丝瓜皮多酚的提取及抗氧化性研究

丝瓜皮是丝瓜食用时的废弃物，含有丰富的多酚等多种活性物质。本文采用单因素结合响应面试验对超声提取丝瓜皮多酚的工艺条件进行优化，并研究其抗氧化性，为丝瓜皮多酚的开发利用提供理论指导。试验结果显示，超声辅助法提取丝瓜皮多酚最优工艺条件是料液比1∶16(g/mL)，提取剂为76%乙醇溶液，提取温度63℃，提取时间30 min，在此条件下丝瓜皮多酚的实际得率为10.13 mg/g。当丝瓜皮多酚浓度为0.6 mg/mL时，对DPPH和羟基自由基的清除率分别为92.8%和88.17%，表明丝瓜皮多酚有较好的抗氧化性，是一种很好的天然抗氧剂。     

喷雾干燥法制备丝瓜水固体粉末及其抑菌作用研究

选择喷雾干燥法将丝瓜水制备成干燥的固体粉末,优选喷雾干燥的最佳工艺参数;选择真菌类的白色念珠菌和黑曲霉,分别以丝瓜水粉末1×10-1、1×10-2和1×10-3 g/mL的稀释液,在25、35和45℃下进行抑菌试验。结果表明:喷雾干燥的最佳工艺参数为:进风温度163℃、进料速度20mL/min、喷雾压力70mm Hg、通针频率10次/min;丝瓜水粉末稀释液浓度为1×10-2g/mL以上时对黑曲霉有较强抑制作用,当浓度达1×10-1 g/mL时,抑菌效果非常显著;对白色念珠菌抑制作用相对较弱,浓度达1×10-1 g/mL时,有较强抑制作用。喷雾干燥法制备丝瓜水的固体粉末工艺简单、易行。     

Study on Preparing Juice of Towd Gourd into Solid Powder by Spray Drying and it's Bactriostasis

选择喷雾干燥法将丝瓜水制备成干燥的固体粉末,优选喷雾干燥的最佳工艺参数；选择真菌类的白色念珠菌和黑曲霉,分别以丝瓜水粉末1×10-1、1×10-2和1×10-3 g/mL的稀释液,在25、35和45℃下进行抑菌试验.结果表明:喷雾干燥的最佳工艺参数为:进风温度163℃、进料速度20 mL/min、喷雾压力70 mm Hg、通针频率10次/min；丝瓜水粉末稀释液浓度为1×10-2g/mL以上时对黑曲霉有较强抑制作用,当浓度达1×10-1 g/mL时,抑菌效果非常显著；对白色念珠菌抑制作用相对较弱,浓度达1×10-1 g/mL时,有较强抑制作用.喷雾干燥法制备丝瓜水的固体粉末工艺简单、易行.     

丝瓜多酚氧化酶的酶学特性初步研究

以邻苯二酚为底物,应用分光光度法对丝瓜多酚氧化酶（PPO）的酶学特性进行研究。结果表明,丝瓜多酚氧化酶的最适反应温度是20 ℃,最适pH值是6.8。反应体系在15～25 ℃、pH值6.4～7.2之间有较高的活性。丝瓜多酚氧化酶的热稳定性试验表明,在沸水中处理3 min,残留的酶活性仅为处理前的4.81 %,而在60 ℃处理3 min,残留的酶活性还有38.08 %。动力学研究结果表明,以邻苯二酚为底物时,米氏方程K_m=0.067 56 mol·L^-1,V_max=0.238 5 A₄₁₀·min^-1。单一的抑制剂VC和硫代硫酸钠对丝瓜多酚氧化酶活性有抑制作用,但有效抑制浓度不同,VC的有效抑制浓度最低,为50.0 mg·L^-1,其次是硫代硫酸钠,为100 mg·L^-1,柠檬酸的抑制效果最弱。     

冬虫夏草菌丝体多酚提取及对3种癌细胞抑制作用研究

以冬虫夏草的菌丝体为原料,提取溶剂为乙醇,采用Folin-Ciocalteu法测定冬虫夏草菌丝体中多酚的含量,目的在于研究乙醇浓度、料液比、提取温度和提取时间对多酚提取率的影响。以单因素试验为前提,以正交试验来指导优化提取参数,测定了所得多酚含量及其对Caco-2结肠癌细胞、Hep G-2肝癌细胞、MCF-7乳腺癌细胞的抑制作用。研究结果表明,在冬虫夏草菌丝体的提取工艺中,最佳的提取工艺条件为:温度为70℃,提取时间60 min,乙醇的浓度70%,料液比(g∶mL)1∶35;冬虫夏草菌丝体中提取的粗多酚对试验中3种癌细胞都表现出一定的抑制作用,当菌丝体粗多酚的浓度为100μg·mL~(-1)时,对3种癌细胞抑制率达到最高,分别为72.12%(Caco-2结肠癌细胞)、83.67%(HepG-2肝癌细胞)和58.78%(MCF-7乳腺癌细胞)。     

Folin-酚法测定水果及其制品中总多酚含量的条件

对Folin-Denis法和Folin-Ciocalteus法测定水果及其制品中总多酚含量进行了研究。Folin-Ciocalteus法比Folin-Denis法更加稳定、灵敏和准确。经过一系列优化实验,提出Folin-Ciocalteus法的最适测定程序为1.0mL样品提取液中依次加入5.0mL水、1mL显色剂和3mL7.5%碳酸钠溶液,摇匀,显色2h,在765nm波长下测定吸光度。采用此程序,苹果、梨、香蕉、柿子、葡萄和葡萄酒等6种试材的没食子酸平均添加回收率为77.2%～112.1%,方法误差为0.8%～5.7%。     

余甘子多酚提取条件优化研究

以水及不同浓度的丙酮、甲醇、乙醇为提取溶剂,提取余甘子的多酚,用Folin-Ciocalteu法测定多酚含量。结果表明,水提取5次、70%丙酮提取3次、80%乙醇提取3次和70%甲醇提取4次的多酚提取率都达到本法的96%以上。其中,70%丙酮提取3次为最佳工艺,所得多酚含量最高,方法简便,容易操作。     

丝瓜伤流量的测定

于2007~2009年,连续3 a采集丝瓜伤流液,测定了丝瓜的伤流量。结果表明:剪断丝瓜茎能采集相当数量的伤流液,无棱丝瓜单株伤流量最高值为1 719 mL,有棱丝瓜单株伤流量最高值为3 666 mL。丝瓜伤流液量不仅与植株生长健壮程度有关,还受其它因素的影响。     

施肥方式对简易钢架拱棚丝瓜长季节栽培的影响

丝瓜栽培中,施肥与搭架是其中两个重要环节。施肥方式对丝瓜产量、商品性、抗性等方面有显著影响;搭架过程的轻简及成本等直接影响丝瓜生产效益。为充分发挥肥料利用率,以兴蔬新美佳丝瓜为供试材料,结合湖南省蔬菜研究所自主开发的简易钢架拱棚进行丝瓜长季节栽培。结果表明,选用本试验最优施肥方式:基肥30 kg/667 m~2,氮磷钾复合肥于定植10 d后追施7.5 kg/667 m~2、始花期追施7.5 kg/667 m~2、始收后于坐果盛期每隔10 d追施5.5 kg/667 m~2,能显著提高丝瓜产量及商品性,节省人工及架材成本,同时对环境保护也有积极影响。     

早春温室套种黄瓜品种比较

为了筛选出适宜早春日光温室套作栽培的黄瓜品种,以津春2号、津瑞216、翠龙和白黄瓜为试材,套作栽培丝瓜。试验设黄瓜套种单行丝瓜和黄瓜单作两种栽培方式。结果表明,在套作栽培丝瓜条件下,4个黄瓜品种的生长、产量和发病情况差异显著。其中华北型黄瓜要显著好于华南型黄瓜,以津春2号黄瓜的产量高,效益好,抗病性较强,土地当量比最高;通过隶属函数法综合分析来看,在套作丝瓜栽培中,华北型黄瓜总的隶属函数值明显高于华南型黄瓜,其中以津春2号总的隶属函数值最大。因此,在本试验条件下,津春2号最适合进行套作栽培。     

Antioxidant and serum lipid lowering effects of luffa cylindrical on experimental hyperlipidemia mice

AIM: To observe the antioxidation and the serum lipid lowing effects of polyphenols in luffa cylindrical on experimental hyperlipidemia mice. METHODS: Acetone was used to extract polyphenols from luffa cylindrical. The content of polyphenols was determined by Folin-ciocalteau method. The inhibitory efficacy of the extracts from luffa cylindrical to the production of OH· free radical was measured. Kunming mice were used to establish the hyperlipidemia model by feeding high fat diet. The freeze-dried fresh luffa cylindricals was added to the treated animals, xuezikang was also used as a positive control. After feeding high-fat food for 14 days, serum were collected to measure the total cholesterol (TC), triglyceride (TG), low density lipoprotein cholesterol (LDL-C) and superoxidedismutase (SOD). The liver tissue was also collected for determining malonaldehyde (MDA) content. RESULTS: (1) Content of polyphenols in fresh luffa cylindrical was （0.3±0.1）g /kg. (2) The polyphenol extracts from fresh luffa cylindrical had a strong efficacy to inhibit the production of OH· free radicals. (3) The trend of body weight gain in groups LC1 (low dosage luffa cylindrical) and LC2 (high dosage luffa cylindrical) became slow down obviously, compared with that in group HPL (high-lipid model). (4) The levels of TC (4.19±0.37)mmol/L and LDL-C (2.77±0.79)mmol/L in group LC1, TC (3.56±0.55)mmol/L and LDL-C (2.34±0.41)mmol/L in group LC2, TC (4.59±0.96)mmol/L and LDL-C (3.25±0.67)mmol/L in group PC (positive control) were all lower than those in group HPL(P<0.01), which the decrease in the levels of TC and LDL-C in group LC2 was the most obvious. (5) SOD levels in the serum of mice in groups LC1 and LC2 were (337.00±29.73)U/mL and (349.00±9.99)U/mL respectively, which were higher than those in groups HPL and blank control, therein the SOD level in group LC2 increased obviously(P<0.01) compared with group HPL. The MDA levels in liver tissue in group LC2 was lower than those in control. CONCLUSION: Polyphenols in the luffa cylindrical are comparatively strong antioxidant. They effectively decrease the liver index and serum lipid in experimental mice.     

热水及加钙处理对冬枣果实货架期间衰老相关生理的影响

 用50～55℃热水处理冬枣6～8 min能显著抑制货架期间其相对电导率、丙二醛含量、褐变指数的上升以及硬度下降, 抑制多酚氧化酶、外切和内切多聚半乳糖醛酸酶活性上升, 延长货架期。热水中加入1% CaCl₂ 可进一步提高处理效果, 但对多酚氧化酶和褐变指数影响不大。     

外源化感物质香草酸对辣椒幼苗土壤酶活性及土壤养分含量的影响

以辣椒品种二荆条为试材,研究了外源化感物质香草酸对辣椒幼苗根际土壤酶活性及土壤养分含量的影响。结果表明 ：4种土壤酶活性均随着香草酸浓度增加而呈增大的趋势,其中影响最大的是多酚氧化酶,在香草酸浓度为1×10^-7 mol·L^-1 时,其活性较对照显著增加了13.3 %;土壤有机质、有效磷及速效钾含量均随着香草酸浓度的增加而呈降低的趋势,而土壤 硝态氮含量却呈增加的趋势;4种土壤酶活性均与土壤有机质含量、有效磷含量及速效钾含量呈极显著负相关,而与土壤硝态 氮含量呈显著或极显著正相关。     

利用SSR分子标记鉴定“中丝2号”丝瓜杂交种纯度

为了建立一套丝瓜种子纯度的快速鉴定方法，采用SSR分子标记对丝瓜杂交一代品种“中丝2号”的纯度进行鉴定，利用24对SSR引物对“中丝2号”丝瓜及其亲本的DNA进行扩增。结果表明：从24对引物中筛选出1对特异性引物ZS-SSR24，能够分别在“中丝2号”母本和父本中扩增出特异的2条多态性条带，大小分别为220 bp和250 bp,F1继承双亲的特异性条带，利用此标记能够鉴定出混在F1中的父本或母本。经田间鉴定，供试丝瓜种子纯度为91.3%，这与分子标记的结果完全吻合，故该标记能够用于“中丝2号”丝瓜品种的纯度鉴定。     

外源多胺对核桃雌雄花芽分化及叶片内源多胺含量的影响

 以‘辽宁1号’核桃为试材，研究了外源多胺对雌雄花芽分化及叶片内源多胺含量的影响。两年试验结果表明，喷施1×10^-3mol·L^-1和1×10^-4mol·L^-1的腐胺(Put)和亚精胺(Spd)能够显著增加雌花数量，提高雌雄花芽比例。在雌花芽生理分化期，芽内Put、Spd和精胺(Spm)含量升高并达高峰，叶片内Put含量累积并达高峰，而Spd、Spm含量变化不大。1×10^-3mol·L 的Put和Spd处理可提高叶片内源多胺含量，其中内源Put、Spd的含量升高早于内源Spm含量的升高。     

超高效液相色谱法分析丝瓜酚类物质组分及其含量

建立超高效液相色谱快速测定丝瓜中酚类物质组分及其含量的方法,为丝瓜酶促褐变的后续研究提供技术支持。液相色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为甲醇(A)/0.3%乙酸水溶液(B),柱温32℃,进样量2μL,流速为0.25 m L·min~(-1)。采用梯度洗脱,洗脱程序0~0.5 min,95%B;0.5~17.5 min,95%~67.5%B;17.5~18 min,67.5%~95%B。检测波长选取283 nm。14种酚类化合物标准品在18 min内完全分离,样品中检测出13种酚酸。线性范围在0.05~4mg·L-1,检出限(S/N=3)为0.004~0.049 mg·L~(-1),决定系数均大于0.999,精密度、重复性、稳定性相对标准偏差均小于5%。平均回收率在95.70%~106.89%,相对标准偏差在0.32%~4.71%。龙胆酸为丝瓜样品中主要酚酸,其次是绿原酸、多巴胺、L–酪氨酸,再次是焦性没食子酸、原儿茶酸、香草酸、儿茶酚、表儿茶酸、对羟基苯甲酸、丁香酸、4–甲基儿茶酚、对香豆酸。     

山茶花红色素的提取及其性质初探

 初步探索了山茶花红色素的提取条件和理化性质, 结果表明, 用料液比1∶10 ( g/mL) 、pH 1(10%盐酸调) 的95%乙醇作提取剂, 在80℃恒温提取6 h, 提取效率较好。山茶花红色素属花色素苷类,pH值对色素影响明显, 在酸性条件下色泽具有热稳定性。光照能加快色素降解, 但与紫外光无关。金属离子Na⁺ 、Ca^{2 +} 、A1^{3 +} 、Cu^{2 +} 、Zn^{2 +}对色泽无影响, Fe^{3 +} 、Pb^{2 +}有不良影响。色素的抗氧化能力较差, 耐还原性较好。蔗糖、葡葡糖和盐等添加剂对色素无影响。     

茄子果实中α-茄碱提取方法的研究

 以茄子品种'辽茄七号'果实为试验材料,设计了单因素试验和正交试验,采用高效液相色谱法对不同提取方式、不同超声波提取条件下茄子果皮和果肉中α-茄碱的含量进行测定。结果表明：采用超声波提取法时,茄子果实中α-茄碱的提取量最高,提取前后α-茄碱性质保持不变。优化的超声波提取条件为：以料液比为1:10的70%甲醇为提取剂,在50 ℃下提取60 min。测得果皮中α-茄碱平均提取量为0.107 mg·g^-1,相对标准偏差 (RSD) 为1.80%（n=5）,果肉中α-茄碱平均提取量为0.620 mg·g^-1,RSD为1.29%（n=5）,平均回收率为98.0%,RSD为1.23%（n=3）,说明该方法的提取率和精密度高、稳定性好,合理可行。     

梨组织中苹果褪绿叶斑病毒的原位RT-PCR检测

 为了建立梨树苹果褪绿叶斑病毒原位RT-PCR检测技术, 用已知带有苹果褪绿叶斑病毒的库尔勒香梨和无病毒实生苗叶片为材料, 利用D IG标记, 研究了香梨病毒的叶片石蜡切片IS-RT-PCR检测技术。包括AMV逆转录酶、dNTPs、RNasin及互补引物浓度对cDNA合成的影响, 退火温度、Taq DNA聚合酶、Mg²⁺ 、引物浓度及循环次数对原位PCR效果的影响。结果表明: RNasin的用量大于0.2 U·μL^-1时,信号强度随着RNasin量的加大而增强; 只有当dNTPs浓度达1.0 mmol·L^-1时才能生成一定量的cDNA;AMV浓度在0.3～0.5 U·μL^-1均可进行正常的逆转录, 而且在该范围内产物的量随AMV浓度提高而增多; 引物浓度达到0.9μmol·L^-1以上时才能进行有效的逆转录, 并且生成的cDNA的量随引物浓度增大而增加。原位扩增ACLSV的cDNA适合退火温度为56℃。循环20～30次可出现较强的蓝色信号, 引物浓度在0.8～1.2μmol·L^-1时显色较好; Taq酶浓度为20 U·mL^-1以上, 均显示较深的蓝色; Mg^{2 +}浓度为1.5mmol·L^-1就可满足原位PCR所需。获得了苹果褪绿叶斑病毒的原位PCR优化检测体系, 利用建立的优化程序对香梨样品进行了检测验证, 取得了很好效果。