禽流感灭活疫苗和重组活疫苗免疫后抗体消长的检测和比较

为了解禽流感疫苗的免疫效果,笔者选用2种不同类型的禽流感疫苗,对其免疫后HI抗体水平进行测定,以了解抗体的产生情况,为以后更有效地做好禽流感的预防免疫工作提供科学依据.     

HSN1亚型禽流感灭活疫苗免疫鸵鸟后抗体消长规律及免疫程序的研究

为了探讨鸵鸟对H5亚型禽流感灭活疫苗的免疫原性，做好鸵鸟禽流感的防控工作，采用哈尔滨兽医研究所研制的重组H5N1亚型禽流感疫苗，不同剂量免疫鸵鸟，用HI方法检测母源抗体和免疫抗体，根据母源抗体的衰减和免疫抗体的消长规律确定首免和再免日龄。结果表明，雏鸵鸟母源抗体能维持约3周～8周；8周龄时分组首免，Cl组产生的免疫反应优于C2组，抗体峰值能达到7．50Iog2，维持时间为9周左右；17周龄时C1组以3．0mL／羽进行二免，2周后抗体达到7．4010g2，3周～7周抗体维持在高峰值，最高达8．8010g2，以后逐渐下降，有效抗体水平能维持至接种后25周左右。二免后25周进行三免，以5mL／羽三免后2周抗体可达到9．8010g2，2周～4周抗体维持在最高峰，以后缓慢下降，期间抗体时有起伏，但有效抗体水平约可维持1年时间。三免后45周内抗体水平合格率均在70％以上。根据抗体消长规律，初步推荐了鸵鸟的免疫程序。     

雁鹅接种禽流感疫苗后抗体消长规律

通过对雁鹅使用重组禽流感灭活疫苗(H5N1,Re-1株)进行免疫后,定期采样,测定血清HI抗体效价,研究禽流感HI抗体的产生及消长规律。试验选取日龄相近的雏雁鹅320羽,随机分为4组,每组80羽。第1组10日龄免疫,0.5mL/羽;第2组14日龄免疫,0.5mL/羽;第3组14日龄首免0.5mL/羽,3周后二免1.0mL/羽;第4组14日龄首免0.5mL/羽,3周后二免1.5mL/羽。结果表明,对于雁鹅禽流感免疫,选择14日龄首免0.5mL/羽,3周后二免接种1.5mL/羽可取得较为理想的免疫效果,而疫苗免疫期应定为4个月。     

禽流感H5亚型油乳剂灭活疫苗抗体消长规律的研究

用禽流感H5N2亚型毒株接种10日龄SPF鸡胚，收获尿囊液，经甲醛灭活后与优质矿物油佐荆混合乳化制成油乳剂灭活疫苗。抽取其中三批，接种28日龄非免疫鸡100羽，4天后检测抗体，以后每隔1周或2周采血检测H5亚型HI抗体，并于抗体水平为2log2、4log2、6log2左右时攻毒。结果表明，免疫后4天即能检测出抗体，之后逐渐上升，至第5周抗体水平达到高峰且较稳定，然后缓慢下降，110天后抗体降至临界值以下。攻毒结果表明，能使鸡抵抗强毒攻击的抗体临界值为6log2。     

重组禽流感病毒灭活疫苗不匾注射方法抗体效果的研究

最近几年,高致病性禽流感在世界一些地区流行,给养禽业造成了巨大的损失。疫苗免疫接种是有效防控禽流感的重要措施之一。重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-6株）在预防控制高致病性禽流感方面发挥了重要的作用。已有试验和很多应用实践证明,该疫苗对禽类均有良好的免疫效果。     

H5N1亚型禽流感灭活疫苗免疫鸵鸟后抗体消长规律及免疫程序的研究

为了探讨鸵鸟对H5亚型禽流感灭活疫苗的免疫原性,做好鸵鸟禽流感的防控工作,采用哈尔滨兽医研究所研制的重组H5N1亚型禽流感疫苗,不同剂量免疫鸵鸟,用HI方法检测母源抗体和免疫抗体,根据母源抗体的衰减和免疫抗体的消长规律确定首免和再免日龄.结果表明,雏鸵鸟母源抗体能维持约3周～8周;8周龄时分组首免,C1组产生的免疫反应优于C2组,抗体峰值能达到7.50 log2,维持时间为9周左右;17周龄时C1组以3.0 mL/羽进行二免,2周后抗体达到7.40log2,3周～7周抗体维持在高峰值,最高达8.80log2,以后逐渐下降,有效抗体水平能维持至接种后25周左右.二免后25周进行三免,以5 mL/羽三免后2周抗体可达到9.80log2,2周～4周抗体维持在最高峰,以后缓慢下降,期间抗体时有起伏,但有效抗体水平约可维持1年时间.三免后45周内抗体水平合格率均在70%以上.根据抗体消长规律,初步推荐了鸵鸟的免疫程序.     

重组禽流感灭活疫苗注射方法比较

用不同批次重组禽流感灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)分别颈部皮下注射和胸部肌肉注射28日龄的SPF鸡,结果表明,颈部皮下注射均比胸部肌肉注射产生的HI抗体快且高.表明应用重组禽流感灭活疫苗,采用颈部皮下注射产生免疫效果比胸部肌肉注射好.     

禽流感灭活苗不同免疫程序对抗体消长的影响

对1日龄矮D商品雏鸡随机分为A、B、C、D、E和对照组共6组,每组3个重复,每个重复100只,进行禽流感H5+H9疫苗的免疫。对照组不接种,A组~E组依次采取1日龄、1日龄和10日龄、1日龄和20日龄、10日龄和20日龄(0.5mL)、10日龄和20日龄免疫接种,每次接种0.3mL。每周采血1次,采用HA-HI国标法检测H5和H9抗体水平,以研究禽流感灭活苗H5、H9不同免疫时间与剂量的抗体消长规律。结果表明,21日龄后各试验组抗体水平均极显著地高于对照组,免疫效果显著。仅进行1日龄免疫一次,其抗体水平较低,达不到免疫保护要求。20日龄增大免疫剂量有助于提高抗体滴度,禽流感灭活苗于不同时间进行免疫均能达到预期的免疫效果,免疫应采取二次免疫,免疫间隔时间不大于10d。     

蛋鸡重组禽流感H_5亚型灭活疫苗强化免疫试验

为了使商品蛋鸡H5亚型禽流感免疫抗体在产蛋期全程保持较高水平,对免疫程序进行优化,采用标准和强化两种程序进行免疫,比较二者间抗体水平差异。结果表明,强化免疫组Re-4株血球凝集(HI)抗体较标准免疫组平均高出2.44 Log2,且抗体水平离散度平均降低0.42 Log2;强化免疫组Re-6株HI抗体较标准免疫组平均高出2.45 Log2,且抗体水平离散度平均低1.02 Log2。这一强化免疫程序可保证蛋鸡在产蛋全期维持高且均一的HI水平。     

禽流感疫苗免疫后抗体消长规律测定

为测定禽流感疫苗免疫后抗体消长规律与免疫效果.试验分3组,第1组30日龄免疫作为母源抗体检测对照组,第2组10日龄免疫,第3组16日龄首免,50日龄二免.结果表明,三次免疫种鸡的母源抗体较高,其效价随日龄增长呈下降趋势.对55日龄左右出栏的快大型肉鸡,10～16日龄首免时,均能达到有效保护;对饲养期在120d以上的放养鸡,采用16日龄首免、50日龄二免后,能在较长时间内保持较高的抗体水平.     

H7亚型重组禽流感病毒灭活疫苗研制成功

<正>国家禽流感参考实验室成功研制出重组禽流感病毒灭活疫苗(H7亚型,H7N9/PR8株),并通过了新兽药评价,作为应急技术储备。为进一步做好H7N9流感疫情应对工作,及时发现、剔除家禽H7N9流感病毒,保障动物产品质量安全和公共卫生安全,农业部制定并实施《全国家禽H7N9流感剔除计划》。在科研人员的辛苦努力下,成功研制出重组禽流感病毒灭活疫苗(H7亚型,H7N9/PR8株)。经试验该疫苗安全,免疫效果良好,可对H7N9禽流感     

白羽肉鸭免疫重组H5亚型禽流感灭活疫苗后体液抗体和细胞因子水平变化研究

选取健康无免疫白羽肉鸭160羽分为A、B、C、D、E五组.A组～D组分别免疫0.5 mL、0.5 mL、0.8 mL、1 mL重组H5亚型禽流感油乳剂灭活疫苗,E组为非免疫对照组.在39同龄,B组1 mL剂量进行二免.免疫后,每隔5d用血凝抑制试验和酶联免疫吸附测定分别监测体液抗体和细胞因子(r-IFN、IL-2、IL-4和IL-8)浓度水平.结果表明,A、B、C、D各组试验鸭在疫苗免疫后体液抗体和细胞因子均出现增长并呈一定相关性,E组无增长趋势.     

重庆市部分地区H5和H7重组禽流感病毒二价灭活苗免疫效果监测

2017年7月7日,农业部决定对全国家禽开展H7亚型流感免疫。为了掌握重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活苗的免疫效果,2017年8—9月,重庆市动物疫病预防控制中心进行了控制性试验和大面积临床监测。控制试验结果表明:首免15 d后,H7亚型禽流感抗体合格率可达70.00%,H5亚型抗体合格率仅为10.00%;首免22 d后,H7亚型禽流感抗体合格率达到93.33%,H5亚型抗体合格率达到60.00%;该疫苗未出现严重免疫副反应;H7亚型禽流感抗体产生的时间早于H5亚型。随机选取5个区县,采集414份免疫血清进行监测。结果显示:二价灭活苗免疫21 d后,H5和H7亚型禽流感抗体平均合格率分别为92.27%和76.00%;5个区县的抗体水平存在差异;蛋鸡抗体水平高于肉鸡。控制试验及临床监测结果提示,该疫苗免疫效果确实,但部分区县仍存在免疫抗体水平不高的养禽场。因此,在新旧疫苗交替使用期间,各地应高度重视高致病性H5和H7亚型禽流感防治工作,尤其是肉鸡。     

禽流感-新城疫重组二联活疫苗与重组禽流感灭活疫苗组合免疫效果观察

为进一步了解、掌握禽流感-新城疫重组二联活疫苗及与重组禽流感灭活疫苗组合使用的免疫效果,本研究以麻花鸡作为试验对象,制定了4种不同的免疫程序,分别对4组试验鸡群进行免疫,通过测定各组鸡只产生的免疫抗体效价和免疫抗体合格率,以评价二联活疫苗及与禽流感灭活疫苗的免疫效果。试验结果表明:禽流感-新城疫重组二联活疫苗单独用于肉鸡禽流感H5免疫预防抗体效价低于4 log2;建议禽流感-新城疫重组二联活疫苗可以与重组禽流感病毒灭活疫苗组合使用,两种疫苗免疫时间间隔2周左右,以免抑制机体产生对新城疫的免疫应答。     

禽流感油乳剂灭活疫苗的研究

将6种不同亚型的禽流感病毒（AIVH2N9、H3N8、H5N1、H5N2、H7N1、H9N2）分别接种鸡胚,收获尿囊液,经甲醛灭活,以矿物油为佐剂制成油乳剂灭活疫苗。疫苗接种4和8周龄SPF鸡,注苗后均无不良反应。每种亚型疫苗免疫后14天和21天攻毒保护率均达90％-100％。分别用H5N1和H9N2亚型灭活疫苗免疫8周龄SPF鸡、25和28周龄健康商品蛋鸡,免疫后7天产生免疫力,14天保护率达100％,21天后抗体达高峰,仔鸡接苗后最高血凝抑制（HI）几何平均滴度（GMT）为7.3-8.0log2,蛋鸡为8.0-10.5log2。免疫后180天,抗体效价不低于6.5log2。免疫后180天分别以AIV攻击,H5亚型疫苗组,用强毒攻击无一发病和死亡,对照鸡全部发病死亡;H9亚型疫苗组,对照鸡在攻毒后72小时停产,免疫鸡无一发病且产蛋正常,对同源攻毒的保护率达100％。     

重组禽流感H5+H7二价灭活疫苗的免疫效果评估与分析

为了客观评价重组禽流感H5+H7二价灭活疫苗(H5N1Re-8株+H7N9Re-1株)的免疫效果及当前禽流感免疫程序的合理性,提高本地区禽流感防控工作水平,采用血凝抑制试验(HI)和酶联免疫吸附试验(ELISA)对某养殖场免疫的100羽蛋鸡进行不同时间段H5、H7亚型禽流感抗体水平检测。结果:在免疫后21～252 d,HI和ELISA检测禽流感H5亚型抗体合格率均为74%～100%;禽流感H7亚型HI检测抗体合格率为78%～100%,ELISA检测抗体合格率为76%～100%。结果表明:HI与ELISA抗体检测结果基本相符,在免疫后21～252 d免疫抗体合格率均达到国家规定≥70%的要求,重组禽流感H5+H7二价灭活疫苗免疫效果良好。     

重组禽流感三价灭活疫苗免疫商品肉鸡和蛋鸡效果的研究

研究旨在评价重组禽流感三价灭活疫苗在临床中的效果。将40 000只三黄肉鸡分为A组、B组、C组,A组20 000只,B组19 900只,C组100只。A组与B组分别免疫疫苗A与疫苗B,C组为不免疫对照组。2周龄首免,颈部皮下注射,0.3 mL/羽份。6周龄进行二免,颈部皮下注射,0.5 mL/羽份。20 000只蛋鸡分为D组、E组、F组,D组10 000只,E组9 900只,F组100只。D组与E组分别免疫疫苗A与疫苗B,F组为不免疫对照组。2周龄首免颈部皮下注射,0.3 mL/羽份。6周龄进行二免,颈部皮下注射,0.5 mL/羽份。13周龄进行三免,颈部皮下注射,0.5 mL/羽份。免疫后进行安全性评价,并于不同时间监测抗体水平。结果显示,免疫后14 d,各组三黄肉鸡和蛋鸡均未出现副反应,且2～3次免疫后,疫苗基本吸收完全。免疫效力试验结果显示,三黄鸡首免2周后HI抗体即可达到5.0以上,3周后可达到完全保护水平;蛋鸡在产蛋高峰前可达到7.5 log2以上,2～3次免疫后抗体即可达到峰值9～10 log2。研究表明,不同厂家疫苗免疫后抗体均可产生100%保护,但抗体水平略有差异。     

水禽用H5亚型禽流感灭活疫苗对高致病性禽流感病毒流行毒株的免疫保护效果研究

为评价水禽用禽流感灭活疫苗(H5N2亚型,D7株)对2010年以后分离的高致病性禽流感病毒流行毒株的免疫保护效果,将该疫苗免疫3周龄SPF鸭后,21 d采血、分离血清测定HI抗体效价,同时用5株2010年以后分离的高致病性禽流感流行毒进行攻毒保护试验,攻毒后5d采集所有试验鸭喉头和泄殖腔拭子进行病毒分离.结果显示,该疫苗免疫SPF鸭21 d后的HI抗体效价的几何平均滴度达7.4log2,对5株高致病性禽流感病毒的攻击均可产生良好的免疫保护,并有效阻止病毒排泄.该疫苗的推广使用将对我国水禽高致病性禽流感的防控发挥重要作用.     

藏鸡禽流感抗体消长规律研究

为探讨鸡禽流感疫苗的免疫效果,总结禽流感病毒抗体在藏鸡体内的消长规律,制定最佳的鸡场禽流感免疫程序。对林芝市西藏农牧学院临床兽医楼养殖的86只藏鸡进行禽流感疫苗的免疫接种,并按程序完成三次免疫后每隔2周随机对接种过禽流感疫苗的20只藏鸡进行抗体检测,检测直至完成最后一次免疫后第28周,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体数值,用血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验检测抗体效价。血凝抑制实验表明,31日龄藏鸡完成三次禽流感疫苗免疫,经2周后,抗体水平迅速上升,第10周抗体水平达到高水平并维持至第20周,直到第24周,抗体水平降至临界值4log2附近;ELISA试验表明,31日龄藏鸡完成三次禽流感疫苗免疫,经2周后,抗体水平迅速上升,第10周至第20周,抗体水平达到高峰,持续保持在一定高水平。18周开始,抗体水平开始逐渐下降,直至第28周,抗体水平降至临界值50%附近。31日龄藏鸡完成三次禽流感疫苗免疫第4～24周,血凝抑制实验结果表明检测所有藏鸡血清中抗体效价平均值都在标准值4log2以上,抽检合格率均大于标准值70%;ELISA试验结果表明抗体数值(PI)均在标准值50%以上。实验结果表明按本防疫程序防疫禽流感后,有效抗体在藏鸡体内维持时间为5个半自然月,建议第24周进行下一次免疫。     

禽流感病毒BEI灭活疫苗制备与免疫效果

使用浓度为0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%和0.6%的二乙烯亚胺(BEI)37℃灭活禽流感病毒(Re-5株)24h,经灭活效果检测BEI浓度≥0.5%可以完全灭活病毒。0.5%的BEI和0.2%的甲醛灭活禽流感病毒,以相同配方制备疫苗,免疫效力比较研究结果显示,按照规程要求免疫21d后采血HI效价分别为8.35log2和7.66log2,BEI灭活疫苗的抗体水平要高于甲醛灭活疫苗。本研究为禽流感灭活疫苗灭活工艺研究提供了依据。