猪传染性胃肠炎的快速诊断——用反向间接血凝试验检测猪传染性胃肠炎的抗原

本试验用反向间接血凝试验检测人工感染传染性胃肠炎病猪的抗原。结果表明,以小肠内容物和生前拉出的粪水作为检验材料较为适宜;滴度一般为1:128～1:2048;检验时间,一般2～3小时。以小肠粘膜作检验,滴度虽相当高,但非特异性凝集较多。 血球致敏条件,采用1％双醛固定绵羊红血球悬液。pH4.0醋酸缓冲液稀释。每毫升血球悬液含IgG80～160微克。在37℃致敏3～4小时最为适宜。致敏血球在4℃可保存198～227天。血凝试验结果判断标准,应以血清中和后抑制4个凝集孔以上,作为阳性。检出率为42/47(89.36％),以其他致敏血球作血凝试验和其他血清作抑制试验作比较,证明本试验的特异性相当可靠。 检测猪传染性胃肠炎的抗原,一般采用细胞培养和荧光抗体技术。前者比较困难,要传几代,才能获得细胞致病效应,且往往不上细胞。后者则适用于早期急性病例,在发病后期,尤其在上皮再生时期不易检出。采用间接血凝试验,国外仅见用于检测抗体,用作抗原检验,中外文献尚未见报导。本试验用反向间接血凝试验,检测人工感染猪的小肠粘膜、小肠内容物及粪水中的抗原,获得初步结果。     

“猪瘟血凝抗原”试用简报

<正> 猪瘟间接血凝抗原试剂简称“猪瘟血凝抗原,”由醛化血球吸附纯化抗原制成,可用于检测猪瘟抗体与抗原。抗原定性或定量均用血凝抑制试验。抗体定性,以两滴试剂能将检料分为性质不同的三个等级:保护性阳性、无保护阳性和阴性。抗体定量用常规倍比稀释梯度凝集法,可查猪、兔血清效价,     

猪瘟生前快速诊断试验

采取人工感染石门系猪瘟强毒病猪和自然感染可疑猪瘟病猪的粪便、尿液和直肠粘膜刮取物作为检验材料,并设猪瘟标准抗原,健康猪的粪便、尿液和直肠粘膜刮取物作对照,应用免疫扩散试验共检测人工感染石门系猜瘟病毒病猪2头,从某农场356头自然感染可疑猪瘟病猪中抽检12头,某猪舍18头可疑猪瘟病猪中抽检6头,共检20头。其结果:人工感染的     

猪瘟荧光抗体的制造和在人工感染猪瘟病例的应用

制成了高质量的猪瘟荧光抗体。用该荧光抗体的128倍稀释液,对猪瘟强毒人工感染猪扁桃体冰冻切片进行染色,隐窝上皮细胞胞浆内可出现特异性荧光。用32倍稀释液对猪瘟强毒人工感染猪的扁桃体、脾脏、淋巴结、腮腺、胰腺、肝脏、肾脏冰冻切片染色,可出现明亮的特异性荧光细胞,此种特异性荧光可被猪瘟阳性血清抑制,但不能被阴性血清抑制。该荧光抗体不能使健康猪、冻死猪和传染性胃肠炎病猪的同种组织冰冻切片出现特异性荧光细胞。     

应用SPA协同凝集快速诊断猪瘟的研究

本试验用抗猪瘟血清标记金黄色葡萄球菌№1800株制成 SPA-IgG 诊断液,采用玻片协同凝集或微量协同凝集试验用于猪瘟诊断。SPA-IgG 液仅与猪瘟病猪脾淋悬液呈阳性反应,而与健猪及其它非猪瘟猪组织液均呈阴性反应。对55份疑似病猪用 SPA 法和荧光抗体法对比,阳性符合率达95%,阴性符合率为91. 6%。该方法设备简单、方法简便,便于基层应用。     

猪传染性水疱病与口蹄疫的快速鉴别诊断——用反向间接血凝和血凝抑制试验检测抗原与抗体

用反向间接血凝试验,检测猪水疱病类病料(水疱皮或水疱液)共18个样品,其中检出:9个口蹄疫O型抗原,6个猪传染性水疱病抗原,3个未能检出.以2日龄乳鼠保护试验作比较,结果相符合.抽样作补体结合反应试验,结果也相符.间接血凝抑制试验,可以测出康复或免疫血清中的抗体.口蹄疫O型康复血清滴度一般较低(1∶20至1∶160),高免血清较高,有的滴度可达1∶5120.间接血凝试验在3～7小时内,可同时作出口蹄疫或猪传染性水疱病的鉴别诊断,快速、简便、特异性强,可作为该两病的流行病学调查之用.     

猪传染性水疱病的快速诊断——用反向间接血凝及血凝抑制试验检测猪传染性水疱病抗原及抗体

以猪传染性水疱病高免血清,提取免疫球蛋白G(IgG),致敏丙酮醛、甲醛固定的绵羊红血球,作反向间接血凝试验,可以检测水疤病的抗原,作间接血凝抑制试验,可以检测该病的抗体。根据对保存的及新近收到的共7个毒株(计6个水疱皮、3个水疱液、5个鼠毒、1个细胞毒以及4个高免血清、4个康复血清)的试验结果看来,均与小白鼠作中和试验结果相符合。送检材料,如为水疤液或康复血清,可在3—4小时内得出结果;如为水疤皮,则需6～7小时,因水疤皮必须磨碎、浸泡一定时间。但较之以小白鼠作中和试验(约需一星期)要快得多了。 本试验对几年来收集的各地毒株(江苏省的口岸毒、无锡毒、下关毒、山东省的莱阳毒、滕县毒、上海龙华地鼠毒、四川省资阳细胞毒)材料,均可检出抗原,用口岸毒猪39代或资阳细胞毒,可以为4种高免血清以及来自山东潍坊、辽宁沈阳等地病猪的康复血清所中和,从而测出抗体。血凝抑制滴度,在高允血清与康复血清之间,有明显的差别。以健康猪蹄冠皮、健康乳鼠组织作对照,均为阴性;以口蹄疫O型血清作为血凝抑制试验对照,也为阴性。说明本试验有可靠的特异性。 致敏血球在4°C至少可保存2个月,更长时间尚待试验。 本试验简单易行,快速敏感,特异性可靠,可作为临床诊断及流行病学调查用。     

应用微粒凝集反应法诊断猪支原体性肺炎

目前国内外曾使用补体结合试验、微量补体结合试验、间接免疫荧光抗体试验、凝胶扩散试验、结合的免疫酶吸附试验、明胶电泳试验、生长沉淀 试验和凝集试验等血清学方法检出病猪血清中猪肺炎支原体的抗体。应用凝集试验诊断猪支原体性肺炎因猪肺炎支原体生长条件要求苛刻,制备抗原相当麻烦,肉眼不易看出凝集颗粒,难以分辨得出病猪和健猪。我们于1975年曾做过试管凝集试验,仅     

猪瘟并发沙门氏菌病的诊断与防治

对临床上的病猪采取微生物学、病理学和免疫酶染色等技术进行了全面检查。结果表明:病猪淋巴结肿大、出血,脾脏的边缘及尖端有出血性梗死,回盲口有大量钮扣状溃疡斑;盲肠、结肠和直肠黏膜出血、肿胀,散在分布有大量灰白色坏死灶;脾脏切面触印片上检出大量沙门氏杆菌;肝脏切片上检出许多副伤寒结节和渗出性结节;猪瘟酶标抗体染色的淋巴结和脾脏切片,呈阳性反应。因此对疾病做出了猪瘟并发沙门氏菌病的诊断,并及时采取了有效地防制措施,迅速控制了疫情。     

猪瘟并发沙门氏菌病的诊断与防治

对临床上的病猪采取微生物学、病理学和免疫酶染色等技术进行了全面检查。结果表明：病猪淋巴结肿大、出血,脾脏的边缘及尖端有出血性梗死,回盲口有大量钮扣状溃疡斑;盲肠、结肠和直肠黏膜出血、肿胀,散在分布有大量灰白色坏死灶;脾脏切面触印片上检出大量沙门氏杆菌;肝脏切片上检出许多副伤寒结节和渗出性结节;猪瘟酶标抗体染色的淋巴结和脾脏切片,呈阳性反应。因此对疾病做出了猪瘟并发沙门氏菌病的诊断,并及时采取了有效地防制措施,迅速控制了疫情。     

猪瘟继发副猪嗜血杆菌病的诊断与防治

对临床上的5例病猪采取病理解剖学、微生物学和免疫酶染色技术进行了全面检查。结果表明:病猪胸腹腔和心包腔积液,胸膜、心包膜和腹膜表面均附着有数量不等的纤维素性渗出物,严重者可使肺脏与胸壁发生粘连,心脏与心包膜粘连;心脏表面附着大量纤维素性渗出物,形成绒毛心;淋巴结肿大、出血,脾脏的边缘及尖端有出血性梗死,回盲口有大量钮扣状溃疡斑;心包液涂片上检出大量两极浓染的副猪嗜血杆菌;猪瘟酶标抗体染色的淋巴结和脾脏切片呈阳性反应;从而对疾病做出了猪瘟继发副猪嗜血杆菌病的诊断,及时采取有效地治疗和预防措施,迅速控制了疫情。     

应用荧光标记葡萄球菌A蛋白(FITC-SPA)间接染色法对猪瘟的快速诊断(初报)

本试验对病理剖检定为猪瘟的30头份和定为猪丹毒一头份病理组织(淋巴结、扁桃体和肝脏)利用FITC-SPA标记物进行间接染色试验复诊,结果25头份材料呈阳性反应.6头份材料(包括一头猪丹毒材料)呈阴性反应。同时对31头份材料进行平行试验检查非特异性荧光反应,结果全部呈阴性反应。另外从屠宰场肉尸中采集了10头份正常猪的淋巴结、扁桃体和肾脏作阴性对照材料,进行试验也全部呈阴性反应。     

非洲猪瘟防控明白纸

<正>如何识别非洲猪瘟猪群符合下述流行病学、临床症状、剖检症状标准之一的,判定为临床可疑非洲猪瘟疫情。1.流行病学标准(已经规范免疫猪瘟、高致病性猪蓝耳病等疫苗,但猪群发病率病死率仍然较高的;饲喂泔水的猪群出现高发病率高死亡率的;调入猪群15天内出现高发病率高死亡率的)。2.临床症状(发病率死亡率较高的;皮肤发红或发紫的;出现高热或结膜炎症状的;出现腹泻或症状的;出现运动失调症状的)。3.剖检症状(脾脏异常肿大至两倍甚至以上、易碎;脾脏有出血性梗死;下颌淋巴结出血;腹腔淋巴结出血)。     

规模化猪场常见猪病及防治策略

<正>猪场在养殖猪的过程中常见疾病较多,例如猪瘟、寄生虫、猪细小病毒、猪丹毒、仔猪白痢、仔猪黄痢等。笔者通过对猪瘟、寄生虫、猪丹毒三种疾病进行详细分析,以此为例探索猪病的防治工作。1规模化猪场常见猪病1.1猪瘟猪瘟病毒多存于猪的淋巴结、血液、脾脏中,主要是通过病猪或带病毒猪的粪便、尿液或其他分泌物进行传染,常见的有呼吸道传染和消化道传染。猪瘟具有较高的传染性,发病无明显季节性。病猪身体上的     

间接红细胞凝集试验在化脓棒状杆菌所致绵羊“肺脓肿病”诊断中应用的初步探讨

我们用化脓棒状杆菌反复冻融裂解制备的无菌体细胞抗原致敏的鞣化甲醛化和戊二醛化红细胞(在试验过程中发现甲醛化红细胞非特异性反应较戊二醛化红细胞为大,故在第2次试验及以后的试验中均采用致敏的戊二醛化红细胞)与从于田羊场疫群(“肺脓肿病”)羊中采回的绵羊血清(—20℃冰箱内保存)99份,健康羊群羊血清20份,免疫兔(化脓棒状杆菌菌体类毒素联合苗免疫)血清5份作间接血凝试验2次。发现疫群血凝抗体滴度分别在1:160—1:2560和0—5120之间(1:2560和1:5120以上稀释度来作测定),绝大多数羊(81.5％和83.19)血清学滴度在1:1280以上。接种疫苗2次并攻强毒后存活的兔免疫血清滴度均在1:1280以上(高于此水平的滴度未予测定)。90％健康羊血清滴度在1:40以下。看来本试验有高度的敏感性。试验过程中发现许多血清样品不同稀释度之间的凝集程度缺乏明显的差别,可能与非特异性凝集现象存在有关。为了消除这些现象作了四种稀释剂(0.2％明胶盐水、0.2％阿拉伯胶盐水、1:2500牛血清白蛋白盐水、1％兔血清盐水)消除非特异性作用的比较试验,发现以明胶和阿拉伯胶盐水消除非特异性凝集作用的效果最好,牛血清白蛋盐水次之,兔血清盐水最差。稀释剂以随用随配为宜,未用完的稀释剂即使在-20℃冰箱中保存,效果仍大大降低。根据本试验初步成果,我们建议在用间接血凝试验作化脓棒状杆菌病正式检疫时,判定标准可暂定为:血清抗体滴度1:20者为阳性,1:40者为可疑,1:80以上者为阳性。参照国外报导,Shigidi(1979)指出间接血凝在绵羊棒状杆菌传染的血清学诊断方法中具有胜过其他试验(试管凝集,凝胶扩散,抗溶血抑制、补体结合等试验)的优点。因之,本试验对化脓棒杆菌所致的肺脓肿的诊断在目前仍不失之为一种较好的血清学诊断方法。     

种猪场猪瘟净化试验

猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种以高热、出血为主要特征的烈性、高度接触性传染病,当前猪瘟的发生表现为种猪的繁殖障碍、持续感染。要从源头上控制规模化猪场的猪瘟疫情,则必须对种猪群进行净化。采用强化免疫、抗体检测、病原检测、淘汰带毒病猪,结合生物安全等管理措施,2014年在某种猪场分2次进行了净化试验。通过对230头母猪、46头公猪、619头后备母猪实施免疫检测净化,共淘汰母猪35头、公猪6头、后备母猪365头,使试验猪群第4次和第5次抗体检测合格率达到100%。     

浅析超剂量猪瘟疫苗的应用试验

正在猪瘟预防过程中疫苗发挥着十分重要的作用。通常情况来讲,在对猪进行疫苗注射时会严格依据注射说明操作,无论是其次数还是剂量,但经有关实践证明对猪进行一定程度的超剂量注射会取得更好的治疗效果。本文以某饲养场中的67头病猪为试验对象,针对注射超剂量猪瘟疫苗试验进行简要分析。1.影响猪瘟预防的主要因素     

以二抗为基底猪瘟抗体ELISA检测方法建立

为验证以鼠抗猪IgG为基底,用辣根过氧化物酶标记猪瘟E2蛋白,建立的猪瘟抗体ELISA检测方法的可行性,对影响ELISA试验结果的主要条件进行优化。结果表明,鼠抗猪IgG最佳包被浓度为1μg/ml,酶标猪瘟E2蛋白最佳稀释度为1:500,最佳封闭液为1%BSA。建立的方法对猪蓝耳病阳性血清、猪圆环病阳性血清、猪亚洲1型口蹄疫阳性血清、猪O型口蹄疫阳性血清均无交叉反应。通过对50份试验样本的检测,对比该方法与商品化IDEXX的猪瘟病毒抗体检测试剂盒的符合性,试验结果表明,该方法检测猪瘟抗体的相对敏感性为76.9%(30/39),相对特异性为90%(45/50)。     

猪瘟继发细菌性感染的诊断

１９９９年５月，惠水及印江县养猪场爆发一种以急性经过、高热稽留、死亡率高、淋巴结及肾脾出血性变化显著、盲肠末端及回盲瓣附近有钮扣状溃疡等为特征的传染病。为快速、准确地对病猪进行诊断，以提出有效的防治措施，通过流行病学调查、病理剖检、病毒抗原测定及细菌学检验，确诊本次疫病为猪瘟继发细菌感染所致。其中猪瘟病毒荧光抗原的测定结果表明，肠系膜淋巴结、脾和肾的特异性荧光斑点且多亮度最强；肝的特异性荧光较弱。     

猪瘟兔化弱毒苗在免疫猪体内动态分布研究

研究猪瘟兔化弱毒苗在免疫猪体内的动态分布,在注射猪瘟兔化弱毒苗后第1、7、14、21、28、35、63天采集免疫猪的脾、肾、肺、腹股沟淋巴结、扁桃体及血清,应用免疫组化、RT-PCR、猪瘟抗原、抗体检测试剂盒等方法,检测分析猪瘟病毒在猪体内的动态分布、存留时间及抗体水平。结果表明:应用免疫组化方法于免疫后第7~14天在脾脏、第7~21天在腹股沟淋巴结、第14~28天在肾脏组织分别检测到猪瘟病毒。在免疫后第7天检测到猪瘟病毒抗体,随后抗体水平持续上升至免疫后第63天;病毒抗原的分布与RT-PCR检测结果吻合。结论:猪瘟兔化弱毒苗在猪体内主要分布器官为脾、肾和腹股沟淋巴结,免疫后第7天脾和腹股沟淋巴结最早检测到猪瘟病毒,猪瘟病毒在肾停留时间可至免疫后第28天。实验过程中未在扁桃体、肺、外周血检测到猪瘟病毒。