高效液相色谱法测定小麦纹枯菌麦角甾醇的含量

麦角甾醇是真菌细胞膜的重要组成成份之一。它与磷脂、蛋白质等共同组成了一个有机的整体,并与膜脂中的磷脂碳氢键相互作用,在保持质膜的流动性和稳定膜分子的结构中起重要作用,因而成为植物病原真菌生物学,真菌对杀菌剂抗药性机理和杀菌剂药理学等研究的热点之一。对于真菌体内的甾醇含量的测定有紫外分光光度法、气相色谱法、薄层紫外扫描法等。由于真菌体内甾醇种类繁多且性能相近,因而对麦角甾醇含量的准确测定非常困难。为了能够准确、快速的检测真菌体内麦角甾醇的含量,作者探讨了高效液相色谱法用于小麦纹枯菌体内麦角甾醇的定量分析,现简报如下:     

杜仲内生真菌ER12次生代谢产物研究

[目的]对杜仲内生真菌ER12次生代谢产物进行研究。[方法]采用色谱技术进行分离纯化,并采用理化性质及波谱分析技术确定化合物的结构。[结果]从杜仲内生真菌ER12次生代谢产物中分离并鉴定了4个化合物,分别是正丁基-β-D-吡喃果糖苷(1)、甘露醇(2)、啤酒甾醇(3)和麦角甾醇(4)。[结论]该方法明确了杜仲内生真菌ER12的次生代谢产物。     

转燕麦噬酸菌蛋白激发子基因flagellin的链霉工程菌株构建及鉴定

利迪链霉菌A01可以产生大量的抗生素——纳他霉素,其通过结合病原真菌细胞膜上的甾醇分子而起到抑制病原菌生长的作用.燕麦噬酸菌的鞭毛蛋白组分FLAGELLIN可以诱导植物抗性,激发活性氧及水杨酸防御反应途径.本研究将燕麦噬酸菌蛋白激发子基因flagellin克隆,接合转移入利迪链霉菌A01中,使工程菌增加诱导植物抗性的功能.PCR验证表明:成功获得了含flagellin基因的阳性工程菌株,证明通过链霉工程菌构建可实现抗生与诱抗的协同作用,预计会提高防治植物病害的效果.     

黄麻链霉菌AUH-1拮抗水稻纹枯病菌的作用机制研究

旨在阐释黄麻链霉菌AUH-1拮抗植物病原真菌的作用机理。以水稻纹枯病菌为指示菌,采用平板对峙培养法和紫外分光光度法,测定了菌株AUH-1抗真菌粗提物对菌丝生长、菌核萌发、麦角甾醇合成和脂质过氧化水平的影响。结果表明:黄麻链霉菌AUH-1能显著抑制水稻纹枯病菌菌丝生长和菌核萌发,加剧电导率上升,抑制细胞膜麦角甾醇合成,显著提升细胞膜脂质过氧化水平。由此可见,黄麻链霉菌AUH-1通过作用于植物病原真菌细胞膜,干扰、破坏膜结构与功能,从而达到拮抗效果。     

红树林内生真菌350#次级代谢产物研究

目的了解一株采自广东湛江红树的内生真菌350#的次级代谢产物。方法从真菌350#的菌体浸提液中通过化学分离方法分离化合物,并通过广泛的光谱方法确定结构。结果与结论分离得到5个化合物,通过结构分析确定为麦角甾醇、过氧化麦角甾醇、尿嘧啶、胸腺嘧啶和环(亮-亮)二肽。     

利迪链霉菌A01活性代谢产物对甘蓝枯萎病菌的抑制作用及其机理

 【目的】明确生防利迪链霉菌A01菌株的活性代谢产物纳他霉素对甘蓝枯萎病菌的抑制作用及其机理,为其下一步的产品开发和应用提供科学依据。【方法】分别采用带毒平皿法和凹玻片法测定活性产物对病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制作用,采用电导率法和美蓝染色法分别测定其对菌丝体细胞膜通透性和细胞存活性的影响,借助电镜观察其对菌丝超微形态和结构的影响。【结果】纳他霉素对甘蓝枯萎病菌菌丝生长和孢子萌发的最低抑菌浓度分别小于或等于31.92和41.04 μg•mL-1,抑制中浓度分别为8.69和3.06 μg•mL-1;30 μg•mL-1以上浓度的纳他霉素处理90 min后可使菌丝悬浮液电导率明显升高,其作用强度与纳他霉素的浓度和作用时间呈正相关;处理后的菌丝生长异常或畸形,并出现细胞器解体、细胞液泡化等现象;10 μg•mL-1以上纳他霉素处理120 min后菌丝大部分可被美蓝染成蓝色。【结论】纳他霉素对甘蓝枯萎病菌菌丝生长和孢子萌发均有明显的抑制作用,能够增加病菌细胞膜的通透性,破坏菌丝细胞的形态和结构,导致其丧失存活能力。     

戊菌唑

<正>1.作用机理戊菌唑是三唑类内吸性杀菌剂,可迅速被植物吸收、传导,因此,具有良好的保护和治疗作用。戊菌唑的主要作用机理是甾醇脱甲基化抑制剂,破坏和阻止病菌细胞膜的重要组成成分麦角甾醇的生物合成,导致细胞膜不能形成,使病菌死亡。2.产品特点戊菌唑可防治南瓜、葡萄、仁果、观赏植物和蔬菜的白粉菌     

天然生物性食品防腐剂纳他霉素的特性及其应用

纳他霉素(Natamycin)也称游链霉素(Pimaricm)，是一种重要的多烯类抗菌素。该抗菌素能够专性的抑制酵母菌和霉菌^[1-3]，阻止丝状真菌中黄曲霉毒素的形成^[4]。与其它抗菌成分相比，纳他霉素对哺乳动物细胞的毒性极低，可以广泛应用于由真菌引起的疾病^[5]。除此之外,由于纳他霉素的溶解度低，可用其对食品表面进行处理     

纳他霉素在食品工业中的应用

纳他霉素是我国批准的允许在食品中使用的天然微生物防腐剂之一,具有高效、安全、无毒、无副作用等特点,用量极微即可发挥防腐作用。主要介绍了纳他霉素的结构和特性以及在不同类型食品中的应用,并对其前景进行了展望。     

盐霉素在畜禽生产中的应用进展

盐霉素是一种高效、广谱、低耐药和低残留的抗生素 ,对革兰氏阳性菌、真菌、病原虫、球虫等具有杀菌、抑菌的显著作用。８０年代以来 ,盐霉素已不断推广应用于世界的４０多个国家 ,并深受用户欢迎。本文就盐霉素在畜禽生产中的应用概况作一简述。１盐霉素的作用机理盐霉素属离子载体型抗生素 ,它的特殊环状化学结构决定了它能强烈与细胞中的阳性离子 ,尤其是Ｋ 、Ｎａ 、Ｒｂ 紧密结合 ,以改变和加大细胞膜上脂质屏障的渗透性 ,从而抑制杀死肠道内的球虫、有害细菌 ,进而提高饲料利用率 ,促进生长。据Ｄｅｗｉｌｄｅ（１９８４）报道 ,盐…     

纳他霉素、脱氢醋酸钠、碳酸氢钠与大蒜对采后病原真菌的抑制作用

采后病原真菌是引起腐败的主要原因,使用安全无毒的保鲜剂对于人们的健康以及水果出口都有重要意义。纳他霉素、脱氢醋酸钠、碳酸氢钠与大蒜均具有较好的抗真菌作用,笔者研究了这4种物质在平板与活体上对链格孢霉、灰葡萄孢霉、果链核盘菌、青霉、根霉等5种常见的果蔬腐败菌的抑制作用。用滤纸片法测定这4种物质对5种病原菌抑制的抑菌圈直径以及抑制的最低浓度(MIC)。还比较了不同浓度的纳他霉素、脱氢醋酸钠、碳酸氢钠以及大蒜水提取液在活体上对鸭梨病斑的抑制作用。结果表明,在活体上,质量浓度0.4mg/mL纳他霉素与5%的脱氢碳酸酸钠对5种病原菌有很好的抑制作用,而高浓度的碳酸氢钠与大蒜水提取液对鸭梨病斑的抑制作用并不太强。     

纳他霉素的特性及研究进展

纳他霉素是一种新型生物防腐剂和医用抗菌剂。介绍了纳他霉素的理化性质、抑菌机理,对纳他霉素的发酵、分离工艺的研究现状进行了综述,并且对其发展前景进行了展望。     

天然产物分析鉴定

植物内生真菌活性成分的研究；植物甾醇及甾烷醇的生理代谢调节功能及其机制研究进展；槐属植物生物碱化学成分及药理作用研究进展；霞草中三萜化合物的分离与结构鉴定；六角莲化学成分的研究；紫牡丹的化学成分研究；筋骨草的化学成分研究。[编者按]     

苹果斑点落叶病菌抗戊唑醇突变体细胞膜透性及麦角甾醇含量研究

为明确苹果斑点落叶病菌抗戊唑醇突变体的生理生化特性,探讨其抗性机理,比较了敏感菌株和抗性突变体的渗透压敏感性、细胞膜透性及药剂处理后细胞内甾醇含量的差异。结果表明:1)敏感菌株与各抗性突变体对不同渗透压的敏感性没有规律性,且突变体抗性水平与渗透压敏感性之间没有直接联系;2)戊唑醇处理后各菌株之间电导率的变化表明,低抗菌株细胞膜透性较敏感菌株低,而中抗菌株膜透性则较敏感菌株高,能在相同时间内渗出更多电解质;3)细胞内麦角甾醇含量测定结果表明,药剂处理后,敏感菌株甾醇含量显著降低,低抗菌株甾醇含量没有显著变化,而中抗菌株甾醇含量显著升高。研究结果表明苹果斑点落叶病菌对戊唑醇产生抗药性时,伴随其他理化特性的改变,为进一步研究该病菌对戊唑醇的抗药性奠定了基础。     

纳他霉素的提取工艺及效价测定的研究

通过对纳他霉素提取工艺的研究,建立了有机溶剂萃取法从湿菌体中提取纳他霉素的工艺路线和参数。发酵液经抽滤后收集湿菌体,加入适量甲醇,调节pH至10.0~10.5,离心后再调节pH至中性,经旋转蒸发结晶获得纳他霉素粗品。纳他霉素粗品再通过紫外分光光度法和管碟法效价检测,结果显示提取出的纳他霉素具有良好的生物活性。     

厚朴内生真菌HPFJ3菌丝体中抑菌活性物质的分离纯化及结构鉴定

为了促进厚朴内生真菌资源的开发利用,以一株对小麦全蚀病菌具有较高抑菌活性的厚朴内生真菌黑孢霉HPFJ3菌株(Nigrospora sp.HPFJ3)为研究材料,对发酵菌丝体甲醇粗提物中能够抑制植物病原菌生长的活性物质进行分析。通过活性指导下的色谱分离,从甲醇提取物中得到3种化合物,质谱(MS)和核磁共振波谱(NMR)鉴定结果表明,3种化合物分别为麦角甾醇、对羟基苯甲酸以及4-羟基-18碳酸。活性检测试验显示,麦角甾醇和对羟基苯甲酸2种化合物对小麦全蚀病菌均具有生长抑制作用,且麦角甾醇的抑菌活性较强,抑菌率达到66.70%;而4-羟基-18碳酸对小麦全蚀病菌无生长抑制作用。     

纳他霉素与6种不同杀菌剂混配对平菇木霉M23的毒力比较

[目的]明确纳他霉素与6种杀菌剂对木霉毒力的差异并比较纳他霉素与6种杀菌剂混配对木霉M23的毒力。[方法]采用菌丝生长速率法测定纳他霉素和6种不同杀菌剂以及纳他霉素与6种杀菌剂混配对木霉M23的室内毒力。[结果]6种不同杀菌剂对木霉的毒力不同,其EC_(50)分别为0.448 4、0.709 9、1.390 8、8.648 3、12.448 1和18.185 6 mg/L;与6种杀菌剂相比,纳他霉素表现出较好的杀菌效果,其EC_(50)为1.551 1 mg/L,与百菌清相近。混配试验结果表明,纳他霉素与百菌清以3∶1比例、与多菌灵以1∶6比例、与苯醚甲环唑以1∶6比例混配均具有最高的共毒系数,其值分别为250.020 0、373.990 3和189.194 4。[结论]纳他霉素与百菌清(3∶1比例)、多菌灵(1∶6比例)、苯醚甲环唑(1∶6比例)混配均具有较好的增效作用,可进一步用于生产实践。     

菌株518鉴定及其次生代谢产物的生防特性与分离

经形态学与分子生物学鉴定,菌株518为淡紫拟青霉。对其进行液体发酵处理,发酵产物对番茄灰霉病有很好的防治效果,同时起到一定的促生长作用。菌体固体发酵后,从中分离得到4种化合物。初步鉴定分别为麦角甾醇、D-甘露糖醇、麦角甾-7,22（E）-二烯-3β,5α,6β-三醇（又称酵母甾醇）、白僵菌素。     

链霉菌TRM 44001中拒霉素分离鉴定及其对表皮葡萄球菌的抑菌作用

[目的]从一株对表皮葡萄球菌有拮抗活性的放线菌中寻找具有奶牛乳房炎防治潜力的抗生素.[方法]对菌株TRM 44001进行16S rRNA鉴定,硅胶柱层析及制备薄层层析法分离该菌的次生代谢产物,活性追踪获得活性化合物,采用1 H NMR、13C NMR谱并结合二维谱解析化合物结构,检测化合物对表皮葡萄球菌抑菌活性,采用流式细胞仪分析化合物对表皮葡萄球菌细胞膜通透性的影响.[结果]经16S rRNA序列对比分析,鉴定TRM 44001为暗红灰链霉菌(Streptomyces erythrogriseus).从该菌的发酵液中分离到2个化合物,分别鉴定为拒霉素(resistomycin,1)和特曲霉素D(tetracenomycin D,2).拒霉素对表皮葡萄球菌有较强抑制作用,最低抑菌浓度为2.0 μg/mL;流式细胞仪分析结果表明拒霉素可以增大表皮葡萄球菌的细胞膜通透性,并呈明显的量效关系.[结论]从暗红灰链霉菌(S.erythrogriseus)发酵液中分离鉴定拒霉素,拒霉素通过增大表皮葡萄球菌细胞膜的通透性起到抑菌作用.