马立克氏病病毒的分离与鉴定

从广西不同地区患马立克氏病的鸡群分离出１０株马立克氏病毒，命名为ＭＺ１、Ｅ１、Ｅ２、Ｅ３、Ｅ４、Ｇ２、Ｌ１、Ｇ５、Ａｎ７、Ｎ。用ＭＤＶ分型单克隆抗体对Ｅ４、Ｌ１、Ｇ２、Ａｎ７、Ｎ毒进行血清型鉴定，结果除Ｅ４疑有血清Ⅱ型与血清Ⅰ型ＭＤＶ同时存在外，其余均为血清Ⅰ型ＭＤＶ。     

鸡马立克氏病病毒的分离与初步鉴定

从鸡马立克氏病病鸡拔取羽毛根 ,经处理后接种于 4日龄鸡胚绒毛尿囊膜。盲传到第六代出现典型的马立克氏痘斑。用第7代鸡胚绒毛尿囊膜研磨液与MD阳性血清进行琼脂扩散试验 ,结果出现了明显的白色沉淀线。此结果表明已分离到马立克氏病毒。     

鸡马立克氏病病毒的分离鉴定和防治试验

1 前言鸡马立克氏病(Marek's disease MD)是由庖疹病毒群的亚群病毒(与细胞相结合)引起,可造成严重经济损失的世界性家禽流行病。大庆机械化养鸡厂1986年投产以来,鸡MD的防制主要采取1日龄注射国产马立克疫苗和法氏囊疫苗以及相应的消毒工作。据1987、1988年     

一株鸡马立克氏病病毒的分离鉴定及主要致病基因分析

山东省某地区鸡马立克氏病疫苗免疫鸡群暴发马立克氏病(MD),为分离得到致病毒株,检测其致病性,采用琼脂扩散试验、细胞培养和间接免疫荧光试验(IFA)等方法从发病鸡的血液及羽髓中分离到一株适应鸡胚成纤维细胞(CEF)生长的马立克氏病病毒。采用PCR方法扩增分离毒株的meq、pp38、132bp重复序列等病毒致病相关基因,所得序列用DNAStar软件与GenBank上登录的参考毒株进行比对分析。结果显示,该分离株SDAU-1的pp38基因与标准强毒序列同源性为100%,132bp重复序列的拷贝数及meq基因的变异均符合MDV强毒株的序列特征。     

利用重组反转录病毒表达马立克氏病病毒Meq基因

为研究马立克氏病病毒Ｍｅｑ蛋白的生物学功能,应用磷酸钙与ＭＤＶ Ｍｅｑ基因重组的反转录病毒转染载体质粒ＲＣＡＳ－Ｍｅｑ的ＤＮＡ,转染于鸡胚成纤维细胞质ＤＦ１。经同间接免疫荧光技术研究表明,转染后第３天即开始有少量ＤＦ１细胞在细胞核表达Ｍｅｑ蛋白,以后阳性细胞增多,到转染后第７天阳性细菌最多,之后荧光即衰减,通过酶联免疫吸附试验检测,发现细胞培养上清中游离病毒在转染后第５天即可检出,直至第７天仍维持     

鸡肾细胞培养分离鸡马立克氏病病毒

鸡肾细胞培养分离鸡马立克氏病病毒吕昌琳高登慧（贵州农学院，贵阳５５００２５）马立克氏病（ＭＤ）是由疱疹病毒引起的一种具有高度传染性的肿瘤性疾病，作者用琼脂扩散进行流行病学调查，用鸡胚、雏鸡接种进行人工感染试验及病理组织学检查、荧光抗体试验，反向间接血...     

致病性马立克氏病病毒的污染与监测

马立克氏病（ Ｍａｒｅｋ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ，ＭＤ）是危害世界养禽业最严重的病毒性肿瘤性传染病。ＭＤ经羽毛囊排毒，空气传播，传染力极强，是鸡的三大主要疫病之一，可造成重大的经济损失。该病的致病因子为马立克氏病病毒（Ｍａｒｅｋ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ，ＭＤＶ），属疱疹病毒科成员，根据其嗜淋巴细胞性相似于γ－疱疹病毒，而其基因组结构却相似于α－疱疹病毒［１］。 ＭＤＶ按其致病性和血清学反应不同分为三个血清型：血清Ｉ型（ＭＤＶＩ）包括致瘤致病性的强毒株（如 ＨＰＲＳ－ １７、ＧＡ、Ｍｄ／５、ＢＪ－１）…     

鸡肿瘤病料中马立克氏病病毒和禽网状内皮组织增生症病毒共感染的研究

采用细胞培养、间接荧光抗体试验(IFA)、聚合酶链式反应(PCR)和斑点杂交(Dotblot)的方法从我国不同地区发生肿瘤的病料中同时进行MDV和REV的分离和鉴定。在分离到的13株MDV野毒株中，有4株培养物既能在IFA中与REV的单抗反应，又可以用PCR扩增出REV的LTR；另有4株培养物能扩增出REV的LTR，但在IFA中却不与REV的单抗反应。结果表明我国MD肿瘤中存在着REV的共感染，且我国MDV某些野毒株的基因组中有可能已经整合进了REV的LTR序列。     

马立克氏病病毒致瘤相关基因meq在不同病变组织中的变化

以MSB-1肿瘤细胞建立的马立克氏病为病理模型,利用PCR技术扩增不同病变组织中的meq基因,构建meq基因重组阳性质粒,测定和比较它们的核苷酸和氨基酸序列。结果显示,与L-meq（1 200 bp）和标准株GA的meq（1 020 bp）比较,MSB-1细胞和脾脏肿瘤组织的meq基因（1 197 bp）、羽髓meq基因（1 017 bp）分别相应缺失3个碱基（CCA）;MSB-1细胞和脾脏肿瘤组织的meq基因具有与L-meq相同的180 bp插入序列;氨基酸序列也发生相应变化。结果表明,meq基因在不同病变组织中的核苷酸序列发生了变化,这种变化可能与马立克氏病病毒的致瘤机制有关。     

Porcine reproductive and respiratory syndrome virus whole-genome sequencing efficacy with field clinical samples using a poly(A)-tail viral genome purification method

The genomic surveillance of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) is based on sequencing of the ORF5 gene of the virus, which covers only 4% of the entire viral genome. It is expected that PRRSV whole-genome sequencing (WGS) will improve PRRSV genomic data and allow better understanding of clinical discrepancies observed in the field when using ORF5 sequencing. Our main objective was to implement an efficient method for WGS of PRRSV from clinical samples. The viral genome was purified using a poly(A)-tail viral genome purification method and sequenced using Illumina technology. We tested 149 PRRSV-positive samples: 80 sera, 33 lungs, 33 pools of tissues, 2 oral fluids, and 1 processing fluid (i.e., castration liquid). Overall, WGS of 67.1% of PRRSV-positive cases was successful. The viral load, in particular for tissues, had a major impact on the PRRSV WGS success rate. Serum was the most efficient type of sample to conduct PRRSV WGS poly(A)-tail assays, with a success rate of 76.3%, and this result can be explained by improved sequencing reads dispersion matching throughout the entire viral genome. WGS was unsuccessful for all pools of tissue and lung samples with Cq values > 26.5, whereas it could still be successful with sera at Cq ≤ 34.1. Evaluation of results of highly qualified personnel confirmed that laboratory skills could affect PRRSV WGS efficiency. Oral fluid samples seem very promising and merit further investigation because, with only 2 samples of low viral load (Cq = 28.8, 32.8), PRRSV WGS was successful.