RNA疫苗研究进展及狂犬病RNA疫苗

狂犬病(rabies)是由狂犬病病毒(rabies virus, RABV)引起的一种严重人畜共患的急性接触性传染病,其致死率为100%,每年全球约6万人死于该病,其中亚洲和非洲发生最多。RABV是狂犬病的致病病原体,由结构蛋白和负链RNA构成。狂犬病一旦发病致死率为100%,目前疫苗接种仍是预防和控制狂犬病最为有效的策略。RNA疫苗是新一代核酸疫苗,其安全性好,有效性高,设计灵活,研发周期短,且借助高效递送系统,可刺激机体快速产生强烈免疫应答。RNA疫苗这一特点对于潜伏期短且病死率高的狂犬病的防控具有重要应用价值。现对RNA疫苗及狂犬病RNA疫苗的研究进行系统梳理,以阐明其研究现状及应用前景。     

光生物素RNA探针:RNA/RNA杂交试验检测蓝舌病病毒

用国产光敏生物索标记20型蓝舌病病毒(BTV)全基因RNA,检测BTV、鹿流行性出血热病毒(EHDV)和实验感染绵羊的血样品。3、10、20、21型BTV RNA杂交阳性,与EHDV无交叉反应。0号感染羊的血样为阳性。试验表明,用乙二醛变性RNA样品,可检出10pg水平的BTV RNA样品,灵敏度高出热变性方法的10—100倍。 蓝舌病是由呼肠孤病毒科环状病毒属内的蓝舌病病毒引起的重要疾病。主要通过昆虫传播,感染反刍动物。本病上世纪发现于非洲,现在叫中东、北美、澳大利亚等国家和地区都有蓝舌病的报道。蓝舌病现有24个血清型,其痫毒的核酸由10个片段的双链RNA(dsRNA)组成。这些基因片段决定BTV衣壳蛋白的氨基酸序列上的差异。通常用补反、琼脂扩散或ELISA等血清学方法检查BTV抗体的存在。但这些方法除了敏感性低以外,一个重要缺陷是和EHDV等相关病毒存在交叉反应。K.R.E.Squire等人采用放射性同位素~(32)P,3'末端或5'末端标记全基因组BTV RNA作探针,检测BTV。P·P.C.Mertens和吴时友等,将基因组RNA用一定浓度的NaOH随机水解成150bp左右的片段,再进行末端标记,末端的增加使标记效率显著提高。由于同位素的使用受到经济和安全等方面的限制,为此我们采用非放射性的光生物素标记BTV RNA,打点杂交检测BTV,试验证明该方法是可行的。     

RNA干扰研究进展

将双链RNA导入细胞内会引起与其同源基因的沉默,这种现象称为RNA干扰(RNA interference,RNAi).作者就RNA干扰的作用机现,RNA干涉技术和RNA干扰的应用等方面的研究进展作一综述.     

RNA干扰技术

RNA干扰现象最初发现于植物中,后来发现此现象广泛存在于几乎所有的真核生物细胞中。它通过一段双链RNA(dsRNA)导致同源mRNA特异性降解从而使目的基因失去表达。在功能基因组学研究中,它是一种可与“基因敲除(knockout)”相媲美的技术;在医学研究中,此项技术可能成为基因治疗的新秀,可广泛用于抗肿瘤,抗病毒和其他一些疾病的治疗中。由于生物体的复杂性和其他原因,RNA干扰技术存在一些问题,这些问题将成为以后研究的新突破点,从而使此技术获得更加广泛的发展。     

环状RNA研究进展

环状RNA(circRNAs)是一类不同于线性RNA的内源非编码RNA,它是通过反向剪接形成的闭合环状RNA分子。circRNA不具有5′端帽子和3′端poly(A)尾巴结构,能够稳定存在于各种类型真核细胞中。对于circRNA的数量和丰度的检测,传统分子生物学方法的能效非常有限,因此一直以来circRNA被认为是RNA异常剪接的产物。随着生物信息学的快速发展和高通量测序技术的不断革新,目前已经在真核细胞中发现了大量内源性circRNA,其中一些circRNA表达丰度高并呈现出时空表达特异性和物种间保守性,说明circRNA可能在调节基因表达方面具有重要功能。本文综述了circRNA的特征、形成机制及生物学功能,并对近年来circRNA研究进展进行归纳总结,以期为真核生物基因表达调控研究、疾病检测等提供基础资料,并对circRNA在动物分子育种方面的研究进行展望。     

RNA干扰的研究进展

RNA干扰(RNA interference,RNAi)现象是1998年在对秀丽线虫的研究中发现的.RNAi利用双链RNA(dsRNA)特异性地降解相应序列的mRNA.从而特异性地阻断相应基因的表达.本文介绍了RNA干扰现象的发现、分子机制、生物学意义及其技术的应用发展.     

RNA干扰的研究进展

RNA干扰（RNA interference,RNAi）是多种生物体内由双链RNA（double stranded RNA,dsRNA）介导同源mRNA降解的现象。这种现象广泛存在于生物界,是生物体抵御病毒或其它外来核酸入侵以及保持自身遗传稳定的保护性机制,以其高效率、高特异性等特性,较反义核酸、核酶、三链RNA等基因沉默技术显示了独特优势及广泛的应用前景。本文就其发现、分子机制及其应用等方面的研究进行综述。     

RNA的可变剪接

在高等真核生物基因组中存在大量的割裂基因,而这些割裂基因的mRNA却是非割裂结构,在这个转化过程中去除内含子的过程就成为RNA的剪接或剪接RNA（RNA splicing）。RNA剪接特别是可变剪接是真核基因表达调控研究的重要内容之一。介绍了RNA可变剪接的特点、功能与调控、可变剪接基因以及剪接形式的识别,并对可变剪接的应用进行了举例。     

奶牛精子RNA提取

优选3头公牛细管冻精,采用上游法获得纯化精子,以含体细胞污染的精子作对照,应用离心层析柱方法和Trizol一步法相结合提取总RNA,紫外分光光度计检测总RNA的D260/280值和产量,并对总RNA进行RT-PCR和凝胶电泳。结果显示,纯化的牛精子中不含体细胞,奶牛细管精液总RNA在2 h内完成提取,D260/280值为1.80,大于200 bp的总RNA产量为0.92 μg/107个精子,精子总RNA进行RT-PCR,电泳后可得到清晰的SRY、LEP和RPS23基因3条带,不含18S rRNA基因条带。结果表明,离心层析柱法和Trizol一步法相结合可获得高质量的奶牛精子总RNA,且纯度和完整度高,可满足分子生物学研究的要求。     

RNA世界中的合作

"RNA世界"可能是生命发展中的一个合理阶段,因为RNA同时具有进化和催化功能。以这样一种方式进化的RNA生物,有可能成为地球的第一生命形式。一项关于RNA自动复制酶的研究正在进行,这种酶依靠独特的基因型而存活和复制。然而,从生命起源以前的化学过程到生命阶段的转变还不清楚。《Nature》2012年491卷发表了一篇关于RNA装配的自发性协作网络的文章,提示生命起源于分子间的自发协作。     

RNA干扰的研究进展

RNA干扰（RNA interference，RNAi）是多种生物体内由双链RNA（double stranded RNA，dsRNA）介导同源mRNA降解的现象。这种现象广泛存在于生物界，是生物体抵御病毒或其它外来核酸入侵以及保持自身遗传稳定的保护性机制，以其高效率、高特异性等特性，较反义核酸、核酶、三链RNA等基因沉默技术显示了独特优势及广泛的应用前景。本文就其发现、分子机制及其应用等方面的研究进行综述。     

RNA的可变剪接

在高等真核生物基因组中存在大量的割裂基因,而这些割裂基因的mRNA却是非割裂结构,在这个转化过程中去除内含子的过程就成为RNA的剪接或剪接RNA（RNA splicing）。RNA剪接特别是可变剪接是真核基因表达调控研究的重要内容之一。介绍了RNA可变剪接的特点、功能与调控、可变剪接基因以及剪接形式的识别,并对可变剪接的应用进行了举例。     

精子RNA的研究进展

1 精子RNA存在的争论 作为遗传物质的载体,精子的作用仅是将父本的基因组DNA成功地带入到卵子中,所以成熟精子不必含mRNA,这个观点被广泛接受.有关精子中存在RNA的报道,常被解释为有未成熟的精子细胞的存在,或是精子分析样本中混杂有体细胞,或是精子中含有未被支持细胞吸收的胞质小体造成~([1]),而胞质小体的存在又通常被认为是精子成熟度低的标志.     

miRBase-micro RNA序列数据库

miRBase是集miRNA命名、序列存储、注释、靶标预测和搜索功能于一身的主要在线数据库。使用者可以通过名称、关键词或序列等方式进行检索,并可通过链接查询有关该miRNA的主要文献,对miRNA进行基因组背景分析及靶标预测等。     

锥虫中的RNA剪辑

锥体目原虫是最早从真核生物进化树的主干上分离出来的生物，也是最早拥有线粒体的真核生物。锥虫做为动基体目原虫拥有许多有趣的生化特性，ＲＮＡ剪辑即是其中之一。本文从ＲＮＡ剪辑的发现、剪辑的部位、作用、程度及机制等方面进行了综述。     

RNA干扰的研究进展

RNA干扰（RNA interference，RNAi）是真核生物中普遍存在的一种自然现象，是由双链RNA（double—stranded RNA，dsRNA）启动的序列特异的转录后基因沉默过程。     

RNA干扰技术研究进展

RNA干扰是近几年发展起来的一门技术,科学家将其应用于临床疾病的治疗,取得了一定的成果,为人类基因功能研究和人类疾病基因的治疗开辟了一条新途径.     

RNA干扰的研究进展

RNA干扰(RNAi)在抵抗病毒感染、抑制转座子活动、调控内源性基因表达等方面发挥重要作用,其高特异性、高效性等显著优势将成为研究基因功能的全新手段.本文简要概括RNAi作用机制和siRNA技术的原理,同时也讨论了RNAi技术在各领域的应用.