DCPV－白僵菌－杀灭菊酯复合杀虫剂林间防治试验

本文通过对马尾松毛虫质型多角体病毒（ＤＣＰＶ）、白僵菌、２０％杀灭菊酯三种药剂混合使用的林间正交试验，从中筛选出最佳配比的复合杀虫剂，供生产上推广应用．林间试验结果表明，最佳组合为ＡａＢａＣａ，即ＤＣＰＶ（ＣＰＢ２×１０７个／ｍＬ），白僵菌（１０亿个／ｇ）和２０％杀灭菊酯（１：２万倍液），防治效果达９５．３％，比单一应用ＤＣＰＶ（Ａａ）、白僵菌（Ｂａ）、２０％杀灭菊醌（Ｃａ）分别增效１３．５％，２３．０％和３３．９％．     

DCPV－白僵菌－杀灭菊酯复合杀虫剂林间防治试验

本文通过对马尾松毛虫质型多角体病毒（ＤＣＰＶ）、白僵菌、２０％杀灭菊酯三种药剂混合使用的林间正交试验，从中筛选出最佳配比的复合杀虫剂，供生产上推广应用．林间试验结果表明，最佳组合为ＡａＢａＣａ，即ＤＣＰＶ（ＣＰＢ２×１０７个／ｍＬ），白僵菌（１０亿个／ｇ）和２０％杀灭菊酯（１：２万倍液），防治效果达９５．３％，比单一应用ＤＣＰＶ（Ａａ）、白僵菌（Ｂａ）、２０％杀灭菊醌（Ｃａ）分别增效１３．５％，２３．０％和３３．９％．     

鸡贫血病毒衣壳蛋白基因的PCR扩增和克隆

通过聚合酶链式反应（ＰＣＲ）扩增鸡贫血病毒（ＣＡＶ）衣壳蛋白基因（１．４ｋｂ），并将此基因克隆进ｐＵＣ－１８载体中。通过原位杂交、酶切分析、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交及其标记成探针对ＣＡＶ基因组的特异性反应等试验证实所获得的克隆是含有ＣＡＶ衣壳蛋白基因的重组质粒克隆。此工作为下一步ＣＡＶ衣壳蛋白体外表达的研究奠定了基础     

马立克病毒糖蛋白D基因转入感染细胞DNA的研究

用ＥｃｏＲＩ，ＰｓｔＩ内切酶将已分离和克隆的马立克氏病病毒（ＭＤＶ）糖蛋白Ｄ（ｇＤ）基因从重组ｐＭｇＤ１８质粒中切出，克隆进反转录病毒质粒载体（ＲＣＡＳ）的连接质粒载体ｐＵＣＣｌａ１１２Ｎ的相同位点。用Ｃｌａｌ再将ｇＤ重组ｐＵＣＣｌａ１１２Ｎ中的ｇＤ基因切出，用ＣｌａＩ将ＲＣＡＳ载体切开，将ｇＤ基因构建于ＲＣＡＳ的ＣｌａＩ位点。通过原位杂交筛选重组ＲＣＡＳ，并结合酶切分析鉴定出ｇＤ插入方向正确的重组ＲＣＡＳ。用磷酸钙沉淀法将ｇＤ重组ＲＣＡＳ转染鸡胚成纤维细胞。收集转染后第９天的细胞上清，并用其感染原代ＣＥＦ，在感染后第４天和第６天收集ＣＥＦ。提取ＣＥＦ基因组ＤＮＡ，用Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ（ｄｉｇ）标记ｇＤ基因片段作为探针，通过ｄｏｔｂｌｏｔ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测基因转移情况。结果表明，转染的重组ＲＣＡＳ不仅在细胞内变成有传染性的完整病毒，而且成功地将ｇＤ基因与病毒前ＤＮＡ一起整合在ＣＥＦＤＮＡ中     

鸡传染性支气管炎病毒血凝性的研究

用中国和澳大利亚分离的Ａ型魏氏梭菌培养液、Ⅰ型卵磷酯酶Ｃ和胰酶处理鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ），制备的血凝抗原能凝集鸡红细胞，为鸡传染性支气管炎的诊断提供了方法。对鸡传染性支气管炎Ｍ（４１）、Ｈ（１２０）、Ｈ（５２）、Ｇｒａｙ、Ｃｏｎｎｅｃｔｉｃｕｔ、Ｔ、ＧＩＢＶ等７个毒株进行了血凝性的比较，以Ｈ（１２０）毒株血凝价最高，其次是Ｍ（４１）、ＧＩＢＶ、Ｇｒａｙ，而Ｈ（５２）、Ｃｏｎｎｅｃｔｉｃｕｔ、Ｔ等毒株血凝性低或无血凝性。作者还对影响鸡传染性支气管炎病毒血凝试验的各种因素进行了研究。     

脐带血及胎盘组织人巨细胞病毒的检测

以核酸杂交法检测了６０份脐血标本及４６份胎盘组织标本中人巨细胞病毒ＤＮＡ同源序列，发现脐血阳性１４份（阳性率为３０．４％），胎盘组织阳性１份（阳性率为２．１７％）。用免疫酶染色法测定６０份脐血的ＨＣＭＶ抗体（６０份标本中４６份与脐血和胎盘组织ＤＮＡ配对），ＩｇＧ阳性４６份（阳性率７ｌ．７％）、ＩｇＭ阳性者ｌ份（阳性率２．２％），两型抗体均为阳性者ｌ份。本结果证实了ＨＣＭＶ能通过胎盘这种传播途径引起宫内感染的已有结论。     

病毒性肝炎患者血清肿瘤坏死因子α检测的临床意义

用放射免疫分析法（ＲＩＡ）测定４５例正常人及２０６例病毒性肝炎病人血清肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）的含量，其中急性黄疸型肝炎（ＡＩＨ）６７例，慢性活动型肝炎（ＣＡＨ）３８例，慢性迁延型肝炎（ＣＰＨ）３６例，肝硬化（ＬＣ）４０例，重症肝炎（ＳＨ）２５例。结果显示，病毒性肝炎病人ＴＮＦα水平较正常人明显增高（２２．４２±１８．３７ｆｍｏｌ／ｍｌ）（Ｐ＜０．００１），且与患者病情轻重密切相关。ＳＨ组ＴＮＦα较ＡＩＨ组明显升高（Ｐ＜０．０１）；ＣＡＨ组ＴＮＦα较ＣＰＨ组明显升高（Ｐ＜０．０１）。二种或二种以上肝炎病毒感染时较单一病毒感染时ＴＮＦα增高（Ｐ＜０．０５）。本文还观察了１０８例病情好转的病人，ＴＮＦα含量也下降（Ｐ＜０．０１），而５例病情恶化的病人ＴＮＦα含量明显增高，最高１例达７８．８０ｆｍｏｌ／Ｌ在病情中ＴＮＦα持续不下降或逐渐上升时，提示病情可能向重型转变，这一结果说明ＴＮＦα水平的变化，可以反映肝细胞病变程度，与病毒性肝炎的活动性相关。     

花生病毒病研究：I.花生矮花叶病的病原鉴定

１９８７－１９９３年期间，在河北、河南、山东、辽宁、北京４省１市先后采集花生矮花叶病及斑驳病标样２９０个，冷干保存，经用鉴别寄主测定、间接ＥＬＩＳＡ、电镜观察证明，引起北方花生产区花生矮花叶病的病原是花生条纹病毒（轻斑驳病毒）（ＰＳＴＶ原ＰＭＭＶ）、花矮化病毒（ＰＳＶ）、花生黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ－ＣＡ）、花生斑驳病毒（ＰＭＶ）其发生频率依次为４７％，４１．３５，３３．３％，３．３％。在我国除台湾外     

鸡传染性支气管炎病毒在鸡胚肾细胞和气管环培养中的适应性…

将６株鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）分别接种鸡胚肾细胞（ＣＥＫＣ）和气管环培养（ＴＯＣ）。６株病毒无论是否已经适应于鸡胚，都在气环培养中能引起病变。病毒适应于ＣＥＫＣ，是与病毒在鸡胚和细胞培养上的传代次数有关。分别用ＳＰＦ鸡胚、非免疫鸡胚和普通鸡胚制备在ＴＯＣＩＢＶ－Ｍ４１株的ＩＣ５０，结果用于ＳＰＦ鸡胚和非免疫鸡胚制的ＴＯＣ测定的ＩＤ５０都获得较镐滴度，而在普通鸡胚制备的ＴＯＣ中ＩＣ５０明显低。     

桃蚜口针中病毒附着位点的免疫荧光标记定位

桃蚜体内病毒附着位点（ＶＡＳ）为６５～８０μｍ，距下颚口针尖端约４０μｍ，能亲和ＣＭＶ－Ｔ，而无能力获得ＣＭＶ－ＮＴ，伴刀豆凝集素（ＣＯｎＡ）仅能与口针表面的ＶＡＳ发生亲和作用，推测ＶＡＳ是一种具有病毒受体属性的糖蛋白物质。     

主要葫芦科作物对常见病毒病的抗性

主要葫芦科作物对常见病毒病的抗性中国农业科学院蔬菜花卉所冯东昕到目前为止，在黄瓜、甜瓜、西葫芦和西瓜上已发现了２７种病毒，其中，黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）、番木瓜环斑病毒Ｗ（ＰＲＳＶ一Ｗ）、西瓜花叶病毒（ＷＭＶ）、矮生南瓜黄化花叶病毒（ＺＹＭＶ）和南瓜花...     

花生病毒病研究──Ⅰ．花生矮花叶病的病原鉴定

１９８７～１９９３年期间，在河北、河南、山东、辽宁、北京４省１市先后采集花生矮花叶病及斑驳病标样２９０个，冷干保存，经用鉴别寄主测定、间接ＥＬＩＳＡ、电镜观察证明，引起北方花生产区花生矮花叶病的病原是花生条纹病毒（轻斑驳病毒）（ＰＳＴＶ原ＰＭＭＶ）、花生矮化病毒（ＰＳＶ）、花生黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ—ＣＡ）、花生斑驳病毒（ＰＭＶ）其发生频率依次为４７％，４１．３％，３３．３％，３．３％．在我国除台湾省外，在北方花生产区第１次报道ＰＭＶ的发生。     

三种非持久性病毒蚜虫传播专化性研究

选用桃蚜和棉蚜与烟草蚀纹病毒（ＴＥＶ）、西瓜花叶病毒２号（ＷＭＭＶ－２）、黄瓜花叶病毒蚜传株系（Ｔ－ＣＭＶ）及非蚜传株系（ＮＴ－ＣＭＶ）组合进行传毒试验。     

植物病毒电镜样品制备方法的研究

利用负染色法（包括直接负染色及免疫负染色法）和超薄切片法两种电镜制样技术，观察了烟草花叶病毒（ＴＭＶ）、黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）、小麦丛矮病毒（ＮＣＭＶ）等三种植物病毒．对植物病毒电镜样品制备方法进行了研究及讨论。     

兔出血症病毒单克隆抗体的抗原识别位点分析

通过ＥＬＩＳＡ迭加试验对５株抗兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的抗原表位进行了分析。抗体反应增值结果表明，６株单抗分别针对３类不同的抗原决定簇。ＣＧ４－１、ＣＨ３－１和ＡＡ８－１针对病毒结构多肽上的同一决定簇，ＣＦ２－１和ＲＭ－１７针对另一决定族，而ＲＭ－１４针对第３种决定簇；其识别表位可能与ＡＡ８－１非常接近。单抗的识别表位与其生物学活性密切相关。     

马铃薯Y病毒6kD和NIa基因转化的烟草介导抗病性

将马铃薯Ｙ病毒中国分离株（ＰＶＹ－Ｃ）的６ｋＤ和ＮＩａ基因拼接和改造，分别构建了其正向表述和反向转录的植物表达载体。借助土壤农杆菌ＬＢＡ４４０４将在此双元载体上的６ｋＤ和ＮＩａ基因及新霉素磷酸转移酶基因（ＮＰＴⅡ）转入到烟草品种ＮＣ８９的染色体上，从而获得了抗卡那霉素的转化再生烟草植株。用ＰＶＹ－Ｃ对这些转化烟草进行抗性接种试验，结果表明部分转基因植株能够抵制ＰＶＹ－Ｃ的侵染，对抗病植株的子一代（Ｒ１）进行进一步的抗性分析发现，其Ｒ１代通过遗传也获得了这种抗病性。     

桃蚜口针中病毒附着位点的免疫荧光标记定位

桃蚜体内病毒附着位点为６５￣８０μｍ，距下颚口针尖端约４０μｍ，能亲和ＣＭＶ－Ｔ，而无能力获得ＣＭＶ－ＮＴ。伴刀豆凝集素（ＣｏｎＡ）仅能与口针表面的ＶＡＳ发生亲和作用，推测ＶＡＳ是一种具有病毒受体属性的糖蛋白物质。     

鸡传染性支气管炎病毒在鸡胚肾细胞和气管环培养中的适应性比较

将６株鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）分别接种鸡胚肾细胞（ＣＥＫＣ）和气管环培养（ＴＯＣ）。６株病毒无论是否已经适应于鸡胚，都在气管环培养中能引起病变。病毒适应于ＣＥＫＣ，是与病毒在鸡胚和细胞培养上的传代次数有关。分别用ＳＰＦ鸡胚、非免疫鸡胚和普通鸡胚制备的ＴＯＣ测定ＩＢＶ－Ｍ４１株的ＩＤ５０，结果用ＳＰＦ鸡胚和非免疫鸡胚制备的ＴＯＣ测定的ＩＤ５０都获得较高滴度，而在普通鸡胚制备的ＴＯＣ中ＩＤ５０明显低。     

鸡产蛋下降综合症（EDS_（－76））Z_（16）毒株的分离和鉴定

从５个爆发产蛋下降综合症的鸡场收集８０个样品中，分离到５株具血凝性的病毒，命名为ＣＡＶ—Ｚ＿（１６）、Ｚ＿２、Ｗ＿４、Ｔ＿１和Ｔ＿３株。病毒大小７０～８０ｎｍ，无囊膜，二十面体对称；对氯仿不敏感，ｐＨ３～５下稳定，５０～６０℃１小时不被完全灭活；在ＤＥＦ细胞上繁殖能被ＩＵＤＲ抑制；经血凝抑制试验、琼扩试验和微量中和试验证实与ＡＶ—１２７株属同一血清型，鉴定为ＥＤＳ＿（－７６）病毒。ＣＡＶ—Ｚ＿（１６）株能在鸭胚上繁殖，致死鸭胚，ＨＡ效价达２￣（１３）～２￣（１７），也能在鸭胚成纤维细胞上繁殖，产生ＣＰＥ，但ＨＡ效价仅有２￣７～２￣（１０）。初次分离ＥＤＳ＿（－７６）病毒选用鸭胚较佳，从生殖道分离成功率较高。     

马立克氏病病毒（MDV）B抗原基因的克隆及鉴定

将ＭＤＶＧＡ株ＢａｍＨＩ基因文库中含Ｉ３片段的质粒ｐＡＣＹＣ１８４和Ｋ３片段的质粒ｐＨＣ７９扩增，用碱裂解法抽提质粒后，利用相应的限制性内切酶切出目的基因片段，连接到合适的载体上，构建了完整的ＭＤＶＢ抗原基因克隆载体。通过内切酶分析，地高辛（ＤＩＧ）－探针原位杂交，ＤＮＡ序列预测，确认克隆的Ｂ抗原基因正确。