微流控芯片技术在微生物检测中的应用

微流控芯片是一项以芯片为基础,结合化学、物理学、生物学等多学科形成的技术平台,能够在一个芯片上实现样品制备、反应、分离、检测等流程,具有高通量、高效率和易操作的特点。随着材料科学和纳米技术的发展,该项技术得到迅速发展并应用于化学分析、微生物检测等,尤其是在微生物检测和分析方面发挥着重要作用,并逐步产生了商品化的微流控芯片。微流控芯片因具有小型化、节约试剂、速度快、集成化程度高等优点,适用于处理突发公共卫生事件,但目前在动物疫病检测中的应用还很少见。本文对微流控芯片的技术原理、结构及其在微生物检测中的应用进行综述,以期为动物疫病的高通量检测提供借鉴。     

五种重要犬病毒微流控芯片检测方法的建立及应用

狂犬病毒、伪狂犬病毒、犬瘟热病毒、犬细小病毒和犬冠状病毒是引起犬科动物重要传染病的5种病毒,严重威胁着犬科动物的健康,是出入境犬科动物重点筛查的致病因子。为提升口岸进出境犬科动物检疫工作效率,建立了上述5种病毒微流控芯片检测方法。在建立5种病毒环等温扩增检测技术(loop mediated isothermal amplification,LAMP)的基础上,将这些LAMP检测体系固化在同一块塑料芯片上,制备了同步高通量快速检测微流控芯片,并将其应用于临床检测。结果显示:微流控芯片检测方法具有良好的特异性,含有目的基因的阳性样本仅在芯片上相应病毒反应槽出现显著扩增,而其他病毒反应槽未出现扩增,彼此无交叉反应;微流控芯片的敏感性与LAMP方法一致;通过检测不同时期收集的感染犬瘟热病毒、犬细小病毒和犬冠状病毒临床样本,证实建立的微流控芯片检测方法具有良好的稳定性和可靠性。与现有核酸检测方法相比,微流控芯片可以在受试核酸上样40 min内完成上述5种犬病毒的快速筛查,从而满足进出境犬科动物快速检疫的需求。     

微流控芯片检测方法及其在畜牧兽医上的应用

微流控芯片是以微米尺度对被检测流体样品进行操作为特点的技术,与传统的检测方法相比,具有样品消耗少、速度快、效率高等优势。近年来,基于该技术已开发出很多方便快捷的检测方法,例如毛细管电泳、质谱检测、免疫检测、电化学检测、光学检测等。随着畜牧养殖业的规模化和集约化发展,动物疾病对畜牧业的影响日益加大。因此,早期快速检测动物疫病病原具有重要的社会效益和经济价值。论文就几种常用微流控芯片检测方法及其在畜牧兽医领域的应用进行综述,以期为动物疾病诊断提供参考。     

微流控肠道芯片研究进展

近年来,微流控技术的出现为生物医学研究提供了新的体外试验平台。动物肠道与机体免疫、营养代谢等生理活动密切相关,但目前肠道功能研究受限于单一体外细胞培养技术。微流控肠道芯片的研发拓展了肠道功能研究方法与技术手段,成为当前研究热点和前沿。本文概述了微流控技术和肠道芯片的发展历程与研究进展,阐述了微流控肠道芯片的结构与功能,比较了其较传统体外模型的优势,包括高度仿生性、高效性和精准可重复性等,并通过具体研究实例阐明了微流控肠道芯片在医学及营养学领域的应用,最后展望了微流控肠道芯片在动物营养学研究中的开发应用前景。     

微流控芯片在活力精子筛选及体外受精中应用的研究进展

目前,微流控芯片在辅助繁殖领域中的应用逐步深入,促进了辅助繁殖技术的发展。通过微流控芯片筛选出高活力、低损伤的精子,可解决体外受精多精子入卵等问题。文章对微流控芯片在活力精子筛选及体外受精中应用的研究进展进行了简要概述。     

宁夏规模牧场犊牛病毒性腹泻流行病学调查

为调查宁夏回族自治区（简称“宁夏”）银川市规模牧场犊牛病毒性腹泻病毒（BVDV）感染情况,本试验采集某牧场6月龄内犊牛血液和粪便拭子各69份,采用商品化BVDV抗原检测试剂盒结合RTPCR检测及微流控芯片检测技术等进行检测。结果表明,商品化BVDV抗原检测、RT-PCR核酸检测方法及微流控芯片检测结果一致,阳性率均为7.24%。结果表明,该牛场BVDV感染率较高,为了做好该病的净化,应加强全群牛只的检测,以防止该病在此牧场进一步蔓延。     

饲料中动物源性成分微流控检测芯片的研究

试验以"LAMP+微流控"技术为基础,开发饲料动物源性成分检测芯片。针对牛、羊、猪、鸡的16srRNA靶序列,根据LAMP引物设计软件进行4种肉类LAMP引物设计。在LAMP优化试验、芯片优化测试、特异性验证试验和芯片应用测试中,进行最佳引物筛选测试和特异性测试。结果显示,筛选出的4种肉类最佳引物特异性强,最佳反应温度为65℃。芯片特异性验证试验的归一化荧光曲线显示,试验结果准确、特异性稳定。对饲料市场购买的16份样本中检测出的动物源性成分,采用中华人民共和国农业行业标准验证,符合率100%。微流控检测芯片的开发与应用为饲料中动物源性成分检测提供新方法,为饲料产品质量安全提供保障。     

我国农药残留检测有了新手段

“小分子有害物质的微流控芯片免疫传感检测技术研究”课题日前在京通过专家委员会鉴定．标志着我国农药、兽药和添加剂等小分子有害物质的残留检测有了新手段。专家鉴定委员会一致认为．由中国检验检疫科学研究院、北京航天医学工程研究所和深圳检验检疫局联合承担的该项课题研究，分别以兽药盐酸克伦特罗和农药甲基对硫磷为小分子有害物质代表，根据表面等离子体谐振分析原理。在微流控芯片上成功实现了免疫传感技术检测。检测方法不需标记物，试剂消耗少，检测周期短，具有特异性强、稳定性好和灵敏度高等优点，是色谱一质谱分析方法的重要补充。此外，课题组研制成功的便携式微流控芯片免疫传感检测仪，非常适用于对农药、兽药、添加剂等各类小分子有害物质的现场快速筛查，填补了我国检验检疫等相关领域此类检测设备的空白。研究成果总体为国际先进水平，部分成果更是达到了国际领先水平。     

早期胚胎体外培养微流控芯片的制备及初步应用

利用微流控芯片模拟输卵管微环境,探讨物理性刺激对早期胚胎发育的影响,为解决早期胚胎体外囊胚发育率较低、胚胎质量差的问题提供帮助。本实验采用一次铸造成型制备微流控芯片培养装置,并应用培养装置对小鼠1-细胞期胚胎进行培养,观察胚胎体外发育率。结果表明,利用微流控芯片培养组与对照组2相比,2-细胞胚胎发育率差异不显著(P0.05),但是,在8-细胞胚胎发育率、桑葚胚发育率和囊胚发育率都差异显著(P0.05)。此外,囊胚内总细胞数显著提高(P0.05)。结论:一次铸造成型微流控芯片制作方法简便易行且培养液不易外漏,这种培养装置能显著提高小鼠早期胚胎体外囊胚发育率和胚胎的质量。     

全自动薄膜芯片法快速鉴定食品中3种牛源性成分

为建立动物性食品中三种牛源性成分的检测体系,采用自动微流控薄膜芯片方法进行了研究。先将3种牛特定的DNA探针,固定于尼龙薄膜上,放入自动微流控薄膜芯片装置的微反应池。然后将生物素标记的含有靶DNA片段的PCR产物通过微流控系统模块加入反应池。PCR产物通过尼龙薄膜,经DNA互补作用捕获靶DNA片段,信号通过链霉亲和素连接碱性磷酸酶级联放大后显色出来。试验证明,本方法对牛源性成分检测的敏感性达到了1%的质量百分比,其稳定性和一致性可以满足实际应用的要求。     

宠物疫病防控的隐患与对策

宠物疫病严重影响宠物的生命安全,并且会对人体健康及公共卫生安全产生较大的威胁。本文在阐述宠物疫病类型及疫病防控重要性的基础上,分析我国宠物疫病防控现状和隐患问题,并从体系建设、源头治理、疫病预防、免疫监测和疫病检测、其他手段应用五个层面,提出宠物疫病防控的具体对策,期望有助于提升宠物疫病防控效果,确保宠物健康,创造良好的人宠生活环境。     

微流控芯片环介导等温扩增技术检测3种猪圆环病毒

为建立快速区分3种猪圆环病毒（PCV2、PCV3和PCV4）的现场检测方法,采用微流控芯片环介导等温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）,收集3种猪圆环病毒临床阳性样本进行核酸提取,与市场上3种猪圆环病毒荧光探针法检测试剂盒进行灵敏度、特异性和重复性同步比对。结果显示：微流控芯片LAMP法在3种猪圆环病毒联检测试中具有非常高的灵敏度,可以在30 min内,实现不低于荧光定量PCR法的敏感性;与非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒和猪细小病毒临床阳性样本均无交叉反应,特异性好;测试3种猪圆环病毒重复性Ct值变异系数（CV）均在2%以下,稳定性好。结果表明：3种猪圆环病毒微流控芯片快速联检技术特异性好、灵敏度高、重复性强,检测速度快,环境要求低,可以满足现场检测的要求,适用于养猪场等场所的猪圆环病毒现场快速检测。本方法的建立为猪相关病原体的现场快速核酸检测提供了有力工具。     

微流控芯片技术在家畜致病菌快速检测中的应用

家畜致病菌的快速检测对疾病防控十分重要。基于形态学、免疫学、细菌毒力、分子生物学等传统致病菌检测方法因操作繁琐、耗时长等技术壁垒问题，限制了家畜致病菌快速检测。近年来，微流控技术与多种检测技术相结合，实现了样品到结果的一键快速检测，解决了对仪器和人员的要求问题，且具备高通量、微型化、集成化、高灵敏性等优点，适合多种环境下的家畜致病菌快速检测。论文概述了家畜致病菌检测的传统检测方法以及微流控芯片技术在该领域的应用，并对其应用前景和发展趋势进行了展望。     

猪精液品质智能检测和大数据平台

正前言:通过微流控技术与透射式技术的比较研究,将公猪精液检测设计为加样超微芯片和数据分析处理的主机组成,以及大数据、人工智能平台的整合,完善了猪精液品质快速检测的智能系统,实现了猪精液品质检测的智能化大数据、互联网技术与养猪业的深度融合。     

酶联免疫吸附试验在几种犬源人兽共患病检测中的应用

随着宠物养殖量的增加,宠物疫病也越来越受到人们的关注。宠物源性人兽共患病不仅危害宠物养殖业的健康发展,而且严重危害了人类健康甚至于生命安全。早期诊断对有效预防和控制宠物源性人畜共患病有重要意义。酶联免疫吸附试验具有操作简单、快速、敏感性高、特异性强等优点,在宠物疫病检测中发挥的作用越来越大。本文对酶联免疫吸附试验在犬源性人兽共患病中的狂犬病、弓形虫病、布鲁氏茵病和钩端螺旋体病检测上的应用与研究进展进行综述,旨在促进该技术在宠物疾病检测方面的应用与推广。     

鉴别牛5种重要病毒的LAMP-基因芯片方法的建立

为建立牛的主要疫病的快速、准确及高通量鉴别诊断技术,以赤羽病病毒(AKV)、牛白血病病毒(BLV)、蓝舌病病毒(BTV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和小反刍兽疫病毒(PPRV)5种牛传染病病原为研究对象,将LAMP技术与微流控芯片技术有机结合,建立了相应的基因芯片检测技术,并优化了该基因芯片的反应条件。结果表明,建立的基因芯片可同时检测上述5种病原,特异性好,60 min反应时间即可给出检测结果。其中AKV和PPRV的敏感性为10~3 copies/μL,BLV的敏感性为10~5 copies/μL,BTV和BVDV的敏感性为10~2 copies/μL,与LAMP检测的敏感性一致。成功建立了基于LAMP技术的5重RT-LAMP基因芯片,可同时快速准确检测上述5种病毒,为口岸检疫探索出一种能快速、高通量检测动物疫病的方法。     

北京市基层兽医从业人员对宠物疫病防控知识的认知情况调查报告

为了解北京市基层兽医从业人员对宠物疫病防控知识的认知情况,确保宠物健康和公共卫生安全,2015年,笔者在北京市朝阳、海淀、大兴3个城区,以简单随机抽样方法对基层兽医从业人员发放调查问卷200份,进行宠物疫病防控相关知识的问卷调查。在被调查者中,有47.8%家庭饲养宠物;90%以上的被调查者觉得宠物疫病防控知识对自己很重要;61.9%认为应加强来自专业机构的宠物疫病防控知识培训;对《中华人民共和国防疫法》的知晓率达91.2%;对动物疫病分类和重大动物疫情分级回答正确的分别为69.9%和43.4%;对于重大人与动物共患疫病知识的回答正确率达78.8%;对外来宠物疫病和宠物传染性寄生虫病知识回答正确率低于10%。上述调查结果表明,北京市基层兽医从业人员对宠物疫病防控知识较为重视,但存在薄弱环节,需加强宠物疫病专业知识的培训,尤其是来自专业技术机构的培训,以提高基层兽医从业人员对宠物疫病的防控技术水平。     

微流控芯片法在非洲猪瘟病毒核酸快速检测中的性能分析

为评估微流控芯片法在非洲猪瘟病毒(ASFV)核酸快速检测中的各项性能,验证该方法的敏感性、特异性、重复性和临床效果,本研究将ASFV VP72质粒标准物质、猪瘟病毒(CSFV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和伪狂犬病病毒(PRV)培养物各1份以及临床样本43份...     

微流控技术在生殖领域中的应用

微流控技术（microfluidics）是微全分析系统（micro total analysis system,μTAS）和芯片实验室（lab-on-a-chip）的重要支撑技术,其微量化和微尺度的优势得到人们越来越多的关注。辅助生殖技术（assisted reproductive technology,ART）是生殖医学的重要组成部分,已被广泛应用于生产实践中,但由于其低效性,人们在不断寻求新的技术手段。笔者综述了近年来微流控技术在生殖领域中的应用,包括精子筛选、体外受精和配子/胚胎培养等方面的内容,为辅助生殖技术提供了新的平台。     

浅谈《宠物行为与训导》课教学活动与学习活动设计过程

<正>2013年宠物养护教学团队共同努力,以2012级宠物养护与疫病防治专业的《宠物行为与训导》课做为研究对象,采用OBTL教学方法收到了很好的效果,本文就教学与学习活动设计过程进行说明。宠物行为与训导共计11学习成果,15子学习成果。以子学习成果能正确接犬、控犬为例设计教学活动和学习活动。根据学习成果设计课程任务——宠物犬神经类型识别。前期的知识与技能:宠物犬品种特点;犬行为形成的生理