荷斯坦牛抗热应激候选基因S441的检测

本试验以S441为奶牛假定抗热应激候选基因。在核心母牛场湖南省奶牛原种场测定不同世代的种母牛213头,在核心公牛场湖南省种公牛站,以及北京、上海、南京、安徽等地测定种公牛46头,共检测出具有S441基因的母牛27头,检出率为12．7％（27／213）,公牛15头,检出率为32．6％（15／46）。在湖南省奶牛原种场,有、无抗热应激候选基因的母牛在热应激期间的产奶量分别为1736．75kg和1528．63kg,产奶量下降率分别为3．51％和22．56％,产奶量差异不显著（P〉0．05）,但产奶量下降率差异显著（P〈0．05）,基本肯定该基因为抗热应激候选基因。     

荷斯坦奶牛抗热应激SCAR标记的研究与应用

为能利用抗热应激SCAR标记应用于奶牛抗热应激新品种的选育,随机选取52头高产耐热荷斯坦奶牛和41头高产不耐热荷斯坦奶牛,利用RAPD技术对筛选出的耐热分子标记进行序列分析和SCAR转化,并以S441 SCAR标记对种公牛和核心群的母牛进行检测和分析.结果表明,随机引物S441和S463在高产耐热组中分别扩增了581 bp和680 bp的特异性片段,序列比较显示,前者与KCNN2基因的同源性达90%,后者与NW-001024067.1|BtUn-WGA9442_2同源性达99%;S441 SCAR标记在种牛的检出率为:母牛12.7%[27/213],公牛32.6%[15/46];数据统计分析表明:有无S441 SCAR标记的母牛产奶量差异不显著(P>0.05),但在热应激条件下产奶量下降率差异极显著(P<0.01).研究初步确定S441标记作为荷斯坦奶牛抗热应激分子标记.     

不同品系荷斯坦牛抗热应激能力的研究

随机选择20～24月龄的中国荷斯坦牛、以色列荷斯坦牛(♂)×中国荷斯坦牛(♀)F1、新西兰荷斯坦牛各6头,测定其在热应激条件下生理生化指标的变化情况。结果表明,以色列荷斯坦牛(♂)×中国荷斯坦牛(♀)F1代的直肠温度显著低于中国荷斯坦牛和以列荷斯坦牛(P<0.05),呼吸频率显著低于新西兰荷斯坦牛(P<0.05),其对热应激有较强的适应能力。     

荷斯坦奶牛抗热应激SCAR标记的研究与应用

为能利用抗热应激SCAR标记应用于奶牛抗热应激新品种的选育,随机选取52头高产耐热荷斯坦奶牛和41头高产不耐热荷斯坦奶牛,利用RAPD技术对筛选出的耐热分子标记进行序列分析和SCAR转化,并以S441 SCAR标记对种公牛和核心群的母牛进行检测和分析。结果表明,随机引物S441和S463在高产耐热组中分别扩增了581 bp和680 bp的特异性片段,序列比较显示,前者与KCNN2基因的同源性达90%,后者与NW_001024067.1|BtUn_WGA9442_2同源性达99%;S441 SCAR标记在种牛的检出率为:母牛12.7%[27/213],公牛32.6%[15/46];数据统计分析表明:有无S441 SCAR标记的母牛产奶量差异不显著(P>0.05),但在热应激条件下产奶量下降率差异极显著(P<0.01)。研究初步确定S441标记作为荷斯坦奶牛抗热应激分子标记。     

热应激对荷斯坦牛与荷-娟F1牛抗氧化能力的影响

临床健康的荷斯坦乳牛和荷斯坦牛-娟姗牛杂交F1牛(荷-娟F1)各20头,分为2组,分别于冬季12月份(牛舍日平均气温为10.35℃,THI为47.24)和次年夏季7月份(牛舍日平均气温为38.07℃,THI为82.61)条件下,研究热应激对血清中丙二醛(MDA)含量,总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力,总抗氧化能力(T-AOC)的影响。结果表明:热应激期间荷-娟F1血清中MDA含量显著低于荷斯坦牛(P<0.05);T-SOD活力显著高于荷斯坦牛(P<0.05);T-AOC有升高的趋势但差异不显著(P>0.05)。在非热应激期间,荷-娟F1与荷斯坦牛相比血清中的MDA含量、T-SOD活力和T-AOC均无显著差异(P>0.05)。荷-娟F1和荷斯坦牛在热应激期间的血清中MDA含量、T-SOD活力与非热应激期差异均极显著(P<0.01),荷斯坦牛血清中T-AOC差异显著(P<0.05),而荷-娟F1血清中T-AOC差异不显著(P>0.05)。由此表明,热应激对乳牛的抗氧化能力产生显著的影响;热应激期间荷-娟F1的抗氧化能力高于荷斯坦牛,更能适应热带和亚热带地区高温高湿的气候条件。     

甘肃某奶牛场荷斯坦奶牛抗热应激方法探讨

为探讨荷斯坦奶牛抗热应激最佳方案,选用甘肃某奶牛场部分出现热应激症状的奶牛,将其分为治疗1组与治疗2组,另选择未发生应激的奶牛10头作为正常对照组,其中正常对照组仅采用喷淋和风扇结合方式给奶牛降温,治疗1组在此基础上采用烟酰胺干预,治疗2组采用中草药制剂干预,比较分析各组环境温度、湿度、生理指标、生产性能指标、血液中激素、抗氧化能力及免疫相关指标。与正常对照组相比,治疗1组与治疗2组产奶量、血液中激素、抗氧化能力及免疫指标均在干预前发生显著变化,且经2种方法干预后均出现比较明显恢复(P0.05)。与治疗1组干预后相比较,治疗2组经干预后,产奶量、血清中皮质醇(COR)、三碘甲腺原氨酸(T3)、胰岛素(INS)、热休克蛋白70(Hsp70)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量恢复显著(P0.05)。结果表明,中草药制剂可以显著改善热应激奶牛环境温度、湿度、产奶量、激素水平、抗氧化及免疫能力。     

中度热应激对荷斯坦牛部分血液生化指标的影响

本研究测定了中国荷斯坦牛分别在中度热应激、无热应激状态下的23个血液生化指标,结果表明:在中度热应激(THI=82.06)状态下,试验牛血液的总蛋白(TP)含量、红细胞数(RBC)、平均血红蛋白(MCH)含量、红细胞压积(HCT)与无热应激组差异显著(P＜0.05);血清肌酐(CRE)含量、胆固醇(CHO)含量、淀粉酶(AMY)含量、红细胞平均血红蛋白(MCHC)含量、白细胞数(WBC)、碱性磷酸酶(ALP)6项血液生化指标与无热应激组差异极显著(P＜0.01),其余13个生化指标两组间差异不显著.同时对结果进行了分析讨论,希望能为科学防控奶牛热应激提供参考思路和基础数据.     

青海省荷斯坦牛胚胎移植

青海省民和县种畜场2001年引进了48头秦川牛,于2001年4月～2002年6月进行了荷斯坦奶牛胚胎移植,结果12头秦川牛移植成功,所产荷斯坦牛犊生长发育良好。1材料与方法1．1供体胚胎荷斯坦奶牛7日龄冷冻胚胎,由新疆生物科技研究所提供。     

荷斯坦奶牛耐热性状的RAPD标记研究

为了筛选出耐热荷斯坦奶牛的分子遗传标记，并应用这些分子标记进行高产耐热荷斯坦奶牛的选育。从高产奶牛群中筛选出耐热性状差异显著的10头高产荷斯坦牛作为实验材料，采用RAPD作为分子标记筛选方法。优化奶牛RAPD反应最佳体系，并在154条随机引物中筛选出稳定性好、带型清晰的引物64条。通过RAPD结果，并结合红细胞钾测定结果和生产性能进行分析，确定3个分子标记与奶牛耐热性状相关，并对其进行了测序与分析。     

家蚕微孢子虫蓖麻毒蛋白B链基因RBL463-4的克隆及在毕赤酵母中的表达

基于家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,Nb)基因组中发现的蓖麻毒素B链(ricin B chain)序列数据设计引物,提取感染Nb第8天的家蚕幼虫中肠组织总RNA,利用RT-PCR方法扩增出RBL463-4基因,并将其克隆进毕赤酵母表达载体pPICZα-A中,构建重组酵母表达载体pPIC-R4。重组质粒pPIC-R4经SacⅠ线性化后,电击导入毕赤酵母X33中,利用博莱霉素(zeocin)筛选获得重组酵母X33/RBL463-4。以2%甲醇诱导表达后,经SDS-PAGE、Western blot检测表达产物,结果出现25kD和20kD2种蛋白,其中25kD蛋白与预测融合蛋白大小一致,表明获得了RBL463-4的融合蛋白。研究结果为进一步探究RBL463-4蛋白在家蚕微孢子虫侵染宿主过程中的功能作用奠定了基础。     

滩羊多羔性能的RAPD标记研究

用RAPD技术和混合分离分析 (BSA)方法对双羔家系的 2 6只滩羊和对照系的 2 5只单羔滩羊进行了RAPD检测。发现 :OPB1 7-530、OPB1 9-92 6和OPB2 0 -1 4 2 6三条DNA片段仅出现在多羔家系的母本及多羔母本与单羔父本杂交产生的部分后代中 ,而在对单羔羊的逐个检测中未出现这三条片段。据此可以推断三个DNA分子标记与多羔性能主基因可能相关。作者系统优化组合出了能使滩羊基因组DNA稳定扩增的RAPD体系     

SR92鸡的OPAY02型标记初步研究

测定了SR92A系鸡初生、28、49、75日龄体重,屠体、半净膛、全净膛重等生产性能,同时用OPAY02随机引物对其DNA进行RAPD扩增,分析OPAY02型标记与鸡群早期增重及75日龄屠宰性能之间的关系。结果表明,片段长度为1 660.8bp和2 326.0bp的两条带所代表的位点,在SR92A系中出现A、B、C三种类型,其中C型母鸡75日龄体重超过A型607.4g,初步表明OPAY02C型标记在SR92A系中可作重要遗传标记。     

分子标记技术在寄生虫分类鉴定上的应用

分子标记与形态标记、细胞学标记和生化标记3类遗传标记技术相比,具有直接以DNA的形式表现,在动物的任何生长阶段都可检测,遍布整个基因组,多态性高,检测手段简单迅速,无基因多效性,能够明确辨别等位基因,试验重复性好等优点.目前,在寄生虫分类鉴定上常用的分子标记技术有RFLP,PCR-RFLP,RAPD和AFLP.文章综述了4种分子标记技术的基本原理、主要优缺点以及在寄生虫分类鉴定中的应用情况.     

滩羊公羊特异性RAPD标记的研究

利用混合样本分析方法对滩羊进行了RAPD分析 ,筛选了 6 0种随机引物 ,结果发现OPB17 32 0这一扩增片段只出现在公羊的混合样中 ,进一步对 5 0只滩羊进行逐个检测 ,发现 2 1只公羊均出现了OPB17 32 0这一DNA片段 ,而 2 9只母羊无一出现此条片段 ,据此推断OPB17 32 0为滩羊公羊的特异性RAPD标记。这一发现为滩羊胚胎性别鉴定和Y染色体上基因的研究提供了新的方法和标记参考座位。     

用RAPD标记分析6个品种猪的群体遗传结构

用140个10碱基随机引物对引入品种杜洛克猪、长白猪、大白猪、斯格猪及广东地方猪种蓝塘猪、大花白猪的基因组池DNA进行了RAPD分析，并从扩增产物表现为多态的引物中筛选出9个特异性强的引物进行个体DNA的RAPD分析。结果表明：（1）斯格猪与长白猪、蓝塘猪与大花白猪的相似系数较高，聚类关系较近；而个地方猪种与4个引入猪种之间则相应地较低、较远。在4个引入猪种中，除杜洛克猪外，另3个表现出与华南地方猪种相对较近的亲缘关系。（2）引物L－15、J－13可作为地方猪种与引入猪种区别的标记，I－09可作为猪性别区别的标记。（3）4个引入品种的群体内遗传变异程度普遍低于广东两地方猪种，尤以杜洛克猪群体内遗传变异最小；两地方猪种中，蓝塘猪的群体内遗传变异要小于大花白猪。