品质提高的主要因素——烟草花叶病毒病,１９９３～１９９６年筛选菌毒清、８３增抗剂、病毒Ａ、植病灵等多种抗病毒剂及宁南霉素等药剂。试验结果表明,２％宁南霉素７５ｍｇ／ｋｇ对烟草花叶病毒病大田防效在７０％以上,优于其他抗病毒剂,且对烟草具有明显的刺激生长作用,明显提高烟叶质量和产量。１９９５～１９９８年累计应用宁南毒素４０多ｔ,面积约１．７３万ｈｍ２,取得较好经济、社会和生态效益。     

枯草芽孢杆菌Tpb55抗烟草普通花叶病毒活性研究

利用三生-NN烟测定Tpb55菌悬液对烟草普通花叶病毒(TMV)钝化、预防和治疗作用结果表明,Tpb55菌悬液对TMV具有较好的钝化、预防和治疗效果,枯斑抑制率分别为96.15%、79.72%和65.71%。为进一步揭示Tpb55抗毒机理,选用易感TMV烟草品种K326为实验材料,研究以Tpb55对烟草花叶病毒(TMV)进行预防和治疗处理,测定烟草中与抗病毒性相关的部分生理生化指标的变化。结果表明,先用Tpb55菌液再接种毒液处理的烟株,对TMV的抑制作用优于先接种毒液再接种菌悬液处理,说明Tpb55对TMV的预防具有积极效果;不论在烟株接种毒液前或后,用Tpb55菌液处理烟株的叶片与只接种毒液的相比,叶片内过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性均显著提高,以接毒前Tpb55菌液处理的烟株活性水平最高。从本试验结果来看,Tpb55具较强的抗TMV活性,可通过直接接触钝化作用及诱导烟草抗病性提高来抑制TMV侵染。     

烟草病毒病的发生及其防治研究新进展

烟草病毒病是烟草生产上的一类重要病害.近年来,在我国的发生且有上升的趋势,病害严重的烟草产区,病株率往往高达80—100%,对烟草的产量和质量造成很大的影响.     

烟草主要病毒病识别与防治

烟草病毒病在我国各烟区普遍发生,局部地区为害较为严重,这在一定程度上直接影响了烟叶的产量和品质.在我国烟区,危害严重的主要是普通花叶病毒病、黄瓜花叶病毒病、马铃薯Y病毒病和蚀纹病毒病.识别这4类病毒病,配以合理的防治措施,对于烟叶生产有较大的意义.     

黄河三角洲西瓜花叶病毒病的综合防治措施

黄河三角洲地区属于黄河下游冲积平原 ,土壤为砂壤土 ,水浇条件好 ,适宜西瓜规模化生产。年种植西瓜 3 3万ｈｍ2 左右 ,露地西瓜栽培面积占 80 %左右。近年来 ,西瓜花叶病毒病 (ｗａｔｅｒｍｅｌｏｎｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ ,ＷＭＶ)发生严重 ,发病面积近 2万ｈｍ2 ,西瓜减产 2 0 % ,严重影响西瓜优质、高产。1　病害症状病株呈系统花叶症状 ,顶部叶片呈浓淡相间的花叶 ,病叶窄小或皱缩畸形。感病较轻植株尚能结瓜 ,但瓜个头很小 ,数量也少。感病重的植株萎缩、节间变短、新生茎变细且节间短 ,纤细纽曲、叶小、皱缩严重 ,蔓叶全部失绿变黄 ,…     

几种药剂防治烟草病毒病药效试验

7种药剂对烟草病毒病的室内生物测定和田间药效试验结果表明:3.95％病毒必克可湿性粉剂500倍液对烟草病毒病的防效最好,室内接种前和接种后对烟草花叶病毒的防效分别为77.93％和72.56％,田间防效达71.53％。20％病毒A 500倍液、5％菌毒清500倍液和1.5％植病灵600倍液的田间防效均在60％以上,对烟草病毒病有相对较好的防治效果。     

瑞香素对烟草青枯病的防治效果及其作用机理

为探究植物次生代谢产物瑞香素对烟草Nicotiana tabacum青枯病的防治效果及其诱导抗性作用,通过室内和田间试验评价瑞香素对烟草青枯病的防治效果,利用高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）和实时荧光定量PCR（real-time quantitative PCR,RT-qPCR）技术分析其对烟草体内酶活性、木质素含量、激素水平和抗性相关基因表达量的影响。结果表明,叶面喷施瑞香素对烟草青枯病有较好的防治效果,其中2.85 mg/L处理的防治效果最佳,其次是5.70 mg/L和11.40 mg/L处理,接种后14 d的相对防效依次为66.93%、42.52%和48.03%。瑞香素处理可显著提高烟草体内过氧化物酶、苯丙氨酸解氨酶和多酚氧化酶的活性,处理后12 h分别较对照显著提高了3.56倍、1.68倍和1.82倍;瑞香素处理后4 d和7 d烟草根部木质素含量分别较对照显著提高了1.33倍和1.54倍;瑞香素处理后6 h烟草体内茉莉酸和脱落酸含量分别较对照显著提高了35.98%和34.55%,而水杨酸含量较对照显著降低了25.56%。同时,叶面喷施2.85 mg/L瑞香素后显著抑制了茉莉酸途径拮抗基因JAZ3的表达,处理后6 h的表达量较对照下调了9.19倍,同时显著促进病程相关基因PR1的表达。提前喷施2.85 mg/L瑞香素能有效控制田间烟草青枯病发生,相对防效达到52.22%~75.54%,显著高于对照药剂苯并噻二唑的相对防效33.50%~53.00%。表明瑞香素能提升烟草体内酶活性和根部木质素含量,促进抗性基因表达,对田间烟草青枯病有稳定的防治效果,具有开发为防治烟草青枯病的植物激活剂的潜力。     

氨基寡糖素在烟草上的应用

用氨基寡糖素（OS-施特灵）对烟草病毒病进行防治试验,结果表明,氨基寡糖素能有效促进烟株生长发育,对烟草病毒病有明显的防治作用。特别对黄瓜花叶病毒防效更佳,室内接种试验防效达到34.92%;生化指标测定表明,喷施氨基寡糖素并接种病毒,能有效促进烟株体内脯氨酸的积累,降低烟株体内丙二醛的含量,调节烟株自身对外部胁迫的抗逆性,示范结果表明,氨基寡糖素对烟草病毒病有较理想的防治效果。其最终防效达64.9%,比植病灵提高了17.2个百分点。     

表面活性素促进枯草芽胞杆菌XF-1在大白菜叶际定殖能力研究

枯草芽胞杆菌XF-1是一株大白菜内生生防菌,通过叶面喷施的方式可有效防控大白菜根肿病,但其叶际定殖的分子机制尚不明确。为了明确表面活性素对XF-1在大白菜叶际定殖的影响,进一步提高其在田间应用效果,本研究通过测定生长曲线、泳动运动、群集运动和24孔细胞培养板静置培养试验,分析表面活性素对XF-1菌株生长速率、运动能力和生物膜形成水平的影响;利用叶片-微生物互作分析和定殖试验,测定XF-1及突变体XF-1-ΔsrfA在大白菜叶表黏附和植株内的定殖能力。结果表明,XF-1-ΔsrfA与XF-1相比生长曲线没有明显差异,泳动能力和群集运动能力分别显著下降了36.8%和43.9%,静置培养24 h后生物膜形成能力显著下降53.9%,48 h后无显著差异。叶片-微生物互作试验中,突变体标记菌XF-1-ΔsrfA-gfp黏附效率较XF-1-gfp约下降80%。喷施接种3~7 d后, XF-1-ΔsrfA-gfp相较于XF-1-gfp在大白菜叶片内和根系中的定殖数量均显著下降。试验结果表明表面活性素对枯草芽胞杆菌XF-1在大白菜叶际定殖具有较为明显的促进作用,srfA基因的缺失显著抑制XF-1的叶际定殖能力。     

枯草芽孢杆菌B006产surfactin突变株特性及其对黄瓜枯萎病的抑制能力

为了明确surfactin产量不同的芽孢杆菌对黄瓜枯萎病的控制作用,本研究采用N＋注入诱变共获得1250株芽孢杆菌B006的突变株,通过对黄单孢杆菌的抑菌试验筛选并获得3株产surfactin突变株B841、B73和B1020。对各突变株NB发酵液的HPLC—ESI—MS分析表明：突变株B841和B73的surfactin含量比野生菌株B006分别升高了15．9％和14．8％,而突变株B1020的surfactin含量比野生菌株降低了85．2％;各突变株fengycin产量未发生改变。对surfactin各组分的质谱图解析,发现突变株B841和B1020的surfactin组分发生变化,突变株B841的surfactin组分中无m／z为995的同系物,而突变株B1020的MS图谱中只发现了m／z为1037和1051的surfactin同系物;对突变株的生物学特性测定表明：突变株B73和B1020的菌落形态发生改变,生长周期缩短;3个突变株比野生菌株产芽孢能力下降,突变株B1020在含有玉米粉和豆饼粉的培养基上不产生芽孢。对各菌株添加到育苗基质中（浓度为10^6cfu·g-1）后,防治黄瓜枯萎病的效果测定表明：2周时,突变株B1020防效接近于野生菌株B006,达70％以上;但3周时,防效下降到36．2％;突变株B841防效始终低于野生菌株B006,只有29．1％。本研究发现芽孢杆菌B006及其突变株在NA培养液中的surfactin产量的高低与其在育苗基质中的防病效果无直接的相关性,对其在自然土中的防病效果值得进一步研究。     

Mosquito adulticidal activity of a biosurfactant produced by Bacillus subtilis subsp. subtilis

BACKGROUND: A biosurfactant, surfactin, produced by a strain of Bacillus subtilis subsp. subtilis (VCRC B471), was effective in killing mosquito larval and pupal stages. As it was lethal to the non‐feeding pupal stage, it was presumed that it could kill the adult mosquitoes also. In this study, the adulticidal effect of the biosurfactant was assessed in the laboratory against a malaria vector, Anopheles stephensi. RESULTS: The biosurfactant surfactin, separated from the culture supernatant of the production strain, showed mosquito adulticidal activity when tested as ultralow‐volume (ULV) spray in a Peet‐Grady chamber. Knockdown activity and mortality were found to increase with increasing surfactin dosage. Knockdown dosage (KD) and lethal dosage (LD) were calculated by statistical analysis. The KD₅₀ and KD₉₀ dosages were 10.73 and 26.39 mg m^?3 respectively. The LD₅₀ and LD₉₀ dosages were 16.13 and 39.21 mg m^?3. The average droplet size of B. subtilis surfactin was 17.5 ± 1.07 µm. CONCLUSION: The present study indicates that the biosurfactant surfactin, produced by B. subtilis subsp. subtilis (VCRC B471), is a potential bioadulticide for ULV spray against malaria‐transmitting Anopheles stephensi mosquitoes. This is the first report of a mosquito adulticide from a microbial source. Copyright © 2012 Society of Chemical Industry     

枯草芽孢杆菌菌株BAB-1表面活性素的分离纯化及性质分析

 枯草芽孢杆菌菌株BAB-1对番茄灰霉病菌有较强的抑制作用,为了明确其抑菌活性相关成分,通过盐酸沉淀、甲醇抽提法,从该菌株发酵上清液中分离得到了一种脂肽类化合物。经HPLC分析纯化后,发现其保留时间与表面活性素标准品基本一致。TLC层析结果表明该菌株能够产生与表面活性素标准品Rf值一致的成分。进一步通过电喷雾质谱分析,得到其[M+H]+值分别为m/z 1 009.3、1 023.4、1 037.4的成分,与已知的表面活性素3种同系物的[M+H]+值一致。最后采用PCR扩增特异性片段sfp的方法证实该菌株有产生表面活性素的同源基因。综合分析表明,枯草芽孢杆菌菌株BAB-1能够产生表面活性素,且提纯后的表面活性素具有明显的溶血和排油活性,并通过显微观察确定了其十字晶体状结构。     

枯草芽孢杆菌B47菌株抗菌物质的分离纯化及其对玉米小斑病的防治作用

枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis菌株B47为番茄内生细菌,能产生对多种植物病原菌有抑制作用的抗菌物质。通过盐酸沉淀、甲醇抽提、硅胶柱层析、凝胶过滤层析和反相高效液相色谱（RP-HPLC）法提取和纯化到该抗菌物质。理化性质测定结果表明,该物质热稳定性和抗紫外线稳定性好;在碱条件下稳定;对蛋白酶不敏感;能溶于甲醇;双缩脲反应呈阳性,茚三酮反应呈阴性,但经酸水解后茚三酮反应呈阳性,推测该物质可能为环肽类物质。该物质对测试的14种病原真菌有拮抗作用,其中,对玉米大小斑病菌和各种香蕉叶斑病菌的拮抗作用强,但对供试病原细菌无拮抗作用。该抗菌物质在0.3g.L-1浓度下对玉米小斑病的田间防治效果为53.05%。     

枯草芽孢杆菌Tpb55挥发物对烟草的防病促生效应

枯草芽孢杆菌Tpb55菌株挥发性代谢产物对烟草赤星病菌菌丝生长、孢子产生具有抑制作用,并延缓黑色素的产生.在相对封闭的试验条件下,Tpb55菌株挥发性物,对烟草赤星病的防治效果达100%.促生效应测定结果表明,Tpb55挥发物对烟草生长无明显毒害作用,且株高、叶长、叶宽和鲜重较显著增加.     

枯草芽孢杆菌G3菌株的抗菌物质及其特性

 产几丁质酶枯草芽孢杆菌G3菌株的固体培养物在黄瓜灰霉病菌和番茄叶霉病菌抑菌试验中证实,抑菌活性物质存在于过滤上清液中,它们是从酸沉淀物中提取出的伊枯草菌素、生物表面活性素和存在于盐析粗蛋白中的几丁质酶。在叶霉孢子萌发试验中,伊枯草菌素微弱地抑制孢子萌发但强烈破坏芽管和新生菌丝;生物表面活性素和几丁质酶则强烈抑制孢子萌发并长久性地抑制芽管伸长。在PDA平板上的灰霉菌丝抑菌试验中,伊枯草菌素抑制菌丝生长,引发菌丝顶端膨大,形成泡囊,泡囊破裂后原生质外泄;几丁质酶抑制菌丝生长,引发产生不规则的菌丝团;生物表面活性素在平皿上对菌丝则不显示出抑菌活性。     

枯草芽孢杆菌CAB-1抑菌蛋白对黄瓜白粉病的防治作用

采用子叶喷雾法分别测定了枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CAB-1所产抑菌蛋白粗提物对黄瓜白粉病的保护和治疗生物活性。结果表明该抑菌蛋白粗提物能显著降低黄瓜白粉病的病情指数,其保护和治疗作用的效果分别为73.33%和76.85%;EC50分别为175μg.mL-1和125μg.mL-1。利用曲利苯兰染色法检测抑菌蛋白粗提物对黄瓜白粉菌Sphacrotheca fuliginea生长的影响,结果表明该抑菌蛋白粗提物能有效降低白粉菌分生孢子的萌发率及萌发的芽管个数,造成菌丝顶端畸形膨大呈球状并减少新生分生孢子的个数。接菌3 d后,对照的孢子萌发率为36.98%,而经抑菌蛋白粗提物处理后的孢子萌发率仅为4.8%;接菌7 d后对照每个分生孢子梗上串生孢子个数最多为7个,多数5～6个;而抑菌蛋白粗提物处理后每个分生孢子梗上串生孢子个数最多为2个,大部分为1个。     

枯草芽孢杆菌挥发产物的杀线虫活性评价及成分鉴定

寄牛线虫Ditylenchus destructor是许多作物和蔬菜的重要病原物.本研究进行的密封皿内测定结果表明,由枯草芽孢杆菌BL02和G8产生的挥发物能够强烈地抑制D.destructor(24 h杀虫活件均达100%).经挥发物处理后,大部分线虫在1～12 h内活动逐渐减弱,24 h后完全停止活动.经固相微萃取并经气相色谱-质谱联脂技术进一步鉴定,挥发物包括烷烃、醇、酯、酮、酸、胺、肟、酚及杂环类.本研究为微生物活性挥发物的开发和利用提供了有价值的参考并预示了细菌挥发物在未来植物线虫病害生物防治方而的应用潜力.