猪合环境中气载需氧菌及气载葡萄球菌的研究

本研究采用Andersen-6空气微生物收集器,选用血-葡萄糖-琼脂培养基为采样介质,对两个不同猪场8个猪舍环境空气中需氧菌总数和葡萄球菌总数进行了检测,并对葡萄球菌的菌群组成进行了分析,评价气载需氧酋和气载葡萄球菌对猪舍环境的污染及对饲养人员健康的潜在危害.结果表明,2个猪场气载需氧菌的浓度分别为2.87×104、12.65×104CFu/m3,葡萄球菌的浓度分别为1.94×104、5.74×104 CFU/m3.猪舍空气中葡萄球菌主要包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、猪葡萄球菌、木葡萄球菌、头状葡萄球菌、科氏葡萄球菌、内葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌的浓度占葡萄球菌总浓度的24%和27%.其次是表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌.从葡萄球菌菌在Andemen-6空气微生物收集器层级上的分布规律来看,主要分布在B-E级(36.9%),气溶胶颗粒直径在0.2～6μm之间.可以进入到人、畜的气管、支气管.甚至细支气管,对养殖人员和动物呼吸道存在严重危害.     

猪舍环境气载需氧菌含量的季节性变化及其健康风险评估

【目的】深入了解封闭式猪舍环境中气载需氧菌含量的季节性变化及其空气动力学粒径分布特征,并评估其潜在的健康风险。【方法】2008-03-2009-02,以5%公绵羊血-琼脂培养基为采样介质,利用Andersen-6级生物空气采样器收集封闭式猪舍环境中的空气样品,然后通过培养计数,分析气载需氧菌含量的动态变化和粒径分布特点,并评估其危害。【结果】封闭式猪舍环境中的气载需氧菌含量在9.07×104~28.23×104CFU/m3,冬季最高,夏季最低。气载需氧菌主要分布在采样器的D级(32.5%),F级最少(3.6%)。【结论】封闭式猪舍环境中气载需氧菌含量高,而且季节性波动较大,每天约有4.0×105CFU和4.9×106CFU气载需氧菌可分别进入人和猪的小支气管或直接侵入肺泡,从而对人和猪的健康构成潜在威胁。     

狐狸饲养场环境气载内毒素与细菌气溶胶的研究

采用AGI-30（All Glass Impinger AGI-30）和Andersen-6空气微生物收集器对泰安市郊不同饲养条件的两狐狸饲养场6个养殖舍的气载内毒素和细菌气溶胶进行了检测,以达到客观地评价气载内毒素和细菌气溶胶对狐狸舍环境的污染及对饲养人员健康的潜在危害.结果表明,两个饲养场气载内毒素的浓度介于2.88×102～2.09×103 EU·m^-3之间和2.41×101～2.66×102 EU·m^-3之间,部分超出了对人体无影响的推荐标准（1.0×102 EU·m^-3）,说明狐狸场饲养人员的健康会受到一定的影响.气载需氧革兰氏阴性菌浓度介于4.07×101～2.03×103 CFU·m^-3之间和4.07×101～4.43×103 CFU·m^-3之间,以大肠杆菌科细菌为主,假单胞菌属和巴斯德氏菌属细菌次之;从革兰氏阴性菌在Andersen-6空气微生物收集器层级上的分布规律看,主要分布在C级（36.9%）,气溶胶颗粒直径在2～6 μm之间,可以进入到动物和人的支气管,甚至细支气管,虽然致病菌的浓度不高,但在一定程度上也增加了狐狸场动物和养殖人员呼吸道疾病发生的可能性.     

动物肠道优势需氧菌原生质体制备与再生研究

从动物肠道优势需氧菌中筛选适于原生质体制备和再生的菌株,确定其原生质体制备与再生的最佳条件,为今后作为与厌氧菌原生质体融合的亲本奠定基础。研究发现,供试20株不同动物肠道优势需氧菌中,只有来自ICR小鼠肠道的M3,M4,M5和M6以及来自猪肠道的Z5对溶菌酶较为敏感。进一步研究发现,5株溶菌酶敏感菌株以来自ICR小鼠肠道的M6(即弗氏埃希氏菌株Escherichia fergusonii M6)原生质体制备率和再生率均最高。进而以菌株M6为试材,研究不同菌龄、酶浓度、酶解时间、渗透压稳定剂以及添加不同化学组分等对菌株M6原生质体制备与再生的影响。通过本研究确定的菌株M6原生质体制备与再生的最佳条件为:菌龄5h,溶菌酶浓度20mg/mL,脱壁时间45min,渗透压稳定剂为0.7mol/L山梨醇,向再生培养基中同时添加0.8%牛血清蛋白和0.1mol/L N-乙酰氨基葡萄糖,此时原生质体平均制备率与再生率分别为87.80%和85.42%。     

奶牛舍环境中气载微生物含量的检测

【目的】准确地定量奶牛舍环境中气载微生物(细菌和真菌)的含量,并评估其健康风险。【方法】利用国际标准的AGI-30空气采样器,以无菌生理盐水为采样介质,收集奶牛舍空气样品,分别用培养计数法和4,6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)染色法,对奶牛舍环境中气载微生物含量进行计数,比较两种方法的差异,并对气载微生物潜在危害进行评估。【结果】培养计数法测得奶牛舍内气载微生物含量为1.14×105~8.32×106CFU/m3,而DAPI染色法为9.3×105~5.93×107CFU/m3,DAPI染色法所测气载微生物含量约是培养计数法的7~733倍。以染色法测得的奶牛舍内气载微生物含量计算,人与奶牛每min吸入的微生物量分别为1.58×105CFU和3.29×106CFU。【结论】染色计数法更能客观地反映环境中的气载微生物含量,有助于对环境的健康风险进行科学评估。     

载菌赤眼蜂释放技术研究

该研究基于原有两次放蜂方法的诸多弊端,提出长效一次放蜂法,即将发育不同时间的寄主卵按一定比例混合,每667m2地放两点,两个放蜂器,一次性放蜂。通过对长效一次放蜂和两次放蜂的比较来看,长效一次放蜂的平均卵寄生率84.27%,比两次放蜂的卵寄生率略低0.03%,比未载菌蜂略低0.41%,但三者之间差异不显著(P≤0.05)。长效一次放蜂能够达到良好的防治效果,且减少了放蜂过程中所带来的运输及人力成本,可以取代现有的放蜂方法进行推广应用。     

冬季猪舍内气载微生物、粉尘浓度日变化及新风系统对其的影响

为了解冬季猪舍空气中有害物质日变化情况,2011年2—3月,检测1 d内猪舍内气载有害物质浓度以及运行新风系统后短时间内其浓度变化,探究冬季封闭猪舍内空气中气载有害物质浓度的日变化规律以及新风系统对猪舍微环境的影响。结果表明,冬季猪舍内1 d内粉尘浓度高峰期出现在7:00～9:00,最小值出现在19:00。气载需氧菌数和气载大肠杆菌数都呈现早晚高、中午低的趋势。运行新风系统后短时间猪舍内气载需氧菌、气载大肠杆菌浓度变化并不明显,而粉尘含量逐渐降低,3 h降到最低值,0.3 m处PM1、PM2.5、RESP、PM10和TSP的浓度降幅为67.65%、67.31%、67.86%、71.43%和72.84%(P0.05),1.5 m处PM1、PM2.5、RESP、PM10和TSP的浓度降幅为60.87%、61.05%、61.90%、62.76%和60.90%(P0.05)。新风系统在短时间内可有效降低封闭猪舍内粉尘浓度,但对气载微生物在短时间内降低效果不明显。     

四川规模化猪场猪舍空气环境管理状况调查研究

对四川三个规模化猪场猪舍内空气环境气象指标进行了测量、调查和分析.其目的在于针对四川特定的自然气候环境找到猪舍空气环境控制中存在的问题.在正常生产条件下,分别在四个季节有代表性的日期里选择不同的时间,对舍内气温、风速、相对湿度和臭气浓度等进行了测量,并结合猪场同期生产成绩的记录资料,对这些规模化猪场舍内空气环境控制中存在的问题进行了分析研究,得出的结论和建议的措施主要有以下几点:(1)四川盆地地区规模化猪场目前猪舍保温隔热性能较差,夏季炎热时不能隔热,对妊娠母猪生产性能有很大的影响;冬季不能保温,大大降低了仔猪的成活率,应当采取适当的措施提高猪舍特别是封闭式保温舍的保温性能;(2)猪舍的通风换气设计不合理,尤其在冬季无法保证有效的换气,舍内空气质量较差,对猪的健康和生产力有不良的影响.可以考虑设计换气管道,同时改变目前很不合理的直接通风换气方式;(3)鉴于舍内整体空气环境控制难度较大,建筑成本和能耗高,而且存在突出的母猪和仔猪温度需求矛盾,建议在封闭舍搞局部空气环境控制.     

牛源金黄色葡萄球菌的耐药性及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检测

【目的】了解内蒙古地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌耐药性和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）感染的情况,为奶牛乳房炎的防治提供理论依据。【方法】采用K-B纸片扩散法,检测分离自内蒙古地区38株金黄色葡萄球菌对17种药物的敏感性,同时用琼脂稀释法检测苯唑西林、万古霉素对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度（MIC）;再用头孢西丁、苯唑西林纸片扩散法、苯唑西林盐琼脂筛选法和PCR方法扩增mecA耐药基因对分离菌株进行全面MRSA检测。【结果】分离菌株对每种抗生素都有不同程度抗性,对氨苄西林、头孢拉丁、青霉素、复方新诺明、新生霉素和链霉素的耐药率都高于45%,而对氧氟沙星、丁胺卡那霉素、万古霉素、环丙沙星、庆大霉素和头孢唑林的敏感性高于90%,2株细菌的万古霉素MIC≥16 μg•mL-1;其中8株细菌的苯唑西林MIC≥8 μg•mL-1,而其它菌株的苯唑西林MIC≤2 μg•mL-1;分离菌株多重耐药情况严重,耐受3种及3种以上药物的菌株占84.21%,其中4株细菌能同时耐受9种不同抗菌药物;16（42.11%）株细菌被检测携带mecA耐药基因,而仅有其中7株的苯唑西林MIC≥4 μg•mL-1;头孢西丁、苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林盐琼脂筛选法分别检出7株、10株和7株表型为MRSA的菌株。【结论】分离菌株的耐药性和多重耐药现象较为严重,被调查地区奶牛场中已经存在MRSA和OS-MRSA感染情况,且感染率高。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的研究进展

万古霉素在临床上的使用越来越频繁,成为治疗MRSA的最后一道防线;然而,对万古霉素敏感性下降的金黄色葡萄球菌的出现,临床上抗感染治疗面临极大困难,引起了医学界普遍的关注。笔者对万古霉素敏感性下降的金黄色葡萄球菌的发展、耐药状况、作用机制和相关治疗等方面的研究进展进行了综述。     

土壤和水中啶氧菌酯的环境行为研究

通过对啶氧菌酯在三种典型土壤(潮土、褐土和红壤土)和水中挥发性、光降解和淋溶性的研究,明确了其环境行为。啶氧菌酯在三种土壤表面和水中,24 h吸收液中未检测到挥发的啶氧菌酯;啶氧菌酯在三种土壤表面的光降解半衰期分别为潮土26.70h、褐土32.80 h和红壤土12.80 h,在水中的光解半衰期为3.20 h;啶氧菌酯在三种土壤中的迁移率分别为潮土0.083、褐土0.08、红壤土0.25。结果表明:啶氧菌酯在三种土壤和水中均难挥发,在土壤表面难光降解,而在水表面较易光降解;在潮土和褐土中移动性等级为不移动,而在红壤中移动性等级为不易移动。综上认为,啶氧菌酯在三种土壤中稳定性高、迁移率低,长期高频次施容易导致土壤中啶氧菌酯累积,而在水中易于降解,不容易累积。     

香辛料提取液对假单胞菌和葡萄球菌及热死环丝菌的抑菌研究

【目的】筛选对假单胞菌、葡萄球菌、热死环丝菌有针对性抑菌效果的香辛料。【方法】应用微生物比浊法研究7种天然香辛料提取液的抑菌性能,应用管碟法测定八角茴香、丁香、肉桂对假单胞菌的最低抑菌质量浓度。【结果】八角茴香、丁香对葡萄球菌的抑菌效果最佳,而肉桂在培养后期,其抑菌效果逐渐明显;八角茴香、肉桂、丁香对假单胞菌的抑菌效果较为明显,以八角茴香尤为显著;八角茴香、丁香、肉桂、甘草和百里香对热死环丝菌均存在一定的抑菌效果,其中八角茴香的抑菌作用最强。【结论】八角茴香、丁香和肉桂对3种供试菌种都存在明显的抑菌效果,其最低抑菌质量浓度分别为0.062 5、0.015 7、0.062 5g/mL。     

PCR及核酸探针检测耐甲氧西林葡萄球菌mecA基因的研究

为了解耐甲氧西林葡萄球菌在畜禽间的存在情况.试验建立针对mecA基因的PCR方法及地高辛标记核酸探针技术,分别用两种方法对75株葡萄球菌分离株进行检测.结果显示,经PCR方法检出42株耐甲氧西林葡萄球菌,占分离株的56.0%;经核酸探针方法检出47株耐甲氧西林葡萄球菌,占分离株的62.7%,两种方法的总符合率为93.3%.通过研究证实,在畜禽的体表及体内能够分离到耐甲氧西林葡萄球菌,且有较高的分离率,应该引起兽医工作者的足够重视.     

拮抗菌X23发酵液对金黄色葡萄球菌的抑制作用

为了解拮抗菌X23发酵液对金黄色葡萄球菌的杀菌作用及机理,将拮抗菌X23发酵液与金黄色葡萄球菌作用后,运用琼脂平板倾注法检测菌体克隆数,扫描电镜观察菌体形态,透射电镜观察菌体超微结构。结果表明:拮抗菌X23发酵液与金黄色葡萄球菌作用60、90、120 min后,金黄色葡萄球菌克隆数极显著低于生理盐水对照组(P<0.01);与拮抗菌X23发酵液作用60 min后,金黄色葡萄球菌菌体表面出现囊状小突起,细胞膜皱褶并最终破裂,菌体内出现大块透电子区,胞浆内容物稀疏,胞质不均匀,胞内空泡变性加重,分裂相减少,菌体溶解。推测拮抗菌X23发酵液可以通过破坏细胞膜结构而杀死金黄色葡萄球菌。     

啶氧菌酯环境归趋与生态风险研究进展

啶氧菌酯是一种对生态系统存在安全风险的甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂,从环境归趋,生态毒理的角度出发,综述了啶氧菌酯在土壤、水中、农作物中的归趋,阐述了啶氧菌酯对蚯蚓、蜜蜂和水生非靶标生物急/慢性毒性,和对组织、酶活、蛋白、基因等方面的影响进行了归纳,并讨论了啶氧菌酯未来的生态毒理学研究方向。以期为进一步研究啶氧菌酯对非靶标生物毒性效应和作用机理,并制定相关策略以减少其生态风险提供依据。     

不同结构鸡舍气载镰孢菌浓度的定量分析

采用Andersen生物采样器和曝皿法同步采集6座不同结构鸡舍的空气镰孢菌Fusarium样本,定量分析封闭式和半封闭式鸡舍中可吸入和可沉降气载镰孢菌浓度。对108份Anderson和曝皿样本分析结果表明,青年鸡舍、雏鸡舍和蛋鸡舍的可吸入镰孢菌浓度分别为(2.24±0.09)×103CFU/m3、(3.34±0.02)×103CFU/m3和(3.43±0.04)×103CFU/m3,而曝皿法测定的可沉降镰孢菌浓度结果依次为(1.32±0.09)×104CFU/m3、(1.34±0.12)×104CFU/m3和(1.32±0.19)×104CFU/m3。封闭式鸡舍可吸入镰孢菌的分布高峰在Andersen生物采样器的D级(3.0~6.0μm),而半封闭式鸡舍的峰值分布高峰在C级(2.0~3.5μm)。半封闭和封闭式鸡舍的可吸入镰孢菌浓度差异显著(P0.05)。首次报道了不同结构鸡舍环境气载镰孢菌的发生特点,为建立禽类真菌病的预警体系提供了参考。     

鸡兔舍耐药大肠杆菌气溶胶向环境扩散的研究

采用Andersen-6级撞击式和RCS(Reuter-Centrifugal sampler)离心式空气微生物采样器,分别对泰安市一兔场舍内及舍外下风向10,50,100,200 m,以及莱芜市一种鸡场舍内及舍外下风向10,50,100,200,400,600,800 m处空气中的细菌总数及大肠杆菌含量进行了2个工作日的测量,同时以上风向100 m处空气中的菌群含量作为对照。结果显示,兔舍内气载细菌总数与舍外下风向10 m相比差异显著(P<0.05),与下风向50,100,200 m相比差异极显著(P<0.01),兔舍内气载大肠杆菌含量与舍外下风向10,50,100,200 m相比差异极显著(P<0.01),舍外上风向100 m细菌总数与舍内及下风向10,50,100,200 m相比差异极显著(P<0.01);鸡舍内气载细菌总数与舍外下风向10,50,100,200,400,600,800 m相比差异极显著(P<0.01),舍内气载大肠杆菌含量与舍外下风向10,50,100,200 m相比差异极显著(P<0.01),舍外上风向100 m细菌总数与舍内及下风向10,50,100,200 m相比差异极显著(P<0.01),与400,600,800 m相比差异不显著(P>0.05)。对分离鉴定的大肠杆菌进行的耐药性分析结果显示,兔舍粪便、饲料及舍内外空气中分离到的菌株均对RIF和P-G耐药,鸡舍粪便、饲料及舍内外空气中分离到的菌株均对RIF、ERY和P-G耐药。这在一定程度上可以证明,舍内微生物气溶胶及耐药细菌可随气体交换传播到周围环境中,使其周围环境受到微生物的污染。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌临床分布及耐药特点分析

目的 调查临床耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistantStaphylococcusaureus,MRSA)感染分布及耐药特点,为临床合理使用抗菌药物及寻找预防控制MRSA感染蔓延的有效途径提供参考依据.方法 采用法国梅里埃VITEK2全自动微生物鉴定及药敏分析仪对2015-01—2017-1...     

动物源耐甲氧西林葡萄球菌的研究进展

动物源耐甲氧西林葡萄球菌感染可引起多种动物发病,这些菌株不仅对β-内酰胺类抗生素耐药,而且也对其它药物耐药,引起临床治疗的难度增加。概述了动物源耐甲氧西林葡萄球菌的发现过程、耐药机制、兽医临床分布以及传播与扩散,以引起有关学者的关注。     

小檗碱体外抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌活性的研究

目的 研究小檗碱体外抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）活性。方法 运用琼脂扩散法、液体稀释法测定并分析小檗碱对MRSA的抑菌环大小、最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）;运用96孔酶标板结晶紫法测定并分析小檗碱对MRSA的最小生物膜清除浓度（MBEC）。结果 与DMSO比较,小檗碱与氯霉素（阳性对照药物）可显著增加MRSA的抑菌环半径（P<0.01）,小檗碱对MRSA的MIC为0.2 mg/mL,MBC为0.4 mg/mL;小檗碱对MRSA的MBEC为0.2 mg/mL。结论 小檗碱对MRSA有比较明显的抗菌、抑菌作用,其效应机制可能与其抑制细菌生物膜的形成有关。