人参茎叶总皂苷对小菜蛾取食、解毒酶及乙酰胆碱酯酶的影响

以人参(Panax ginseng C.A.Mey)茎叶总皂苷为试验材料,以小菜蛾(Plutella xylostella(L.))为试验昆虫,测定小菜蛾取食、解毒酶及乙酰胆碱酯酶活性。结果表明:人参茎叶总皂苷对小菜蛾取食有明显抑制作用;低质量浓度人参茎叶总皂苷能够激活小菜蛾体内多功能氧化酶系(MFO)活性,而高质量浓度人参茎叶总皂苷对小菜蛾体内多功能氧化酶系(MFO)活性具有抑制作用;人参茎叶总皂苷,能够抑制谷胱甘肽-S-转移酶及羧酸酯酶活性;低质量浓度时人参茎叶总皂苷对小菜蛾体内乙酰胆碱酯酶活性影响不大,中质量浓度能够抑制小菜蛾体内乙酰胆碱酯酶活性,而高质量浓度时抑制作用与中质量浓度相比有所减弱。     

人参茎叶、根部皂苷对桃蚜解毒酶活性影响及作用对比

以人参茎叶皂苷和人参根皂苷为试验材料,以同翅目桃蚜为试验昆虫,采用带虫叶片浸渍法对桃蚜取食皂苷后其体内解毒酶活性进行测定,并对比人参茎叶皂苷和人参根皂苷影响酶活性的作用。结果表明,人参茎叶皂苷和人参根皂苷在一定浓度时对桃蚜体内解毒酶活性有抑制作用;但人参茎叶皂苷中浓度(20、30 g/L)对桃蚜处理24 h后,其体内谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)、多功能氧化酶(MFO)和乙酰胆碱酯酶(AChE)有显著诱导激活作用。经过作用对比显示人参根皂苷在24、48 h时对桃蚜解毒酶的抑制作用比人参茎叶皂苷显著。     

人参单体皂苷对桃蚜取食、解毒酶及乙酰胆碱酯酶活性的影响

以人参单体皂苷Rg1和Rb1为试验材料,以同翅目桃蚜为试验昆虫,测定了桃蚜取食单体皂苷后解毒酶及乙酰胆碱酯酶活性,比较了Rg1和Rb1对酶活性的影响。结果表明:Rg1和Rb1对桃蚜取食有显著抑制作用,在较低浓度时对桃蚜体内解毒酶活性有抑制作用。处理24 h后,Rg1对桃蚜体内谷胱甘肽-S-转移酶、多功能氧化酶、羧酸酯酶、乙酰胆碱酯酶有显著抑制作用。处理48 h后,Rb1对桃蚜体内的多功能氧化酶、羧酸酯酶、乙酰胆碱酯酶有明显的抑制作用;且Rg1对桃蚜解毒酶的抑制作用比Rb1显著;Rg1和Rb1有诱导酶活性增强的作用,打破了桃蚜体内解毒酶活性均衡。研究结果可为植物害虫的生物防治及新农药开发提供参考。     

绿薄荷茎叶乙醇提取物对小菜蛾幼虫解毒酶系的影响

为探讨绿薄荷茎叶乙醇提取物对小菜蛾幼虫的作用机制,采用浸叶法,分别用不同浓度的茎叶提取物处理甘蓝叶片后喂食小菜蛾3龄幼虫,在12、24、36、48 h后测定其体内解毒酶系的活力变化。结果表明,经处理后的小菜蛾体内乙酰胆碱酯酶(AchE)、羧酸酯酶(Car E)和谷胱甘肽-S-转移酶(GST-s)活力均为先激活后抑制,处理组的酶活力显著低于对照;绿薄荷叶提取物对小菜蛾体内解毒酶的抑制作用大于茎。研究可为应用绿薄荷提取物防治小菜蛾奠定基础。     

蛇床子素对小菜蛾幼虫的胃毒作用及对虫体内两种酶活性的影响

采用生物测定和酶活力测定方法,研究了蛇床子素对敏感品系小菜蛾Plutella xylostellaL.的胃毒作用及其对小菜蛾幼虫体内谷胱甘肽-S-转移酶、乙酰胆碱酯酶活性的影响。结果表明：蛇床子素对小菜蛾幼虫具有一定的胃毒作用。2 mg/mL的蛇床子素处理萝卜苗叶片后饲喂小菜蛾幼虫12 h校正死亡率为37%,72 h时后小菜蛾幼虫的校正死亡率为93%。处理24 h时,LC50为1 521.25 mg/mL,处理48 h时,LC50为865.93 mg/mL。处理72 h时,LC50为515.5 mg/mL。不同浓度蛇床子素和不同时间处理小菜蛾幼虫后,幼虫体内的谷胱甘肽-S-转移酶和乙酰胆碱酯酶活力均产生了消长变化。经125×10-3mg/mL蛇床子素处理16 h时,小菜蛾体内的GSTs活力最高为209.15 U.mg-1prot.min-1。经125×10-3mg/mL蛇床子素处理4 h时,小菜蛾体内的AchE酶活力最高,为0.648 1 U.mg-1prot.min-1。各处理在24 h时,小菜蛾体内的GSTs活力和AchE酶活力均有明显的降低。说明蛇床子素对小菜蛾幼虫体内的谷胱甘肽-S-转移酶和乙酰胆碱酯酶活力重要的影响。     

溴虫腈对小菜蛾幼虫解毒酶的影响

为深入研究小菜蛾对溴虫腈抗性发展机制,采用浸叶法研究溴虫腈对小菜蛾3龄幼虫解毒酶系(多功能氧化酶MFO、酯酶EST和谷胱甘肽S-转移酶GST)活性的影响。结果表明:用溴虫腈处理小菜蛾3龄幼虫48h的致死中质量浓度(LC50)为1.281mg/L;用溴虫腈LC50剂量处理小菜蛾3龄幼虫一定时间后,处理组EST酶活力显著高于对照组,并且随着处理时间的延长,解毒酶活性逐渐升高并保持在较高的水平;MFO酶活力在处理初期就被溴虫腈极显著诱导,但随着处理时间的推移,处理组的MFO酶活力与对照相比差异不显著;而GST酶在处理后则没有被激活。由此可见,溴虫腈处理后能有效的干扰EST和MFO的活性,说明这2种解毒酶可能参与小菜蛾对溴虫腈的代谢过程。     

苦参碱对小菜蛾幼虫毒力测定及其对害虫体内2种酶活性的影响

采用生物测定和酶活力测定方法,研究苦参碱对小菜蛾Plutella xylostella L．的胃毒活性及其对幼虫体内谷胱甘肽-S-转移酶、乙酰胆碱酯酶活性的影响。试验结果表明：苦参碱对小菜蛾幼虫具有一定的胃毒作用。2mg／mL苦参碱处理叶片饲喂小菜蛾幼虫12h校正死亡率为37．93％,72h后小菜蛾幼虫的校正死亡率为95．83％。不同质量浓度苦参碱处理小菜蛾幼虫后,幼虫体内的谷胱甘肽-S-转移酶（GSTs）和乙酰胆碱酯酶（AchE）活力与对照相比均产生波动。经125×10 -3mg／mL苦参碱处理4h,小菜蛾体内GSTs活力最高,为1610．72U／（mg·min）。经125×10mg／mL苦参碱处理16h,小菜蛾体内的AChE酶活力最高,为10．63U／（mg·min）。各处理24h,小菜蛾体内GSTs活力和AChE酶活力均有明显降低。说明苦参碱对小菜蛾幼虫体内谷胱甘肽-S-转移酶活力和乙酰胆碱酯酶活力有一定的影响。     

西洋参皂苷对高脂肪食小鼠脂肪和胰脂肪酶活性的影响

通过体外、体内试验研究了西洋参总皂苷、单体皂苷对胰脂肪酶活性及小鼠体重和子宫周围脂肪组织重的影响。体外试验结果表明：西洋参茎叶总皂苷为0．5g/L时，对胰脂肪酶活性的抑制率为90％；人参皂苷Rc，Rb1，Rb2对胰脂肪酶活性均显示很强的抑制作用，当质量浓度为0．5g/L时抑制率分别为100％、96％、97％；体内试验结果表明：西洋参茎叶皂苷对体重影响变化不大，但可以明显降低子宫周围脂肪质量。这说明西洋参茎叶总皂苷和人参皂苷Rc，Rb1，Rb2可以抑制胰脂肪酶活性。因此西洋参茎叶总皂苷的抗肥胖作用可能是由于西洋参总皂苷中的人参皂苷Rc，Rb1，Rb2抑制小肠吸收食物脂肪的结果。     

受马拉硫磷抑制的麦穗鱼（Pseudorasbora parva）脑乙酰胆碱酯酶（AChE）的恢复

研究了受亚致死剂量马拉硫磷抑制的麦穗鱼（Pseudorasbora parva)脑乙酰胆碱酯酶（AChE)的活性恢复。马拉硫磷处理浓度分别为0.5mg/L、1.0mg/L、2.0mg/L，约为LC50的1/20、1/10、1/5。处理48h后，AChE抑制率随浓度升高而增加，分别为33.76%、57.89%、63.05%。恢复120h后，0.5mg/L处理过的鱼AChE恢复到了对照的80%以上（80%被认为是鱼的安全限）；1.0mg/L处理过的鱼经288h也恢复到了对照的80%以上；而2.0mg/L处理过的鱼恢复360h还低于对照的60%。恢复期间后两个处理鱼AChE活性差异加大。这些结果表明恢复研究能够提供更多信息。     

人参茎叶总皂苷对腐皮镰刀菌的抑制作用及抑菌机理

采用HPLC法确定人参茎叶总皂苷中5种单体皂苷的含量;生长速率法测定人参茎叶总皂苷(TGSL)对腐皮镰刀菌菌丝生长的抑制作用;载玻片萌发法测定人参茎叶总皂苷水溶液对腐皮镰刀菌孢子萌发的抑制作用;测定人参茎叶总皂苷处理前后的腐皮镰刀菌电导率变化情况,进一步确定细胞膜透性变化情况;考马斯亮蓝G-250比色法测定腐皮镰刀菌可溶性蛋白质含量的影响;紫外吸收法测定吸光率的变化速度,确定菌体过氧化氢酶的活力。结果表明:人参茎叶总皂苷中人参皂苷Re、Rg1、Rf、Rd、Rb1的含量为1.62%,0.66%,0.10%,1.23%,0.36%;当人参茎叶总皂苷质量浓度为10 mg/m L时,对腐皮镰刀菌菌丝生长抑制率为76.79%,EC50为3.530 2 mg/m L;对孢子萌发的抑制率达81.65%,EC50为3.037 7 mg/m L;人参茎叶总皂苷能引起菌丝细胞膜透性的变化,导致液体培养基电导率增加,菌丝体可溶性蛋白含量降低,过氧化氢酶活性下降;菌丝变细且节间拉长,生长稀疏,菌丝体胞内物质外渗,内含物变少,阻碍腐皮镰刀菌菌丝的生长。     

人参茎叶总皂苷对腐皮镰刀菌的抑制作用及抑菌机理初探

采用HPLC法确定人参茎叶总皂苷中五种单体皂苷的含量;生长速率法测定人参茎叶总皂苷对腐皮镰刀菌菌丝生长抑制作用;载玻片萌发法测定人参茎叶总皂苷水溶液对腐皮镰刀菌孢子萌发的抑制作用;测定人参茎叶总皂苷处理前后的腐皮镰刀菌电导率变化情况,进一步确定细胞膜透性变化情况;考马斯亮蓝G-250比色法测定腐皮镰刀菌可溶性蛋白质含量的影响;紫外吸收法测定吸光率的变化速度确定菌体过氧化氢酶的活力。结果:人参茎叶总皂苷中人参皂苷Re、Rg1、Rf、Rd、Rb1的含量分别为1.62%,0.66%,0.10%,1.23%,0.36%;当人参茎叶总皂苷浓度为10mg/m L时,对腐皮镰刀菌菌丝生长抑制率为76.79%,EC50为3.5302mg/m L;对孢子萌发的抑制率达到81.65%,EC50为3.0377mg/m L;人参茎叶总皂苷能引起菌丝细胞膜透性的变化,导致液体培养基电导率增加;菌丝体可溶性蛋白含量升高和过氧化氢酶活性下降;菌丝变细且节间拉长,生长稀疏,菌丝体胞内物质外渗,内含物变少,阻碍腐皮镰刀菌菌丝的生长。     

假臭草精油对小菜蛾的毒力及酶活力的影响

为了探讨外来入侵杂草假臭草的科学利用方法,用点滴法和熏蒸法测定了假臭草精油对小菜蛾的毒杀、拒食作用及其对小菜蛾体内羧酸酯酶和谷胱甘肽-s-转移酶活性的影响。结果表明,假臭草精油对小菜蛾幼虫有一定的毒杀作用,点滴处理48 h致死中浓度为2.102×105mg·L-1、熏蒸处理48 h致死中浓度为1.404×105mg·L-1;假臭草精油对小菜蛾幼虫有明显的拒食作用,12 h拒食中浓度为2.69×104mg·L-1,处理浓度为1.00×105mg·L-1,拒食率可达100%,不同处理时间的拒食中浓度无明显差异。假臭草精油处理小菜蛾幼虫会导致小菜蛾幼虫体内的羧酸酯酶和谷胱甘肽-s-转移酶活性的变化,但未呈现出规律性。     

17种植物不同溶剂萃取物乙酰胆碱酯酶抑制活性研究

采用乙酰胆碱酯酶抑制活性筛选模型,对采自井冈山及周边地区的17种植物(21个部位)乙醇提取物的不同溶剂萃取物进行乙酰胆碱酯酶抑制活性研究.结果表明:在乙酸乙酯萃取物中,在供试质量浓度在1 mg/mL时,17种植物均具有明显的乙酰胆碱酯酶抑制活性,其中麦冬、东风菜、牡荆表现出较强的抑制活性,抑制率均大于80％,其余大部分植物的抑制率均大于50％.在供试质量浓度在0.025 mg/mL时,只有苍耳表现出较高的乙酰胆碱酯酶抑制活性,其抑制率为(62.03 ±0.81)％,其余大部分植物的抑制活性均小于30％.在正丁醇萃取物中,供试质量浓度在1 mg/mL时,17种植物均具有明显的乙酰胆碱酯酶抑制活性,其中牡荆、牛蒡、一年蓬、紫茉莉、天目藜芦、凹叶厚朴皮的抑制率均大于80％,其余大部分植物的抑制率均大于50％.供试质量浓度在0.025 mg/mL时,仍有部分植物表现出较高的乙酰胆碱酯酶抑制活性,其中臭牡丹、牛蒡、凹叶厚朴皮的抑制率均大于60％.在石油醚萃取物中,在供试质量浓度在1 mg/mL时,大部分植物均具有明显的乙酰胆碱酯酶抑制活性,其中牛蒡、苍耳、一枝黄花的抑制率均大于90％.供试质量浓度在0.025 mg/mL时,仍有部分植物表现出较高的乙酰胆碱酯酶抑制活性,其中抑制率大于70％的有4种,分别是牡荆茎、台湾刘寄奴、荷花玉兰茎、深山含笑.另外,有些植物萃取物不仅对乙酰胆碱酯酶没有抑制活性,反而表现出一定的增强作用.     

壳聚糖和木聚糖对人参不定根中皂苷积累的影响

以生物反应器培养30d的人参不定根为材料,研究了木聚糖和壳聚糖处理时间及浓度对人参不定根皂苷积累的影响。结果表明:用30mg/L木聚糖和30mg/L壳聚糖分别处理9d和6d时,有利于人参不定根中皂苷的积累。在木聚糖和壳聚糖浓度为60mg/L处理中,人参不定根的皂苷含量和生产量最高,但是,对于人参不定根干重的积累,木聚糖和壳聚糖无明显作用。     

微生物转化人参皂苷Rb1为稀有皂苷F2

从橙汁中分离到的菌株CZ2能使人参皂苷Rb1转化为稀有皂苷F2和gypenoside-XVII.最佳转化培养基含酵母提取粉1 g/L、氯化铵0.5 g/L、磷酸氢二钾1 g/L、磷酸二氢钾0.5 g/L、硫酸镁0.25 g/L,pH值为4.0.菌株CZ对人参皂苷Rb1的生物转化机理为Rb1→Gpy-XVII→F2.     

小菜蛾对辛硫磷的抗性选育及其乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶活力变化

在室内模拟田间药剂的选择压力,用辛硫磷对小菜蛾（Plutella xylostella）逐代处理,以选育其抗性种群,并测定乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase,AChE）和羧酸酯酶（carboxylesterase,CarE）的活性变化。选育至12代,对辛硫磷抗性增长到4.524倍。生化分析表明,抗性品系AChE和CarE活性均显著高于敏感品系。在抗性选育过程中,小菜蛾AChE酶活性增长迅速,其比活力由F0的0.035μmol/L·mg·min上升为F12的0.209μmol/L·mg·min;小菜蛾不同选育世代CarE酶活性差异显著,F12比活力增长到F0的12.944倍。     

转Bt基因杨树对美国白蛾幼虫中肠解毒酶及乙酰胆碱酯酶的影响

以转Bt基因欧洲黑杨叶片饲喂4-5龄美国白蛾幼虫，对其中肠几种重要解毒酶及乙酰胆碱酯酶的活性进行了测定。结果表明，中肠多功能氧化酶受到强烈抑制，饲喂4h后，多功能氧化酶的活性比对照降低50.89%，48h后，该酶活性仅为对照的1/6，酯酶及羟酸酯酶的活性也受到明显抑制，饲喂48h后，上述两种酶的活性分别比对照降低73.58%和56.55%，谷胱甘肽S-转移酶变化比较复杂，饲喂24h后其活性出现峰值；48h后与对照持平，中肠乙酰胆碱酯酶活性无明显变化，转基因叶片对幼虫中肠解毒酶活性的抑制可能是其毒杀害虫的作用机制之一。     

海藻酸钠包埋的酵母菌转化人参皂苷Rb1的研究

为探索海藻酸钠包埋酵母菌转化人参皂苷Rb1的最佳条件,选用浓度为1.25×108个·mL-1的酵母菌菌悬液进行包埋,使用紫外分光光度计测定发酵液中人参皂苷Rb1含量变化计算生物转化率。通过单因素和正交设计试验分别考察海藻酸钠浓度、包埋时间、接种量和CaCl2浓度对所包埋的酵母菌转化人参皂苷的影响,最终获得了海藻酸钠包埋酵母菌转化人参皂苷Rb1的最佳条件为包埋时间45min,接种量7%,海藻酸钠浓度5%,CaCl2浓度10%。在该条件下,所包埋酵母菌对人参皂苷Rb1的最高生物转化率为31.51%,较以往未包埋的酵母菌转化人参皂苷Rb1的生物转化率提高约3%～5%。本研究首次利用海藻酸钠包埋酵母菌转化人参皂苷Rb1,解决了酵母菌种子不能重复使用等问题,简化了灭菌、菌种活化等步骤,为人参皂苷Rb1等苷类物质的高效生物转化提供了很好的思路和可借鉴的成功范例。     

花椒提取物对山楂叶螨的生物活性及作用机理的研究

试验研究了不同溶剂对花椒果实活性成分的提取及其对山楂叶螨的杀螨作用,结果表明:在4种不同溶剂的提取物中,花椒氯仿提取物(ZFCE)对卵和雌成螨都有较高的生物活性,当提取物浓度为2mg/ml时,处理山楂叶螨的卵、雌成螨24h后的校正死亡率分别达到了55.57%、64.14%,LC50值分别达到了2.09mg提取物/ml、1.13mg提取物/ml;ZFCE处理山楂叶螨雌成螨后,体内的乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶和谷胱甘肽-S-转移酶活性均受到不同程度的影响,其中乙酰胆碱酯酶被抑制,可以初步判断乙酰胆碱酯酶是ZFCE在山楂叶螨体内的重要靶标之一。     

HPLC-MS/MS法检测三七茎叶总皂苷中人参皂苷Rb1的含量

利用HPLC-MS/MS法,建立测定三七茎叶总皂苷中人参皂苷Rb1含量的分析方法.方法:色谱柱为BDS HYPERSUL C18(150 mm×2.1 mm,5 μm)柱;流动相:乙腈-水(梯度洗脱);柱温:30 ℃;质谱条件:采用负离子多反应监测方法(MRM)测试;用于定量分析的对照品离子对为:人参皂苷Rb1 m/z 1107.9→783.7,内标物紫杉醇m/z 852.5→525.3.结果:人参皂苷Rb1标准曲线的线性范围为0.159～16.0 μg/mL,精密度和准确度等均符合样品分析的要求.结论:该法准确、灵敏、特异性强,适用于三七茎叶总皂苷及其制剂中人参皂苷Rb1浓度的检测.