药用植物太子参茎尖培养及快速繁殖技术研究

 太子参茎尖培养及快速繁殖技术的研究，成功地解决了繁殖、生根等关键技术。不同发育阶段适宜培养基组成：茎尖培养基MS+NAA0.5mg/kg +BA0.5mg/kg，出苗率86.7%。继代繁殖培养基MS+NAA0.5mg/kg +BA 0.5mg/kg和MS+NAA1.0mg/kg +BA0.5mg/kg。生根培养基1/2MS+IAA1.0mg/kg，生根率为76.7%，茎尖组培苗移栽成活率85.2%，定植成活率100%，近3年研究一个简易、快速、实用太子参工厂化育苗生产程序已基本建成。     

罗汉果组培苗生产体系的建立

以罗汉果带节茎段为材料,对其诱导、继代、生根和移栽等条件进行研究,为罗汉果组培苗生产体系的建立提供条件。结果表明:MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.10 mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂6.0g·L-1为诱导培养基,诱导率可达40.0%;继代培养采用单节茎段扦插和促进腋芽生枝方法,适合的培养基为2/3改良MS+IBA 0.5mg·L-1+GA30.3mg·L-1+蔗糖40g·L-1+琼脂6.0g·L-1,增殖系数为4.0;生根培养基为1/2改良MS+IBA 0.5mg·L-1+蔗糖2.0%+活性炭0.1%+琼脂6.0g·L-1,生根率达到94%;栽培基质以泥炭土∶珍珠岩=10∶2为宜,移植成活率可达97.8%。     

不同激素配比对辣木组培苗生长的影响

以辣木嫩梢茎段为外植体,在25种不同激素配比的培养基上进行培养,探讨不同激素配比对辣木组培苗生长的影响,并在6种不同生根培养基上进行生根试验。研究结果表明:在MS+6-BA0.02～0.5mg.L-1+NAA0.02mg.L-1+蔗糖3%的培养基上辣木组培苗生长良好,增殖倍数达5.6～8.1。在1/2MS+NAA0.2mg.L-1+蔗糖2%的培养基上生根率最高达79%。用形态学上端朝上与朝下两种方式接种到生根培养基上均能在形态学下端生根。     

文心兰茎尖诱导丛生芽高频率植株再生

以文心兰茎尖为外植体,通过基本培养基(MS、1/2MS、1/2 N6)、植物激素(6BA、NAA)、培养条件(有机添加物、糖、培养物状态)等关键因子对文心兰丛生芽诱导、增殖、生根各培养阶段影响的试验,探讨了文心兰以丛生芽途径再生植株的关键技术.结果表明:茎尖诱导丛生芽较适培养基配方为1/2 MS+6BA 2.0 mg·L-1 +NAA 0.1 mg·L-1,诱导率为84.6%;丛生芽在MS+6BA 2.0 mg·L-1 +NAA 0.1 mg·L-1 +蔗糖30 g·L-1培养基中增殖效果较好,增殖系数为5.5;株高2.0～3.0 cm的试管苗是丛生芽增殖的最佳培养材料;生根培养基适宜配方为1/2MS+IBA0.5 mg·L-1 +苹果汁100 g·L-1 +活性碳0.5 g·L-1 +蔗糖20 g·L-1,生根率为100%.     

大花蕙兰(Cymbidium hybridium)离体快速繁殖技术

以大花蕙兰茎尖和茎节段作外植体进行了离体快速繁殖技术研究。结果显示:茎尖诱导芽的效果优于茎节段;适宜诱导培养基为MS BA4.0mg·L-1 NAA0.2mg·L-1 AC0.6g·L-1,茎尖在该培养基上芽的诱导率为71.4%;丛芽增殖适宜培养基为MS BA2.0mg·L-1 NAA0.2mg·L-1 AC03.g·L-1,增殖率为3.79;原球茎增殖、分化的适宜培养基为MS BA1.0mg·L-1 NAA0.2mg·L-1 AC0.3g·L-1,增殖率为6.1,分化率为71.1%;生根和壮苗的适宜培养基为MS NAA0.5mg·L-1 AC0.3g·L-1,试管苗生根率达100%。     

影响草莓茎尖快繁因素的分析

[目的]分析几种影响草莓茎尖快繁的因素。[方法]以"童子1号"草莓为试材,对草莓茎尖培养快繁中茎尖取材大小、生长调节剂、碳源等影响因素进行分析。[结果]以0.5 mm大小的茎尖接种,脱毒率最高,成活率最理想。诱导"童子1号"草莓茎尖成活与生长的最适培养基、最优增殖培养基均为MS+BA 0.5 mg/L。IBA浓度为800 mg/L时,组培苗瓶外生根不仅有较高的生根率和生根数,而且获得了较壮的生根苗。蔗糖和白砂糖作碳源时,繁殖系数较理想,以白砂糖最为适宜。[结论]草莓茎尖快繁应以0.5 mm大小的茎尖为材料,诱导分化培养基、继代增殖培养基均为MS+BA 0.5 mg/L,组培苗瓶外生根蘸取的最佳生长调节剂为800 mg/L IBA。     

甘蔗新品种粤糖03-373 组培快繁试验

以粤糖新品种03-373的成熟甘蔗种茎作为研究材料,研究不同植物生长调节剂配比对愈伤组织脱分化和再分化诱导、茎尖与腋芽萌发诱导、丛芽增殖培养、生根培养的影响。结果表明,适合粤糖03-373的最佳综合组培方案为:诱导愈伤组织脱分化适宜培养基为MS+2,4-D1.0mg/L,诱导愈伤组织再分化的适宜培养基为MS+BA0.5mg/L+IBA0.01mg/L,诱导茎尖与腋芽萌发的适宜培养基为MS+BA1.0mg/L+IBA0.04mg/L,丛芽继代增殖适宜培养基为MS+BA1.0mg/L+IBA0.04mg/L,生根培养基以1/2MS+ABT0.20g/L+IBA0.05mg/L+活性碳0.5g/L;继代培养基中添加不同浓度椰汁、水解酪蛋白和酵母提取物,组培苗黄化率由低到高依次为椰汁水解酪蛋白酵母提取物对照;采用简易的沙培方式,组培苗的假植成活率达99%以上,大田移栽成活率达98%。     

颐和园古柿树组织培养快繁体系的建立

以北京颐和园的古柿树当年新生的嫩芽切段为外植体进行组培快繁研究。结果表明,不定芽启动培养基为1/2MS+0.8 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.5 g/L PVP。将无菌苗转接到最适分化培养基( 1/2MS +5.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.5 g /L PVP)上,组培苗分化效率较高,但小苗矮小。将分化较好的组培苗转接到壮苗培养基（1/2MS+2.0 mg/L ZT+0.1 mg/L IAA+0.5 g/L PVP）,待组培苗长至 2~3 cm 转到生根培养基（1/2MS +0.6 mg/L NAA+0.3 mg/L IBA+0.5g/L PVP）,暗培养9~10 d后转接到生根培养基（ 1/2MS + 0.5 g/L PVP）,生根率为30%。而将组培苗茎段预先用250 mg/L 的IBA或IAA浸泡2min,生根率可提高到40%。生根组培苗经炼苗后移栽成活率可达60%。     

草莓茎尖培养快繁体系研究

以草莓“丰香”品种为材料,利用匍匐茎剥取茎尖,以不同大小茎尖接种到不同配方的茎尖诱导培养基中,观察草莓茎尖在各种培养基上的生长情况。实验结果表明草莓茎尖的成活率与剥取的茎尖大小有关,与培养基配方有关。在相同的培养基上,剥取茎尖越大,成活率越高。同样以0.5mm大小茎尖,在培养基MS BA0.5mg/L上的成活率最高,达到66.7%;转接到各增殖培养基上后生长良好,并在MS BA0.5mg/L培养基上增殖系数最高,为6.05;再生芽转接到生根培养基1/2MS上,培养20d左右,生根率达100%,平均生根6.13条/株。生根苗在全蛭石的基质上驯化,成活率高达98.33%。     

滁菊组织培养脱病毒技术研究

采用改良热处理结合茎尖分生组织培养的方法,建立滁菊组培脱毒快繁技术体系.研究结果表明,滁菊茎段诱导的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;茎尖增殖的最佳培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;壮苗生根的最佳培养基为1/2MS+0.1mg/L NAA.接种脱毒结果为,脱毒率＞83%,茎尖成活率＞42%.     

51份龙眼种质的胚性愈伤组织诱导及其离体保存

对福建龙眼的主要栽培品种、地方品种及特异株系共51份种质的幼胚进行培养,诱导胚性愈伤组织作为种质资源离体保存的材料,并进行限制生长保存试验.结果表明:MS+2 mg.L-12,4-D培养基适用于绝大部分品种的不同直径的龙眼幼胚胚性愈伤组织的诱导,平均诱导率为48.3%;直径2-4 mm的幼胚最适宜于胚性愈伤组织诱导.在添加1 mg.L-1活性炭的培养基上进行为期7-10 d的过渡培养,能减少直径<2 mm和直径>6 mm的幼胚因褐变导致的死亡,从而提高愈伤组织诱导率.龙眼胚性愈伤组织在常规继代培养中的周期为20 d左右,且品种间的差异较大.在MS+1 mg.L-12,4-D培养基中附加20 g.L-1甘露醇,于16℃低温下进行限制生长保存,可以使龙眼继代培养周期由原来的20 d延长至60 d.     

幼胚和花药培养诱导荔枝胚性愈伤组织

以福建荔枝主栽品种元红的幼胚为外植体，优化了离体培养诱导胚性愈伤组织（ＥＣ）的培养基．对ＥＣ的诱导，较高质量浓度的蔗糖（５０ｇＬ－１）和２，４－Ｄ（２～４ｍｇＬ－１）优于较低质量浓度的蔗糖（３０ｇＬ－１）和２，４－Ｄ（０．５～１．０ｍｇＬ－１）．ＢＡ和活性炭（ＡＣ）对ＥＣ的诱导有抑制作用．适当的硫代硫酸银（ＳＴＳ）（２９．４μｍｏｌＬ－１）可以抵消ＢＡ的抑制作用．在ＭＳ附加质量浓度为５０ｇＬ－１的蔗糖和２ｍｇＬ－１的２，４－Ｄ培养基上，下番枝、乌叶、元红和陈紫幼胚诱导ＥＣ的频率分别为２２％、１４．５％、１７．２％和１６．８％．在上述培养基中，元红花药产生ＥＣ的频率为０．１％～０．６％，而加入ＳＴＳ（２９．４μｍｏｌＬ－１）可提高至１．２％～５．６％．对影响ＥＣ的诱导因素和它们的相互关系进行了讨论     

红叶石楠组织培养工厂化扩繁技术研究

以红叶石楠的侧芽和顶芽为材料进行组织培养试验。结果表明：外植体用0．1%HgCl_2消毒10～12 min,诱导培养基以MS+0．05 mg．L~1 NAA+2．0 mg·L~1 6-BA为佳,芽增殖培养基以MS+1．0 mg·L~1BA+0．1 mg’L~1 6-BA为佳,壮苗培养基以MS+0．5 mg·L~1 NAA+0．5 mg·L~1 6-BA为佳,生根培养基以1/2MS+1．0 mg·L~1 IBA为佳,将生根苗移入温室的穴盘中,基质以蛭石：珍珠岩：泥炭土=5：3：2较好,控制好室内的温度、光照和湿度,成活率可达90%以上。     

杂种黄秋葵茎尖及试管苗培养的研究

采用茎尖和试管苗培养的方法,以黄秋葵生长点为材料,进行了生长点的生长、分化芽的生根和试管苗的生根继代增殖培养,以及试管苗的移栽与定植的研究。结果表明:1/2MS+ZT0.2mg·L-1+NAA0.3mg·L-1是生长点伸长生长的理想培养基;MS+6-BA0.7mg·L-1+AgNO30.8mg·L-1+NAA0.1mg·L-1是生长芽分化培养的理想培养基;1/3MS+ABT0.6mg·L-1+蔗糖10g·L-1+IAA0.4mg·L-1是分化芽生根培养和生根继代增殖培养的理想培养基。试管苗移栽成活率为94.7%;定植成活率为97.4%;定植的试管苗保持了杂种黄秋葵的杂种优势。     

麝香百合花梗离体培养再生植株

以麝香百合的花梗为外植体,进行了离体培养再生植株的研究.结果表明:在附加2mgBA、0.1mg·L-1NAA的MS培养基,花梗培养产生小鳞茎的诱导率可高达86.67%;在附加0.3mg·L-1BA的MS培养基上继代,增殖系数最高,达5.10;在附加0.5mg·L-1NAA的1/2MS培养基上培养生根,生根率90%以上.     

百合愈伤组织的诱导及植株再生

试验以东方百合(Oriental hybrids)"bernini"的花柱、花丝、花瓣为外植体,利用组织培养技术,探讨不同外植体愈伤组织的诱导、胚状体发生及植株的再生状况。结果表明,三种外植体均能诱导愈伤组织,花柱和花瓣诱导的愈伤组织为绿色致密的非胚性组织,而花丝诱导的愈伤组织为黄色疏松的胚性组织,将胚性愈伤组织继续培养一个月可发生胚状体。花丝愈伤组织诱导率、分化率以及分化速度均高于花柱和花瓣。诱导愈伤组织的最佳培养基为改良MS(盐酸硫胺素的浓度为4mg·L~(-1))+2,4-D2mg·L~(-1)+水解乳蛋白300mg·L~(-1);最佳分化培养基为MS+KT0.1mg·L~(-1)+BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 1mg·L~(-1);最佳生根培养基为MS+IBA 0.5mg·L~(-1)。     

芳樟离体快繁与离体保存试管苗再生植株培养

以芳樟嫩茎为外植体,进行离体培养快繁技术研究.结果表明:在改良MS+2mg·L-1 6 BA+ 0. 1mg·L-1 NAA固体培养基中诱导不定芽,诱导率高;用附加 0. 2mg·L-1 GA3 或无GA3 的改良MS+2mg·L-1 6 BA+0. 1mg·L-1 IBA固体培养基交替培养,芽苗可大量增殖,繁殖系数高达 10-20倍,而且可以避免褐变和玻璃化现象;保存 2a的试管苗仍然保持再生芽的能力;芽苗用 1 /2MS+0. 8mg·L-1 IBA+ 0. 2mg·L-1 NAA + 20g·L-1蔗糖固体培养基培养,生根、壮苗效果最好.     

玻璃化法超低温保存荔枝胚性愈伤组织及其植株再生

采用玻璃化法对荔枝胚性愈伤组织超低温保存及植株再生进行了初步探讨.将继代保存15 d的荔枝胚性愈伤组织转接到预培养基[MS+50 mL.L-1二甲基亚砜(DMSO)+1 mg.L-12,4-D+20 g.L-1蔗糖+6 g.L-1琼脂糖]中,在5℃低温下预培养.将预培养后的愈伤组织于常温下用体积分数为60%玻璃化溶液(2PVS2)装载20 min,再于0℃下用PVS2溶液平衡40 min;换新鲜的PVS2溶液,迅速投入液氮中保存.1周后取出,于40℃温水浴中化冻,弃PVS2,用1.2 mol.L-1蔗糖液+MS基本培养基的洗涤液洗涤3次,再接种到新鲜的培养基中恢复培养,恢复培养后的胚性愈伤组织能正常进行体细胞胚胎发生、成熟和植株再生.     

莲雾组织培养和快速繁殖技术

以莲雾未萌发带顶芽茎段为材料研究其组织培养和快速繁殖技术。结果表明:莲雾组织培养的基本培养基为WPM;带顶芽茎段诱导芽的适宜培养基为WPM+0.5 mg.L-16-BA+0.02 mg.L-1NAA;通过腋芽增殖途径的适宜培养基为WPM+0.8 mg.L-16-BA+0.4 mg.L-1IBA;壮苗适宜培养基为WPM+0.2 mg.L-16-BA+0.4 mg.L-1IBA;生根适宜培养基为1/2WPM+0.5 mg.L-1NAA+0.2 mg.L-1IAA。组培苗驯化移栽成活率达90%以上。剪取成活组培苗顶部枝梢进行嫩枝(幼态)扦插生根成苗,能提高繁殖率,降低成本。     

奈的离体繁殖

以木柰的带腋芽茎段为外植体进行离体繁殖技术研究．结果表明,外植体材料从快停止生长的嫩梢切取为佳,并以在１．０ｍｇ·Ｌ－１升汞中消毒１５ｍｉｎ为宜;在附加０．２ｍｇ·Ｌ－１ＩＡＡ、１．０ｍｇ·Ｌ－１ＢＡ的ＭＳ培养基上进行初代培养,启动腋芽萌发;在含ＮＡＡ０．１ｍｇ·Ｌ－１、ＢＡ０．５１．０ｍｇ·Ｌ－１的１／２ＭＳ培养基上进行继代增殖,可形成丛生芽,并且增殖倍数达４．０以上;增殖后的芽苗在含ＮＡＡ０．１ｍｇ·Ｌ－１、ＩＢＡ１．０ｍｇ·Ｌ－１的１／２ＭＳ培养基上长根成苗．以泥炭土和石至石（１∶１）为介质,试管苗移苗成活率为９０．１％．试管苗种植田间５ａ后,已正常开花结果．