牛传染性鼻气管炎病毒gB基因的截短表达与间接ELISA诊断方法的建立

经DNAstar分析，据牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）全基因序列设计合成gB基因的特异性引物，以构建的pGM-T-gB为模板，PCR扩增IBRVgB蛋白192-266位氨基酸的基因序列。将目的片段克隆，酶切鉴定并测序鉴定后，定向插入pET32a表达载体中，转化表达菌BL21。SDS-PAGE电泳分析表明，诱导表达产物以包涵体和可溶形式存在，大小约为29．2ku，与预测值相符。亲和纯化后重组蛋白浓度为2．000mg／mL，纯度为79．2％。间接ELISA检测证明，表达蛋白具有抗原性。以该蛋白作为诊断抗原，建立了间接ELISA诊断方法。确定的抗原包被浓度为50／zg／mL，血清的最佳稀释度为1：40，阳性标准定为s／e〉0．395。交叉试验表明对牛流热（BEV）、牛肺疫（CBPP）、牛病毒性腹泻（BVD）、牛结核（BTB）、牛副结核（PBB）以及牛赤羽病（BAD）等其它6种疾病阳性血清不发生交叉反应。与中和试验相比较，特异性、敏感性和符合率分别为83．3％、90．9％和88．9％；与进口法国IBRV全病毒ELISA抗体诊断试剂盒比较，特异性、敏感性和符合率分别为92％、92．7％和92．5％。上述结果表明该诊断方法具有良好的特异性和敏感性，显示了良好的应用前景。     

应用基因重组NcSRS1抗原对新疆部分地区牛（牦牛）新孢子虫病的血清学调查

目的为摸清新疆部分地区牛（牦牛）感染新孢子虫病的情况。方法从阿勒泰市牛场、104团三分牧场牦牛、乌鲁木齐种牛场的随机抽样48头份血清,采用直接酶联免疫吸附反应（direct-ELISA）法进行检测。结果阿勒泰市牛场感染率为53％（9／17）,乌鲁木齐种牛场感染率为0％（0／15）,104团三分牧场牦牛感染率为0％（0／16）,总感染率为18．8％（9／48）。结论新孢子虫病已经传入新疆地区,应引起人们足够重视,加强防范。     

奶牛小区实施同期发情后应用性控冻精人工授精的效果观察

为观察奶牛养殖小区应用同期发情后，实施性控冻精人工授精的效果进行试验。结果表明：发情率为87．5％，而且92．9％的发情牛集中在20h之内，并获得了58．％的情期受胎率；≥17月龄的参配育成牛的妊娠率（83．3％）明显高于〈17月龄的参配牛的妊娠率（33．3％），差异显著（P〈0．05）；输精到排卵侧子宫角的妊娠率（62．5％）高于输精到子宫体的妊娠率（50．0％），但差异不显著（P〉0．05）；发情后长时间（超20h）不排卵，可以肌肉注射促排卵素3号25μg／头，然后输精，可提高妊娠率。     

声明

在石阡县高魁、大岩两村用氯前列烯醇注射空怀健康的黄牛（86头）、水牛（46头）共132头母牛进行唰期发情和冻配试验。结果表明：0～8d友晴牛共122头，同期发情率为92．42％（122／132），在2～6d发晴的占总发晴数的92．62％，有卵泡发育的母牛占发情母牛数的55％（22／40）；冻配第一晴期受胎率为43．59％（51／117），第二情期受胎率为600／0（27／45）。     

三河牛引血效果的研究

三河牛引血工作已开展近11年,为掌握其引血后代的遗传进展,笔者对谢尔塔拉种牛场合外血三河牛资料进行了分析研究。结果表明,引血对三河牛遗传改进效果具有显著的影响,含外血1／2、1／4、1／8三河牛产奶量分别提高24％、17％、6％（P〈0．05）;含外血1／2、1／4、1／8三河牛乳脂率分别比三河牛降低7．5％、4．8％、1．9％;含外血1／2、1／4三河牛乳脂率影响分别为极显著、显著（P〈0．01,P〈0．05）;含外血1／8三河牛乳脂率影响不显著（P〉0．05）;含不同外血三河牛不同发育阶段体尺、体重及一、三、五胎体尺、体重与三河牛对比影响不大（P〉0．05）。     

不同杂交组合牛及纯种牛生长发育比较研究

通过对“云南热带、亚热带肉牛品种杂交组合及选育研究”课题执行期间收集的各种杂交组合牛、纯种莫累灰牛（MM）及云南黄牛（YY）的阶段性体重、体尺测定资料和外貌评分资料进行统计比较。结果表明在条件较好的小哨，莫云杂（MY）、婆云杂（BY）两种二元杂交牛的12月龄和18月龄体重分别比纯种云南黄牛提高21．45％、29．71％和28．91％、31．31％；婆莫云（BMY）三元杂交牛的初生重、18月龄和36月龄体重分别比云南黄牛提高66．21％、12．36％和10.92％。在六六呼，纯种沙西华公牛（SS）与木地黄牛的沙云杂（SY）二元杂交牛的18月龄、24月龄和36月龄体重分别比本地黄牛提高17．1％、10．92％和23．07％。在以MY为母本，SS为父本的三元杂交牛中，相应司旨标分别提高68．49％、75．3％和82．5％。在曼中田，以婆罗门（BB）冻精进行人工授精所产生的婆云杂（BY）二元杂交牛的初生重、12月龄和18月龄体重分别比本地黄牛提高36．9％、－0．2％和16．34％。以杂交公牛为父本所产生的1／4婆罗门·3／4云南黄牛（BYY）和1／4婆罗门·1／8莫累灰·5／8云南黄牛（BMYY）44后代中，其初生重和18月龄体重分别比本地牛提高2．56％、13．56％和7．1％、2．8％。     

共和县恰卜恰镇奶牛结核病感染情况调查

在被检的934头奶牛中,初检检出阳性结核病牛8头,可疑牛5头,对可疑牛复检后,检出阳性牛1头,共检出阳性牛9头,阳性率为0．96％（9／934）：阳性牛中黑白花奶牛7头,阳性率为1．17％（7／599）,当地黄牛2头,阳性率为0．60％（2／335）;从检测结果看,恰卜恰镇黑白花奶牛的阳性率;比当地黄牛的阳性率高,差异性极显著（P〈0．01）,说明黑白花奶牛对结核病的抵抗力比当地黄牛相对较差。     

切割取样后胚胎的冷冻保存技术的研究

研究了切割取样后小鼠胚胎和牛胚胎冷冻-解冻的技术方法。结果表明：（1）分别以10％甘油、10％乙二醇作为冷冻液以及在以上两种冷冻液中分别添加10％葡聚糖＋0．1mol／L蔗糖作为冷冻液常规方法冷冻切割后的小鼠胚胎，冷冻-解冻后体外培养72h总发育率分别为56．9％（259／455）、81．8％（604／738）、84．8％（540／637）和59．5％（308／518）。（2）取样后胚胎体外短暂培养（0-4h）并不能提高切割取样后小鼠胚胎冷冻-解冻体外培养发育率。（3）切割取样小鼠胚胎在25％甘油＋0．25mol／L蔗糖＋20％的血清为冷冻液，在-100～-110℃左右熏蒸2min快速冷冻后体外培养发育率为73．3％（33／45），切割取样牛胚胎快速冷冻-解冻移植妊娠率为57．1％（4／7）。     

奶牛酮病和脂肪肝综合症研究进展

奶牛酮病（Ketosis）和脂肪肝综合症（Fatty liver syndrome）是奶牛重要的群发性常见多发病，多发于日产奶30kg以上的高产牛。由于高产品种的引进、培育，高能饲料的开发、利用，规模化饲养程度提高等原因，这2种疾病的发病率长期以来一直居高不下。我国奶牛酮病的发病率占泌乳牛的15．0％-30．0％，美国为5．0％，印度为14．7％，而日本却高达43．1％。我国奶牛脂肪肝的发病率超过30．0％，美国为35．0％，66．0％。     

进口澳大利亚奶牛附红细胞体的发现与诊断

在对从澳大利亚进口的奶牛进行入境隔离检疫时，发现了牛附红细胞体病，感染率100％（1363／1363），其中：体况较肥的牛血液中30％－50％的红细胞感染附红细胞体，瘦弱牛，极度消瘦的牛血液中60％－80％以上的红细胞感染附红细胞体，使用贝尼尔3．5毫克／千克体重治疗效果较好，在广西是首次从澳大利亚进口的奶牛中发现附红细胞体病。     

鹿感染牛病毒性腹泻—粘膜病病毒的调查

应用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ对吉林省某地区育成梅花鹿育成马鹿及马鹿感染牛病毒性腹泻－粘膜病病毒进行了调查，结果育成梅花鹿的带毒率为３４．１％（２８／８２）；育成马鹿的带毒辣率为１９．６％（１８／９２）；马鹿带毒率为４４．４％（８／１８）。     

云南省红河州家畜衣原体病的调查

应用间接血凝试验（ＩＨＡ）对红河州的个旧、河口等１３个市（县）、１０３个乡（镇）、８２４个自然村，户农户的１４５４２份家畜血清进行了衣原体抗体检测，结果检出阳性４１７１份，阳性率为２８．６８％。其中，马的阳性率为３５．４１％（９５３／２６９１）；牛的为３４．６１％（８２３／２３７８））；羊的为２６．１２％（１０２４／３９１７）；猪的为２４．５％（１３４２／５４７７）。另外，对查出衣原体阳性反应的血清同时进行弓形虫病的抗体监测，结果证明，部份衣原体检查为阳性的血清中也存在弓形虫抗体，且两病混感率为７．６３％（１１０９／１４５４２）。其中羊混感率为９．３７％（３６７／３９１７）；猪为８．９３％（４８９／５４７７）；牛为７．７８％（１８５／２３７８）；马为２．５２％（６８／２６９１）。羊的混感率最高。因此红河州广泛流     

高产奶牛性控雌性冻胚规模化移植试验

从美国引进高产奶牛性控雌性胚胎，在农村条件下，选择自然发情的黄牛作受体，移植合格受体牛648头。结果显示，自然发情黄牛924头中，经直肠检查合格受体牛648头，使用合格率为70．13％（648／924）；氯前列烯醇同期处理476头，使用合格率为36．13％（172／476），差异极显著（P〈0．01）。80～100d怀孕检查，自然发情移植成功率41．98％（272／648），同期发情移植成功率40．12％（69／172），差异不显著（P〉0．05）。自然发情黄牛不同黄体级别的移植成功率分别为：A级44．09％（41／93），B级42．43％（199／469），C级37．21％（32／86），差异不显著（P〉0．05）。单胚移植580头，移植成功率42．41％（242／580），双胚移植68头，移植成功率44．12％（30／68），差异不显著（P〉0．05）。正常胚胎单枚移植541头，移植成功率42．51％（230／541），裸胚单枚移植39头，移植成功率30．77％（12／39），裸胚比正常胚移植成功率低11．74％。怀孕牛已出生犊牛83头。其中母犊79头．公犊4头，母犊占95．18％，与自然发情的性比例（50％）相比较，差异极显著（P〈0．01）。     

应用PCR检测福尔马林固定,石蜡包埋组织中的副结构分枝…

应用副结构分枝杆菌ＩＳ９００序列特异引物，对Ｊｏｈｎｅ氏病（副结核病）牛的福尔马要固定、石蜡包埋回肠组织进行ＰＣＲ扩增并与Ｚｉｅｈｌ－Ｎｅｅｌｓｅｎ氏染色法（抗酸染色法）和免疫组化法进行比较。ＰＣＲ检出率为１９／２１（９０％），抗酸染色为１８／２１（８６％），免疫组化为２１／２１（１００％）。抗酸染色法和免疫组化法检测副结核分枝力的特异生不高。扩增ＩＳ９００序列的ＰＣＲ方法诊断Ｊｏｈｎｅ氏病非常特     

牛病毒性腹泻/粘膜病的研究进展

牛病毒性腹泻／粘膜病（Ｂｏｖｉｎｅｖｉｒａｌ　ｄｉａｒｒｈｅａ／ｍｕｃｏｓａｌ　ｄｉｓｅａｓｅ，ＢＶＤ／ＭＤ），简称牛病毒性腹泻（ＢＶＤ）或牛粘膜病（ＢＭ），是由牛病毒性腹泻／粘膜病病毒（ＢＶＤ／ＭＤＶ）感染牛引起的以发热、粘膜糜烂溃疡、白血胞减少、腹泻、咳嗽及怀孕母牛流产或产出畸形胎儿为主要特征的一种传染病。１９４６年Ｏｌａｆｓｏｎ等首次报道病毒性腹泻病。１９５３年Ｒａｍｓｅｙ和Ｃｈｉｖｅｒ发现粘膜病。１９６１年Ｇｉｌｌｅｓｐｉｅ等研究证明，这两种病毒是有共同抗原性的同种病毒，１９７１年由美国…     

23种家畜疫病的诊断调查报告

应用ＡＧＰ、ＰＡＴ、ＳＡＴ、ＩＨＡ、血片、粪便镜检、结核菌素点眼等检测方法,对毕节地区４县（市）９４个乡（镇）、３个国营农牧场及牲畜集市的５２６７份（次）家畜样品,进行了２３种疫病的诊断调查。结果,阳性率分别为：牛蓝舌病２．２４％,牛布鲁氏菌病３．５２％,牛伊氏锥虫病１０．３６％,牛弓形虫病３６．８４％,马传染性贫血１．５９％,马伊氏锥虫病３．５７％,马焦虫病０．５９％,猪布鲁氏菌病０．６２％,猪囊虫病２０．８１％,羊蓝舌病３．４３％;牛肝片吸虫病５８．４２％,牛焦虫病０．７１％,猪弓形虫病２５．３９％,羊布鲁氏菌病１．７９％;牛口蹄疫、牛白血病、牛病毒性腹泻／粘膜病、牛结核病、猪口蹄疫、猪痢疾、羊口蹄疫、羊病毒性腹泻／粘膜病、羊焦虫病均为０。前１０种疫病在毕节地区历史上从未记载,属首次正式证实有这些疫病的存在。牛、羊蓝舌病在贵州省属新发现。     

怀化地区六种牛羊疫病血清学调查报告

对湖南省怀化地区六种牛病和六种山羊疫病进行了血清学调查．共采集353份牛血清,496份羊血清,采用简便快速的诊断方法,结果为：牛羊布病为0．28％和0％,弓形体病为2.03％和4．64％,兰舌病为24．36％和25．11％,牛锥虫10．48％,牛结核和牛副结核均为0％,山羊衣原体病5．78％,羊支原体胸膜肺炎7．25％,山羊关节胸炎（CAE）0％．本次调查为怀化地区牛羊疫病综合防治工作提供了科学依据．     

菜饼的脱毒及其在小尾寒羊日粮中的应用

应用现代生物工程技术对菜饼进行脱毒处理，结果表明：发酵底物活菌含量达4×105（CFu／g），其中芽孢杆菌1×105（CFu／g），放线菌1×105（CFu／g），并含有高活性酶系统和高含量平衡氨基酸（21．92％）；同时，选择10月龄小尾寒羊公羊14只，随机分成2组，试验组为48％经处理的菜饼发酵底物，对照组为常规蛋白料，进行为期58d的饲养试验，平均日增重对照组（176．85±27．35g）与试验组（174．88±32．88g）差异不显著（P＞0．05）；精饲料报酬对照组（3．85∶1）比试验组（4．0∶1）高3．75％，每千克增重饲料成本对照组（5．92元）比试验组（5．57元）增加6．28％；绝干粪中氮含量对照组（2．29％）比试验组（2．41％）降低0．12个百分点（P＞0．05）。     

复方缓释剂防治家畜主要寄生虫病的效果试验

为防治牛、羊、猪、兔等动物的多种体内外寄生虫痛，笔者等于2000年-2003年期间在全省部分县（市）推广应用了复方缓释剂。推广应用结果表明：复方缓释荆具有杀虫谱广，药效持久等特点。牛、羊、猪等动物的吸虫病（包括肝片吸虫、血吸虫、双腔吸虫、前后盘吸虫、闰盘吸虫、姜片吸虫）阳性率分剐从防治前的30．3％、52．0％、9．2％，分别下降至0．1％、0．2％、1．0％；线虫病（包括捻转血矛线虫、蛔虫、食道口线虫、奥氏奥斯特线虫、鞭虫、钩虫、猪肾虫、肺虫等）的阳性率从防治前的6．5％、63．8％、21．3％分别降至0．2％、0．1％、0．1％；绦虫病阳性率分别由防治前的3．2％、5．3％、2．5％均降至0．1％；牛原虫病（焦虫）的阳性率从治疗前的牛8．3％下降至0．1％；羊、猪、兔等动物的螨病分剐从防治前的13．5％、31．7％、73．6％，分别降至0．1％、0．2％、0．2％。与对照相比，每头牛、羊、猪、兔的平均增重分别为20kg、3kg、10kg、0．5kg；每头耕地增加耕作力3亩，每头奶牛年增乳600kg，牛增犊率为5％、羊增羔率6％、猪增加产仔数为4％，兔增加产仔数为12％，牛、羊、猪、兔增加成活率分别为10％、8％、3．9％、9．7％，牛、羊、猪、兔降低死亡率分别为5％、8．2％、5％、26％、并节省劳力和费用，取得了巨大的经济效益。     

中草药在奶牛子宫内膜炎防治中的应用

奶牛子宫内膜炎是奶牛最常见的产科病之一，是引起奶牛不孕的主要原因。据报道，每年美国因奶牛不孕症造成的经济损失近2．5亿美元；英国报导不孕牛中约95％是由于子宫内膜炎引起。根据报道，奶牛不孕症中，子宫内膜炎特别是慢性子宫内膜炎可占不孕牛的60．1％～92．0％。Barbu等（1980）报道，136头产后不孕的牛中约有70％患有慢性或隐性子宫内膜炎；在国内，