利用gus基因瞬时表达探讨菊花叶盘基因枪转化参数

为了将基因枪转化方法应用于菊花的遗传改良和品种选育,以gus基因为报告基因,利用基因枪方法将其转入菊花外植体内,通过检测gus基因在菊花叶盘中的瞬时表达情况,分析了轰击距离、氦气压力、金粉用量、质粒DNA浓度、轰击后培养时间、轰击次数等参数对gus瞬时表达的影响。结果表明,以幼嫩叶片为受体材料,在射程为6 cm、氦气压力为7.584×106Pa,每枪金粉用量为400μg,质粒DNA用量为3μg,轰击2次的条件下,2 d后可检测gus基因的最佳表达活性和最高瞬时表达率。     

荔枝基因枪转化研究初报

荔枝是我国南方重要的亚热带木本果树之一 .近 2 0 a来 ,国内外不少学者致力于将生物技术手段应用于荔枝品种改良研究[1 ,2 ] ,以期为荔枝育种开辟新途径 .2 0 0 0年以来 ,在已建立的荔枝体胚再生系统 [1 - 3] 的基础上 ,笔者采用基因枪法进行 gus基因 (β- gluccuronidaes gene)转化荔枝胚性愈伤组织的研究 ,初步探讨了荔枝基因枪转化的主要影响因素 ,为进一步建立荔枝遗传转化体系提供重要依据 .试验选取旺盛生长的荔枝 (“下番枝”、“元红”等品种 )胚性愈伤组织 ,将它平铺于 9cm培养皿内 (离中心约 2 cm的圆内 ) ,预处理 4h,用基因枪轰…     

不同调控序列控制下的gus基因在柑桔原生质体中的瞬间表达

通过ＰＥＧ法及转化脂介导法将不同调控序列控制下的ｇｕｓ基因导入柑桔原生质体中,研究了ｇｕｓ基因在柑桔原生质体中的瞬间表达情况,结果表明,在柑桔原生质体中,控制ｇｕｓ基因表达水平的能力由大于小依次为ＣａＭＶ３５Ｓ启动子,ＡｄｈＩ启动子及ｒｂｃｓ启动子,内含子的存在可以提高ｇｕｓ基因在柑桔原生质体中的表达水平。     

荔枝胚性愈伤组织基因枪转化系统的建立

荔枝是我国南方重要热带亚热带特产果树之一 .建立高效、稳定的荔枝转基因系统 ,对于应用现代生物技术进行荔枝的品种改良具有重要意义 [1] .我们在已建立的荔枝胚性愈伤组织 ( embryogenic callus,EC)体胚发生系统 [2 -4] 及其基因枪转化初步探讨 [5] 的基础上 ,进一步进行了 EC基因枪转化系统的建立研究 ,为将目的基因导入荔枝奠定了重要基础 ,并获得荔枝细胞工程研究中很有价值的有抗性筛选标记的荔枝胚性细胞系 .本研究中 ,以荔枝品种下番枝 (东刘 1号 )幼胚诱导的、长期继代保持的 EC为试验材料 ,建立了荔枝 EC高效遗传转化系统 :…     

利用GUS瞬时表达探讨香石竹品种“云红二号”基因枪转化参数

利用基因枪法和带有GUS基因的双元表达载体pBI121转化香石竹品种"云红二号"的外植体。通过检测GUS基因在香石竹叶片和茎段上的瞬时表达情况,分析受体材料、轰击距离及氦气压力对GUS瞬时表达的影响。结果表明,以茎段为受体材料,在射程为6 cm、氦气压力为1100 psi下,可检测到GUS基因较好的表达活性,瞬时表达率最高可达8.33%。     

番红花花蕊分化期差异蛋白表达的鉴定与分析

通过蛋白质组学筛选和研究番红花花蕊分花期差异蛋白的变化,旨在揭示番红花花蕊分化的内在分子调控机制。利用MALDI/TOF/TOF-MS/MS质谱鉴定与分析技术筛选与鉴定番红花花蕊分化期的差异蛋白,结果表明：75个差异表达蛋白得以鉴定,分析其可能的功能后构建了番红花花蕊分化的分子调控模型,其中,糖代谢途径为分化提供了足够的能量和营养;氨基酸代谢中的甲硫氨酸tRNA连接酶、精氨酸酶等可能与细胞分裂素、多胺等分子信号调控有关;活性氧代谢中的抗坏血酸过氧化氢酶、过氧化氢酶、硫氧还蛋白过氧氢酶、甘露糖-3′5′-异构酶等可能调控植物激素信号和抗性机制;热激蛋白、蛋白伴侣保障蛋白修饰和加工的正常进行;延伸因子Tu、β-肌动蛋白、β-微管蛋白、3-oxo-γ(4,5)-类固醇-5-β-还原酶构建细胞结构。本研究鉴定了75个可能在番红花花蕊分化中发挥重要作用的蛋白,并分析了其可能的调控过程,为进一步揭示番红花花蕊分化分子调控机制提供了科学依据。     

超声波辅助农杆菌介导转化大豆gus基因在不同外植体中的瞬时表达

研究以大豆品种东农42为材料,对胚尖、子叶节和下胚轴进行不同功率及作用时间的超声波处理,统计gus基因的瞬时表达频率.在超声波处理农杆菌侵染条件下,胚尖在80 W功率下处理3 min,gus基因表达频率达到最高,为87.5%.子叶节和下胚轴在48 W功率下处理5 min,gus基因瞬时表达频率均达到最高,分别为66.7%和75.0%.与常用的刀切处理相对比,超声波处理条件下,胚尖、子叶节及下胚轴的gus瞬时表达频率远高于刀切处理的外植体的gus瞬时表达频率,分别提高100.23%、73.25%、50%.     

基因枪转化小麦愈伤组织的影响因素研究

以小麦愈伤组织为受体材料,用基因枪法将报告基因GUS和目的基因Psag12-IPT导入小麦中。GUS基因表达检测表明,金粉用量越高,转化频率越高;质粒DNA用量以2.0μg/枪最佳;随着愈伤组织培养时间的延长,GUS基因瞬时表达呈明显下降趋势,至第28天以后趋于稳定。另外,GUS基因瞬时表达检测应在24h内进行。     

PEG法GUS基因在水稻原生质体及其愈伤组织中的瞬间表达初报

本文作者构建了ｐＸＭ１和ｐＧＣＹ６两个质粒，其中质粒ｐＸＭ，含有高赖氨酸基因和ＧＵＳ报告基因，质粒ｐＧＣＹ６则由裂解多肽Ｃｅｃｒｏｐｉｎ Ｂ基因和ＧＵＳ基因组成。这两个基因均以ＣａＭＶ３５Ｓ作为启动子，以ＮＯＳ作为终止子。经纯化的质粒ＤＮＡ以ＰＥＧ法导入４个水稻品种：８９－２、Ｌａｃｃａｓｉｎ、Ｃｙｐｒｅｓｓ、台北３０９细胞悬浮系的原生质休中，组织化学检测结果表明，ＧＵＳ基因在原生质体、愈伤组织及     

藏红花愈伤组织的诱导

[目的]建立藏红花愈伤组织诱导方法。[方法]以藏红花愈伤组织诱导率、诱导时间、外观形态作为评价参数,研究了外植体、激素种类及配比、外源添加物椰乳和活性炭浓度对藏红花愈伤组织诱导的影响。[结果]适宜的外植体是藏红花种球,适宜的激素种类及配比是MS+KT 0.5 mg/L+NAA 2.0 mg/L,适宜的椰乳浓度是100 m L/L,活性炭浓度是3 g/L。[结论]建立的藏红花愈伤组织诱导体系稳定性好,增殖速度较快,为工厂化生产奠定基础。     

我国藏红花研究文献分析

运用文献计量学方法,赋我国1989～2004年间的藏红花研究文献年代、研究领域、期刊分布、文献作者及其所在地区分布等进行了统计分析。初步总结了当前我国藏红花研究的现状和特点,找出了我国藏红花研究的热点和薄弱环节,并对此提出了建议。     

番红花球茎组培中的消毒和褐化抑制方法

[目的]优化番红花球茎消毒和褐化抑制的方法。[方法]以番红花球茎的染菌率、褐化率和愈伤组织诱导率为指标,分析了外植体大小、氯化汞浓度和消毒时间对番红花球茎染菌和诱导的影响,同时比较了抗坏血酸和活性炭对番红花球茎褐化的抑制效果。[结果]当外植体大小5 mm~3,氯化汞溶液浓度0.2%、消毒时间10 min时,染菌率和诱导率较为适宜;向培养基中加入0.5 g/L活性炭可以降低球茎的褐化。[结论]该研究建立了番红花球茎消毒和褐化抑制方法,为野外番红花球茎的初代组培提供了理论依据。     

浙江省西红花“二段法”优质高产栽培技术研究

通过西红花栽培研究试验及示范推广,作者对西红花的药用价值、特征特性、栽培技术、田间管理、病虫害防治及采收加工进行了系统的研究,提出浙江省西红花二段法栽培的技术措施。西红花在浙江高产栽培的关键是选用8 g以上的种球,11月上中旬田间露地种植,在科学的肥水运筹下越冬生长并发育形成新的子球,翌年5月植株休眠将商品用球采收放到室内通风阴湿的环境下催芽,10月底到11月采花。这套技术的推广应用为浙江省西红花产业发展及栽培管理提供了科学依据。     

西红花抗肿瘤作用的研究进展

癌症明显影响人类的平均寿命和生活质量,而从蔬菜、草药和香料中提取的天然物质可能有助于预防或治疗多种癌症。西红花具有多种活性成分,具有明显的抗肿瘤潜力,民间中医已将其广泛用于治疗很多疾病。该文通过查阅知网、PubMed和SciFinder中相关文献和资料,获得西红花试验数据,并进行归纳总结,着重介绍了西红花及其主要成分,并对国内外大量的体内、体外试验的研究进展进行综述,发现藏红花具有清除自由基和抗肿瘤活性,并在体外和体内模型中均具有明显的抗肿瘤作用。基于当前数据表明,西红花可被视为有潜力的候选临床抗癌药物。     

双波长分光光度法测定藏红花中总黄酮的含量

用双波长分光光度法,测定藏红花中的总黄酮含量,测定波长510nm,参比波长588nm,平均回收率98.63%。结果表明,藏红花中总黄酮平均含量为7.27%,该方法稳定可靠,重现性好。     

藏红花球茎腐烂病的调查及初步分析

藏红花在贵州省种植历史很短,关于病害的发生危害和防治的研究也较少。目前,藏红花球茎腐烂病造成了较大的危害,成为种植方面的首要病害。该文通过对藏红花进行实地病害调查和组织分离法分离病原菌,并进行培养和鉴定,实验结果表明,藏红花球茎腐烂病是由炭疽菌和镰刀菌交互侵染导致的结果。     

种植密度对藏红花生长的影响

研究了不同种植密度对藏红花生长的影响。结果表明：在整个生长期,不同种植密度下的藏红花各生长阶段的发生时间和株高差异不大;开花期的花梗长度、花朵直径、叶片数及叶长差异不显著。行株距12 cm×10 cm处理的柱头和雄蕊干重均最高,花瓣干重也较高,建议在生产上藏红花的种植密度以行株距12 cm×10 cm为宜。     

分葱对黄瓜、萝卜和白菜的化感作用

以黄瓜(Cucumis sativusL.),萝卜(Raphanus sativusL.)和白菜(Brassica chinensisL.)3种蔬菜作物为受体,通过种子萌发试验及幼苗生长试验,对分葱(Allium fistulosumL.var.caespitosum Makino)根系及其地上部水浸液的化感作用进行了初步研究。结果表明:分葱根系和地上部水浸液对黄瓜、萝卜和白菜具有一定的化感作用。对黄瓜和萝卜的萌发有一定的抑制作用,而对其幼苗生长有一定的促进作用;对白菜的萌发表现为低浓度促进高浓度抑制,而对其幼苗生长有一定的抑制作用。因此,在蔬菜栽培制度中,分葱可与黄瓜和萝卜进行合理的轮作与间套作;但可能不适宜与白菜进行轮作或间套作。     

黄瓜酪氨酸硫化转移酶基因CsTPST克隆及其表达分析

【目的】克隆黄瓜酪氨酸硫化转移酶基因(CsTPST),并分析植物多肽在发育过程中的调控作用,为研究CsTPST的功能及多肽与乙烯在黄瓜发育过程中的相互作用打下基础。【方法】以拟南芥TPST蛋白序列信息为基础进行同源比对,经PCR扩增和生物信息学分析获得CsTPST基因序列信息、结构和亲缘关系,并利用qRT-PCR对其表达模式进行分析。【结果】CsTPST基因cDNA全长789 bp,编码262个氨基酸。进化分析结果表明,CsTPST蛋白与甜瓜的TPST蛋白亲缘关系最近,其氨基酸序列相似性为93%。 qRT-PCR分析结果表明,CsTPST基因在黄瓜雌花、根和叶片中表达量较高,在雄花和茎中表达量较低。此外,CsTPST基因在乙烯合成促进剂ACC处理的黄瓜叶片中上调表达,而在乙烯合成抑制剂AVG处理下呈下调表达。 CsTPST基因启动子能激活GFP基因的表达。【结论】CsTSPT基因是一个受乙烯诱导表达的基因,可供开展CsTPST基因的生物学功能及性别决定的分子机理研究参考。